检索结果-内蒙古大学图书馆

军事医学 2022年第8期46卷 569-575页

作者：张家宁付梦姣焦俊欧阳譞于永慧赵明亮张珊温博海熊小路孙岩松军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的研究宿主细胞自噬相关基因4B(ATG4B)对贝氏柯克斯体胞内生长繁殖的影响。方法用ATG4B特异小干扰RNA(siRNA)处理宿主细胞(THP-1和Vero),以非特异siRNA和无siRNA处理的细胞为对照;逆转录实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western印迹检测抑... 详细信息

目的研究宿主细胞自噬相关基因4B(ATG4B)对贝氏柯克斯体胞内生长繁殖的影响。方法用ATG4B特异小干扰RNA(siRNA)处理宿主细胞(THP-1和Vero),以非特异siRNA和无siRNA处理的细胞为对照;逆转录实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western印迹检测抑制效果;Western印迹分析细胞自噬标识蛋白(p62和LC3)的量变;qRT-PCR检测贝氏柯克斯体感染细胞中细菌增殖水平;共聚焦显微镜观察贝氏柯克斯体感染细胞中细菌寄生囊泡发育状况。结果与对照组比较,ATG4B特异siRNA处理组的细胞自噬标识蛋白p62和LC3-Ⅱ明显增多,细菌繁殖量更低,细菌寄生囊泡为散在分布小囊泡而不是单一成熟大囊泡。结论宿主细胞ATG4B表达下调可部分阻断自噬,自噬的部分阻断使贝氏柯克斯体寄生囊泡发育受阻,进而抑制贝氏柯克斯体胞内生长繁殖,为阐明宿主细胞的自噬促进贝氏柯克斯体繁殖的致病机制提供了新的依据。

关键词：贝氏柯克斯体自噬相关基因4B 小干扰RNA 胞内寄生感染细胞增殖

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动物鼠疫周期流行的生态位影响因素研究进展

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中国人兽共患病学报 2021年第6期37卷 556-562页

作者：秦婧靓杨瑞馥崔玉军病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071 安徽医科大学基础医学院合肥230032

鼠疫是由鼠疫耶尔森菌引发的烈性传染病,曾在历史上发生过3次大规模的流行,导致数亿人死亡。作为鼠疫自然疫源地最丰富的国家之一,中国拥有独特的鼠疫研究资源。在鼠疫自然疫源地中,动物间鼠疫呈现流行与静息周期性交替的特征。了解其... 详细信息

鼠疫是由鼠疫耶尔森菌引发的烈性传染病,曾在历史上发生过3次大规模的流行,导致数亿人死亡。作为鼠疫自然疫源地最丰富的国家之一,中国拥有独特的鼠疫研究资源。在鼠疫自然疫源地中,动物间鼠疫呈现流行与静息周期性交替的特征。了解其转换机制对鼠疫防控具有重要意义。现有研究表明,疫源地生态位变化是导致动物间流行周期性转换的可能触发因素。本文从宿主动物、蚤类媒介、土壤、鼠疫耶尔森菌及人类活动5个主要方面,梳理总结了鼠疫自然疫源地生态位变化与动物间鼠疫周期性流行的相关性研究进展,以期为鼠疫防控工作提供借鉴。

关键词：鼠疫鼠疫耶尔森菌疫源地生态位流行期静息期

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低温和短日照诱导白纹伊蚊滞育的代谢适应研究

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中国媒介生物学及控制杂志 2024年第2期35卷 145-149页

作者：王淼简藓懿刘庆梁国锐谢静文王明姜玉庭赵彤言郭晓霞安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全全国重点实验室北京100071

目的检测白纹伊蚊滞育期间成蚊及卵内总糖、糖原、总胆固醇、甘油三酯、山梨醇、海藻糖指标含量的变化,为白纹伊蚊的滞育生理学研究提供理论基础。方法在实验室条件下,通过设置短日照和低温诱导白纹伊蚊滞育,取产卵后雌蚊及滞育维持期蚊... 详细信息

目的检测白纹伊蚊滞育期间成蚊及卵内总糖、糖原、总胆固醇、甘油三酯、山梨醇、海藻糖指标含量的变化,为白纹伊蚊的滞育生理学研究提供理论基础。方法在实验室条件下,通过设置短日照和低温诱导白纹伊蚊滞育,取产卵后雌蚊及滞育维持期蚊卵,对总糖、糖原、海藻糖、甘油三酯、总胆固醇、山梨醇等生化物质进行提取,通过酶标仪检测其含量。运用GraphPad 8.0软件对实验数据进行非配对t检验统计分析。结果在滞育诱导条件下,白纹伊蚊成蚊总糖、糖原、海藻糖、山梨醇、甘油三酯、总胆固醇含量分别为(21.60±2.21)、(28.23±0.16)、(6.89±0.28)、(21.71±3.89)、(52.54±4.98)mg/g和(19.08±1.68)μmol/g,总糖、糖原、山梨醇较正常发育组高(均P<0.05)。蚊卵内总糖、糖原、海藻糖、总胆固醇生化指标含量分别为(103.94±8.06)、(8.61±1.54)、(1.35±0.07)mg/g和(13.58±0.28)μmol/g,均高于正常发育组(均P<0.01)。结论白纹伊蚊在滞育诱导条件下,卵内及成蚊体内生化指标发生不同程度的升高。总糖、糖原、海藻糖、总胆固醇等生化指标在蚊虫滞育生理中的作用在接下来的实验中可以进一步研究。

关键词：滞育白纹伊蚊滞育卵代谢

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创伤弧菌天然溶血素的制备及其活性研究

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昆明理工大学学报（自然科学版） 2023年第3期48卷 136-144页

作者：王亚茹凤梓涵李世青徐健皓袁兵王景林刘丽袁媛昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500 军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国人民解放军第96110部队医院疾病预防控制科宁夏银川750021

创伤弧菌溶血素(*** Hemolysin, VVH)是创伤弧菌重要的致病因子之一,但目前国内外重组表达的VVH多为包涵体形式.本研究建立了创伤弧菌培养上清中分泌型溶血素的纯化制备方法,并评价了胆固醇及雌二醇对天然VVH溶血活性的影响,为进一步深... 详细信息

创伤弧菌溶血素(*** Hemolysin, VVH)是创伤弧菌重要的致病因子之一,但目前国内外重组表达的VVH多为包涵体形式.本研究建立了创伤弧菌培养上清中分泌型溶血素的纯化制备方法,并评价了胆固醇及雌二醇对天然VVH溶血活性的影响,为进一步深入研究VVH蛋白的生物学功能及致病机制奠定了基础.研究采用硫酸铵沉淀法结合脱盐柱、阴离子层析及疏水相互作用纯化制备出天然VVH,用溶血试验验证了蛋白活性,评价了胆固醇、雌二醇对创伤弧菌YJ016培养上清以及天然VVH溶血活性的影响.结果显示:从创伤弧菌培养上清中纯化制备的天然VVH纯度较高,其具有良好的溶血活性(2μg/HU),100μg/mL的胆固醇或雌二醇均能有效抑制VVH的溶血活性.本研究成功建立了制备天然VVH的有效方法,为创伤弧菌重症感染的致病机制、防控与治疗研究奠定了基础,同时对其他致病弧菌溶血素的制备也具有借鉴意义.

关键词： VVH 天然蛋白纯化溶血活性胆固醇雌二醇

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金黄色葡萄球菌噬菌体vB_Sau_P68的基因组分析和裂解酶

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微生物学通报 2022年第8期49卷 3107-3119页

作者：于诗筠吕金晖文会淇张雅倩喻鑫婷米志强黄海龙吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 安徽医科大学解放军307临床学院北京100071

【背景】金黄色葡萄球菌是常见的人畜共患条件致病菌,随着多耐药菌株分离率的增长,研发与抗生素作用模式不同的抗菌剂迫在眉睫。【目的】分离高效且特异性强的金黄色葡萄球菌噬菌体,对其进行功能注释,并对其编码的裂解酶进行功能验证。... 详细信息

【背景】金黄色葡萄球菌是常见的人畜共患条件致病菌,随着多耐药菌株分离率的增长,研发与抗生素作用模式不同的抗菌剂迫在眉睫。【目的】分离高效且特异性强的金黄色葡萄球菌噬菌体,对其进行功能注释,并对其编码的裂解酶进行功能验证。【方法】通过对噬菌体全基因组序列进行分析找到裂解酶基因,利用原核表达系统对其编码的2个裂解酶蛋白进行克隆,用SDS-PAGE与蛋白免疫印迹法(Western blotting)鉴定目的蛋白是否表达,并采用单斑法验证其裂解活性。【结果】本研究的噬菌体为一株新的金黄色葡萄球菌噬菌体,命名为vB_Sau_P68,该基因组全长为139409 bp,GC含量为31.0%,编码220个开放阅读框(open reading frame,ORF),透射电镜观察具有正二十面体头部和收缩性尾部,形态学分类属于肌尾噬菌体。该噬菌体编码2个裂解酶基因,分别具有CHAP催化结构域与SH3_5结合结构域,SDS-PAGE与Western blotting表明Lys161能够表达且有裂解活性,Lys163则无法外源表达。对Lys161序列进行分析,该裂解酶无信号肽,无跨膜区域,以无规则卷曲为主。【结论】本研究对一株新的金黄色葡萄球菌噬菌体编码的2个裂解酶基因进行了克隆表达,结果提示CHAP催化结构域具有裂解活性,而SH3_5结合结构域则不表达。这一结果可为裂解酶的机制探索及应用提供理论基础。

关键词：全基因组分析 CHAP结构域 SH3_5结构域蛋白结构

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中性粒细胞在高毒力肺炎克雷伯菌临床分离株sgh10吸入感染致小鼠急性肺炎中的作用

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实验动物科学 2023年第2期40卷 61-67页

作者：秦佟童赵玥孙天奇张丽丽周冬生杨文慧吕蒙邱业峰军事科学院军事医学研究院实验动物中心北京100071 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 贵州医科大学基础医学院贵阳550025

目的探究中性粒细胞在高毒力肺炎克雷伯菌sgh10吸入感染后宿主防御中的关键作用。方法使用单克隆抗体anti-Ly6g消除小鼠体内肺组织中性粒细胞,建立中性粒细胞体内消除模型,通过流式细胞术检测和免疫荧光对消除效果进行评价。将动物分为... 详细信息

目的探究中性粒细胞在高毒力肺炎克雷伯菌sgh10吸入感染后宿主防御中的关键作用。方法使用单克隆抗体anti-Ly6g消除小鼠体内肺组织中性粒细胞,建立中性粒细胞体内消除模型,通过流式细胞术检测和免疫荧光对消除效果进行评价。将动物分为两组,一组注射单克隆抗体,一组注射同型对照抗体,分别在感染前、感染后24和48 h,检测小鼠生存率、肺细菌载量、肺组织病理、细胞因子以及中性粒细胞消除对其他免疫细胞的影响。结果流式细胞术和免疫荧光检测证实中性粒细胞在体内被消除。与对照组相比,中性粒细胞消除组小鼠死亡率增加、肺部细菌载量增加、肺部病理损伤加重、促炎细胞因子水平上升。此外,尽管中性粒细胞消除的小鼠对高毒力肺炎克雷伯菌呼吸道感染更敏感,并导致更高的死亡率,但中性粒细胞的改变并未对其他几种固有免疫细胞的水平造成显著影响。结论中性粒细胞在高毒力肺炎克雷伯菌sgh10吸入感染后宿主应答中发挥了重要作用。

关键词：高毒力肺炎克雷伯菌中性粒细胞吸入感染肺炎

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带荧光标签的产气荚膜梭菌ε毒素融合蛋白纯化及特性鉴定

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军事医学 2022年第10期46卷 744-748页

作者：郭子槊吕若梅黄静柳婷婷陈铭康琳王景林辛文文军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的表达纯化带eGFP和mScarlet标签的产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)ε毒素(ETX),鉴定ETX的毒素特性。方法在大肠杆菌中表达带eGFP和mScarlet标签的ETX融合蛋白,镍柱纯化蛋白;用MTS法测定带不同标签ETX的毒性;用共聚焦显微镜... 详细信息

目的表达纯化带eGFP和mScarlet标签的产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)ε毒素(ETX),鉴定ETX的毒素特性。方法在大肠杆菌中表达带eGFP和mScarlet标签的ETX融合蛋白,镍柱纯化蛋白;用MTS法测定带不同标签ETX的毒性;用共聚焦显微镜观察mScarlet-ETX与HaCaT细胞、HEKa细胞和不同物种红细胞的结合情况。结果成功表达带eGFP和mScarlet标签的ETX融合蛋白,纯化后得到纯度较高的eGFP-ETX和mScarlet-ETX融合蛋白。通过细胞毒实验,证实eGFP-ETX毒素与未加荧光标签的His-ETX相比毒性减弱,mScarlet-ETX毒素与His-ETX毒性基本一致,确定了eGFP-ETX和mScarlet-ETX的最佳荧光值。将mScarlet-ETX应用于HaCaT细胞和HEKa细胞,观察到mScarlet-ETX与HaCaT细胞、HEKa细胞结合,证实HaCaT细胞、HEKa细胞对ETX敏感。将mScarlet-ETX应用于人、小鼠和兔红细胞,mScarlet-ETX只与人红细胞结合。结论 mScarlet-ETX具有良好的毒素活性,可应用于对ETX毒性研究的多个方面。

关键词：产气荚膜梭菌 ε毒素 eGFP标签 mScarlet标签融合蛋白

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产气荚膜梭菌α毒素作用机制研究进展

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军事医学 2022年第9期46卷 711-714页

作者：郭子槊辛文文王景林军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

毒素是产气荚膜梭菌的主要毒力因子之一,具有磷脂酶C和鞘磷脂酶两种酶活性,能水解宿主细胞膜上的磷脂酰胆碱和鞘磷脂,导致多种人畜疾病。同时,该毒素也是一种潜在的生物战剂,对国家生物安全存在潜在威胁。该文主要对产气荚膜梭菌α毒素... 详细信息

毒素是产气荚膜梭菌的主要毒力因子之一,具有磷脂酶C和鞘磷脂酶两种酶活性,能水解宿主细胞膜上的磷脂酰胆碱和鞘磷脂,导致多种人畜疾病。同时,该毒素也是一种潜在的生物战剂,对国家生物安全存在潜在威胁。该文主要对产气荚膜梭菌α毒素的生物学结构与性质、细胞毒性作用的信号通路、激活血小板的分子机制以及治疗方面进行综述。

关键词：产气荚膜梭菌 α毒素细胞毒性作用溶血机制血小板

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大流量湿壁气旋式生物气溶胶采样器的设计及其性能评价

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中国消毒学杂志 2022年第6期39卷 401-406,409页

作者：郭建树程鹏博吕蒙秦佟童胡凌飞杨文慧周冬生孙岩松赵晓冬军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 军事科学院军事医学研究院实验动物中心

目的对自行设计的一种大流量湿壁气旋式生物气溶胶采样器进行性能标定。方法使用多分散的NaCl气溶胶评价物理采样效率,使用黏质沙雷菌及大肠埃希菌噬菌体PhiX174气溶胶评价生物采样效率,使用过氧化氢消毒剂进行清洗消毒效果评价,在实际... 详细信息

目的对自行设计的一种大流量湿壁气旋式生物气溶胶采样器进行性能标定。方法使用多分散的NaCl气溶胶评价物理采样效率,使用黏质沙雷菌及大肠埃希菌噬菌体PhiX174气溶胶评价生物采样效率,使用过氧化氢消毒剂进行清洗消毒效果评价,在实际环境中评价湿壁气旋气溶胶采样器的实际采样性能。结果湿壁气旋式生物气溶胶采样器的物理切割粒径为1μm。湿壁气旋式生物采样器对黏质沙雷菌气溶胶及大肠埃希菌噬菌体PhiX174的总生物采样效率分别为(25.47±12.94)%及(16.34±1.67)%,活性生物采样效率分别为(42.98±6.53)%和(24.24±6.68)%。消毒清洗功能能够清除采样器气旋室内(99.73±0.04)%的核酸及>99.99%的活菌。现场气溶胶采样结果显示湿壁气旋气溶胶采样器生物气溶胶检出限比AGI-30降低约40倍,计算得到的空气微生物浓度比BioStage高约7倍。结论该大流量湿壁气旋式生物气溶胶采样器能够在单位时间内采集更多的空气,有更高的富集比和较低的生物粒子检出限。

关键词：湿壁气旋式生物气溶胶采样器物理采样效率生物采样效率黏质沙雷菌噬菌体消毒

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四环素降低致倦库蚊共生Wolbachia密度方法的建立及效果评价

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寄生虫与医学昆虫学报 2023年第2期30卷 74-79页

作者：吕慧鑫姜玉庭郭晓霞倪孟邢丹赵彤言张灵玲福建农林大学生命科学学院福州350002 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071

胞内共生菌Wolbachia在昆虫生理生殖和天然免疫方面发挥着重要作用,蚊虫体内的Wolbachia密度与其抗病毒作用有很强的相关关系。本研究建立了一种利用四环素处理幼虫降低致倦库蚊共生Wolbachia密度的方法,并采用实时荧光定量PCR进行了效... 详细信息

胞内共生菌Wolbachia在昆虫生理生殖和天然免疫方面发挥着重要作用,蚊虫体内的Wolbachia密度与其抗病毒作用有很强的相关关系。本研究建立了一种利用四环素处理幼虫降低致倦库蚊共生Wolbachia密度的方法,并采用实时荧光定量PCR进行了效果评估。结果显示,使用0.05 mg/mL四环素处理致倦库蚊海口株和温州株,处理后Wolbachia密度中位数分别下降2729和3507倍;卵巢及其余组织的Wolbachia密度均下降至0.001以下,其中,卵巢中Wolbachia密度下降825629倍。可见,0.05 mg/mL四环素处理幼虫能显著降低蚊虫体内Wolbachia密度,为后续清除Wolbachia、探究Wolbachia对致倦库蚊感染和传播病毒的影响提供了技术基础。

关键词：致倦库蚊四环素沃尔巴克氏体

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