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畜牧兽医学报 2013年第10期44卷 1569-1575页

作者：欧阳效晴杨淑青张春强栗瑞兰张通张家新内蒙古农业大学动物科学学院内蒙古自治区动物遗传育种与繁殖重点实验室呼和浩特010018

旨在探讨牛卵丘卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complex,COCs)体外成熟过程中生长分化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF-9)基因表达和卵丘细胞扩展的关系。运用实时荧光定量PCR技术检测GDF-9基因在牛卵丘卵母细胞复合体体外... 详细信息

旨在探讨牛卵丘卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complex,COCs)体外成熟过程中生长分化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF-9)基因表达和卵丘细胞扩展的关系。运用实时荧光定量PCR技术检测GDF-9基因在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中(0、6、12、18、24和28h)的相对表达变化,同时观察了卵丘细胞扩展情况。结果表明,GDF-9mRNA的表达量在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中呈现一定的规律性变化,随着成熟培养的进行,其表达量逐渐增加,在成熟培养12h时表达量最高,但随后又逐渐降低,在成熟培养24h表达量最低;卵丘细胞在IVM 12h开始出现明显的扩散,而且随着成熟时间的延长,卵丘细胞的扩散程度在不断增加。研究结果表明:高水平的GDF-9mRNA表达与卵丘细胞开始扩散的时间一致,揭示GDF-9基因可能在牛卵丘细胞扩散和卵母细胞体外成熟过程中起着重要的作用。

关键词：牛卵丘卵母细胞复合体 GDF-9 体外成熟

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精浆含量对绒山羊精液低温保存效果的影响

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黑龙江畜牧兽医 2019年第22期 48-53页

作者：于慧敏宋国欣张美娜徐冰冰王瑞军李金泉张家新内蒙古农业大学动物科学学院/内蒙古自治区动物遗传育种与繁殖重点实验室

为了研究精浆含量对绒山羊精液低温保存效果的影响,试验以低倍稀释(1∶2)为对照组,研究以高倍稀释(1∶10,高倍稀释组)和离心洗涤(洗涤组)两种方式去除精浆后的精子保存效果,再人为添加不同浓度精浆(0、10%、20%,30%、40%)于低温保存稀... 详细信息

为了研究精浆含量对绒山羊精液低温保存效果的影响,试验以低倍稀释(1∶2)为对照组,研究以高倍稀释(1∶10,高倍稀释组)和离心洗涤(洗涤组)两种方式去除精浆后的精子保存效果,再人为添加不同浓度精浆(0、10%、20%,30%、40%)于低温保存稀释液中,测定精子活率、运动速率、顶体完整性、质膜完整性及线粒体活性等精液品质指标。结果表明:高倍稀释组在各时间段内的精子活率、运动速率[直线速率(VSL)、曲线速率(VCL)及平均路径速率(VAP)]、质膜完整率均显著高于对照组和洗涤组(P<0.05);高倍稀释组的精子顶体完整率和线粒体活性与对照组和洗涤组相比无显著差异(P>0.05);在外源添加不同浓度精浆的试验中,10%、20%精浆组的精子活率、质膜完整率及运动速率均显著高于其他组(P<0.05),而10%、20%精浆组之间无显著差异(P>0.05),但20%精浆组的各项精子质量指标略高于10%精浆组。说明在低温保存山羊精液时存在一定浓度的精浆可以有效提高保存效果,在本试验条件下10%~20%的精浆添加量比较适宜,但20%精浆组的保存效果相对更好。

关键词：精浆低温保存绒山羊稀释倍数稀释液

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父源性印记基因在牛早期胚胎中的表达

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中国农业科学 2013年第18期46卷 3887-3893页

作者：张春强赵德超韩志玲张文广张家新内蒙古农业大学动物科学学院/动物遗传育种与繁殖自治区重点实验室

【目的】研究父源印记基因在牛早期胚胎中的表达模式。【方法】利用Real-time PCR技术,检测Gnas、Grb10和Xist这3个父源性印记基因在牛体外受精(In vitro Fertilization,IVF)和孤雌激活(Parthenogenetic Activation,PA)胚胎各发育阶段... 详细信息

【目的】研究父源印记基因在牛早期胚胎中的表达模式。【方法】利用Real-time PCR技术,检测Gnas、Grb10和Xist这3个父源性印记基因在牛体外受精(In vitro Fertilization,IVF)和孤雌激活(Parthenogenetic Activation,PA)胚胎各发育阶段的表达情况。【结果】对于IVF和PA两种来源的牛胚胎,Gnas在胚胎各发育阶段的表达没有明显差异;Grb10在2细胞阶段的PA胚胎中的表达量明显高于在IVF胚胎的,但从4细胞阶段到囊胚阶段,Grb10在两种来源的牛胚胎中表达没有明显差异;从2细胞阶段到8细胞阶段,Xist在两种来源的牛胚胎中表达没有明显差异,但从16细胞期开始,Xist在PA胚胎中的表达明显高于IVF胚胎的表达量。【结论】对于牛IVF胚胎和PA胚胎,Gnas、Grb10和Xist从2细胞期到囊胚期都可以检测到表达,但表达模式不同。这3个父源性印记基因在牛胚胎发育过程中可能发挥着重要的作用。

关键词：牛父源性印记基因早期胚胎表达

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马毛色遗传机理研究进展

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遗传 2018年第5期40卷 357-368页

作者：赵若阳赵一萍李蓓格日乐其木格张心壮陶克涛图格琴旭仁其木格青柏李超白东义芒来内蒙古农业大学动物科学学院内蒙古自治区马属动物遗传育种与繁殖重点实验室呼和浩特010018

动物毛色是人类正向选择产生的表型之一,在遗传与进化过程中扮演着重要角色。其中马的毛色丰富多变,单从表型无法准确判别其属于哪种毛色,造成马品种登记时毛色性状记录不准确,因此研究马毛色形成机理在育种工作中具有重要意义。随着基... 详细信息

动物毛色是人类正向选择产生的表型之一,在遗传与进化过程中扮演着重要角色。其中马的毛色丰富多变,单从表型无法准确判别其属于哪种毛色,造成马品种登记时毛色性状记录不准确,因此研究马毛色形成机理在育种工作中具有重要意义。随着基因组学及测序技术的日益成熟,马毛色形成遗传机理的研究不断深入,并发现不同毛色性状与特定疾病之间的相关性。本文从遗传学的角度对马的毛色进行归类,对与其形成的相关基因、作用机理及应用等研究进展进行了综述,以期为马毛色形成机理的系统性研究和马匹选育提供借鉴和参考。

关键词：马毛色遗传机理基因调控

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不同抗氧化剂组合对蒙古马精液冷冻保存效果和抗氧化相关指标的影响

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中国农业大学学报 2020年第10期25卷 98-105页

作者：阿娜尔白东义纳日嘎芒来内蒙古农业大学动物科学学院/内蒙古自治区马属动物遗传育种与繁殖重点实验室呼和浩特010018

为研究不同抗氧化剂对蒙古马冷冻精液的品质和抗氧化相关指标的影响,选取10匹蒙古公马作为试验动物,以INRA82作为基础稀释液(对照组),分别添加谷胱甘肽(0、5.0、7.0、10.0和20.0mg/mL)、海藻糖(0、25.0、35.0和50.0mg/mL)和联合添加谷... 详细信息

为研究不同抗氧化剂对蒙古马冷冻精液的品质和抗氧化相关指标的影响,选取10匹蒙古公马作为试验动物,以INRA82作为基础稀释液(对照组),分别添加谷胱甘肽(0、5.0、7.0、10.0和20.0mg/mL)、海藻糖(0、25.0、35.0和50.0mg/mL)和联合添加谷胱甘肽+海藻糖((0+0)、(5.0+35.0)、(5.0+50.0)、(7.0+35.0)和(7.0+50.0)mg/mL)制备成含有不同氧化剂的冷冻保护液,将浓缩处理后的马精子分别置于稀释液中稀释、冷冻和解冻,利用精子常规品质检测方法和酶联免疫分析法,检测运动精子比例(TM)、前进运动精子比例(PM)、质膜完整率(MI)、顶体完整率(AI)及丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和谷胱甘肽还原酶(GR)的活性。结果显示:1)5.0mg/mL谷胱甘肽对马精液TM、PM和MI均有提高,可降低精液中MDA含量,可显著提高CAT和GSH-PX活性(P<0.05);35.0和50.0mg/mL海藻糖可提高精子TM、PM、AI和MI,且35.0mg/mL海藻糖可显著降低MDA含量(P<0.05);2)联合添加5.0mg/mL谷胱甘肽和35.0mg/mL海藻糖可显著提升马精液的TM、PM、AI和MI(P<0.05),还可显著降低MDA含量(P<0.05),提高SOD活性和GSH-PX活性。综上,联合添加5.0mg/mL谷胱甘肽和35.0mg/mL海藻糖一定程度上可通过改变酶活性,对精子氧化应激产生保护作用,提高马精液冷冻-解冻后质量。

关键词：蒙古马精液冷冻保存抗氧化剂抗氧化酶

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C型钠肽预处理对牛卵母细胞体外成熟的影响

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畜牧兽医学报 2014年第9期45卷 1424-1431页

作者：张春强欧阳效晴张通栗瑞兰范晓梅张家新内蒙古自治区动物遗传育种与繁殖重点实验室内蒙古农业大学动物科学学院呼和浩特010018

旨在研究C型钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)预处理对牛卵母细胞体外成熟(In vitro maturation,IVM)的影响。以常规的牛卵母细胞体外24h成熟培养为对照,研究了CNP预处理牛卵母细胞6h,再进行成熟培养28h后(CNP预处理组)的牛卵母细... 详细信息

旨在研究C型钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)预处理对牛卵母细胞体外成熟(In vitro maturation,IVM)的影响。以常规的牛卵母细胞体外24h成熟培养为对照,研究了CNP预处理牛卵母细胞6h,再进行成熟培养28h后(CNP预处理组)的牛卵母细胞成熟情况。结果表明,CNP预处理组的牛卵母细胞成熟效果明显提高,其受精后的囊胚率和囊胚细胞数都明显高于对照组((51.55%±2.50%),(156.2±11.0)和(28.13%±3.80%),(116.3±19.0),P<0.05);卵母细胞中线粒体分布由未成熟时的周边分布变为成熟时的均匀分布;而CNP预处理6h的卵母细胞中线粒体多呈半周边分布,在随后的28h成熟培养中也变为均匀分布;CNP预处理组的成熟卵母细胞线粒体DNA的拷贝数为(510 078.4±28 906.0),明显高于对照组的((416 558.5±51 743.0),P<0.05)。综上表明:C型钠钛预处理可以有效改善牛卵母细胞的体外成熟质量。

关键词： C型钠肽牛卵母细胞体外成熟线粒体

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不同发育时期蒙古马睾丸组织中GH和IGF-Ⅰ及其受体的表达

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中国农业大学学报 2019年第1期24卷 52-60页

作者：苏少锋赵一萍李蓓白东义宋海燕赵若阳芒来内蒙古农业大学动物科学学院/内蒙古自治区马属动物遗传育种与繁殖重点实验室呼和浩特010018

为进一步揭示蒙古马发育与生殖调控的分子机制提供试验数据和理论依据,研究不同发育年龄蒙古马睾丸组织中生长激素(Growth hormone,GH)、生长激素受体(Growth hormone receptor,GHR)、胰岛素样生长因子Ⅰ(Insulin-like growth factorsⅠ... 详细信息

为进一步揭示蒙古马发育与生殖调控的分子机制提供试验数据和理论依据,研究不同发育年龄蒙古马睾丸组织中生长激素(Growth hormone,GH)、生长激素受体(Growth hormone receptor,GHR)、胰岛素样生长因子Ⅰ(Insulin-like growth factorsⅠ,IGF-Ⅰ)和胰岛素样生长因子Ⅰ受体(Insulin-like growth factorⅠreceptor,IGF-ⅠR)表达的发育性变化模式,以性成熟前期(5匹)、性成熟期(5匹)、成年期(5匹)的蒙古公马为研究对象,采集其睾丸组织,利用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)对不同发育年龄蒙古马睾丸组织中的GH、GHR、IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因的表达差异进行分析,采用免疫组织化学方法对性成熟前期和性成熟期蒙古马睾丸组织中的GH和IGF-Ⅰ蛋白质进行定位。RT-qPCR试验结果表明蒙古马睾丸组织中上述4个基因的表达量从性成熟前期到性成熟期显著增加,成年期下降。免疫组织化学结果表明GH和IGF-Ⅰ免疫标记定位于精母细胞、精原细胞、精子细胞和睾丸间质细胞,其在相关细胞中的信号从性成熟前期到性成熟期逐渐增强。研究发现睾丸组织中GH、GHR、IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR的mRNA协同表达对蒙古马睾丸发育和性成熟有重要调节作用,GH和IGF-Ⅰ蛋白可能通过自分泌/旁分泌的方式调节蒙古马的精子形成和睾丸间质细胞的功能。

关键词：蒙古马睾丸生长激素胰岛素样生长因子Ⅰ 受体基因表达蛋白定位

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马转录因子TBX3基因的密码子使用偏好性分析

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中国农业大学学报 2018年第7期23卷 53-65页

作者：苏少锋赵一萍白东义任秀娟赵若阳陶克涛宋海燕芒来内蒙古农业大学动物科学学院/内蒙古自治区马属动物遗传育种与繁殖重点实验室呼和浩特010018

为了解马TBX3基因的密码子使用特性,为选择该基因最佳的受体以及合适的异源表达系统提供依据,利用CHIPS、CUSP、Codon W等软件对NCBI公布的马TBX3基因(GenBank登录号为XM_014742147.1)的密码子使用情况进行分析,并将其与马的10个肢体生... 详细信息

为了解马TBX3基因的密码子使用特性,为选择该基因最佳的受体以及合适的异源表达系统提供依据,利用CHIPS、CUSP、Codon W等软件对NCBI公布的马TBX3基因(GenBank登录号为XM_014742147.1)的密码子使用情况进行分析,并将其与马的10个肢体生长和肢体形态形成相关基因、模式生物基因组以及其他物种TBX3基因进行比较。结果表明:马TBX3基因偏好使用G/C结尾的密码子,存在19种偏好使用的密码子(RSCU>1.20),其中:GCC、CTG、AGC和GTG偏好性较强(RSCU>2.00);10个马相关基因在20种偏好密码子中偏好性较强的只有CTG,17种密码子偏好G/C结尾;通过比较30种动物的TBX3基因密码子偏好性,发现其TBX3基因表达水平一般,并且密码子偏好G/C结尾;基于RSCU值和CDS序列的聚类分析发现,奇蹄目的家马与食肉目的家猫、北极熊聚在一起,可见系统进化树更接近这30个物种的真实系统分类;在密码子的使用频率上,小鼠更适合作为马TBX3基因的外源表达宿主。本研究可为TBX3基因在动物遗传育种改良中选择适合的宿主动物、筛选最佳的外源表达系统以及提高其表达水平提供依据。

关键词：马 TBX3基因密码子偏好性聚类分析

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马卵母细胞体外成熟的研究进展

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畜牧兽医学报 2020年第5期51卷 914-922页

作者：神英超任宏纳日嘎王希生芒来格日乐其木格内蒙古农业大学动物科学学院内蒙古自治区马属动物遗传育种与繁殖学重点实验室呼和浩特010018

随着全球马产业的发展,马发挥的经济价值越来越大。辅助生殖技术有利于发挥优良马匹的潜在价值。马卵母细胞体外成熟(IVM)是辅助生殖技术重要的组成部分,卵母细胞的获取是体外成熟的前提,切刮法能从离体卵巢中获得较多的马卵母细胞,而... 详细信息

随着全球马产业的发展,马发挥的经济价值越来越大。辅助生殖技术有利于发挥优良马匹的潜在价值。马卵母细胞体外成熟(IVM)是辅助生殖技术重要的组成部分,卵母细胞的获取是体外成熟的前提,切刮法能从离体卵巢中获得较多的马卵母细胞,而活体采卵技术(OPU)则能持续地获得卵母细胞,并能较好的保存马卵母细胞的发育能力。扩张型卵母细胞的成熟率高于紧密型卵母细胞,母马的年龄会影响到其卵母细胞的质量。马卵母细胞体外存放较长时间不会影响其发育能力,现在已有较为成熟的体系能使马卵母细胞在体外保存24 h以上而不影响其成熟率。在马卵母细胞成熟体系中常用的基础培养液是M199,添加胎牛血清(FBS)、促卵泡素(FSH)、促黄体生成素(LH)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)等物质能显著提高成熟率,常用培养环境为38~39℃,5%CO2饱和湿度下培养,培养时间30 h。成熟的卵母细胞有扩张的卵丘细胞和极体,且成熟的卵母细胞的细胞骨架及微管结构也会发生变化。本文针对马卵母细胞的采集和体外成熟培养的相关研究进行总结,重点阐述了不同采集技术的回收率以及影响马卵母细胞体外成熟率的关键因素,以期对今后马卵母细胞体外成熟的进一步研究及后期体外受精技术的发展提供借鉴与参考。

关键词：马卵母细胞收集体外成熟(IVM)

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苏尼特羊Lnc＿000588的组织表达及其在调控肌肉生长发育中互作分子的预测

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农业生物技术学报 2022年第12期30卷 2333-2343页

作者：宫文典王瑞雪王荣刘俊阳穆卿特日格勒吴子贤李蕴华刘佳森赵艳红内蒙古农业大学动物科学学院/内蒙古自治区动物遗传育种与繁殖重点实验室/农业农村部肉羊遗传育种重点实验室内蒙古自治区农牧业科学院畜牧研究所

苏尼特羊(Ovis aries)是我国优质的肉羊资源，也是我国北方地区主要羊肉来源之一。长链非编码RNA (long non-coding RNA, LncRNA)在绵羊肌肉发育中发挥重要作用。为预测Lnc＿000588在苏尼特羊骨骼肌发育中的调控网络，本研究对其在不同... 详细信息

苏尼特羊(Ovis aries)是我国优质的肉羊资源，也是我国北方地区主要羊肉来源之一。长链非编码RNA (long non-coding RNA, LncRNA)在绵羊肌肉发育中发挥重要作用。为预测Lnc＿000588在苏尼特羊骨骼肌发育中的调控网络，本研究对其在不同部位的组织表达量进行了实时荧光定量PCR分析及靶向miRNA-mRNA的生物信息学互作预测。同时，在小鼠(Mus musculus)成肌纤维细胞(C2C12)中检测了Lnc＿000588的表达量。Lnc＿000588在各组织中均有表达，且在背最长肌中的表达量极显著高于其他组织(P<0.01);Lnc＿000588在C2C12细胞中的表达量随着细胞分化时间的延长而增加，48 h以后极显著高于较早时的表达(P<0.01)。；Lnc＿000588可能通过miRNA参与调控肌肉的生长发育，其中的3个miRNA的靶基因富集于Ras信号通路(oas04014:Ras signaling pathway)、Rap1信号通路(oas04015:Rap1 signaling pathway)和AMPK信号通路(oas04152:AMPK signaling pathway)等66条通路。综上，Lnc＿000588在苏尼特羊肌肉组织的表达量极显著高于其他组织，推测其参与了C2C12细胞分化。本研究为探究LncRNA参与苏尼特羊肌肉组织的调控功能提供了科学依据。

关键词：长链非编码RNA(LncRNA) 苏尼特羊肌肉靶基因

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