检索结果-内蒙古大学图书馆

环境科学研究 2018年第9期31卷 1636-1644页

作者：焦周光胡凌飞李娜张柯温占波李劲松军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 北京慧荣和科技有限公司北京101102

为评估大气PM_(2.5)及其不同组分对心肌细胞H9C2的毒性作用,探讨PM_(2.5)对心血管系统产生毒性作用的关键组分,将前期采集并制备的PM_(2.5)完全颗粒物、PM_(2.5)水溶性组分、PM_(2.5)脂溶性组分和PM_(2.5)单纯颗粒物以不同质量浓度对H9C... 详细信息

为评估大气PM_(2.5)及其不同组分对心肌细胞H9C2的毒性作用,探讨PM_(2.5)对心血管系统产生毒性作用的关键组分,将前期采集并制备的PM_(2.5)完全颗粒物、PM_(2.5)水溶性组分、PM_(2.5)脂溶性组分和PM_(2.5)单纯颗粒物以不同质量浓度对H9C2细胞染毒.用MTS法在染毒6、10、24、48、72 h后测定细胞活力;根据细胞活力测定结果,选用较低染毒浓度(10μg/m L),用相关试剂盒测定染毒24 h后胞内和上清液中LDH(乳酸脱氢酶)和SOD(超氧化物歧化酶)活力,ELISA及RT-q PCR法测定炎性因子IL-6和TNF-α表达量,AP位点计数法测定细胞DNA损伤情况.结果表明:颗粒物成分(PM_(2.5)完全颗粒物和PM_(2.5)单纯颗粒物)对H9C2细胞表现出强烈的生长抑制作用,50μg/m L及以上染毒浓度组在染毒时间≥24 h时细胞可能已经全部死亡,而可溶性成分(PM_(2.5)水溶性组分和PM_(2.5)脂溶性组分)对H9C2细胞生长表现为极弱或无生长抑制作用,仅400μg/m L的PM_(2.5)脂溶性组分始终对细胞生长表现出抑制作用;各组分样本都在一定程度上造成了H9C2细胞损伤,降低了胞内LDH和SOD活性;PM_(2.5)完全颗粒物和PM_(2.5)脂溶性组分在造成炎性损伤方面的作用较为明显.研究显示,颗粒物组分对H9C2细胞致死作用显著,相对而言,PM_(2.5)完全颗粒物表现出的毒性作用最强且最全面.

关键词： PM2.5 心肌细胞细胞活力炎性因子

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寨卡病毒可作为溶瘤病毒特异杀伤胶质瘤干细胞

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中国科学：生命科学 2018年第10期48卷 1126-1127页

作者：陈奇秦成峰军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室.北京100071

胶质母细胞瘤（glioblastoma）是一种恶性程度最高的原发性脑肿瘤．由于肿瘤生长快、侵袭性强，常规手术、放疗、化疗等治疗后复发率极高，预后差，绝大多数患者生存期中位数低于两年．胶质母细胞瘤的成因复杂，最新研究显示胶质瘤干细... 详细信息

胶质母细胞瘤（glioblastoma）是一种恶性程度最高的原发性脑肿瘤．由于肿瘤生长快、侵袭性强，常规手术、放疗、化疗等治疗后复发率极高，预后差，绝大多数患者生存期中位数低于两年．胶质母细胞瘤的成因复杂，最新研究显示胶质瘤干细胞（glioblastomastemcells，GSCsl可能在其中发挥了关键作用．胶质瘤干细胞是一群具备无限增殖、自我更新和多向分化等类干细胞潜能的细胞，不仅参与促进肿瘤血管生成，而且能够抵抗放化疗的杀瘤作用．以胶质瘤干细胞为靶标的新型疗法成为当前研究的热点之一．

关键词：干细胞胶质瘤病毒杀伤肿瘤血管生成肿瘤生长多向分化自我更新

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LAMP技术在感染乙脑病毒致倦库蚊混合样本检测中的应用

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寄生虫与医学昆虫学报 2019年第1期26卷 36-40页

作者：郭晓霞高剑李春晓邢丹董言德赵彤言军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京市虫媒病与自然疫源性疾病重点实验室北京100071

为建立媒介蚊虫自然感染种群样本携带病原体快速灵敏的检测技术,本研究将实验室经口感染乙脑病毒的致倦库蚊阳性样品和未感染乙脑病毒的阴性样品按一定比例混合成混合样本,分别采用环介导等温扩增技术(Loop Mediated Isothermal Amplifi... 详细信息

为建立媒介蚊虫自然感染种群样本携带病原体快速灵敏的检测技术,本研究将实验室经口感染乙脑病毒的致倦库蚊阳性样品和未感染乙脑病毒的阴性样品按一定比例混合成混合样本,分别采用环介导等温扩增技术(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)和实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time Fluorescent Quantitative PCR,qPCR)检测方法,对感染乙脑病毒的致倦库蚊混合样本进行检测。结果显示:当阳性样本在混合样本中所占比例为0.01%时,LAMP仍然可检测到病原体;定量PCR的最低检出比例是阳性样本在混合样本中所占0.14%以上。通过进一步优化反应体系各组分的浓度、反应时间和温度,建立了灵敏性高的LAMP扩增方法。

关键词： LAMP 乙脑病毒混合样本

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模拟失重环境对大肠杆菌K12表型异质性亚群菌株的影响

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微生物学通报 2018年第10期45卷 2112-2120页

作者：王言吉容丹王佳平王海立高建义韩延平杨瑞馥李勇枝中国航天员科研训练中心北京100094 军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

【背景】我国未来几年深空探索任务将呈"井喷式"发展,微生物对于航天活动的影响越来越引起关注,而国内外少有表型异质性亚群的研究。【目的】从表型异质性的角度探讨低剪切力模拟失重环境(Low-shearmodeledmicrogravity,LSMMG... 详细信息

【背景】我国未来几年深空探索任务将呈"井喷式"发展,微生物对于航天活动的影响越来越引起关注,而国内外少有表型异质性亚群的研究。【目的】从表型异质性的角度探讨低剪切力模拟失重环境(Low-shearmodeledmicrogravity,LSMMG)和低剪切力正常重力环境(Low-shearnormalgravity,LSNG)对大肠杆菌K12造成的影响。【方法】利用旋转细胞培养系统模拟失重环境对大肠杆菌K12进行连续传代培养,从单克隆形态、颜色以及菌体形态等方面挑选出表型异质性的亚群菌株,对不同菌株进行增殖速率、抗生素耐药性、生物被膜形成、环境压力抵抗力以及细胞毒性的测定,以此评估低剪切力和模拟失重环境对大肠杆菌K12的影响。【结果】利用旋转细胞培养系统连续传代培养,总共分离出4株形态不同的表型异质性亚群菌株,其中2株来自模拟失重组(M1,Ma),另外2株来自正常重力对照组(N1,Na);4株亚群与原始菌株(P)相比,在增殖速率、生物被膜形成、环境压力抵抗力和细胞毒性方面均有增强或减弱的明显变化,对于抗生素的耐药性无明显变化。【结论】低剪切力模拟失重环境以及存在低剪切力的正常重力环境均能引起大肠杆菌表型异质性变化,与原始菌株相比,表型异质性亚群菌株在分化上并没有统一的方向,但仍需警惕那些可能对人类造成危害的变化表型。

关键词：大肠杆菌模拟失重低剪切力表型异质性细胞毒性

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淡色库蚊中溴氰菊酯和生物丙烯菊酯抗性发展与击倒抗性基因频率之间的关系（英文）

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寄生虫与医学昆虫学报 2019年第3期26卷 151-157页

作者：宋锋林李春晓董言德赵彤言军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京市虫媒病与自然疫源性疾病重点实验室北京100071 大连海关辽宁大连116001

使用溴氰菊酯和生物丙烯菊酯对采自北京的淡色库蚊蚊株进行抗药性筛选,筛选时,4龄幼虫被置于LC 50浓度值的水体中饲养。经过7代的不间断筛选,蚊虫对溴氰菊酯和生物丙烯菊酯的抗性倍数分别上升了12.9倍和4.8倍,对应敏感株,抗性倍数分别为... 详细信息

使用溴氰菊酯和生物丙烯菊酯对采自北京的淡色库蚊蚊株进行抗药性筛选,筛选时,4龄幼虫被置于LC 50浓度值的水体中饲养。经过7代的不间断筛选,蚊虫对溴氰菊酯和生物丙烯菊酯的抗性倍数分别上升了12.9倍和4.8倍,对应敏感株,抗性倍数分别为217.8倍和41.6倍。PCR检测结果显示,kdr抗性基因的频率在逐代上升。F 7代时,溴氰菊酯筛选株和生物丙烯菊酯筛选株的kdr抗性基因频率已分别上升至98.96%和97.87%。结果表明,Phe1014的抗性纯合子频率和抗性杂合子频率均与LC 50值之间具有显著相关性。本文证明了高浓度的拟除虫菊酯杀虫剂筛选会使Phe1014突变频率快速的上升。

关键词：淡色库蚊溴氰菊酯生物丙烯菊酯杀虫剂抗药性击倒抗性

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淡色库蚊对家鸡和鸽子挥发性气味物质的反应（英文）

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寄生虫与医学昆虫学报 2019年第1期26卷 13-21页

作者：余静李春晓董言德赵彤言军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京市虫媒病与自然疫源性疾病重点实验室北京100071 南部战区疾病预防控制中心昆明650118

淡色库蚊具有明显的偏好性,对鸟类的偏好胜过哺乳类动物。本研究采用吸附剂和羽毛浸提方法分别收集气味物质,应用GC/MS方法分析家鸡Gallus gallus domesticus和鸽子Columba rupestris的挥发性气味物质组成。随后使用Y型嗅觉仪进行行为实... 详细信息

淡色库蚊具有明显的偏好性,对鸟类的偏好胜过哺乳类动物。本研究采用吸附剂和羽毛浸提方法分别收集气味物质,应用GC/MS方法分析家鸡Gallus gallus domesticus和鸽子Columba rupestris的挥发性气味物质组成。随后使用Y型嗅觉仪进行行为实验,对影响淡色库蚊搜寻宿主行为的化学物质进行鉴定。从家鸡气味物质中鉴定出69个化合物,其中脂肪醛、吲哚和对甲苯酚分别占全部分成的17. 4%、10. 77%和10. 67%。从鸽子气味和羽毛浸提液中鉴定出100个化合物。鸽子气味的主要成分是苯甲酸(2. 20%)、壬醛(2. 22%)和a-蒎烯(2. 23%),羽毛浸提液的主要成分是苯甲醛(3. 38%),胆甾烷醇(2. 38%)和肉豆蔻酸(2. 18%)。家鸡中鉴定出的两个羧基酸类(辛酸和肉豆蔻酸)以及2个芬芳类化合物(吲哚和对甲苯酚)对淡色库蚊具有引诱作用,而所有醛类则具有驱避作用。两种从鸽子中鉴定出的壬醛和苯甲醛,对蚊虫具有驱避作用。结果表明,宿主气味对蚊虫的驱避或引诱是一个复杂的机制主导,应该是多种气味物质的组合决定了宿主对蚊虫的作用类型。本研究为淡色库蚊引诱剂和驱避剂的开发提供技术基础。

关键词：蚊库蚊淡色库蚊气味嗅觉仪 GC/MS

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云南省边境地区卵形硬蜱中中华基因型伯氏疏螺旋体的检出和鉴定

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中国媒介生物学及控制杂志 2019年第5期30卷 519-523页

作者：段兴德何志海高子厚蒋宝贵龚正达张云邵宗体江佳富孙毅刘洪波姚明国王帆杜春红云南省地方病防治所医学动物昆虫防制科云南大理671000 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的对云南省耿马傣族佤族自治县(耿马县)采集的蜱进行伯氏疏螺旋体分子生物学检测,为当地莱姆病的调查提供参考。方法对2016年4月在云南省耿马县采集的游离蜱单只进行DNA提取后,采用巢式PCR扩增伯氏疏螺旋体5S^23S rRNA间隔区作为初筛... 详细信息

目的对云南省耿马傣族佤族自治县(耿马县)采集的蜱进行伯氏疏螺旋体分子生物学检测,为当地莱姆病的调查提供参考。方法对2016年4月在云南省耿马县采集的游离蜱单只进行DNA提取后,采用巢式PCR扩增伯氏疏螺旋体5S^23S rRNA间隔区作为初筛实验,阳性者进一步检测16S rRNA和FLA鞭毛蛋白基因确证。结果 3种蜱共94只,检出阳性14只,阳性率为14.89%。阳性蜱均为卵形硬蜱,不同性别间差异无统计学意义(χ~2=0.746,P=0.388)。锐跗硬蜱和金泽革蜱均未检出阳性。检出的伯氏疏螺旋体3个目的基因片段序列均与中华基因型伯氏疏螺旋体同源性达98%~99%,构建的系统发育树显示,与我国四川、安徽省检出的中华基因型伯氏疏螺旋体聚在一个分支上;与日本疏螺旋体接近,而阿弗西尼疏螺旋体、狭义伯氏疏螺旋体、法雷斯疏螺旋体等基因型聚在外围。结论耿马县采集的卵形硬蜱携带中华基因型伯氏疏螺旋体,其宿主和媒介的种类、分布及其对人的致病性等,值得进一步调查研究。

关键词：卵形硬蜱伯氏疏螺旋体中华基因型伯氏疏螺旋体

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检测4种血流感染病原体的靶向序列富集与测序相结合技术方法评价

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军事医学 2018年第1期42卷 53-56页

作者：李倩刘鹏张彦张超黄文华郑玉玲王洪权姜永强军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的应用Ampliseq技术,建立可同时检测金黄色葡萄球菌(***)、表皮葡萄球菌(***)、肺炎克雷伯菌(***)、单核细胞增生李斯特菌(***)4种常见血流感染病原体的目标片段特异性富集结合二代测序的方法,为准确、快速检测血流感染提供有效的依... 详细信息

目的应用Ampliseq技术,建立可同时检测金黄色葡萄球菌(***)、表皮葡萄球菌(***)、肺炎克雷伯菌(***)、单核细胞增生李斯特菌(***)4种常见血流感染病原体的目标片段特异性富集结合二代测序的方法,为准确、快速检测血流感染提供有效的依据。方法构建模拟临床样本评价该法的最低检出限(LOD),与实际掺入菌量比较,评价其灵敏度和特异性。结果与结论 Ampliseq法的灵敏度为95.38%,特异性为95.45%,Kappa值为0.839~1.000,LOD均可达到101数量级CFU/ml。该法可在15 h内在同一反应体系内快速检测4种常见血流感染病原体,灵敏度和特异性均较好。

关键词：血流感染 Ampliseq 二代测序目标序列富集

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田鼠型鼠疫菌血液存活能力的改变对豚鼠毒力的影响

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军事医学 2018年第7期42卷 545-549页

作者：纪宇欣周亚洲李璐杨瑞馥王效义军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌对小鼠强毒而对豚鼠低毒的原因。方法通过将布氏田鼠型鼠疫菌201菌株分别与豚鼠和小鼠抗凝血共孵育,然后用稀释平板计数法测定其在两种动物全血中的存活能力;通过与两种活性血清和两种56℃灭活补体的血... 详细信息

目的探讨布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌对小鼠强毒而对豚鼠低毒的原因。方法通过将布氏田鼠型鼠疫菌201菌株分别与豚鼠和小鼠抗凝血共孵育,然后用稀释平板计数法测定其在两种动物全血中的存活能力;通过与两种活性血清和两种56℃灭活补体的血清共孵育,分别测定了鼠疫菌在活性血清和补体失活血清中的存活能力。结果田鼠型鼠疫菌在小鼠全血、活性血清和灭活补体血清中的存活能力明显高于在豚鼠全血、活性血清和灭活补体血清中的存活能力。在小鼠和豚鼠血清中鼠疫菌存活能力明显高于在两种动物补体灭活血清中的存活能力。结论布氏田鼠型鼠疫菌在豚鼠血液中的存活能力下降导致了其对豚鼠低毒。在同一种动物血清中,灭活补体不仅不能使鼠疫菌血清存活能力提高反而使血清存活能力降低。

关键词：布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌小鼠豚鼠血清补体

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基于CRISPR/Cas9技术的miR-374a低表达细胞系的构建及鉴定

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蚌埠医学院学报 2019年第5期44卷 561-565页

作者：谢柱李崇慧方军陈佳唯李浩寇志华李军锋周育森军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所国家病原微生物生物安全重点实验室北京100071 蚌埠医学院生命科学学院安徽蚌埠233030

目的:运用CRISPR/Cas9技术构建miR-374a低表达细胞系。方法:设计针对miR-374a成熟体gRNA,合成DNA,插入pSpCas9(BB)-2A-Puro,将鉴定正确的载体转染入肺癌细胞系A549细胞,使用嘌呤霉素筛选转染的细胞;PCR方法扩增,序列测定分析细胞基因组... 详细信息

目的:运用CRISPR/Cas9技术构建miR-374a低表达细胞系。方法:设计针对miR-374a成熟体gRNA,合成DNA,插入pSpCas9(BB)-2A-Puro,将鉴定正确的载体转染入肺癌细胞系A549细胞,使用嘌呤霉素筛选转染的细胞;PCR方法扩增,序列测定分析细胞基因组中靶位点区域序列;定量PCR方法检测转染细胞中miR-374a及其靶基因TGFA的表达情况;细胞增殖实验检测miR-374a基因编辑对细胞生长情况的影响。结果:构建了靶向miR-374a成熟体基因序列的基因编辑载体,转染细胞经过加压筛选,序列分析结果提示靶向位点的基因发生了缺失或插入突变;定量PCR结果显示,转染基因编辑载体的细胞miR-374a表达水平较对照细胞明显下降(P<0.01),而靶基因TGFA表达则明显上升(P<0.05);细胞增殖实验显示miR-374a低表达的细胞增殖能力发生了明显改变(P<0.05~P<0.01)。结论:成功构建了miR-374a低表达细胞系,为后续研究该分子的功能提供了基础。

关键词：微小RNA-374a 转化生长因子 CRISPR/CAS9技术细胞增殖

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