检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2014年第6期41卷 11-17页

作者：王秀明毛伟曹金山董至恒刘博内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

本试验旨在探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对奶牛输卵管上皮细胞环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)基因表达的影响,阐明LPS对奶牛输卵管上皮细胞COX-2基因表达的调控机制。采用机械法及胰酶消化法分离培养奶牛输卵管上皮细胞;分... 详细信息

本试验旨在探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对奶牛输卵管上皮细胞环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)基因表达的影响,阐明LPS对奶牛输卵管上皮细胞COX-2基因表达的调控机制。采用机械法及胰酶消化法分离培养奶牛输卵管上皮细胞;分别将LPS、吲哚美辛、N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)作用于体外培养的奶牛输卵管上皮细胞,采用实时荧光定量PCR技术检测LPS对奶牛输卵管上皮细胞COX-2基因表达的调控作用。结果显示,不同浓度的LPS能显著促进输卵管上皮细胞COX-2mRNA的表达(P<0.05),且具有浓度依赖性;LPS作用2h时COX-2mRNA的表达量最高,随之表达量逐渐下降到正常水平;NAC能显著抑制LPS诱导的COX-2mRNA表达(P<0.05)。结果表明,LPS能通过NF-κB途径上调奶牛输卵管上皮细胞COX-2mRNA表达量。

关键词：脂多糖输卵管上皮细胞环氧合酶-2 吲哚美辛 N-乙酰半胱氨酸实时荧光定量PCR

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绵羊肺腺瘤病毒受体Hyal-2原核表达诱导条件的优化及其表达产物的鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2014年第3期 25-28页

作者：朱福余马学恩于立新孙丽红么宏强内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018

为了提高绵羊肺腺瘤病毒受体透明质酸酶-2(Hyal-2)在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达量,试验对含pGEX-4T-1-Hyal-2重组质粒的BL21(DE3)重组菌原核表达条件进行了优化。结果表明:诱导剂IPTG浓度、作用时间、温度对目的蛋白的表达影响很大,在3... 详细信息

为了提高绵羊肺腺瘤病毒受体透明质酸酶-2(Hyal-2)在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达量,试验对含pGEX-4T-1-Hyal-2重组质粒的BL21(DE3)重组菌原核表达条件进行了优化。结果表明:诱导剂IPTG浓度、作用时间、温度对目的蛋白的表达影响很大,在37℃条件下加入不同终浓度的IPTG(0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 mmol/L)对重组菌诱导4 h,在终浓度为0.4 mmol/L时目的蛋白的表达量最高;加入终浓度为0.5 mmol/L的IPTG,在37℃条件下诱导,在不同时间点(2,4,6,8小时)取样,在作用时间为2 h,37℃条件下表达的目的蛋白主要以包涵体形式存在,当温度降低时可溶性形式明显增加。通过对诱导条件的优化和摸索发现,绵羊肺腺瘤病毒受体Hyal-2原核表达在诱导剂IPTG浓度为0.4 mmol/L、作用时间为2 h、温度为37℃时目的蛋白的表达量最高。

关键词：绵羊肺腺瘤病毒受体透明质酸酶-2 原核表达诱导条件优化

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6株酵母菌产营养活性物质能力的比较分析

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动物营养学报 2014年第2期26卷 533-540页

作者：卢春芳刘国娟刘大程胡红莲高民内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古农牧业科学院呼和浩特010031

本试验旨在为后期反刍动物微生态制剂研制筛选出高活性酵母菌株。试验测定了6株酵母菌[产朊假丝酵母(Cadida atilis)BY、热带假丝酵母(Candida tropicalis)BR、热带假丝酵母B2、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YR、酿酒酵母YC和酿... 详细信息

本试验旨在为后期反刍动物微生态制剂研制筛选出高活性酵母菌株。试验测定了6株酵母菌[产朊假丝酵母(Cadida atilis)BY、热带假丝酵母(Candida tropicalis)BR、热带假丝酵母B2、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YR、酿酒酵母YC和酿酒酵母BC]产营养活性物质(β-葡聚糖、甘露聚糖、有机酸、氨基酸和多肽)的能力,并使用DPS 14.10软件运用Topsis法对试验数据进行了多指标综合分析。结果表明:热带假丝酵母BR产β-葡聚糖、甘露聚糖能力最强,其细胞壁中β-葡聚糖、甘露聚糖含量分别为80.2、60.5 mg/g;产朊假丝酵母BY产有机酸能力最强,其培养液中总有机酸含量为344.46μg/mL;酿酒酵母BC产多肽能力最强,其培养液中多肽含量为14.08 mg/dL。多指标综合分析结果表明最优菌株为热带假丝酵母BR,其产β-葡聚糖、甘露聚糖、丁二酸、谷氨酸和半胱氨酸的能力均最强,其细胞壁中β-葡聚糖、甘露聚糖含量分别为80.2、60.5 mg/g,培养液中总有机酸、总氨基酸含量分别达到312.11μg/mL、4.705 mg/g。通过6株酵母菌产营养活性物质能力综合比较分析得出最优菌株为热带假丝酵母BR。

关键词：酵母菌营养活性物质反刍动物微生态制剂

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复合菌固态发酵培养基及发酵工艺的优化

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动物营养学报 2014年第4期26卷 1019-1027页

作者：刘国娟刘大程卢春芳胡红莲高民内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古农牧业科学院动物营养研究所呼和浩特010031

本试验旨在研究复合菌固态发酵培养基及发酵工艺的优化。试验采用DPS软件中的混料试验设计和均匀试验设计方案,共配伍成14种复合菌固态发酵培养基和14种发酵工艺,通过测定发酵固态料中的活菌数及β-葡聚糖、甘露聚糖、有机酸含量筛选优... 详细信息

本试验旨在研究复合菌固态发酵培养基及发酵工艺的优化。试验采用DPS软件中的混料试验设计和均匀试验设计方案,共配伍成14种复合菌固态发酵培养基和14种发酵工艺,通过测定发酵固态料中的活菌数及β-葡聚糖、甘露聚糖、有机酸含量筛选优良组方并对发酵工艺进行优化。结果表明:1)优化后复合菌固态发酵培养基为麸皮52.69%、玉米皮20.45%、玉米粉16.07%、米糠4.09%、棉籽粕1.86%、豆粕3.99%、无机盐0.85%;2)发酵工艺优化为含水量60%、pH 8.0、温度30℃、时间46 h,此时活菌数为6.71×108CFU/g、葡聚糖含量为279.83 mg/g、甘露聚糖含量为156.82 mg/g、酒石酸含量为2.78 mg/g、苹果酸含量为8.28 mg/g、柠檬酸含量为1.34 mg/g、丁二酸含量为2.54 mg/g。由此可见,本试验优化了复合菌固态发酵培养基及发酵工艺。

关键词：复合菌活性物质发酵培养基发酵工艺

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乳样体细胞数与DHI其他主要指标的相关性研究

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黑龙江畜牧兽医 2014年第12期 89-91页

作者：包特日格乐黄春华侯荣伦白俊生小亮哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 内蒙古天和荷斯坦牧业有限公司呼和浩特011500

为了解呼和浩特市托克托县某奶牛场乳样体细胞数(SCC)的动态变化及体细胞数与奶牛群改良(DHI)其他主要指标间的相关性,试验利用2013年1—9月份的DHI测定数据资料,采用SPSS17.0统计软件分析了乳样不同范围的体细胞数对DHI其他相关指标的... 详细信息

为了解呼和浩特市托克托县某奶牛场乳样体细胞数(SCC)的动态变化及体细胞数与奶牛群改良(DHI)其他主要指标间的相关性,试验利用2013年1—9月份的DHI测定数据资料,采用SPSS17.0统计软件分析了乳样不同范围的体细胞数对DHI其他相关指标的影响。结果表明:牛乳中的体细胞数与日产奶量、乳脂率、乳糖含量呈极显著负相关(P<0.01),与乳蛋白率呈极显著正相关(P<0.01)。说明乳样体细胞数的变化对DHI其他主要指标确有一定的影响,且存在显著相关性。

关键词：乳样体细胞数 DHI 主要指标相关性

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内蒙古地区奶牛源沙门氏菌的分离、鉴定及其对小鼠的致病性研究

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中国畜牧兽医 2014年第6期41卷 224-229页

作者：关红赵俊利赵红霞李志芳丁月霞石瑞丽内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古科技大学包头医学院内蒙古包头014040

本研究旨在通过对内蒙古地区奶牛源沙门氏菌的分离、血清学鉴定及其对小鼠的致病性研究,探明本地区奶牛源沙门氏菌的血清型分布及其对小鼠的致病力强度,为兽医临床防制由沙门氏菌引起的奶牛感染性疾病提供依据。采用SC增菌液和SS琼脂从... 详细信息

本研究旨在通过对内蒙古地区奶牛源沙门氏菌的分离、血清学鉴定及其对小鼠的致病性研究,探明本地区奶牛源沙门氏菌的血清型分布及其对小鼠的致病力强度,为兽医临床防制由沙门氏菌引起的奶牛感染性疾病提供依据。采用SC增菌液和SS琼脂从兽医临床采集的奶牛乳房炎和奶牛子宫内膜炎病料中分离沙门氏菌;对分离到的疑似菌落进行涂片染色镜检和生化鉴定;采用A^F群O抗原多价诊断血清及单价诊断血清对疑似沙门氏菌进行血清型鉴定;采用腹腔注射感染小鼠,观察部分菌株对小鼠的致病和致死情况,并进行病理学检查。结果显示,从460份病料中共分离、鉴定出沙门氏菌38株,分离率为8.3%;38株分离菌均分布于A^F群内,分属8个群、14种血清型,其中鼠伤寒沙门氏菌分离率最高(39.5%);选择的5株沙门氏菌攻毒后均可引起小鼠发生死亡,死亡率在50%~80%之间;在感染小鼠的心脏、肝脏均回收到了攻毒菌,且发病小鼠的心脏、肝脏和肾脏出现坏死灶,肺脏有细菌性栓子。结果表明,内蒙古地区奶牛源沙门氏菌血清型分布较复杂,对小鼠有较强的致病性,且不同血清型菌株间的毒力存在差异。

关键词：奶牛沙门氏菌血清型小鼠致病性

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绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白及其TM亚基通过激活Akt诱导NIH 3T3细胞转化

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中国预防兽医学报 2014年第8期36卷 606-610页

作者：刘畅李磊于立新么宏强周建华马学恩内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江哈尔滨150001

为进一步研究绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)囊膜蛋白(Env)及其亚基诱导NIH 3T3细胞转化的分子机制,本研究利用JSRV Env及其亚基真核细胞表达质粒分别诱导转化NIH 3T3细胞和稳定表达JSRV受体绵羊Hyal-2的NIH 3T3-Hyal2-HA细胞,并检测转化后细胞... 详细信息

为进一步研究绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)囊膜蛋白(Env)及其亚基诱导NIH 3T3细胞转化的分子机制,本研究利用JSRV Env及其亚基真核细胞表达质粒分别诱导转化NIH 3T3细胞和稳定表达JSRV受体绵羊Hyal-2的NIH 3T3-Hyal2-HA细胞,并检测转化后细胞的接触抑制特性、Akt的激活和肿瘤相关基因的突变。结果显示,在NIH 3T3细胞中,Env及其穿膜蛋白亚基(TM)均具有诱导细胞转化、激活Akt的能力;而在NIH 3T3-Hyal2-HA细胞中,仅TM具有这样的能力。在细胞转化的过程中,肿瘤相关基因kras、nras、egfr、p53和pik3ca均未发生突变。结果表明,在JSRV Env诱导NIH 3T3细胞转化并激活Akt的过程中,TM亚基可能起主要作用,并且还具有单独诱导NIH 3T3细胞转化的能力;绵羊Hyal-2具有抑制JSRV Env诱导NIH 3T3细胞转化的作用。JSRV Env及其亚基诱导NIH 3T3细胞转化的分子机制可能与肿瘤相关基因突变无关。

关键词：绵羊肺腺瘤病毒 Hyal-2 转化 Akt

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稳定表达绵羊肺腺瘤病毒受体Hyal-2蛋白细胞系的建立

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中国预防兽医学报 2014年第3期36卷 187-191页

为构建稳定表达绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)受体透明质酸酶-2(Hyal-2)的NIH 3T3细胞系,本研究采用RT-PCR方法从绵羊瘤胃组织总RNA中扩增Hyal-2的cDNA,并引入标签多肽HA序列和限制性内切酶位点,将其克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建重组质... 详细信息

为构建稳定表达绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)受体透明质酸酶-2(Hyal-2)的NIH 3T3细胞系,本研究采用RT-PCR方法从绵羊瘤胃组织总RNA中扩增Hyal-2的cDNA,并引入标签多肽HA序列和限制性内切酶位点,将其克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建重组质粒pcDNA-Hyal2-HA。将该重组质粒转染NIH 3T3细胞,并利用G418筛选、纯化,获得了稳定表达JSRV受体蛋白Hyal-2的NIH 3T3细胞系。qPCR、间接免疫荧光及western blot检测结果表明,该细胞系在传代至15代后,Hyal2-HA在NIH 3T3细胞中仍然能够稳定表达,并且主要分布于细胞膜上。JSRV囊膜蛋白诱导细胞转化试验显示,该蛋白的瞬时表达可以导致NIH 3T3细胞出现转化聚积灶,但失去了对稳定表达绵羊Hyal-2蛋白NIH 3T3细胞系的诱导转化作用,其作用机制尚待阐明。该细胞系的建立为进一步研究JSRV与其受体的相互作用致瘤机制奠定了基础。

关键词：绵羊肺腺瘤病毒透明质酸酶-2 真核表达 NIH 3T3细胞系

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绵羊肺腺瘤病毒内蒙古分离株前病毒全基因组克隆及序列分析

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病毒学报 2014年第5期30卷 508-513页

作者：刘畅李磊于立新么宏强周建华马学恩内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 安徽科技学院动物科学学院凤阳233100 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150001

为了探究绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)内蒙古流行株与国际各代表株间的亲缘关系,本研究以内蒙古地区绵羊肺腺瘤病自然病例的肺组织总DNA为模板,克隆gag、pro与pol基因,并应用双酶切的方法将其与本实验室先期制备... 详细信息

为了探究绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)内蒙古流行株与国际各代表株间的亲缘关系,本研究以内蒙古地区绵羊肺腺瘤病自然病例的肺组织总DNA为模板,克隆gag、pro与pol基因,并应用双酶切的方法将其与本实验室先期制备并保存的LTR、env基因连接起来,得到了含有JSRV内蒙古分离株前病毒全基因组重组质粒pMD-JSRV。序列分析结果表明,JSRV内蒙古分离株前病毒全基因组全长7 690bp,具外源性JSRV典型的分子特征:1在gag基因中含Sca I酶切位点;2核衣壳蛋白区有2个保守的可形成锌指结构的"CCHC"基序;3env基因编码的TM区胞浆尾部包含保守的特异性"YXXM"基序。将其进行同源性分析,结果表明该株病毒属JSRV-II型,与分离自美国的代表株AF105220间亲缘关系较近,同源性达95%。本研究为进一步探讨JSRV内蒙古分离株基因组结构特点与其致病机制间的关系奠定了基础。

关键词：绵羊肺腺瘤病毒病毒全基因组克隆序列分析

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福斯盘尾丝虫病的流行病学调查及福斯盘尾丝虫线粒体COⅠ基因的序列分析

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中国兽医科学 2014年第3期44卷 245-250页

作者：张伟罗晓平杨晓野刘鑫远于志超王瑞杨莲茹范永生内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古农牧业科学院内蒙古呼和浩特010031 乌拉特后旗兽医局内蒙古乌拉特后旗015500

以内蒙古地区骆驼盘尾丝虫病流行病学调查为基础，基于细胞色素氧化酶工（COⅠ）基因的分子标记特点，进而为骆驼福斯盘尾丝虫传播媒介的研究奠定基础。在骆驼屠宰季节，进行骆驼福斯盘尾丝虫感染情况的检查，并分离虫体，提取DNA，用PC... 详细信息

以内蒙古地区骆驼盘尾丝虫病流行病学调查为基础，基于细胞色素氧化酶工（COⅠ）基因的分子标记特点，进而为骆驼福斯盘尾丝虫传播媒介的研究奠定基础。在骆驼屠宰季节，进行骆驼福斯盘尾丝虫感染情况的检查，并分离虫体，提取DNA，用PCR方法扩增CO工基因，然后克隆和测序，并运用MEGA5．05和DNAStar7．1软件进行序列分析。结果显示，骆驼福斯盘尾丝虫主要寄生于骆驼的项韧带间隙，骆驼的平均感染率为92．2％，其中阿拉善左旗骆驼感染率高达100％，最大感染强度为每峰骆驼23个结节。对福斯盘尾丝虫COⅠ基因的序列分析结果表明，该基因长689bp，与GenBank中公布的同属线虫其他种的COⅠ基因的同源性介于89．8％～93．8％之间。对内蒙古地区骆驼感染福斯盘尾丝虫的状况进行了调查，并在国内外首次对福斯盘尾丝虫COⅠ基因序列进行了测序分析，为该虫种的分子标记及传播媒介的进一步研究奠定了重要基础。

关键词：骆驼福斯盘尾丝虫流行病学调查 COⅠ基因序列分析

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