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解放军医学院学报 2023年第8期44卷 890-896,902页

作者：袁瑞赵艳青张中奇王丽珍杨志甫内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院神经内科内蒙古包头014000 内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院神经外科内蒙古包头014000 内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院病理科内蒙古包头014000 内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院病理教研室内蒙古包头014000

背景帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种多发于中老年的神经退行性疾病,线粒体DNA(mtDNA)甲基化可能参与PD的发生和发展,目前相关研究极少。目的观察PD患者外周血mtDNA D环区的甲基化水平及其拷贝数的变化,分析D环区甲基化与mt... 详细信息

背景帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种多发于中老年的神经退行性疾病,线粒体DNA(mtDNA)甲基化可能参与PD的发生和发展,目前相关研究极少。目的观察PD患者外周血mtDNA D环区的甲基化水平及其拷贝数的变化,分析D环区甲基化与mtDNA拷贝数的相关性,探讨PD的发病机制。方法选取2020-2022年内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院PD患者(PD组)和健康体检者(对照组)各30例[(66.63±7.95)岁vs (63.50±4.96)岁],每组男性、女性各15例,采用质谱法(MassARRAY)检测外周血mtDNA D环区的甲基化水平,采用实时定量PCR法(qRT-PCR)检测mt DNA拷贝数。结果 PD组与对照组的外周血mtDNA中D环区总体甲基化率及各CpG位点甲基化率差异无统计学意义(P>0.05),早期PD患者与中晚期PD患者的外周血mtDNA中D环区总体甲基化率及各CpG位点甲基化率差异无统计学意义(P>0.05)。PD患者外周血mtDNA拷贝数低于对照组(P=0.02),中晚期PD患者外周血mtDNA拷贝数低于早期PD患者,差异有统计学意义(P=0.012)。mtDNA D环区第1、15个CpG位点(即人mtDNA序列第112、413位的核苷酸)甲基化率与mtDNA拷贝数呈负相关(r=-0.257,P=0.047;r=-0.517,P<0.001)。Logistic回归分析显示,mtDNA拷贝数越高,PD发生概率越低(OR=0.119,P=0.023)。结论 PD患者外周血mtDNA D环区甲基化水平未发生显著改变,但其外周血mt DNA拷贝数降低,且随着PD病程的进展呈动态变化,mtDNA拷贝数有望成为预测PD发生及病程进展的指标。D环区的甲基化可能会负向调控mtDNA的复制与转录。

关键词：帕金森病表观遗传修饰 mtDNA甲基化 D环区 mtDNA拷贝数

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帕金森病与DNA甲基化相关性研究进展

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解放军医学院学报 2023年第2期44卷 191-196页

作者：袁瑞王丽珍杨志甫内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院神经内科内蒙古自治区包头014000 内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院病理科内蒙古自治区包头014000 内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院病理教研室内蒙古自治区包头014000

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是第二常见的神经退行性疾病,其病程长、致残率高,且发病机制和病因目前不明确。DNA甲基化作为重要的表观遗传修饰方式之一,近些年成为PD等神经系统退行性疾病发病机制方面的研究热点。本文从全基因... 详细信息

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是第二常见的神经退行性疾病,其病程长、致残率高,且发病机制和病因目前不明确。DNA甲基化作为重要的表观遗传修饰方式之一,近些年成为PD等神经系统退行性疾病发病机制方面的研究热点。本文从全基因组甲基化调控、易感基因甲基化调控、线粒体DNA甲基化调控、环境因素导致DNA甲基化调控等方面对DNA甲基化调控与PD相关性的研究做一综述,以期为研究PD的发病机制、开发PD的新治疗靶点提供理论依据。

关键词：帕金森病 DNA甲基化表观遗传全基因组易感基因

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Hcy及叶酸、EGCG对HUVECs TM启动子甲基化状态的调节作用

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中国神经精神疾病杂志 2022年第7期48卷 398-404页

作者：王丽珍周雪颖韩沙如拉袁瑞杨志甫内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院病理科包头014000 内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院病理教研室山东大学齐鲁医院康复科内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院神经内科

目的探讨同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)启动子区甲基化水平的影响及其机制,明确叶酸(folic acid,FA)与表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对Hcy所引起的上述变化的干预作用及机制。方法体外培养HUVECs细胞株,分为对照组、不同浓度(50、100、200、500、1000μmol/L)Hcy组、100μmol/L Hcy+FA组以及100μmol/L Hcy+EGCG组。干预24 h后,采用流式细胞学技术检测各组HUVECs凋亡率;巢氏甲基化特异性PCR法检测TM启动子区甲基化水平;实时荧光定量PCR法检测TM mRNA表达水平;Western blotting法检测DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)蛋白表达水平。结果与对照组相比,各浓度Hcy组HUVECs凋亡率(10.04%、14.67%、16.02%、17.08%、20.78%vs.6.32%)、DNMT1蛋白表达水平(0.96±0.07、1.43±0.09、1.43±0.09、1.04±0.10、1.08±0.15 vs.0.56±0.05)与TM基因启动子区甲基化水平(0.68±0.09、2.90±0.25、1.43±0.03、1.30±0.05、0.91±0.11 vs.0.31±0.08)均升高(P<0.01),TM mRNA表达水平(0.24±0.04、0.09±0.02、0.05±0.01、0.04±0.02、0.04±0.02 vs.2.25±0.11)下降(P<0.01)。与100μmol/L Hcy组相比,100μmol/L Hcy+FA组、100μmol/L Hcy+EGCG组HUVECs凋亡率(11.84%、8.84%vs.14.67%)、DNMT1蛋白表达水平(0.78±0.14、0.59±0.08 vs.1.43±0.09)与TM基因启动子区甲基化水平(0.94±0.05、0.74±0.04 vs.1.43±0.06)均明显下降(P<0.01)、TM mRNA表达水平(0.57±0.08、1.94±0.41 vs.0.09±0.02)明显升高(P<0.01)。结论Hcy可通过上调HUVECs DNMT1蛋白表达水平,引起TM启动子区高甲基化,进而下调TM mRNA表达,诱导HUVECs凋亡增加。而FA和EGCG可以逆转Hcy所引起的上述改变。

关键词： DNA甲基化血栓调节蛋白同型半胱氨酸人脐静脉内皮细胞表没食子儿茶素-3-没食子酸酯叶酸

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基于网络药理学和分子对接探讨香青兰总黄酮对脑缺血/再灌注损伤的作用机制

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实用中医内科杂志 2025年

作者：华志鹏杨占君贾建新杨志甫内蒙古科技大学包头医学院研究生院内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院神经内科三病区赤峰学院人体解剖学教研室内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院人体解剖学教研室

目的：基于网络药理学方法挖掘香青兰总黄酮治疗脑缺血/再灌注损伤（CIRI）的中药活性成分及其作用的主要靶点，运用分子对接探究活性成分与靶蛋白的结合能力，以期寻找高特异性的靶向改善CIRI的小分子药物。方法：依据TCMSP、HERB数据... 详细信息

目的：基于网络药理学方法挖掘香青兰总黄酮治疗脑缺血/再灌注损伤（CIRI）的中药活性成分及其作用的主要靶点，运用分子对接探究活性成分与靶蛋白的结合能力，以期寻找高特异性的靶向改善CIRI的小分子药物。方法：依据TCMSP、HERB数据库及相关文献结合Pubchem、Swiss Institute of Bioinformatics筛选香青兰总黄酮主要活性成分的单体；GeneCards、OMIM及DisGeNET数据库筛选CIRI的相关靶点；运用jvenn筛选交集基因并绘制Venn图，STRING数据库绘制蛋白互作网络图；运用微生信平台及Metacape数据将交集基因进行GO、KEGG富集分析；将活性单体成分与核心基因进行分子对接。结果：香青兰总黄酮中筛选出活性单体成分20个，预测改善CIRI相关靶点2053个，GO及KEGG富集分析显示，香青兰总黄酮活性单体成分改善CIRI机制主要涉及对缺氧的反应、凋亡过程负向调控、炎症反应等生物过程，所涉及的通路包括氧化应激、细胞凋亡、PI3K-Akt等。结论：香青兰总黄酮改善CIRI具有多成分、多靶点的作用效果，其主要活性单体成分对不同靶点具有不同的结合能力，故提取高纯度的高特异性的活性单体成分可能提高香青兰总黄酮靶向改善CIRI的能力。

关键词：香青兰总黄酮脑缺血/再灌注损伤网络药理学分子对接机制

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细菌溶解产物对哮喘小鼠急性发作状态下肺功能及血清IgE的影响

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中国呼吸与危重监护杂志 2022年第12期21卷 873-877页

作者：吴其赫高扬蔡志平时静华内蒙古科技大学包头医学院第二附属医院呼吸与危重症医学科内蒙古包头014030 内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院内蒙古包头014030 内蒙古科技大学包头医学院生理教研室内蒙古包头014030

目的研究哮喘小鼠模型在急性发作状态时,细菌溶解产物OM-85 BV对其肺功能与血清IgE的影响,探讨OM-85 BV对哮喘小鼠急性发作的治疗效果和非急性发作期的应用价值。方法选取4~6周龄SPF级昆明小鼠共30只,随机分为3组,分别为空白对照组(A... 详细信息

目的研究哮喘小鼠模型在急性发作状态时,细菌溶解产物OM-85 BV对其肺功能与血清IgE的影响,探讨OM-85 BV对哮喘小鼠急性发作的治疗效果和非急性发作期的应用价值。方法选取4~6周龄SPF级昆明小鼠共30只,随机分为3组,分别为空白对照组(A组)、哮喘模型组(B组)和OM-85 BV干预组(C组),每组10只。在实验第1、8和15天分别给B、C组小鼠腹腔注射卵清蛋白–十二水硫酸铝钾使其致敏,第22天起,连续5 d每天雾化吸入5%卵清蛋白30 min激发制备哮喘模型;C组小鼠自第1天起,以OM-85 BV溶于生理盐水,每只小鼠连续灌胃10 d。A组小鼠的腹腔注射、灌胃用药及雾化吸入试剂均以生理盐水代替,B组小鼠灌胃用药以生理盐水代替。末次激发1 h后麻醉小鼠,对其行肺功能测定,眼球采血后处死,并离心血液,分离血清保存。取小鼠部分右肺行苏木精–伊红染色作病理学检查,后采用酶联免疫吸附法进行血清IgE测定。结果与A组相比,B组小鼠肺功能第0.15秒用力呼气容积(forced vital capacity in 0.15 second,FEV0.15)、FEV0.15与用力肺活量(forced vital capacity,FVC)的比值(FEV0.15/FVC)、呼气峰流速(peak expiratory flow,PEF)显著下降;C组肺功能表现较B组有所改善。B组病理表现为支气管上皮增生紊乱、塌陷,在支气管周围出现以淋巴细胞和嗜酸性细胞为主的炎症细胞浸润,气管腔内出现少量黏液和脱落的上皮细胞,气道管壁显著增厚,证明哮喘小鼠模型制备成功;C组气道病理表现较B组气道损伤程度更轻,小鼠气道壁厚度有所降低,炎症细胞也显著减少。B、C各组血清中的IgE浓度均上升,C组相比于B组IgE水平明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论外源性地给予哮喘小鼠OM-85 BV后,能有效降低其血清IgE的浓度,减少嗜酸性粒细胞浸润,改善FEV0.15/FVC、FEV0.15、PEF等肺功能指标,提示OM-85 BV可抑制支气管哮喘小鼠急性发作期气道炎症反应,改善肺生理功能,减轻急性发作症状,同时对于改善非急性发作期的哮喘控制也有一定的应用价值。

关键词：支气管哮喘细菌溶解产物肺功能血清IgE 急性发作

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多房棘球绦虫钙网蛋白的原核表达及初步鉴定

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中国病原生物学杂志 2022年第6期17卷 654-659页

作者：陈路娟咸思奇闫艳徐志坚程喆于桂霞王彦海赵利美内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院病原生物学教研室内蒙古包头014060 厦门大学生命科学学院寄生动物研究室

目的原核表达多房棘球绦虫钙网蛋白EmCRT,并对其免疫学功能进行初步鉴定。方法以多房棘球绦虫囊cDNA为模板,PCR扩增目的基因,克隆至pGEX-4T-2载体,构建重组质粒pGEX-4T-2-EmCRT;PCR、酶切鉴定及测序正确后,转化至表达菌BL21(DE3),并用... 详细信息

目的原核表达多房棘球绦虫钙网蛋白EmCRT,并对其免疫学功能进行初步鉴定。方法以多房棘球绦虫囊cDNA为模板,PCR扩增目的基因,克隆至pGEX-4T-2载体,构建重组质粒pGEX-4T-2-EmCRT;PCR、酶切鉴定及测序正确后,转化至表达菌BL21(DE3),并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达;运用10%SDS-PAGE电泳以及Western blot分析鉴定表达的重组蛋白rEmCRT。结果成功构建了重组质粒pGEX-4T-2-EmCRT,转化表达菌BL21后,经IPTG诱导表达及纯化,获得了纯度较高的可溶性重组蛋白rEmCRT,相对分子质量约为72 ku(含表达载体序列);通过Stains all染色,表明rEmCRT具有Ca^(2+)结合能力;免疫学特性鉴定表明rEmCRT具有较好的抗原特异性。结论成功表达多房棘球绦虫钙网蛋白EmCRT,具有免疫反应性,可为包虫病诊断及其疫苗研发提供理论基础。

关键词：多房棘球绦虫钙网蛋白表达和鉴定抗原性

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香青兰总黄酮通过介导自噬改善帕金森病模型小鼠的神经损伤的作用

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包头医学院学报 2023年第12期39卷 1-7页

作者：索耀文莫超然杨占君内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院内蒙古包头014040 德阳市中西医结合医院内蒙古科技大学包头医学院人体解剖学教研室

目的:研究中药香青兰总黄酮(TFD)改善帕金森病模型小鼠神经损伤的作用机制。方法:120只小鼠被随机分为正常对照组20只和观察组100只,观察组小鼠腹腔注射30 mg/(kg·d)MPTP以制备PD小鼠模型,对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水,连续7 ... 详细信息

目的:研究中药香青兰总黄酮(TFD)改善帕金森病模型小鼠神经损伤的作用机制。方法:120只小鼠被随机分为正常对照组20只和观察组100只,观察组小鼠腹腔注射30 mg/(kg·d)MPTP以制备PD小鼠模型,对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水,连续7 d后再将观察组小鼠随机分为5组,分别为模型组和TFD治疗组25、50、75、100 mg/(kg·d):。治疗组按照小鼠的体重灌胃给药,正常对照组和模型组小鼠给予等容量的生理盐水,连续1个月。通过行为学实验评价小鼠运动功能,通过免疫荧光组织化学技术检测小鼠中脑黑质区组织细胞酪氨酸羟化酶(TH)和选择性自噬接头蛋白(P62)阳性染色的细胞数,采用荧光定量PCR和Western-blot技术检测小鼠黑质区组织的微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)、P62、自噬效应蛋白(Beclin1)和TH mRNA和蛋白表达水平。结果:TFD治疗显著增加PD模型小鼠的悬挂运动评分、运动距离和下落潜伏期(P<0.05);TFD治疗增加PD模型小鼠黑质区组织表达P62和TH的阳性染色细胞数,TFD治疗增加PD模型小鼠黑质区组织表达PINK1、Parkin、P62、和TH蛋白的阳性染色细胞数(P<0.05)。结论:TFD可能通过上调LC3B、P62、Beclin1改善自噬,促进多巴胺能神经元受损线粒体及其他细胞器的清除,从而对MPTP诱导的PD模型小鼠产生神经保护作用。

关键词：香青兰总黄酮帕金森病自噬小鼠

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诊疗规范在病理住院医师规范化培训中的应用

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继续医学教育 2023年第5期37卷 137-140页

作者：张伟王丽珍居红格内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院病理科内蒙古包头014010 内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院病理学教研室内蒙古包头014040

住院医师规范化培训是毕业后医学教育的重要组成部分,国家对住培内容与标准仍在不断更新,在临床病理专业住培的实际工作中遇到诸如理论与实践脱节、师资力量不均衡等问题仍在逐步完善过程中。由国家卫生健康委员会及中华医学会等权威机... 详细信息

住院医师规范化培训是毕业后医学教育的重要组成部分,国家对住培内容与标准仍在不断更新,在临床病理专业住培的实际工作中遇到诸如理论与实践脱节、师资力量不均衡等问题仍在逐步完善过程中。由国家卫生健康委员会及中华医学会等权威机构发布的肿瘤诊疗规范与临床病理专业专家共识,在规范临床病理专业住院医师培训内容以及提高病理诊断水平方面具有重要作用。笔者采用已公开发布的最新版肿瘤诊疗规范与权威专家共识作为病理科住培内容,并改进多种教学方法进行以理论与实践相结合的能力提升为目标的教学培训,取得了较好的培训效果,从而丰富了住院医师住培的内容,提升了住培学员水平,并为临床病理专业住培提供了一种教学经验和思路。

关键词：临床病理住院医师规范化培训肿瘤诊疗规范专家共识继续医学教育

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JNK信号通路在细胞凋亡与自噬中作用的研究进展

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包头医学院学报 2022年第1期38卷 88-91页

作者：曹丽婷马宝慧内蒙古科技大学包头医学院内蒙古包头014040 内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院生理教研室

JNK信号通路在多种疾病的发生与发展中起着至关重要的作用,导致JNK信号通路激活的因素复杂多样,具体机制尚不明确。JNK信号通路参与细胞凋亡与自噬这两种密切相关的应激反应,但其之间的分子相互作用有待探究。本文主要综述了JNK信号通... 详细信息

JNK信号通路在多种疾病的发生与发展中起着至关重要的作用,导致JNK信号通路激活的因素复杂多样,具体机制尚不明确。JNK信号通路参与细胞凋亡与自噬这两种密切相关的应激反应,但其之间的分子相互作用有待探究。本文主要综述了JNK信号通路及其在细胞凋亡与自噬中的部分机制。

关键词： JNK信号通路细胞凋亡细胞自噬

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寄生虫钙网蛋白及其在虫体与宿主相互作用中的功能

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中国病原生物学杂志 2021年第6期16卷 731-733页

作者：赵利美诸欣平内蒙古科技大学包头医学院基础医学与法医学院病原生物学教研室内蒙古包头014060 首都医科大学基础医学院病原生物学系寄生虫学教研室

钙网蛋白(Calreticulin,CRT)是一种一级结构高度保守的Ca2+结合蛋白,存在于高等生物除红细胞外的所有细胞中,属于内质网(ER)滞留蛋白家族,同时也存在于细胞表面、胞质、胞核等非ER区,具有N、P、C三个结构和功能区。CRT具有多种生物学功... 详细信息

钙网蛋白(Calreticulin,CRT)是一种一级结构高度保守的Ca2+结合蛋白,存在于高等生物除红细胞外的所有细胞中,属于内质网(ER)滞留蛋白家族,同时也存在于细胞表面、胞质、胞核等非ER区,具有N、P、C三个结构和功能区。CRT具有多种生物学功能,比如参与钙离子储存与信号转导、细胞凋亡与粘附、降低T细胞和NK细胞穿孔素裂解活性等。某些物种包括寄生虫CRT还能够通过与补体组分C1q结合,抑制C1q依赖的补体经典途径活化。本文综述了CRT蛋白的结构组成以及近年来其在寄生虫感染与宿主免疫过程中所发挥的潜在功能,为寄生虫病的防控提供新策略和新思路。

关键词：寄生虫钙网蛋白宿主相互作用综述

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