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畜牧与饲料科学 2015年第4期36卷 23-25页

作者：乌兰其其格高晶周伟光陈玉惠敖特根巴雅尔内蒙古鄂托克旗农牧业局家畜改良工作站内蒙古鄂托克旗016100 内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古鄂托克旗兽医局内蒙古鄂托克旗016100

为研究牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)感染对牛单核巨噬细胞吞噬功能的影响,应用淋巴细胞分离液获得牛外周血单个核细胞,通过贴壁培养成为单核巨噬细胞。IBRV感染单核巨噬细胞24 h后加入鸡红细胞,测定被感染细胞对鸡红细胞的吞噬率。结果显... 详细信息

为研究牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)感染对牛单核巨噬细胞吞噬功能的影响,应用淋巴细胞分离液获得牛外周血单个核细胞,通过贴壁培养成为单核巨噬细胞。IBRV感染单核巨噬细胞24 h后加入鸡红细胞,测定被感染细胞对鸡红细胞的吞噬率。结果显示,单核巨噬细胞被IBRV感染后,对鸡红细胞的吞噬率显著降低(P<0.05)。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒鸡红细胞牛单核巨噬细胞吞噬

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伊维菌素和三氯苯达唑在羊体内的药动学相互作用

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中国农业科学 2014年第7期47卷 1438-1443页

作者：高妍妍巴雅尔哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古家畜改良工作站

【目的】研究联合应用伊维菌素和三氯苯达唑在蠕虫感染绵羊体内的药代动力学特征及相互影响,【方法】借助经典麦克麦斯特法定量检查羊群消化道蠕虫感染基础上选取每克粪便虫卵数大于1500个,且感染强度相近的泌乳期鄂尔多斯细毛羊15只,... 详细信息

【目的】研究联合应用伊维菌素和三氯苯达唑在蠕虫感染绵羊体内的药代动力学特征及相互影响,【方法】借助经典麦克麦斯特法定量检查羊群消化道蠕虫感染基础上选取每克粪便虫卵数大于1500个,且感染强度相近的泌乳期鄂尔多斯细毛羊15只,平均体重为(39.3±3.2)kg,年龄为4周岁。将15只受试羊禁食8 h后随机分成3组,按照预定试验设计给予不同药物:第1组皮下注射伊维菌素(0.2 mg·kg),第2组灌服三氯苯达唑混悬液(12 mg·kg),第3组皮下注射伊维菌素(0.2 mg·kg)的同时灌服三氯苯达唑混悬液(12 mg·kg)。分别于给药后第0.75、2、4、8、16、24、36、48、72、120、192和336 h,由颈静脉采集5 mL血样,离心分离血浆,冷冻保存待测。建立检测血浆伊维菌素(IVM)、三氯苯达唑(TCBZ)及其主要活性代谢产物三氯苯达唑亚砜(TCBZSO)浓度的高效液相色谱(HPLC)荧光检测法和紫外检测法,并对每个样品进行甲醇沉淀蛋白,经ODS C18固相萃取柱进行纯化处理后,分别测定各组血浆样品中的IVM、TCBZ及其主要代谢产物TCBZSO的浓度。色谱条件:反相C18柱,Inertsi10DS—SP(5μm,4.6×150mm,I.D.);流动相为V(甲醇+乙腈):V(水)=95:5;激发波长364 nm,发射波长470 nm;流速为1.0 ***;柱温为室温;进样量为20μL。最后将测定血药浓度数据用Phoenix WinNonlin药动学软件按非房室模型方法处理,计算出各试验组每只羊的相关药动学参数,并进行统计学分析。【结果】血浆样品色谱图中IWM和内标物AVM色谱峰分离良好,保留时间分别为8.73 min和6.16 min,且不受血浆其他干扰峰的影响;TCBZ和TCBZSO以及内标物甲苯咪唑的保留时间分别为10.04、5.53和3.42 min,且在试验分析条件下具有良好的分离度,血浆内源性物质对目标峰没有干扰。对HPLC检测方法的绝对回收率、精密度和准确度等的考证结果均达到色谱测定要求。因此,本试验所建立的方法切实可行,能满足测定血浆样品各目标物的检测要求。联合应用IVM和TCBZ后,IVM的血浆峰浓度(C)和药时曲线下面积(AUC)极显著下降,表观分布容积(V)、消除半衰期(T)和体清除率(CL)反而极显著增加;联合用药后TCBZSO的V、MRT和T显著高于单独用药组,T则极显著高于单独用药组。【结论】为蠕虫感染绵羊联合应用伊维菌素和三氯苯达唑后,在药代动力学方面相互产生了负面影响,未达到联合用药的真正目的。由此可见,在临床实践中联合用药时应考虑它们的药动学相互作用问题,应避免只根据体外药效学协同作用进行盲目配伍和联合用药,从而保证充分发挥各药物的原有药效和协同作用的目的。

关键词：伊维菌素三氯苯达唑联合用药药动学相互作用

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牛支原体内蒙古分离株脂蛋白vspY基因的克隆和序列分析

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畜牧与饲料科学 2015年第3期36卷 9-13页

作者：宫利娜郝瑞峰王业华张岩高航飞李琛海日汗李平安吴太平关平原内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古托克托县农产品质量安全检验检测站内蒙古托克托县010200 内蒙古农业大学食品科学与工程学院内蒙古呼和浩特010018

旨在为进一步研究牛支原体内蒙古分离株（NM 2012）的vsp Y1、vsp Y2基因功能提供依据。根据已发表的牛支原体vsp Y1、vsp Y2基因序列设计引物,对NM 2012株的vsp Y1、vsp Y2基因进行克隆、测序,并与已发表的相关序列进行相似性比较;采... 详细信息

旨在为进一步研究牛支原体内蒙古分离株（NM 2012）的vsp Y1、vsp Y2基因功能提供依据。根据已发表的牛支原体vsp Y1、vsp Y2基因序列设计引物,对NM 2012株的vsp Y1、vsp Y2基因进行克隆、测序,并与已发表的相关序列进行相似性比较;采用在线生物信息学分析工具对NM 2012株的vsp Y1、vsp Y2推导的氨基酸的相似性、保守结构域、跨膜结构、信号肽、脂蛋白、抗原表位进行预测。结果表明,牛支原体内蒙古分离株（NM 2012）的vsp Y1、vsp Y2基因大小分别为1 029 bp和804 bp,分别编码342和267个氨基酸组成的完整开放阅读框;vsp Y1与已发表的牛支原体vsp Y1基因相似性为99.4%~100%,其推导的氨基酸序列相似性为98.6%~99.7%,vsp Y2与已发表的牛支原体vsp Y2基因相似性为100%。根据生物信息学软件分析结果推测,vsp Y1蛋白是潜在的毒力因子。

关键词：牛支原体 vsp Y1基因 vsp Y2基因分子克隆序列分析

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黑龙江省一株马流感病毒的全基因组测序及同源性分析

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中国动物检疫 2015年第12期32卷 69-72页

作者：赵钊郭巍关平原王晓钧吕洋安茹内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 北京市延庆县农业局北京延庆102100

通过采集一匹患病马的病料及后续的病毒分离、病毒核酸提取、RT-PCR、连接T载体等一系列分子生物学技术,对病毒核酸进行测序,经NCBI比对分析,获得一株H3N8亚型马流感病毒。将获得的毒株与我国分离的A/equine/Jilin/1/1989禽源性毒株、2... 详细信息

通过采集一匹患病马的病料及后续的病毒分离、病毒核酸提取、RT-PCR、连接T载体等一系列分子生物学技术,对病毒核酸进行测序,经NCBI比对分析,获得一株H3N8亚型马流感病毒。将获得的毒株与我国分离的A/equine/Jilin/1/1989禽源性毒株、2002年美国肯塔基分离株A/equine/Kentucky/1/02(美洲谱系Florida亚型)、A/equine/Argentine/77(美洲谱系Argentine亚型)等有代表性毒株进行同源性分析,发现该毒株与Florida-2型马流感病毒基因片段的同源率最高。根据马流感病毒的命名规则,将这毒株命名为A/equine/Heilongjiang/1/2010。本次所分离到的黑龙江株马流感病毒,丰富了我国马流感病毒资源库,为我国马流感流行病学研究、诊断技术及疫苗研究提供了重要基础。

关键词：马流感病毒基因组同源性分子生物学技术

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布鲁氏菌疫苗株S2全基因组测序及牛羊布鲁氏菌比较基因组学研究

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中国人兽共患病学报 2014年第11期30卷 1133-1136页

作者：红梅冯陈晨岳建伟呼和巴特尔王文龙内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

目的为了了解布鲁氏菌S2疫苗株全基因组结构及分子生物学功能。方法对布鲁氏菌疫苗株S2进行全基因组测序,并与GenBank公布的6株牛羊布鲁氏菌进行比较基因组学研究。结果与结论通过全基因组测序发现S2基因组大小为3 331 982bp,预测基因有... 详细信息

目的为了了解布鲁氏菌S2疫苗株全基因组结构及分子生物学功能。方法对布鲁氏菌疫苗株S2进行全基因组测序,并与GenBank公布的6株牛羊布鲁氏菌进行比较基因组学研究。结果与结论通过全基因组测序发现S2基因组大小为3 331 982bp,预测基因有3 243个,GC含量为57.23%。S2预测基因中大多数基因功能主要与糖代谢﹑氨基酸代谢﹑氨基酸转运和膜转运有关。通过比较基因组学研究发现S2有20个特有基因。另外S2与GenBank公布的S2序列进行比对发现有19个差异基因。

关键词：布鲁氏菌布鲁氏菌疫S2疫苗株全基因组测序比较基因组学研究

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内蒙古地区临床型奶牛子宫内膜炎葡萄球菌毒力基因检测及耐药性研究

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畜牧兽医学报 2014年第2期45卷 295-304页

作者：赵俊利李培锋李志芳关红丁月霞内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

旨在调查引起内蒙古地区奶牛临床型子宫内膜炎致病葡萄球菌的毒力基因分布情况及其耐药现状。本试验对采集自内蒙古不同地区的260份患有临床型子宫内膜炎奶牛的子宫脓性分泌物进行了葡萄球菌的分离鉴定,调查了超抗原毒素基因(SEs和TSST... 详细信息

旨在调查引起内蒙古地区奶牛临床型子宫内膜炎致病葡萄球菌的毒力基因分布情况及其耐药现状。本试验对采集自内蒙古不同地区的260份患有临床型子宫内膜炎奶牛的子宫脓性分泌物进行了葡萄球菌的分离鉴定,调查了超抗原毒素基因(SEs和TSST-1)的分布;采用微量肉汤稀释法测定了19种抗菌药物对分离菌株的MIC,并对红霉素和四环素耐药菌株携带的相关耐药基因进行了检测。结果显示,260份样品中分离到10种127株(48.8%)葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌53株(41.7%),凝固酶阴性葡萄球菌74株(58.3%);80株(63.0%)葡萄球菌至少携带1种超抗原毒素基因,超抗原基因可有17种不同的组合,其中sej(38.6%)检出率最高,sec+sej+sen(33.3%)组合最为流行。分离菌株对青霉素(79.5%)和氨苄西林(71.7%)耐药率最高,对头孢菌素类的耐药率在60%左右,对大环内酯类和四环素抗生素的耐药率均在40%左右,对氟喹诺酮类抗菌药物的耐药率在20%左右,对3种联合用药的抗菌药物组合耐药率均在10%左右,所有菌株均对万古霉素敏感。菌株对红霉素的耐药表型主要由ermC(46.4%)和ermB(37.5%)基因贡献,未检出ermA基因。菌株对四环素的耐药表型主要由tetK(70.0%)基因介导,其次为tetM(10.0%)基因。22株耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)均为凝固酶阴性葡萄球菌;MRS菌株对青霉素、氨苄西林、克拉霉素和红霉素的耐药率极显著高于甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS)(P<0.01),对头孢噻肟的耐药率高于MSS(P<0.05)。结果提示:内蒙古地区临床型奶牛子宫内膜炎葡萄球菌携带毒力基因复杂,耐药情况较为严重,且发现耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的流行。抗微生物药的耐药性可能是导致内蒙古地区奶牛临床子宫内膜炎治疗失败的主要原因之一。

关键词：奶牛子宫内膜炎葡萄球菌超抗原基因耐药性

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奶牛乳汁中白细胞介素-6与体细胞凋亡的相关性分析

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动物医学进展 2014年第10期35卷 61-65页

作者：智宇丁玉林吴建美毕艳楠王一王凤龙内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为了解奶牛乳腺炎病例乳汁中白细胞介素-6(IL-6)与体细胞凋亡的相关性,探讨了患有不同程度乳腺炎的奶牛乳汁中IL-6水平变化,并研究了IL-6与乳汁体细胞凋亡的相关性。利用无菌消毒法对某奶牛饲养场的82头奶牛采集乳样,采用放射免疫分析... 详细信息

为了解奶牛乳腺炎病例乳汁中白细胞介素-6(IL-6)与体细胞凋亡的相关性,探讨了患有不同程度乳腺炎的奶牛乳汁中IL-6水平变化,并研究了IL-6与乳汁体细胞凋亡的相关性。利用无菌消毒法对某奶牛饲养场的82头奶牛采集乳样,采用放射免疫分析法测定乳清IL-6,应用流式细胞仪检测乳汁体细胞凋亡率。结果表明,隐性乳腺炎乳汁中IL-6水平极显著高于无乳腺炎乳汁中IL-6水平(P<0.01),临床乳腺炎乳汁中IL-6水平极显著高于无乳腺炎乳汁和隐性乳腺炎乳汁中IL-6水平(P<0.01);奶牛乳腺炎病例乳汁中IL-6水平与上皮细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞凋亡呈明显负相关(P<0.01),其中IL-6与中性粒细胞的相关系数接近1或达到1,二者的相关性最明显,IL-6对中性粒细胞凋亡抑制最明显。奶牛乳汁中IL-6水平与奶牛乳腺炎的发病程度密切相关,IL-6不同程度的抑制牛乳汁中体细胞的凋亡过程,IL-6对中性粒细胞的凋亡过程的明显抑制与奶牛乳腺炎有重要关系。

关键词：奶牛乳腺炎白细胞介素-6 体细胞凋亡

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RNA 干扰抑制大鼠肺泡巨噬细胞 NR8383 TGR5受体表达的研究

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动物医学进展 2014年第6期35卷 6-10页

作者：刘倩史琳凯李磊张子英王旭东李培锋内蒙古农业大学兽医学院、农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

应用RNA干扰技术建立大鼠肺泡巨噬细胞NR8383TGR5基因阻断模型。采用阳离子脂质体法,将TGR5siRNA(Santa Cruz Biotechnology)转染到NR8383细胞中,实时荧光定量PCR和Western blot分别检测NR8383细胞中TGR5mRNA和蛋白水平表达变化。结果显... 详细信息

应用RNA干扰技术建立大鼠肺泡巨噬细胞NR8383TGR5基因阻断模型。采用阳离子脂质体法,将TGR5siRNA(Santa Cruz Biotechnology)转染到NR8383细胞中,实时荧光定量PCR和Western blot分别检测NR8383细胞中TGR5mRNA和蛋白水平表达变化。结果显示,与对照组比,转染TGR5siRNA组可明显降低NR8383细胞TGR5mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。RNA干扰技术能够特异性的高效阻断NR8383细胞中TGR5基因的表达,为深入探讨TGR5的生物学功能提供了可靠方法和新途径。

关键词： RNA干扰 NR8383细胞 TGR5受体

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我国不同地区奶牛乳房炎病原菌群落多样性特征

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微生物前沿 2015年第1期4卷 11-19页

作者：唐·希尼尼根于景丽赵吉内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特内蒙古大学环境与资源学院内蒙古呼和浩特内蒙古大学生命科学学院内蒙古呼和浩特内蒙古自治区环境污染控制与废物资源化重点实验室内蒙古呼和浩特中美生态、能源及可持续性科学内蒙古研究中心内蒙古呼和浩特

探究不同地区奶源病原菌群落多样性特征是搞清发病诱因和有效防控奶牛乳房炎的前提条件。利用Excel统计分析传统培养和常规鉴定获得的病原菌群落种群/类群数及其多样性。结果显示:北京、沈阳、石河子、渭南、徐州、上海病原菌群落种群/... 详细信息

探究不同地区奶源病原菌群落多样性特征是搞清发病诱因和有效防控奶牛乳房炎的前提条件。利用Excel统计分析传统培养和常规鉴定获得的病原菌群落种群/类群数及其多样性。结果显示:北京、沈阳、石河子、渭南、徐州、上海病原菌群落种群/类群数S值为9、4、12、5、7、14。总计21个种群/类群中,3个为六地区共享、10个为二至五个地区共享、8个为某个地区独有。8个独有群中北京、石河子、徐州、上海分别占1、3、1、3个。不同地区病原菌群落多样性指数差异大,与种群/类群数S值有关。Shannon-Wiener丰富度指数(0.29~0.75)和Simpson优势度指数(0.65~0.91)随着S值变化分别有相反和相同的变化趋势,Pielou均匀度指数(1.10~1.50)随S值变化无明显规律。不同地区奶牛乳房炎病原菌群落多样性影响因素可能是多重的。建议统一研究尺度,搞清驱动奶牛乳房炎病原菌群落多样性的关键因素(气候与季节、畜群与个体、圈舍条件与卫生措施)。

关键词：不同地区奶牛乳房炎病原菌群多样性

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绵羊肺腺瘤病毒检测方法的研究进展

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中国畜牧兽医 2014年第4期41卷 236-241页

作者：朱福余于立新么宏强马学恩内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

绵羊肺腺瘤(OPA)是由β-反转录病毒属绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的一种肿瘤性传染病,该病潜伏期长,经呼吸道传播,冬季圈养种羊发病率高,目前无治疗措施,病死率为100%。OPA的持续存在对种羊生产形成了潜在威胁并造成较大经济损失,严重危... 详细信息

绵羊肺腺瘤(OPA)是由β-反转录病毒属绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的一种肿瘤性传染病,该病潜伏期长,经呼吸道传播,冬季圈养种羊发病率高,目前无治疗措施,病死率为100%。OPA的持续存在对种羊生产形成了潜在威胁并造成较大经济损失,严重危害养羊业健康发展。所以,对OPA的早期精确诊断是防制本病的前提,尤其是在出入境检验检疫过程中对进出口羊的JSRV检测尤为重要。随着分子生物学技术的不断发展,JSRV分子生物学检测方法也得到不断的创新和改进。作者就近年来针对检测JSRV的聚合酶链式反应(PCR)、核酸探针杂交技术、酶联免疫吸附试验(ELISA)、环介导等温扩增技术(LAMP)等方法的研究概况作一综述,为寻找快速准确并适用于出入境检疫的JSRV检测方法和进一步发展研究新型JSRV检测方法提供参考。

关键词：绵羊肺腺瘤绵羊肺腺瘤反转录病毒检测方法

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