检索结果-内蒙古大学图书馆

药物分析杂志 2019年第12期39卷 2184-2190页

作者：张晓云白玉廷郝大成于玥王伊琴毛伟宋小霞孙华李培锋内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 二连浩特海关技术中心二连浩特011100

目的:建立测定牛可食性组织中红霉素残留的高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),为动物性食品中牛可食性组织残留的监督检验和残留监控提供技术支持。方法:用乙腈提取,正己烷除脂离心后用0.22μm的有机针孔滤膜过滤,采用日本资生堂CAPCEL... 详细信息

目的:建立测定牛可食性组织中红霉素残留的高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),为动物性食品中牛可食性组织残留的监督检验和残留监控提供技术支持。方法:用乙腈提取,正己烷除脂离心后用0.22μm的有机针孔滤膜过滤,采用日本资生堂CAPCELL PAK MGⅡ-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱。流动相为乙腈-0.5%氨水(92∶8),流速为0.5 mL·min-1,柱温为30℃,进样量为5μL,采用电喷雾离子源ESI,正离子模式,选择MRM多反应监测等质谱条件进行样品检测。结果:红霉素的保留时间为5.967 min,峰形良好、无杂峰干扰,并在5~200 ng·mL^-1浓度范围内线性关系良好(r^2=0.990 0,n=5)。低、中、高3个浓度的平均回收率在84.6%~107.6%之间,批内精密度<9%,批间精密度<10%,检测下限为5μg·kg^-1,定量下限为20μg·kg^-1,符合检测要求。结论:本文建立的LC-MS/MS检测方法灵敏度高、稳定性好,可用于检测牛可食性组织中的红霉素。

关键词：红霉素罗红霉素牛可食性组织残留液相色谱-串联质谱

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布鲁氏菌A19疫苗株全基因组测序及比较基因组学分析

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中国人兽共患病学报 2019年第11期35卷 1002-1008页

作者：王姝懿赵学亮孙柯呼和巴特尔王文龙内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古自治区综合疾病预防控制中心呼和浩特010031

目的探索布鲁氏杆菌A19疫苗株全基因组的结构、分子生物学的功能,并对其生物信息学进行研究。方法采用Illumina Hiseq 4000和PacBio对A19进行全基因组测序,并与GenBank上的8株菌进行比较基因组学解析。A19基因组3286167 bp,预测3371个基... 详细信息

目的探索布鲁氏杆菌A19疫苗株全基因组的结构、分子生物学的功能,并对其生物信息学进行研究。方法采用Illumina Hiseq 4000和PacBio对A19进行全基因组测序,并与GenBank上的8株菌进行比较基因组学解析。A19基因组3286167 bp,预测3371个基因,GC含量57.25%。通过注释COG库,对应基因有2560个,将其归入22类COG中;根据比对KEGG库,得到2544个基因,共参与33类代谢通路。结果综合两个数据库结果发现,大多数A19预测基因中的基因功能主要与膜运输、氨基酸转运及碳水化合物代谢有关。结论通过分析发现,A19和猪羊牛种布鲁氏菌之间存在一定差异,并找出牛种毒力基因。本实验通过测序A19全基因组,为布鲁菌疫苗的研究提供思路。

关键词：布鲁氏菌布鲁菌疫苗株A19 全基因组测序比较基因组学研究

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绵羊捻转血矛线虫流行病学调查及耐药性检测

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家畜生态学报 2019年第11期40卷 70-72页

作者：赵学亮额叶勒德格海鹰米其德孙柯吕旭王文龙内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古鄂尔多斯市乌审旗动物疫病控制中心内蒙古鄂尔多斯017300

为调查乌审旗地区捻转血矛线虫感染及耐药性情况,通过粪便中虫卵定性定量及剖检法对乌审旗不同地区的绵羊进行捻转血矛线虫感染情况调查,并开展了驱虫效果比较试验。结果表明,该地区绵羊捻转血矛线虫病流行比较严重,平均感染率和平均感... 详细信息

为调查乌审旗地区捻转血矛线虫感染及耐药性情况,通过粪便中虫卵定性定量及剖检法对乌审旗不同地区的绵羊进行捻转血矛线虫感染情况调查,并开展了驱虫效果比较试验。结果表明,该地区绵羊捻转血矛线虫病流行比较严重,平均感染率和平均感染强度分别为89%和416.92×200个/g,捻转血矛线虫对伊维菌素注射剂和阿苯达唑片剂产生了严重的耐药性。

关键词：绵羊捻转血矛线虫耐药性检测

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骆驼锥虫病研究现状

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动物医学进展 2019年第6期40卷 102-106页

作者：苏日娜哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古骆驼研究院内蒙古阿拉善盟巴丹吉林镇737300

锥虫病是世界卫生组织认定的由锥虫引发的主要的人畜共患原虫病之一。在我国流行的主要是骆驼、马、牛等家畜的伊氏锥虫病。骆驼锥虫病可造成骆驼日渐消瘦、心肌衰竭甚至死亡,随着疾病的蔓延会造成较大的经济损失。通常使用苏拉明、贝... 详细信息

锥虫病是世界卫生组织认定的由锥虫引发的主要的人畜共患原虫病之一。在我国流行的主要是骆驼、马、牛等家畜的伊氏锥虫病。骆驼锥虫病可造成骆驼日渐消瘦、心肌衰竭甚至死亡,随着疾病的蔓延会造成较大的经济损失。通常使用苏拉明、贝尼尔、安锥赛等药物可达到防治该病的目的。为了让更多的人们较为系统地了解和有效防治骆驼锥虫病,从骆驼锥虫病的病原体特征、流行病学、临床症状、病理变化和防治措施等方面进行了综述。此外,对骆驼锥虫病的防治提出了新的方法和思路,为骆驼锥虫病的诊断、治疗及预防提供参考。

关键词：骆驼伊氏锥虫防治

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布鲁菌疫苗株A19全基因组测序及功能分析

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中国兽医学报 2019年第9期39卷 1770-1775页

作者：王姝懿赵学亮孙珂呼和巴特尔王文龙内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区综合疾病预防控制中心内蒙古呼和浩特010031

采用Illumina Hiseq和PacBio测序技术对布鲁菌A19进行全基因组测序,并进行GO注释、VFDB注释、ARDB注释、CRISPR以及基因岛预测等生物信息学分析。结果显示:A19全基因组大小为3.28 Mb,GC含量分布未见异常,含1个CRISPR和16个基因岛,通过G... 详细信息

采用Illumina Hiseq和PacBio测序技术对布鲁菌A19进行全基因组测序,并进行GO注释、VFDB注释、ARDB注释、CRISPR以及基因岛预测等生物信息学分析。结果显示:A19全基因组大小为3.28 Mb,GC含量分布未见异常,含1个CRISPR和16个基因岛,通过GO数据库注释发现,参与生物学途径的基因5 311个、细胞组份基因有3 350个、分子功能基因有3 078个;通过VFDB注释发现,与毒力相关的基因82个,主要包括脂多糖(LPS)、纤连结合蛋白、virB四型分泌系统等毒力相关因子;通过ARDB数据库注释发现,与耐药相关的基因1个,该基因的表达产物通过影响焦磷酸异构酶的表达,从而产生对抗生素的耐药。本试验通过A19全基因组测序,为布鲁菌病的治疗和致病机制的研究及疫苗的开发奠定了基础。

关键词：布鲁菌布鲁菌疫苗株A19 全基因组测序功能分析

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牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的制备及其应用

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中国兽医科学 2019年第3期49卷 287-293页

作者：赵洪哲范峻豪李新培王昊关平原温永俊内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 中国农业科学院特产研究所吉林长春130112

为制备牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)单克隆抗体(MAb)及其直接荧光标记抗体,本试验用纯化的牛病毒性腹泻病毒Ht01株免疫雌性BALB/c小鼠。间接ELISA测其血清效价,取抗体效价达标小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合。用间... 详细信息

为制备牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)单克隆抗体(MAb)及其直接荧光标记抗体,本试验用纯化的牛病毒性腹泻病毒Ht01株免疫雌性BALB/c小鼠。间接ELISA测其血清效价,取抗体效价达标小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合。用间接ELISA筛选阳性细胞株并进行2次亚克隆后注射入小鼠腹腔制备单抗腹水。利用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化腹水,用间接免疫荧光试验测定其活性,用SDS-PAGE试验测定其纯度。经活性、纯度检测合格后,采用搅拌法与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联;用葡聚糖G-25 Medium介质进行分离纯化。结果,本研究共获得2株能够稳定分泌IgG1类型的阳性杂交瘤细胞株和一种直接荧光抗体,分别被命名为BMAb11、BMAb20、DB11。稳定性试验表明,杂交瘤细胞分泌的抗体稳定性好。ELISA、间接免疫荧光试验和直接免疫荧光试验表明,单克隆抗体和直标荧光抗体均与BVDV发生特异性反应,说明它们的特异性较好。经ELISA鉴定,腹水抗体效价达到1∶12 800。直接荧光抗体荧光素与蛋白的摩尔比(F/P)为3.34,标准值在2.0～4.0之间,符合标准。上述研究结果表明,本研究制备的单克隆抗体和直标荧光抗体可用于BVDV的检测,为BVDV的临床诊断奠定了基础。

关键词：牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 杂交瘤细胞单克隆抗体(MAb) 直标荧光抗体

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捻转血矛线虫阿苯达唑耐药株给药前后比较转录组学分析

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畜牧兽医学报 2019年第3期50卷 637-644页

作者：赵学亮王姝懿呼和巴特尔孙柯苏倩吕旭王文龙刘春霞内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古自治区综合疾病预防控制中心呼和浩特010018 内蒙古农业大学生命科学院呼和浩特010018

为探明捻转血矛线虫阿苯达唑耐药株给药前后在转录组水平上的差异,本研究采用Illumina Hiseq4000对给药前后的捻转血矛线虫进行转录组测序,筛选得到差异表达基因并通过GO和KEGG数据库对其进行功能注释及富集性分析,并利用荧光定量PCR验... 详细信息

为探明捻转血矛线虫阿苯达唑耐药株给药前后在转录组水平上的差异,本研究采用Illumina Hiseq4000对给药前后的捻转血矛线虫进行转录组测序,筛选得到差异表达基因并通过GO和KEGG数据库对其进行功能注释及富集性分析,并利用荧光定量PCR验证部分差异表达基因。结果显示,共筛选获得851个显著差异表达基因,其中包括584个上调基因和267个下调基因。通过GO功能富集分析显示,有458、418和367个基因分别注释到生物学过程、分子功能和细胞组分三大类;对差异表达基因进行KEGG富集分析显示,有173个差异表达基因参与到75条KEGG通路中,显著富集在核糖体合成、细胞凋亡、过氧化物酶增殖体激活受体(PPAR)等信号通路。本试验初步筛选了阿苯达唑耐药株给药前后的差异表达基因,为深入探索捻转血矛线虫耐药性分子机制、筛选对耐药性检测的分子标记及耐药性早期鉴别诊断方法的建立提供重要数据。

关键词：捻转血矛线虫阿苯达唑耐药性转录组

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猪传染性胃肠炎病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

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动物医学进展 2019年第9期40卷 29-33页

作者：杜雅楠李静刘艳成杜鹏包福祥内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 兴安盟动物疫病预防控制中心内蒙古乌兰浩特137400

为建立一种操作简便、准确率高的检测方法,对内蒙古地区猪传染性胃肠炎流行情况进行调查,参考GenBank中收录的猪传染性胃肠炎病毒的N基因序列,设计合成了一对特异性引物,针对该基因建立了TGEV的RT-PCR检测方法。应用建立的RT-PCR方法对... 详细信息

为建立一种操作简便、准确率高的检测方法,对内蒙古地区猪传染性胃肠炎流行情况进行调查,参考GenBank中收录的猪传染性胃肠炎病毒的N基因序列,设计合成了一对特异性引物,针对该基因建立了TGEV的RT-PCR检测方法。应用建立的RT-PCR方法对从内蒙古地区7个盟市采集的204份猪腹泻样品进行了TGEV检测。结果显示,受检的204份样品中有24份样品呈现TGEV阳性,阳性率为11.76%。其中从赤峰市采集的样品TGEV阳性率最高,为20.83%;不同类型样品TGEV的检出率也有差异,其中肛门拭子的检出率最高(15.56%),其次是肠道样品(12.00%),粪便样品的检出率最低(7.87%)。表明所建立的RT-PCR检测方法灵敏度高、特异性强,可用于猪传染性胃肠炎病毒的快速检测。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒反转录-聚合酶链反应检测

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羊种布鲁氏菌Rev.1株VjbR基因的克隆、原核表达及生物信息学分析

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中国动物检疫 2019年第12期36卷 68-75页

作者：杭天宇宋前进金铭关平原温永俊内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室

本研究旨在构建表达载体pET-30a-VjbR,进而表达布鲁氏菌VjbR蛋白;利用生物软件分析该蛋白生物信息学信息,为进一步研究该蛋白奠定基础。以布鲁氏菌Rev.1株基因组为模板,扩增VjbR基因序列,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,获得重组质... 详细信息

本研究旨在构建表达载体pET-30a-VjbR,进而表达布鲁氏菌VjbR蛋白;利用生物软件分析该蛋白生物信息学信息,为进一步研究该蛋白奠定基础。以布鲁氏菌Rev.1株基因组为模板,扩增VjbR基因序列,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,获得重组质粒pET-30a-VjbR,并进行原核表达、Western-blot检测及该基因的生物信息学分析。结果显示:本试验成功克隆并表达了VjbR基因;经对表达产物进行SDS-PAGE分析纯化,发现本试验得到较纯蛋白;经Western-blot检测,发现该基因表达蛋白可与布鲁氏菌羊阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性;通过生物信息学系列软件统计分析,发现VjbR蛋白无跨膜区,无信号肽,且该蛋白共有15个抗原决定簇,在二级结构中,α-螺旋的氨基酸有131个,占比为49.81%。布鲁氏菌VjbR基因的成功表达与纯化,为进一步制备该蛋白的单克隆抗体及iELISA诊断试剂盒的研制奠定了基础。

关键词：布鲁氏菌 VjbR基因原核表达免疫原性

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基于全基因组重测序分析阿拉善双峰驼生物学特性

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家畜生态学报 2019年第8期40卷 20-26页

作者：王凤红包花尓敖敦格日勒乌云高娃额尔敦木图那仁巴图内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古农业大学动物科学学院内蒙古呼和浩特010018 内蒙古师范大学生命科学与技术学院内蒙古呼和浩特010022

此试验旨在通过研究阿拉善双峰驼基因组遗传变异信息,找到与其生物学特性相关的候选基因,以期对阿拉善双峰驼分子特征做出评价,并为双峰驼重要经济性状的功能基因定位提供基础数据。提取12头双峰驼基因组总DNA,制备基因组文库,经Illumin... 详细信息

此试验旨在通过研究阿拉善双峰驼基因组遗传变异信息,找到与其生物学特性相关的候选基因,以期对阿拉善双峰驼分子特征做出评价,并为双峰驼重要经济性状的功能基因定位提供基础数据。提取12头双峰驼基因组总DNA,制备基因组文库,经Illumina HiSeq^TM平台测序,利用生物信息学手段对重测序数据进行分析,对识别的SNPs和InDels进行注释。结果:共计得到367.98Gb序列数据,平均测序深度15×,测序得到2453332756个reads,比对到参考基因组的reads为2003009380,匹配率为81.65%;共确定了6759037SNPs和976715InDels,共计注释15037个基因。其中与耐热性相关的候选基因是HSF1、HSPA9、HSPA4;与胰岛素相关的候选基因是EEF1A1、EEF1A12、GSK3A、GSK3B、PDX1、PAX6、PPARs和IRSs;与高血压相关的候选基因是KLK和PPARs;与耐渴性相关的候选基因是NFAT5、BGT1和AQPs。此研究基本阐明了双峰驼的遗传变异信息,从基因组层面解释了双峰驼的生物学特性,为后续分析与经济性状相关的遗传学机制、功能基因的研究和保护双峰驼品种资源提供了基因组数据,并为与经济性状相关的功能基因定位提供新的思路和线索。

关键词：阿拉善双峰驼全基因组重测序 SNPs InDels 生物学特性

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