检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2010年第6期42卷 57-61页

作者：靳木子马玉珍仓明王瑞任宇刘东军内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室内蒙古呼和浩特010021

牛胚胎干细胞的培养一直未能确定最适合的饲养层,寻找一种适合于其生长的饲养层对于成功培养牛胚胎干细胞有重要意义。本研究以胎鼠和牛胎儿为材料,分别以含10%FBS的高糖DMEM和含10%FBS的DMEMF12为培养液,分离并且获得2～5代的胎鼠成纤... 详细信息

牛胚胎干细胞的培养一直未能确定最适合的饲养层,寻找一种适合于其生长的饲养层对于成功培养牛胚胎干细胞有重要意义。本研究以胎鼠和牛胎儿为材料,分别以含10%FBS的高糖DMEM和含10%FBS的DMEMF12为培养液,分离并且获得2～5代的胎鼠成纤维细胞和5～6代的牛胎儿成纤维细胞。在上述两种成纤维细胞为饲养层的条件下,采用含10%胎牛血清、0.1 mmol/Lβ-巯基乙醇、0.1 mmol/L非必须氨基酸、100 U/mL青霉素、0.05 mg/mL链霉素、20 ng/mL LIF和10 ng/mL bFGF的DMEMF12培养液培养牛胚胎干细胞,来寻找一种适合于牛胚胎干细胞培养的饲养层。结果表明,在相同的培养体系条件下培养牛胚胎干细胞,以胎鼠成纤维细胞为饲养层的贴壁率显著高于以牛胎儿成纤维细胞为饲养层的贴壁率(P<0.05),以牛胎儿成纤维细胞为饲养层更利于胚胎滋养层的去除。

关键词：牛胎儿成纤维细胞饲养层养牛胚胎干细胞培养牛胚胎鼠成纤维细胞贴壁率胎鼠培养液 DMEM 细胞的培养胚胎滋养层条件胎牛血清巯基乙醇培养体系青霉素链霉素氨基酸生长

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牛4种组织中ZAR1基因表达及DNA甲基化修饰

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畜牧与兽医 2009年第10期41卷 40-42页

作者：辛鹏慧岳永莉李燕于海泉内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室内蒙古呼和浩特010021

ZAR1(Zygote Arrest 1)是母性效应基因,该基因在胚胎发育中起重要作用。本研究对成年牛组织中ZAR1基因表达情况及DNA甲基化状况进行了检测。利用RT-PCR检测成年牛心脏、肾脏、肝脏及睾丸中ZAR1基因mRNA的表达,结果ZAR1在睾丸中表达量较... 详细信息

ZAR1(Zygote Arrest 1)是母性效应基因,该基因在胚胎发育中起重要作用。本研究对成年牛组织中ZAR1基因表达情况及DNA甲基化状况进行了检测。利用RT-PCR检测成年牛心脏、肾脏、肝脏及睾丸中ZAR1基因mRNA的表达,结果ZAR1在睾丸中表达量较高,肾脏、心脏中较低,而在肝脏中不表达。选定该基因5′调控区中的11个CpG位点,利用亚硫酸盐测序PCR(bisulfite-sequencingPCR,BSP)检测其DNA甲基化状态,结果心脏中的甲基化程度明显高于其他3种组织。结果表明,DNA甲基化与牛ZAR1基因的组织特异性表达相关。

关键词：牛组织 DNA甲基化

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砷的生殖发育毒性及雌激素效应研究进展

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中国地方病学杂志 2010年第1期29卷 112-115页

作者：夏雅娟(综述) 旭日干刘东军(审校) 内蒙古大学实验动物研究中心哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室呼和浩特010021

砷作为一种环境毒物，对健康的损害是全身性的、多系统的。人暴露于无机砷，可引起膀胱癌、肺癌、皮肤癌、肝癌、肾癌以及许多其他非癌毒性效应，如皮肤损害、心脑血管疾病、糖尿病、神经系统效应及生殖毒性效应等。多年来．有关砷中毒... 详细信息

砷作为一种环境毒物，对健康的损害是全身性的、多系统的。人暴露于无机砷，可引起膀胱癌、肺癌、皮肤癌、肝癌、肾癌以及许多其他非癌毒性效应，如皮肤损害、心脑血管疾病、糖尿病、神经系统效应及生殖毒性效应等。多年来．有关砷中毒的发病机制提出了多种假说。然而，迄今为止，还没有一个被广泛认可、具有说服力并且符合砷的生物效应的机制学说。特别是砷的致癌作用还未复制出一个理想的砷致癌动物模型。

关键词：砷环境暴露生殖毒性内分泌干扰物雌激素效应

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使用荧光染色和流式细胞术检测山羊精子

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畜牧与兽医 2012年第8期44卷 4-7页

作者：胡润环张圣朝靳木子刘东军郭旭东内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室内蒙古呼和浩特010021

分别使用PI(碘化丙碇),FITC-PSA(异硫氰酸荧光素络合豌豆凝集素)和RH123(罗丹明)对山羊冷冻精子进行染色,再使用流式细胞仪进行检测、分析。试验发现,对于山羊的冷冻精子,PI染色阴性的为质膜完整的精子;FITC-PSA染色阴性的可能为顶体完... 详细信息

分别使用PI(碘化丙碇),FITC-PSA(异硫氰酸荧光素络合豌豆凝集素)和RH123(罗丹明)对山羊冷冻精子进行染色,再使用流式细胞仪进行检测、分析。试验发现,对于山羊的冷冻精子,PI染色阴性的为质膜完整的精子;FITC-PSA染色阴性的可能为顶体完整的精子,染色FITC-PSA+和FITC-PSA++,可能分别为顶体反应中的精子和顶体破损精子;RH123+应为线粒体无活性精子,有绿色荧光可能是因为染料残留在细胞膜上导致,而RH123++可能应为线粒体有活性的活精子。不同个体羊的精子对于低温敏感度不一样。不同个体羊之间的冻精顶体完整率、质膜完整率、线粒体有活性的精子比率之间差异显著,据此应选择合适的山羊个体进行精液冷冻。

关键词：流式细胞术荧光染色山羊精子

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大鼠骨髓间充质干细胞对雄性生殖系统的修复作用

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中华男科学杂志 2015年第8期21卷 692-697页

作者：周雪原马玉珍王晓华刘东军任宇冀小平内蒙古妇幼保健医院遗传优生科内蒙古呼和浩特010020 内蒙古大学哺乳动物繁殖生物学与生物技术重点实验室内蒙古呼和浩特010021 内蒙古自治区人民医院生殖中心内蒙古呼和浩特010017

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在无精子症大鼠模型中对睾丸内环境的修复能力。方法:将同种异体BMSCs移植入无精子症模型大鼠睾丸生精小管中,注射后30 d HE染色观察生精小管细胞组成和结构,免疫组化检测CD44、CD106和c-kit表达... 详细信息

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在无精子症大鼠模型中对睾丸内环境的修复能力。方法:将同种异体BMSCs移植入无精子症模型大鼠睾丸生精小管中,注射后30 d HE染色观察生精小管细胞组成和结构,免疫组化检测CD44、CD106和c-kit表达情况。结果:与正常大鼠相比,20 mg/kg白消安组中大鼠附睾中精子数量明显减少(P<0.01)。分离得到的BMSCs表达CD44和CD106,而不表达c-kit。BMSCs注射移植30 d后,HE染色显示移植组生精小管内形成新的细胞,部分细胞表达CD106,部分细胞表达生殖细胞表面标记c-kit。结论:BMSCs在移植组无精子症大鼠生精小管中能够分化为生殖细胞,对受损的不育大鼠生精小管进行修复。

关键词：不育大鼠生精小管骨髓间充质干细胞移植睾丸内环境

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培养条件对牛体外受精胚胎核仁及线粒体发育的影响

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动物学杂志 2003年第3期38卷 38-42页

作者：刘东军杨东山其木格旭日干内蒙古大学哺乳动物繁殖生物学与生物技术教育部重点实验室呼和浩特010021 内蒙古医学院电镜中心呼和浩特010059

牛体外受精胚胎分别在SOF +FCS、SOF +BSA和SOF +PVA三种培养系统内进行培养 ,然后分别取三个系统中发育到原核期、2细胞、4细胞、8细胞、桑椹胚和囊胚阶段的胚胎进行透射电镜的观察 ,了解培养系统中血清和BSA的添加与否对胚胎发育过程... 详细信息

牛体外受精胚胎分别在SOF +FCS、SOF +BSA和SOF +PVA三种培养系统内进行培养 ,然后分别取三个系统中发育到原核期、2细胞、4细胞、8细胞、桑椹胚和囊胚阶段的胚胎进行透射电镜的观察 ,了解培养系统中血清和BSA的添加与否对胚胎发育过程中核仁和线粒体发育的影响。观察结果表明 :与已报道的体内受精胚胎研究结果相比 ,体外受精胚胎核仁的发育比较迟缓 ,培养系统中血清及BSA的添加与否不会显著影响核仁的发育过程。在SOF +FCS和SOF +BSA培养系统中线粒体的发育明显滞后 ,表明培养系统中血清和BSA的添加可能是造成这种现象的重要原因。

关键词：牛体外受精胚胎发育核仁线粒体

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脂质体介导外源基因体外转染牛胎儿成纤维细胞条件的优化

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遗传 2002年第6期24卷 653-655页

作者：李扬吴凯峰郭旭东郭继彤旭日干内蒙古大学实验动物研究中心哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室呼和浩特010021

通过脂质体(FuGENE-6)介导,将真核表达载体pEGFP-C1成功导入体外培养的牛胎儿成纤维细胞,探讨影响外源基因转染效率的参数,如DNA和脂质体的用量、转染的细胞数量以及细胞暴露于DNA与脂质体复合物的时间长度。通过实验发现,绿色荧光蛋白(... 详细信息

通过脂质体(FuGENE-6)介导,将真核表达载体pEGFP-C1成功导入体外培养的牛胎儿成纤维细胞,探讨影响外源基因转染效率的参数,如DNA和脂质体的用量、转染的细胞数量以及细胞暴露于DNA与脂质体复合物的时间长度。通过实验发现,绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)基因的表达随DNA、脂质体量的增加而增加,延长细胞暴露时间反而使转染效率下降,转染细胞数适当才能得到较高的转化率。

关键词：脂质体介导外源基因体外转染牛胎儿成纤维细胞优化绿色荧光蛋白转染条件

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血管内皮生长因子对牛早期胚胎发育的影响

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内蒙古大学学报（自然科学版） 2006年第6期37卷 660-663页

作者：李海军仓明王立民刘东军旭日干内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室呼和浩特010021

为了探明血管内皮生长因子VEGF对牛体外受精胚胎早期发育的影响,本试验采用了成分明确的体外发育培养系统.通过在体外发育培养液中分别添加0、1、5、10 ng/mL的VEGF,对868枚胚胎的发育能力进行检测.研究结果显示:对照组与添加1 ng/mL、5... 详细信息

为了探明血管内皮生长因子VEGF对牛体外受精胚胎早期发育的影响,本试验采用了成分明确的体外发育培养系统.通过在体外发育培养液中分别添加0、1、5、10 ng/mL的VEGF,对868枚胚胎的发育能力进行检测.研究结果显示:对照组与添加1 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL VEGF的各实验组卵裂率分别为61.99%、75.69%、76.81%、68.92%;8-细胞期发育率分别为51.82%、61.21%、65.41%、63.40%;囊胚期发育率分别为27.74%、24.85%、23.90%、22.88%;囊胚孵化率分别为5.11%、4.85%、5.66%、3.27%.添加1、5、10 ng/mLVEGF与对照组比较,卵裂率、8-细胞期发育率有所增加,囊胚期发育率和囊胚孵化率表现下降趋势,但实验组与对照组间上述几项发育指标差异均不显著(P>0.05).

关键词：牛血管内皮生长因子胚胎发育

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免疫外科法分离牛卵巢颗粒细胞核

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内蒙古大学学报（自然科学版） 2009年第4期40卷 455-459页

作者：陈玉龙杨利军黄翔华李云霞赵宇航李煜内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室呼和浩特010021

实验旨在用制备的兔抗牛脾脏细胞免疫血清去除牛颗粒细胞膜,将得到的完整的细胞核分离纯化以应用于核移植胞质内注射.首先用牛脾脏细胞免疫健康成年兔,注射五周后将兔子放血,分离得到高效价的免疫血清,分装冷藏;然后,解冻适量血清,与牛... 详细信息

实验旨在用制备的兔抗牛脾脏细胞免疫血清去除牛颗粒细胞膜,将得到的完整的细胞核分离纯化以应用于核移植胞质内注射.首先用牛脾脏细胞免疫健康成年兔,注射五周后将兔子放血,分离得到高效价的免疫血清,分装冷藏;然后,解冻适量血清,与牛颗粒细胞反应,观察凝聚现象和破膜反应.结果表明,免疫学方法可以批量破除细胞膜,该法为体细胞核移植方法的改进提供了一条新的思路,值得为相关研究所借鉴.

关键词：免疫外科抗体制备细胞核分离

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人脐带间充质干细胞提取物对人肺癌细胞A549作用的研究

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中国细胞生物学学报 2016年第9期38卷 1110-1117页

作者：李晓琴张祥刘瑞花樊春彪乌云她娜李向南于海泉内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室呼和浩特010070

该研究探讨了人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)提取物对人肺腺癌细胞A549增殖和迁移能力的影响及其作用机制。利用超声破碎法制备h UC-MSCs提取物,并处理经链球菌溶血素O(streptolys... 详细信息

该研究探讨了人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)提取物对人肺腺癌细胞A549增殖和迁移能力的影响及其作用机制。利用超声破碎法制备h UC-MSCs提取物,并处理经链球菌溶血素O(streptolysin O,SLO)通透的A549细胞。采用MTT法、平板克隆形成实验检测h UC-MSCs提取物对A549细胞增殖的影响,Transwell实验检测细胞迁移能力,实时荧光定量PCR检测促凋亡基因胱冬肽酶-3(caspase-3)、胱冬肽酶-9(caspase-9)、抑癌基因RUNX3(runt-related transcription factor 3)和存活蛋白基因(survivin)的m RNA水平,亚硫酸氢盐测序检测RUNX3启动子区Cp G岛甲基化水平。结果发现,经h UC-MSCs提取物处理后,A549细胞的增殖、迁移能力均显著降低,caspase-3、caspase-9和RUNX3 m RNA水平显著升高,survivin m RNA的表达量显著降低,RUNX3启动子区Cp G岛显著去甲基化。该研究结果表明,h UC-MSCs提取物可能通过逆转RUNX3启动子区甲基化状态恢复其表达,并通过提高caspase-3、caspase-9表达及降低survivin的表达来抑制A549的增殖及迁移能力。

关键词：肺癌人脐带间充质干细胞提取物

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