检索结果-内蒙古大学图书馆

中国动物传染病学报 2022年第1期30卷 98-105页

作者：张洪亮郝占武解倩倩王凤雪张志韩先杰单虎温永俊青岛农业大学动物医学院山东省新兽药创制协同创新中心青岛市兽医生物技术工程研究中心青岛266109 内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 中国动物卫生与流行病学中心青岛266032

本研究利用PCR扩增伪狂犬病病毒(PRV)Bartha-K61株gB基因核心抗原区和闵A株gE基因核心抗原区,构建了重组质粒pET-32a-gB和pET-32a-gE,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导进行表达。SDS-PAGE分析表明,pET32a-gB蛋白分子... 详细信息

本研究利用PCR扩增伪狂犬病病毒(PRV)Bartha-K61株gB基因核心抗原区和闵A株gE基因核心抗原区,构建了重组质粒pET-32a-gB和pET-32a-gE,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导进行表达。SDS-PAGE分析表明,pET32a-gB蛋白分子量约为44 kDa,pET32a-gE蛋白分子量约为41 kDa。分别以gB和gE重组蛋白作为包被抗原,建立了PRV抗体间接ELISA检测方法。该方法中重组蛋白仅与PRV阳性血清发生特异性反应,检测敏感性可达到1∶1600,批内重复性和批间重复性变异系数均小于10%。本研究建立的间接ELISA方法可用于PRV抗体的监测,鉴别疫苗免疫抗体和野毒感染抗体,有利于猪伪狂犬病净化工作。

关键词：猪伪狂犬病病毒 gB基因 gE基因蛋白表达间接ELISA

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胆酸对代谢性炎症模型大鼠糖及脂代谢的影响

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黑龙江畜牧兽医 2021年第13期 109-115页

作者：孙苗何秀玲石琳琳牛春宇郝普国李培锋内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 鄂尔多斯生态环境职业学院内蒙古鄂尔多斯017010

为探讨胆酸对代谢性炎症模型大鼠糖及脂代谢的影响,试验用饲喂60 d高脂饲料的48只SD大鼠建立代谢性炎症模型,均分为模型组和胆酸高(150 mg/kg)、中(50 mg/kg)、低剂量(16.7 mg/kg)组,连续灌胃给药30 d,并以饲喂基础饲料的12只SD大鼠作... 详细信息

为探讨胆酸对代谢性炎症模型大鼠糖及脂代谢的影响,试验用饲喂60 d高脂饲料的48只SD大鼠建立代谢性炎症模型,均分为模型组和胆酸高(150 mg/kg)、中(50 mg/kg)、低剂量(16.7 mg/kg)组,连续灌胃给药30 d,并以饲喂基础饲料的12只SD大鼠作为阴性对照组,分别在停药第1天、第3天检测葡萄糖耐量及胰岛素耐量,停药第5天测定天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)活性,白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、总胆酸(TBA)、胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)含量,计算大鼠增重率,测定脂肪湿重(WAT)并计算脂肪系数。结果表明:与阴性对照组相比,模型组增重率、脂肪系数、WAT、TG含量极显著升高(P<0.01)、ALP活性显著升高(P<0.05);与模型组相比,胆酸高剂量组增重率、WAT、FFA、TG含量极显著降低(P<0.01),胆酸中、低剂量组的ALP活性及FFA含量显著降低(P<0.05),胆酸中剂量组的增重率显著降低(P<0.05)。给予葡萄糖120分钟时,模型组血糖值较阴性对照组显著上升(P<0.05),而较胆酸高、中、低剂量组极显著降低(P<0.01)。腹腔内注射胰岛素后120分钟时,模型组血糖值较阴性对照组显著上升(P<0.05),胆酸高剂量组血糖值较模型组显著降低(P<0.05)。说明高剂量胆酸对代谢性炎症模型大鼠起到降脂、抑制体重增长并改善胰岛素敏感性的作用。

关键词：胆酸代谢性炎症脂代谢糖代谢胰岛素耐量葡萄糖耐量

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犊牛轮状病毒RT-LAMP检测方法的建立与应用

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当代畜禽养殖业 2023年第6期43卷 7-12页

作者：韩子阳赵洋唐欣如张榕兰冯静萱王嘉羽特木尔巴根郭宇武娅楠张志丹周伟光内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 中美冠科生物技术有限公司北京100000 内蒙古自治区动物疫病预防控制中心内蒙古呼和浩特010020

为能够现场快速检测出牛场牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV),本试验根据GenBank中BRV NSP5基因序列,针对其保守区域设计了一套RT-LAMP引物,通过对反应体系中Mg2+、dNTPs、内引物的用量以及反应时间和温度进行优化,建立一种能够快速检测... 详细信息

为能够现场快速检测出牛场牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV),本试验根据GenBank中BRV NSP5基因序列,针对其保守区域设计了一套RT-LAMP引物,通过对反应体系中Mg2+、dNTPs、内引物的用量以及反应时间和温度进行优化,建立一种能够快速检测BRV的反转录-环介导等温扩增技术(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)方法,并验证该方法的特异性、敏感性和重复性,选择出最优检测方法应用于后续临床样品的检验。结果表明:RT-LAMP方法的最佳反应温度为64℃、反应时间为45 min,Mg2+(100 mmol/L)和dNTPs(10 mmol/L)的最佳用量为1.2和1.5μL,内引物最佳用量为2μL;该方法从多种牛腹泻与呼吸道疾病的病原中只检测到BRV,其灵敏度为1×102 copies/μL,而普通RT-PCR的灵敏度为1×103 copies/μL,且重复性高;利用本试验建立的BRV RT-LAMP检测法和普通RT-PCR对38份临床样品进行检测,阳性率分别为47.4%和15.7%。综上所述,本试验建立的RT-LAMP检测方法具有检测速度快、特异性强、灵敏度高和可信度高等优点,且结果易于判定、便于现场检测,在BRV检测方面具有良好的应用前景,为BRV的流行病学调查及检测提供重要的技术支撑。

关键词：牛轮状病毒环介导等温扩增敏感性特异性

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牛传染性鼻气管炎病毒gI蛋白截短表达与单克隆抗体制备

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中国动物检疫 2022年第8期39卷 112-119页

作者：侯丽娜于明华刘春羽赵洪哲郑秉武温永俊王凤雪内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 呼和浩特市动物园内蒙古呼和浩特010050

为获得牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)gI蛋白单克隆抗体,构建了gI截短基因重组原核表达质粒pET-32a-gI,并对其进行了诱导表达和纯化,通过SDS-PAGE和Western blot验证了gI蛋白在大肠杆菌内的表达... 详细信息

为获得牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)gI蛋白单克隆抗体,构建了gI截短基因重组原核表达质粒pET-32a-gI,并对其进行了诱导表达和纯化,通过SDS-PAGE和Western blot验证了gI蛋白在大肠杆菌内的表达情况。将纯化的gI蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合、筛选及亚克隆,得到针对IBRV gI蛋白的单克隆细胞株gI14。利用体内诱生法制备抗IBRV gI蛋白单克隆抗体腹水,使用Western blot和间接免疫荧光(IFA)对单克隆抗体特异性进行检测和验证。Western blot结果显示:原核表达的gI融合蛋白相对分子质量为34 ku,gI蛋白单克隆抗体与gI表达蛋白反应性良好,与pET-32a(+)空载体蛋白无特异性结合;天然表达的gI蛋白相对分子质量为45 ku,gI蛋白单克隆抗体与细胞内感染的IBRV所表达的gI蛋白反应性良好。IFA结果显示,gI蛋白单克隆抗体及阳性对照组IBRV多抗均能与细胞内感染的IBRV发生特异性结合,使细胞出现特异性绿色荧光信号,而空白及阴性对照组均未见绿色荧光信号。结果表明,本研究基于高效表达的gI蛋白,成功制备了1株能稳定表达gI单克隆抗体的细胞株gI14,获得的gI蛋白单克隆抗体与原核表达的gI蛋白及IBRV全病毒均能特异性结合,这为进一步研制IBRV诊断试剂盒及探究IBRV gI蛋白抗原表位及蛋白功能奠定了基础。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 gI蛋白原核表达单克隆抗体

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酵母发酵饲料对瘤胃菌群数量及多样性的影响

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中国畜牧杂志 2021年第2期57卷 116-124页

作者：郝凌魁刘世雄李冬芳于春微李松建陈灰高民胡红莲刘大程内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古农牧业科学院动物营养与饲料研究所内蒙古呼和浩特010031

本试验研究日粮中添加酵母发酵饲料对蒙古绵羊瘤胃菌群数量及多样性的影响。选用10只安装永久性瘤胃瘘管且体重约40 kg的14月龄蒙古羯羊,分为对照组和试验组,每组各5只。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮+酵母发酵饲料(13.37%)。... 详细信息

本试验研究日粮中添加酵母发酵饲料对蒙古绵羊瘤胃菌群数量及多样性的影响。选用10只安装永久性瘤胃瘘管且体重约40 kg的14月龄蒙古羯羊,分为对照组和试验组,每组各5只。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮+酵母发酵饲料(13.37%)。预试期15 d,正试期5 d。于正试期晨饲后0、3、6、9、12 h依次采集瘤胃液,每天采集一个时间点,共采集5次。实时荧光定量PCR(探针法)检测9种瘤胃菌群的数量,并用16S rRNA高通量测序技术分析菌群多样性。结果表明:试验组溶纤维丁酸弧菌、黄色瘤胃球菌、产琥珀酸丝状杆菌、埃氏巨球型菌、牛链球菌和栖瘤胃普雷沃氏菌数量均高于对照组(P<0.05),反刍兽甲烷短杆菌数量低于对照组(P<0.05),嗜淀粉瘤胃杆菌和白色瘤胃球菌在两组间差异不显著;试验组中菌群多样性低于对照组(P<0.05),拟杆菌门、纤维杆菌门、密螺旋体门含量升高,厚壁菌门含量降低(P>0.05);理研菌科_RC9菌属含量升高,克里斯滕森菌属_R-7含量降低(P<0.05)。综上,酵母发酵饲料能够影响瘤胃菌群数量,改善瘤胃菌群结构,降低瘤胃菌群的多样性。

关键词：酵母发酵饲料瘤胃细菌产甲烷菌实时荧光定量PCR 16S rRNA高通量测序

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绵羊梅迪-维斯纳病毒CA蛋白可溶性表达、多克隆抗体制备及鉴定

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畜牧与饲料科学 2022年第5期43卷 1-6页

作者：李慧萍陈思旭张良史晓娜刘淑英内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区基础兽医学重点实验室内蒙古呼和浩特010018

[目的]制备绵羊梅迪-维斯纳病毒(maedi-visna virus,MVV)衣壳蛋白(capsid protein,CA)多克隆抗体,并鉴定其特异性。[方法]根据MVV内蒙古分离株CA基因序列设计特异性引物,扩增CA基因,构建重组质粒;对CA重组蛋白进行原核表达及纯化,制备兔... 详细信息

[目的]制备绵羊梅迪-维斯纳病毒(maedi-visna virus,MVV)衣壳蛋白(capsid protein,CA)多克隆抗体,并鉴定其特异性。[方法]根据MVV内蒙古分离株CA基因序列设计特异性引物,扩增CA基因,构建重组质粒;对CA重组蛋白进行原核表达及纯化,制备兔源MVV CA重组蛋白多克隆抗体,采用间接ELISA方法测定其抗体效价,利用Western blot和免疫组化方法对其进行特异性鉴定。[结果]成功构建MVV CA重组蛋白原核表达系统,纯化后的目的蛋白大小约27 kDa;间接ELISA方法测定制备的多克隆抗体效价为1∶8192;Western blot检测感染MVV绵羊的病肺组织,在25 kDa处出现特异性条带;免疫组化结果显示感染MVV绵羊的病肺中巨噬细胞的胞浆内有明显棕黄色阳性信号。[结论]利用获得的可溶性重组MVV CA蛋白制备的多克隆抗体具有较好特异性,可为MVV血清学诊断技术提供检测抗体。

关键词：绵羊梅迪-维斯纳病毒衣壳蛋白原核表达多克隆抗体

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捻转血矛线虫GST耐药基因的克隆、表达及生物信息学分析

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中国农业大学学报 2020年第1期25卷 123-130页

作者：赵学亮孙柯苏倩呼和巴特尔王文龙内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为探究捻转血矛线虫GST基因的原核表达及其生物信息学特征,以捻转血矛线虫cDNA为模板,设计特异性引物扩增GST基因,构建原核表达载体pET30a(+)-GST转化至*** BL21(DE3)感受态细胞,将鉴定正确的重组菌进行表达条件优化后,再通过SDS-PAGE... 详细信息

为探究捻转血矛线虫GST基因的原核表达及其生物信息学特征,以捻转血矛线虫cDNA为模板,设计特异性引物扩增GST基因,构建原核表达载体pET30a(+)-GST转化至*** BL21(DE3)感受态细胞,将鉴定正确的重组菌进行表达条件优化后,再通过SDS-PAGE分析蛋白表达的特征,并利用在线软件对GST蛋白进行生物信息学分析。结果表明:捻转血矛线虫GST基因大小为618 bp;诱导后的pET30a(+)-GST重组菌最佳诱导条件为0.05 mmol/L的IPTG在37℃时诱导6 h,以包涵体的形式存在,大小约为29 ku。生物信息学分析表明:GST分子式为C1083H1657N277O294S6,属于不含信号肽和跨膜区的亲水性蛋白;二级结构主要由α螺旋形成;潜在的抗原表位主要位于25~48、55~63、92~106、113~124、139~147、170~189和195~205位氨基酸附近。本试验成功构建GST基因原核表达系统,优化表达条件下能稳定纯化GST重组蛋白,为进一步探索捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制及GST蛋白的生物学特性提供研究基础。

关键词：捻转血矛线虫 GST基因原核表达生物信息学

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动物生理学课程思政元素探索——以内蒙古农业大学为例

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内蒙古农业大学学报（社会科学版） 2022年第5期24卷 61-65页

作者：李慧萍张良徐斯日古楞刘淑英内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区基础兽医学重点实验室内蒙古呼和浩特010018

本文以内蒙古农业大学为例,基于动物生理学的课程特点,通过对理论、实验教学内容和教学过程的分析和延展,探索和挖掘了10个思政元素。通过课程设计将思政元素贯穿于动物生理学的日常教学中,并对学生的满意度进行调查。结果显示,学生对1... 详细信息

本文以内蒙古农业大学为例,基于动物生理学的课程特点,通过对理论、实验教学内容和教学过程的分析和延展,探索和挖掘了10个思政元素。通过课程设计将思政元素贯穿于动物生理学的日常教学中,并对学生的满意度进行调查。结果显示,学生对10个元素的完全满意度平均为81.6%。本文初步挖掘动物生理学课程中的思政元素,为建设动物生理学的课程思政体系提供一定参考。

关键词：动物生理学课程思政教学设计

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金黄色葡菌球菌脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞免疫作用的影响

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中国畜牧兽医 2021年第8期48卷 3079-3086页

作者：张静钱英红张凯吴金迪刘博毛伟曹金山内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古自治区农牧业科学院呼和浩特010018

本研究旨在阐明金黄色葡萄球菌脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞免疫作用的影响,为金黄色葡萄球菌致病性研究提供理论参考。以金黄色葡萄球菌野生株SA113(WT SA113)和SA113 lgt::ermB脂蛋白表达缺失菌株(SA113Δlgt株)体外感染M1型小鼠... 详细信息

本研究旨在阐明金黄色葡萄球菌脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞免疫作用的影响,为金黄色葡萄球菌致病性研究提供理论参考。以金黄色葡萄球菌野生株SA113(WT SA113)和SA113 lgt::ermB脂蛋白表达缺失菌株(SA113Δlgt株)体外感染M1型小鼠骨髓源巨噬细胞,分为3组:空白对照组、WT SA113感染组(MOI:3∶1)、SA113Δlgt感染组(MOI:3∶1)。采用ELISA法检测M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、趋化因子(RANTES)和白细胞介素10(IL-10)的水平,实时荧光定量PCR检测Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)和含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)基因的表达,免疫荧光法检测脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌作用的影响。结果显示,与空白对照组相比,WT SA113感染组和SA113Δlgt感染组均可显著上调M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中TNF-α、RANTES、IL-10分泌量以及WT SA113感染组TLR2、NLRP 3基因表达水平(P<0.05),而TLR 4基因表达量显著降低(P<0.05);与WT SA113感染组相比,SA113Δlgt感染组M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中TNF-α、IL-1β、RANTES、IL-10分泌量以及TLR2(12 h除外)、NLRP 3基因表达水平显著降低(P<0.05)。免疫荧光结果显示,M1型巨噬细胞对SA113Δlgt株的吞噬作用显著低于对WT SA113株的吞噬作用(P<0.05)。综上,金黄色葡萄球菌的脂蛋白在M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中主要通过激活TLR2和NLRP3受体,诱导细胞因子TNF-α、IL-1β、RANTES和IL-10的产生和释放。

关键词：金黄色葡萄球菌脂蛋白骨髓源巨噬细胞细胞因子

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一例绒山羊狂蝇蛆病的诊断

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当代畜禽养殖业 2024年第2期44卷 60-61页

作者：庞涛李静张迪蔺钰博李怡潞李新跃纪爽丁玉林王金玲张娜内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区科学技术厅内蒙古呼和浩特010000 内蒙古通辽市科尔沁区畜牧水产工作站内蒙古通辽028000 内蒙古自治区农牧业技术推广中心内蒙古呼和浩特010000

狂蝇蛆病是一种由狂蝇属的羊狂蝇幼虫寄生在羊的鼻腔及其附近腔窦内,引起的以慢性鼻炎和流脓性鼻液为特征的寄生虫病。本研究通过临床病史、症状及尸体剖检的方法诊断了一例绒山羊狂蝇蛆病。绒山羊发病初期流大量鼻液,后期流黏稠鼻液,... 详细信息

狂蝇蛆病是一种由狂蝇属的羊狂蝇幼虫寄生在羊的鼻腔及其附近腔窦内,引起的以慢性鼻炎和流脓性鼻液为特征的寄生虫病。本研究通过临床病史、症状及尸体剖检的方法诊断了一例绒山羊狂蝇蛆病。绒山羊发病初期流大量鼻液,后期流黏稠鼻液,鼻液与大量污物阻塞鼻孔而导致呼吸困难,出现运动失调、转圈、弯头、痉挛及麻痹等神经症状。剖检可见鼻腔黏膜充血和出血,在鼻腔额窦和颅腔内发现不同发育时期的羊狂蝇幼虫虫体。

关键词：绒山羊狂蝇蛆病狂蝇蛆神经症状

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