检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2023年第6期43卷 1263-1269,1296页

作者：张良黄家荣孙志伟李慧萍刘淑英内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区基础兽医学重点实验室内蒙古呼和浩特010018

绵羊肺腺瘤(ovine pulmonary adenocarcinoma,OPA)是一种由绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)引起的慢性、接触传染性肺脏肿瘤疾病。为了探究细胞凋亡在OPA发展过程中的作用,本研究利用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹... 详细信息

绵羊肺腺瘤(ovine pulmonary adenocarcinoma,OPA)是一种由绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)引起的慢性、接触传染性肺脏肿瘤疾病。为了探究细胞凋亡在OPA发展过程中的作用,本研究利用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹等方法检测了凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3及其对应的凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3在健康和自然感染JSRV绵羊肺组织中的表达情况。结果显示:与对照组相比,OPA肺组织中Bcl-2基因和蛋白表达量均显著上调,而Bax和Caspase-3基因和蛋白表达量均显著下调。此外,免疫组织化学显示,Bcl-2、Bax、Caspase-3主要表达于腺瘤灶内增生的Ⅱ型肺泡上皮细胞中。结果表明,细胞凋亡在OPA肺组织中的活动受到抑制,提示绵羊肺腺瘤病毒可能通过调节细胞凋亡活动影响OPA的发生发展。

关键词：绵羊绵羊肺腺瘤绵羊肺腺瘤病毒细胞凋亡 Bcl-2

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内蒙古地区羊源副结核分枝杆菌的分离与基因分型

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中国农业科学 2023年第6期56卷 1204-1214页

作者：赵维宏韩文雄杨波孟维康柴海亮马懿敏张占胜王利峰王艳王明圆张姗丁玉林王金玲吉林台王凤龙赵丽刘永宏内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古赛科星繁育生物技术(集团)股份有限公司鄂尔多斯市动物疫病预防控制中心

【目的】副结核病被世界动物卫生组织（OIE）列入必须报告的《OIE疫病、感染及侵染名录》，我国将其列为二类动物疫病，引起多种反刍动物慢性、增生性肠炎，感染动物通过肠道间歇性排菌而成为养殖场的持续传染源，给养殖业带来了巨大经... 详细信息

【目的】副结核病被世界动物卫生组织（OIE）列入必须报告的《OIE疫病、感染及侵染名录》，我国将其列为二类动物疫病，引起多种反刍动物慢性、增生性肠炎，感染动物通过肠道间歇性排菌而成为养殖场的持续传染源，给养殖业带来了巨大经济损失。其病原体副结核分枝杆菌（MAP）属于胞内寄生的革兰氏阳性菌，为三类动物病原微生物，包括S型（羊型，细分为Ⅰ型、Ⅲ型和骆驼型）和C型（牛型、Ⅱ型，包括B型（野牛型））。有研究表明，各亚型MAP无宿主特异性，但具有地域性，内蒙古作为国内该病的首发地区，获得并准确鉴定内蒙古地区MAP菌株亚型及基因特征，对副结核病的预防控制意义重大。【方法】对内蒙古地区来源的28份MAP阳性的羊源病料进行MAP分离培养，菌落Ziehl-Neelsen染色，染色阳性菌扩繁，提取扩繁菌液基因组DNA，进行IS900基因、IS1311基因和DMC基因扩增、测序和序列分析，同时IS1311基因PCR产物进行Hinf I和Mse I双酶切鉴定。【结果】28份样品经过7—12周培养，共有9支培养基长出菌落，菌落半透明乳白色、表面光滑。挑取单菌落进行抗酸染色，在显微镜下观察到呈不规则（单个或分枝状）、红染的细短杆菌，符合分枝杆菌的形态学特征及抗酸染色特性。9株分离菌IS900、IS1311和DMC基因PCR扩增产物均与目的基因片段预期大小一致。确定了本研究9株分离株均为MAP菌株，分别命名为MAP-NM1至MAP-NM9。DMC基因扩增产物大小为310bp，符合Ⅱ型MAP特征；IS1311基因扩增产物经HinfⅠ和MseⅠ双酶切，本研究9株MAP均得到4条目的条带，与Ⅱ型MAP一致；IS1311基因测序结果与S型、C型、印度野牛型和美国野牛型MAP代表株对照分析显示，9株MAP IS1311基因片段的64、65、68、223、236、422、527、628位碱基位点符合C型和B型MAP特征；IS900基因测序结果序列分析显示，9株MAP IS900基因片段第169位及第216位碱基分别为C（胞嘧啶）和A（腺嘌呤），符合Ⅱ型和Ⅲ型MAP特征；17株来自GenBank数据库的MAP IS900基因参考序列与本研究9株分离株IS900基因系统进化树显示，本研究9株MAP均划分于Ⅱ型MAP分支；3个基因测序结果进行Blast在线分析，与本研究所得分离株同源性最高的参考序列均为Ⅱ型MAP，且同源性均高于98%。综上所述，本研究9株MAP分离株均为Ⅱ型MAP。【结论】首次分离得到内蒙古地区羊源Ⅱ型MAP菌株。

关键词：副结核分枝杆菌分离培养亚型鉴定羊内蒙古

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双峰驼NUCB2/Nesfatin-1抗体的制备及其表达分布

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动物学杂志 2022年第3期57卷 401-411页

作者：白兆星么宏强罗雨晨张雅文张光杰斯日古楞内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010000

双峰驼(Camelus bactrianus)经过长期的自然选择,具备了许多特殊的生物学特性,比如极强的耐渴、耐饥饿以及适应恶劣气候等能力。Nesfatin-1是一种由82个氨基酸组成的肽,通过其前体物质NUCB2在Lys 83~Arg 84位点的前激素转化酶(PCs)的蛋... 详细信息

双峰驼(Camelus bactrianus)经过长期的自然选择,具备了许多特殊的生物学特性,比如极强的耐渴、耐饥饿以及适应恶劣气候等能力。Nesfatin-1是一种由82个氨基酸组成的肽,通过其前体物质NUCB2在Lys 83~Arg 84位点的前激素转化酶(PCs)的蛋白质水解而来,其可以调节机体的能量代谢效率,对食欲有抑制作用。研究双峰驼体内NUCB2/Nesfatin-1的分布与表达,以探究双峰驼体内是否具有特有的能量代谢方式,是否与其不会发生代谢性疾病有一定的联系。使用化学合成的方法合成双峰驼NUCB2/Nesfatin-1蛋白特定表位的半抗原多肽,使用马来酰亚胺法将半抗原与血蓝蛋白(KLH)偶联,通过免疫动物制备针对NUCB2/Nesfatin-1蛋白单一抗原表位的多克隆抗体,应用Western Blot方法检测NUCB2/Nesfatin-1蛋白在双峰驼下丘脑(弓状核、孤束核、腹内侧核)、前峰脂肪、后峰脂肪、胃(胃底腺周围组织)、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、胰腺、肝以及腹部脂肪组织中的表达情况,使用荧光定量PCR技术检测NUCB2/Nesfatin-1 mRNA在双峰驼上述组织中的表达情况。结果采用GraphPad Prism 5.0软件的t检验分析。合成的双峰驼NUCB2/Nesfatin-1蛋白特定表位的多肽杂峰很少,经过计算其纯度大于95%。多肽的质荷比[M+4H]^(4+)和[M+3H]^(3+)符合预期。经过间接ELISA法测定制备的针对NUCB2/Nesfatin-1蛋白的多克隆抗体的效价为5.12×10^(5),成功制备多克隆抗体。使用制备的NUCB2/Nesfatin-1多克隆抗体检测双峰驼体内的NUCB2/Nesfatin-1蛋白的分布,其中,在双峰驼脂肪组织和胰腺组织中表达较为显著。荧光定量PCR检测双峰驼体内的NUCB2/Nesfatin-1 mRNA的分布,在所检测的组织中均有基因表达,其中,在腹部脂肪和肝组织的相对表达量较高。本研究通过分析抗原表位及合成多肽的方式,成功制备了针对双峰驼NUCB2/Nesfatin-1蛋白的特异性抗体,且该抗体的效价高、特异性强。通过成功制备的特异性抗体在蛋白层次上检测NUCB2/Nesfatin-1在双峰驼体内的分布情况,再使用荧光定量PCR方法在基因层次检测NUCB2/Nesfatin-1在双峰驼体内的分布情况。通过对结果的分析后发现,NUCB2/Nesfatin-1可能在双峰驼的耐渴、耐饥饿的机制调节中起到了抑制食欲的作用,使得双峰驼可以忍受长时间的饥饿,在双峰驼的外周脂肪组织中高表达,推测NUCB2/Nesfatin-1蛋白在双峰驼体内可能通过抑制脂肪细胞的分化,促进脂肪细胞中脂滴的水解为机体提供能量,其具体在脂肪细胞中的功能有待我们的进一步研究。

关键词： Nesfatin-1 多克隆抗体双峰驼组织分布

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蜱实验室人工饲养技术研究进展

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中国人兽共患病学报 2025年第1期41卷 67-74页

作者：董晓楠孙连阳崔浩康佳美丁玉林刘永宏赵丽内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010000 内蒙古自治区呼伦贝尔市扎兰屯市动物疫病预防控制中心呼伦贝尔021000 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010000

蜱作为世界第二大病原传播媒介,可通过吸食宿主血液从而传播多种病原体。蜱的存在不仅威胁了人的生命健康,同时也给畜牧业造成极大的经济损失。开展蜱的人工饲养可以为蜱类生长发育繁殖提供稳定的环境,从而为了解蜱的生物学特性,进行蜱... 详细信息

蜱作为世界第二大病原传播媒介,可通过吸食宿主血液从而传播多种病原体。蜱的存在不仅威胁了人的生命健康,同时也给畜牧业造成极大的经济损失。开展蜱的人工饲养可以为蜱类生长发育繁殖提供稳定的环境,从而为了解蜱的生物学特性,进行蜱传病原体的研究及为研制抗蜱药物及防蜱疫苗提供充足实验材料。目前实验室饲养蜱的方法大致可分为两类,一类为使用宿主动物的饲养方法,另一类为使用人工膜的饲养方法,饲养方法的选择需根据蜱的种类、吸血习性、生活环境等多方面综合考虑,现就两种方法的发展过程及各自存在的优弊进行阐述与讨论,以期为实验室开展蜱的人工饲养提供一定的帮助。

关键词：蜱人工饲养生活史

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捻转血矛线虫耐药虫株与敏感虫株circRNAs差异表达分析

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中国农业大学学报 2024年第2期29卷 122-130页

作者：寇慧林陈昕迪王腾宇高娃温海峰张艳敏于宇李峥刘春霞王文龙内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010010 河套学院医学系/内蒙古自治区蜱媒人畜共患传染病重点实验室内蒙古巴彦淖尔015000 内蒙古农业大学生命科学学院呼和浩特010010

为分析捻转血矛线虫伊维菌素敏感虫株与耐药虫株之间差异表达的circRNAs在调控耐药性中的作用,本研究以捻转血矛线虫敏感虫株和耐药虫株为研究对象,采用Illumina Hiseq 2000平台进行高通量测序及cDNA文库的构建,利用相关生物信息学软件... 详细信息

为分析捻转血矛线虫伊维菌素敏感虫株与耐药虫株之间差异表达的circRNAs在调控耐药性中的作用,本研究以捻转血矛线虫敏感虫株和耐药虫株为研究对象,采用Illumina Hiseq 2000平台进行高通量测序及cDNA文库的构建,利用相关生物信息学软件对测得的circRNAs进行差异性分析,同时对来源基因进行GO和KEGG pathway功能富集。运用TargetScan和Miranda软件预测关键circRNAs靶向的miRNAs,探究circRNAs-miRNAs的作用。随后又随机选取5个显著差异的circRNAs,进行RT-qPCR检测并与转录组测序结果进行一致性评定。结果显示:1)敏感虫株与耐药虫株共筛选出677个差异表达的circRNAs,其中47个显著差异,23个显著上调,24个显著下调。2)所有差异circRNAs的来源基因GO富集分析显示,共富集到生物过程336个、细胞组分59个和分子功能110个,主要与代谢过程、细胞膜结构和催化活性等相关,KEGG富集分析显示,富集到257条通路,主要与代谢(脂肪酸生物合成、甘油磷脂代谢和丙酸代谢)、胰高血糖素信号通路和AMPK信号通路等相关。3)circRNAs-miRNAs调控网络分析显示,627个差异circRNAs靶向结合187个miRNAs,组成了10602组调控关系。综上,本研究成功筛选了捻转血矛线虫伊维菌素敏感虫株和耐药虫株间差异表达的circRNAs,对所有差异circRNAs的来源基因进行功能注释和富集分析,并构建了部分显著差异circRNAs-miRNAs调控网络。本研究结果为捻转血矛线虫耐药性产生的分子机制研究提供了新思路。

关键词：捻转血矛线虫伊维菌素耐药性转录组 circRNAs 差异分析

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厚垣普可尼亚菌ARSEF9494菌株最适碳源氮源碳氮质量比及初始pH值的筛选

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中国兽医科学 2023年第12期53卷 1544-1553页

作者：张艳妮郝陆瑶马园李倩楠郭志凯丁玉林陆静王瑞杜山内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室国家级动物医学实验教学中心内蒙古呼和浩特010010

为研究不同碳源、氮源、碳氮质量比及初始pH值等不同营养环境对厚垣普可尼亚菌生长的影响,在马铃薯葡萄糖培养基的基础上,分别采用含5种不同的碳源、氮源及其质量比例和初始pH值的培养基对厚垣普可尼亚菌进行培养,测定其生长速度及分生... 详细信息

为研究不同碳源、氮源、碳氮质量比及初始pH值等不同营养环境对厚垣普可尼亚菌生长的影响,在马铃薯葡萄糖培养基的基础上,分别采用含5种不同的碳源、氮源及其质量比例和初始pH值的培养基对厚垣普可尼亚菌进行培养,测定其生长速度及分生孢子产量,确定培养该菌的最适碳源、氮源组分。结果显示:在固体培养基上,厚垣普可尼亚菌菌丝生长的最适碳氮源组合分别是D-甘露醇和硫酸铵,最适碳氮质量比为5∶1,生长最适初始pH值范围为6.0~8.0,以pH值为7.0时菌丝的生长速度最快;在液体培养基内,最适碳源和氮源分别为乳糖和硫酸铵,液体培养基中碳氮质量比为5∶1时,菌丝生长速度最快,分生孢子数最多,最适初始pH值范围是6.0~9.0,以pH值为6.0时菌丝生长最佳。结果表明,不同营养环境对厚垣普可尼亚菌菌丝生长以及分生孢子产量具有明显影响,而且2种不同培养方法中最适碳源、氮源、碳氮质量比、初始pH值也存在差异。上述结果为该菌种的深入研究和批量培养提供了重要基础数据。

关键词：厚垣普可尼亚菌分生孢子碳源氮源 pH值

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片形吸虫病诊断技术研究概况

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动物医学进展 2024年第10期45卷 101-104页

作者：乌日力格李娜海鹰哈斯毕力格侯斌格日勒格拉巴哈斯苏荣内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室/国家级动物医学实验教学中心内蒙古呼和浩特010018 乌审旗动物疫病预防控制中心内蒙古鄂尔多斯017300

片形吸虫病是由肝片吸虫、大片吸虫及其中间型感染引起的全球性人兽共患寄生虫病,不仅对养殖业造成巨大经济损失,还威胁着人类的健康。目前在家畜片形吸虫病的诊断、药物防治方面虽然取得了一定的进展,但尚未有效控制该病的广泛流行,并... 详细信息

片形吸虫病是由肝片吸虫、大片吸虫及其中间型感染引起的全球性人兽共患寄生虫病,不仅对养殖业造成巨大经济损失,还威胁着人类的健康。目前在家畜片形吸虫病的诊断、药物防治方面虽然取得了一定的进展,但尚未有效控制该病的广泛流行,并已认识到控制该病的关键在于实现早期诊断。因此,亟待建立特异性强、灵敏度高的早期诊断技术和检测方法。论文综述了片形吸虫病的病原学诊断、免疫学诊断及分子生物学诊断技术的最新研究进展,为系统了解家畜片形吸虫病的诊断方法及进一步研究开发准确率更高、特异性更强的新型诊断方法提供线索。

关键词：片形吸虫病病原学诊断免疫学诊断分子生物学诊断

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siRNA干扰TLR4影响两种酵母多糖处理RAW264.7细胞NF-κB/MAPK信号通路的激活

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中国兽医科学 2024年第7期54卷 974-981页

作者：杜蕊陈灰张宇飞李松建刘世雄李薛强徐子萱薛晨刘大程内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 包头市固阳县畜牧业技术服务中心内蒙古包头014200

为了探究Toll样受体4(TLR4)在两种酵母多糖激活NF-κB/MAPK信号通路中发挥的作用,本研究利用CCK8法检测酵母β-葡聚糖和甘露聚糖的细胞毒性,并利用多种方法筛选效果最佳的TLR4 siRNA,然后利用ELISA、RT-qPCR方法检测相关炎症因子的分泌... 详细信息

为了探究Toll样受体4(TLR4)在两种酵母多糖激活NF-κB/MAPK信号通路中发挥的作用,本研究利用CCK8法检测酵母β-葡聚糖和甘露聚糖的细胞毒性,并利用多种方法筛选效果最佳的TLR4 siRNA,然后利用ELISA、RT-qPCR方法检测相关炎症因子的分泌量及其m RNA表达量的变化,最后通过Western-blot检测NF-κB/MAPK信号通路关键蛋白磷酸化水平。结果显示,2.5~20μg/m Lβ-葡聚糖及2.5~50μg/m L甘露聚糖对RAW264.7细胞的活力没有影响;TLR4 siRNA-2可以高效敲低TLR4 m RNA和蛋白表达水平;两种酵母多糖处理敲低TLR4的细胞后,IL-6、IL-12、IL-1β、TNF-α、NO分泌量及IL-6、IL-12、IL-1β、TNF-α、i NOSm RNA表达水平显著下降,NF-κB/MAPK信号通路关键蛋白p-P65、p-P38、p-ERK1/2、p-JNK和p-IκB水平显著降低。结果表明,两种酵母多糖可以通过TLR4调控NF-κB/MAPK信号通路及相关细胞因子的分泌,最终确定TLR4是两种酵母多糖发挥免疫调节作用的重要受体。

关键词：酵母β-葡聚糖酵母甘露聚糖 Toll样受体4 RAW264.7细胞 NF-κB/MAPK信号通路

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牛传染性鼻气管炎病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立

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动物医学进展 2022年第11期43卷 6-11页

作者：王亚新刘春羽侯丽娜温永俊王凤雪内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

为检测牛传染性鼻气管炎病毒,通过设计针对gB基因的特异性引物扩增gB基因,构建阳性重组质粒。经过优化建立了牛传染性鼻气管炎病毒的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。结果显示,建立的实时荧光定量PCR检测方法在阳性标准质粒拷贝数在5.... 详细信息

为检测牛传染性鼻气管炎病毒,通过设计针对gB基因的特异性引物扩增gB基因,构建阳性重组质粒。经过优化建立了牛传染性鼻气管炎病毒的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。结果显示,建立的实时荧光定量PCR检测方法在阳性标准质粒拷贝数在5.474×10~4~5.474×10^(9)拷贝/μL时线性关系良好,线性相关系数R^(2)=0.9993。该方法最低检测限为5.747×10^(2)拷贝/μL;可以特异性检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛副流感病毒(BPIV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)不发生交叉反应。病毒滴度与拷贝数的线性关系良好,线性相关系数R^(2)=0.9854。该方法为牛传染性鼻气管炎病毒的快速检测提供了技术支持。

关键词：牛传染性鼻气管炎 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR gB基因

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金黄色葡萄球菌对奶牛中性粒细胞PGE_(2)的分泌及其合成酶COX-2和mPGES-1的影响

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中国兽医科学 2023年第9期53卷 1193-1199页

作者：张凯姜雪莹钱英红王超曹金山刘博张双翼巩志国毛伟内蒙古农业大学兽医学院内蒙古呼和浩特010018 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 内蒙古自治区农牧业科学院

为了阐明金黄色葡萄球菌感染奶牛中性粒细胞过程中炎症介质PGE_(2)分泌的变化及机制,本试验以体外培养的奶牛中性粒细胞为研究对象,应用金黄色葡萄球菌对其进行感染,采用RT-PCR、Western-blot检测COX-2、m PGES-1基因和蛋白的表达,ELIS... 详细信息

为了阐明金黄色葡萄球菌感染奶牛中性粒细胞过程中炎症介质PGE_(2)分泌的变化及机制,本试验以体外培养的奶牛中性粒细胞为研究对象,应用金黄色葡萄球菌对其进行感染,采用RT-PCR、Western-blot检测COX-2、m PGES-1基因和蛋白的表达,ELISA检测细胞上清PGE_(2)的分泌量。结果显示,与空白对照组(CON)相比,金黄色葡萄球菌(SA113)组感染奶牛中性粒细胞中COX-2、m PGES-1基因和蛋白的表达明显增高(P<0.001),细胞上清中PGE_(2)的分泌量在感染后第3小时无明显变化(P>0.05),但在第6小时和第9小时分泌量明显上升(P<0.05,P<0.01),在第12小时和第24小时分泌量极显著升高(P<0.001)。为进一步证明COX-2和m PGES-1是否对PGE_(2)的分泌产生影响,本试验加入COX-2抑制剂CAY10404和m PGES-1抑制剂MF63,使用ELISA和RT-PCR检测细胞上清中PGE_(2)的分泌和细胞中PGE_(2)基因的表达。结果显示,在感染后第12小时和第24小时与金黄色葡萄球菌(SA113)组相比,加入CAY10404、MF63和同时加入CAY10404、MF63抑制剂时细胞上清和细胞中PGE_(2)的分泌及其基因的表达明显降低(P<0.001)。结果表明:在24 h内金黄色葡萄球菌感染奶牛中性粒细胞过程中COX-2和m PGES-1合成酶的基因和蛋白的表达及炎症介质PGE_(2)的分泌都是随着细菌感染时间的增加逐渐升高且PGE_(2)的合成和表达受COX-2和m PGES-1合成酶的影响。本试验证明了金黄色葡萄球菌可通过提高奶牛中性粒细胞COX-2和m PGES-1合成酶的表达进而促进炎症介质PGE_(2)的分泌。

关键词：奶牛中性粒细胞金黄色葡萄球菌前列腺素E_(2) 环氧合酶2 膜结合型前列腺素E2合酶1

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