检索结果-内蒙古大学图书馆

动物医学进展 2019年第5期40卷 13-17页

作者：黄静高洁夏苏苏金志颖康琳高姗杨浩辛文文赵宝华王景林军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 河北师范大学河北石家庄050024

应用Crispr/Cas9基因编辑技术敲除MDCK细胞中的Annexin A2基因,并验证其是否为ε毒素在MDCK细胞表面的受体。根据Crispr/Cas9靶点设计原则设计靶点,构建PALentiCRISPR v2重组质粒。借助Crispr/Cas9技术,将构建好的质粒转染至MDCK细胞中... 详细信息

应用Crispr/Cas9基因编辑技术敲除MDCK细胞中的Annexin A2基因,并验证其是否为ε毒素在MDCK细胞表面的受体。根据Crispr/Cas9靶点设计原则设计靶点,构建PALentiCRISPR v2重组质粒。借助Crispr/Cas9技术,将构建好的质粒转染至MDCK细胞中,用嘌呤霉素筛选敲除Annexin A2蛋白的MDCK细胞株,并通过测序和Western blot验证敲除效果。通过细胞毒性试验验证MDCK细胞膜表面的Annexin A2蛋白是否为ε毒素的受体蛋白。测序结果和Western blot结果表明,通过Crispr/Cas9技术成功敲除了MDCK细胞的Annexin A2基因,但细胞毒性试验结果表明,敲除Annexin A2基因并不能减弱ε毒素对MDCK细胞的毒性。结果表明,Annexin A2蛋白不是ε毒素在MDCK细胞表面的受体,研究结果为今后MDCK细胞其他蛋白的敲除提供了试验方法,构建的Annexin A2基因敲除的MDCK细胞也为Annexin A2蛋白引起的其他疾病的研究奠定了基础。

关键词： Crispr/Cas9技术基因敲除 Annexin A2 MDCK细胞系

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基于同源重组原理快速验证fim家族基因簇对鲍曼不动杆菌蹭动的影响

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安徽医科大学学报 2024年第1期59卷 8-14页

作者：孙千姿宁年智王慧安徽医科大学基础医学院合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的旨在利用含有抗生素耐药盒的线性PCR片段对鲍曼不动杆菌靶基因片段进行同源重组替换,实现基因的快速敲除及功能验证。方法以鲍曼不动杆菌Ab4294菌株为研究对象,PCR分别扩增fim基因簇(全长4980 bp)上游901 bp、下游1028 bp的序列作... 详细信息

目的旨在利用含有抗生素耐药盒的线性PCR片段对鲍曼不动杆菌靶基因片段进行同源重组替换,实现基因的快速敲除及功能验证。方法以鲍曼不动杆菌Ab4294菌株为研究对象,PCR分别扩增fim基因簇(全长4980 bp)上游901 bp、下游1028 bp的序列作为重组的同源臂;从pUC57质粒中扩增获得卡那霉素抗生素耐药盒(KanR);利用重叠延伸PCR技术将上述3个片段连接,并将连接片段转化至鲍曼不动杆菌Ab4294中,筛选获得基因缺失突变株,构建质粒回补株,对所得菌株进行表型鉴定,探究fim基因簇的功能。结果利用含有抗生素耐药盒的线性PCR片段同源替换的方法成功构建了fim基因簇缺失的鲍曼不动杆菌Ab4294突变菌株;缺失菌株与野生株相比生长速率无明显差异,蹭动运动能力明显下降,回补该基因簇后表型恢复。结论利用含有抗性耐药盒的线性PCR片段同源替换的方法成功敲除鲍曼不动杆菌Ab4294的fim家族基因簇,该基因簇编码产物参与鲍曼不动杆菌的蹭动运动。

关键词：鲍曼不动杆菌基因敲除 fim基因簇蹭动运动

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mRNA技术应对病毒传染病的研究进展

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微生物学通报 2022年第7期49卷 2849-2861页

作者：田颖张娜娜秦成峰李晓峰安徽医科大学基础医学院安徽合肥230000 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 清华大学医学院北京100084

信使核糖核酸(messenger RNA,mRNA)疫苗和抗体是近年来兴起的一种新型疫苗和抗体技术。与传统疫苗相比,mRNA疫苗具有安全性高、均衡免疫性好、研发周期短、生产成本低等优势,mRNA抗体比其他形式递送的抗体在体内发挥生物学效应的时间更... 详细信息

信使核糖核酸(messenger RNA,mRNA)疫苗和抗体是近年来兴起的一种新型疫苗和抗体技术。与传统疫苗相比,mRNA疫苗具有安全性高、均衡免疫性好、研发周期短、生产成本低等优势,mRNA抗体比其他形式递送的抗体在体内发挥生物学效应的时间更早也更持久。随着mRNA修饰与递送技术的快速发展,mRNA技术迅速走向成熟,在肿瘤治疗、病毒传染疾病的预防和治疗等方面展现出广阔的应用前景,特别是新型冠状病毒mRNA疫苗以创纪录的速度完成研发并成功应用,为未来mRNA技术的推广铺平了道路。本文综述了mRNA技术领域的重要突破,重点关注mRNA疫苗和抗体在应对病毒传染病中的重大进展,并展望了未来该技术在抗病毒感染领域的研究趋势。

关键词： mRNA技术 mRNA修饰递送系统传染病新型冠状病毒

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生物技术两用性研究安全风险与管控分析

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防化研究 2022年第2期1卷 12-20页

作者：王菁王景林军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

随着生命科学研究的迅速发展和生物高新技术的广泛应用，生物技术这把“双刃剑”引起了相当大的争议。如何有效防止生物技术的谬用，加强生物技术两用性研究的有效管控，保障国家生物安全，是目前世界各国共同面临的难题。文章简述了两... 详细信息

随着生命科学研究的迅速发展和生物高新技术的广泛应用，生物技术这把“双刃剑”引起了相当大的争议。如何有效防止生物技术的谬用，加强生物技术两用性研究的有效管控，保障国家生物安全，是目前世界各国共同面临的难题。文章简述了两用生物技术及其安全风险，分析了生物技术两用性研究类型及如何定性、定量评估两用生物技术的潜在风险，并回顾了生物技术两用性研究典型案例，以及我国对生物技术两用性研究的管控现状。最后结合上述分析，针对未来生物技术两用性研究的方向与重点，对生物技术谬用的风险管控提出了建议。

关键词：生物技术两用性研究谬用安全风险管控

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人皮肤微生物对蚊虫嗅觉行为影响的研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2022年第1期40卷 94-98页

作者：郭红霞赵腾吴家红李春晓贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071

蚊虫是疟疾、登革热、黄热病等传染病的传播媒介。蚊虫防制可以降低传染病的发生和流行。近年来研究发现,人皮肤微生物的代谢产物或产生的挥发性气味物质对蚊虫具有一定的吸引力,有望为蚊虫控制提供新方法。本文就人皮肤微生物的组成、... 详细信息

蚊虫是疟疾、登革热、黄热病等传染病的传播媒介。蚊虫防制可以降低传染病的发生和流行。近年来研究发现,人皮肤微生物的代谢产物或产生的挥发性气味物质对蚊虫具有一定的吸引力,有望为蚊虫控制提供新方法。本文就人皮肤微生物的组成、分布及其产生的挥发性气味物质对蚊虫嗅觉行为的影响进行综述,为新型蚊虫驱避剂和引诱剂的开发及应用提供参考。

关键词：蚊虫嗅觉行为人皮肤微生物挥发性物质引诱

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小鼠吸入性鼠疫病理学和毒力相关基因的体内转录

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解放军医学杂志 2006年第12期31卷 1169-1172页

作者：王虹刘海洪吴小红高亚兵王津郭兆彪彭瑞云宋亚军李才杨瑞馥军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 吉林大学再生医学科学研究所病理研究室军事医学科学院放射医学研究所

目的探讨吸入感染鼠疫的发生、发展过程及重要鼠疫菌致病相关基因的体内表达规律。方法采用滴鼻法建立小鼠吸入性鼠疫感染模型,并观察不同感染时间的组织病理学改变;采用免疫组化和逆转录-实时定量PCR方法检测感染小鼠组织中鼠疫菌5种... 详细信息

目的探讨吸入感染鼠疫的发生、发展过程及重要鼠疫菌致病相关基因的体内表达规律。方法采用滴鼻法建立小鼠吸入性鼠疫感染模型,并观察不同感染时间的组织病理学改变;采用免疫组化和逆转录-实时定量PCR方法检测感染小鼠组织中鼠疫菌5种毒力相关蛋白及其基因(caf1、lcrV、lcrG、pla、psaA)的表达和转录。结果鼠疫菌吸入后可诱导小鼠产生肺鼠疫型和非肺鼠疫型鼠疫。在小鼠体内感染状态下的鼠疫菌体表面能够检测到上述5种毒力相关蛋白的表达。其毒力基因的转录呈时相、组织差异性。结论在体内感染状态下,5种毒力相关蛋白均呈菌体表面可检测到的表达;各毒力相关基因在不同时间、不同组织中转录具有很大的差异性,这种差异性可能与其功能及宿主细胞的作用密切相关。

关键词：耶尔森菌,鼠疫组织病理学毒力相关基因

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云南横断山中部山区小型兽类感染巴贝虫的分子流行病学调查

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2021年第2期39卷 278-282页

作者：王帆别双双张云宋静段兴德熊孟韬王剑江佳富高子厚董毅杜春红大理大学公共卫生学院大理671000 云南省地方病防治所大理671000 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

为了解云南省横断山中部山区小型兽类感染巴贝虫的情况,分别于2013、2016和2020年在云南省横断山中部山区的剑川、云龙和洱源等3个县,采用笼日法和夹线法捕获小型兽类。通过形态学进行种类鉴定,并取脾组织,提取巴贝虫DNA,巢式PCR扩增巴... 详细信息

为了解云南省横断山中部山区小型兽类感染巴贝虫的情况,分别于2013、2016和2020年在云南省横断山中部山区的剑川、云龙和洱源等3个县,采用笼日法和夹线法捕获小型兽类。通过形态学进行种类鉴定,并取脾组织,提取巴贝虫DNA,巢式PCR扩增巴贝虫18S r RNA基因片段,目的条带经双向测序后,进行同源性分析,采用Neighbor-Joining法构建系统进化发育树。共捕获小型兽类498只,通过形态学鉴定,分属于4目8科14属27种,主要优势鼠种有齐氏姬鼠、中华姬鼠和大绒鼠,共有55份样品扩增出巴贝虫18S r RNA基因片段,总阳性率为11%(55/498)。剑川县、云龙县和洱源县的小型兽类巴贝虫阳性率分别为0.5%(1/212)、31.6%(54/171)和0(0/115)。巴贝虫阳性检出率比较高的小兽为:大耳姬鼠11/17,滇绒鼠5/10,印度长尾鼩鼱2/4。BLAST比对结果表明,本次检出的样品序列具有高度同源性,相似性达99.6%,属于田鼠巴贝虫的大津(Otsu)型。云南省横断山中部山区小型兽类存在巴贝虫感染,属于田鼠巴贝虫的Otsu型。

关键词：云南横断山区小型兽类巴贝虫调查

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HIV-1整合位点分布机制及检测的研究进展

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中华医院感染学杂志 2024年第11期34卷 1755-1760页

作者：孙孜璇韩婧婉李敬云李韩平王晓林温红玲李林山东大学齐鲁医学院公共卫生学院微生物检验学系新发突发传染病防控与生物安全重点实验室山东济南250012 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071

艾滋病是由人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)引起的慢性传染性疾病,对人类的生命健康构成了严重威胁.整合是HIV-1病毒复制生命周期的关键环节,不同于新冠病毒等非整合型病毒,HIV-1自身基因编码的逆转录酶和整合酶,可帮助病毒整合入宿主细胞... 详细信息

艾滋病是由人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)引起的慢性传染性疾病,对人类的生命健康构成了严重威胁.整合是HIV-1病毒复制生命周期的关键环节,不同于新冠病毒等非整合型病毒,HIV-1自身基因编码的逆转录酶和整合酶,可帮助病毒整合入宿主细胞基因组,同步复制,确保病毒的遗传信息长期存在于宿主细胞中.然而HIV-1整合位点的选择不是随机的,而是与染色体结构和宿主基因功能等紧密相关.本文综述了有关HIV-1整合位点的检测方法、分布特征及影响其选择的因素等方面的研究进展,旨在为艾滋病的精准防控、治疗,乃至最终治愈提供信息参考.

关键词：人类免疫缺陷病毒1型整合位点分布特征影响因素

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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染小鼠致肺炎的模型构建与特征分析

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中国人兽共患病学报 2023年第5期39卷 447-454页

作者：赵玥周冬生杨文慧秦佟童吕蒙翟丽娜张丽丽商正玲贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵阳550025 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 军事科学院军事医学研究院实验动物中心北京100071

目的建立耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的BALB/c小鼠吸入感染肺炎恢复模型,并评价模型的病原学、病理学、免疫学特征。方法将MRSA以气溶胶肺递送途径感染小鼠,在7 d内观察小鼠状态与死... 详细信息

目的建立耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的BALB/c小鼠吸入感染肺炎恢复模型,并评价模型的病原学、病理学、免疫学特征。方法将MRSA以气溶胶肺递送途径感染小鼠,在7 d内观察小鼠状态与死亡情况。选择亚致死剂量构建小鼠肺炎恢复模型,检测感染后小鼠的血液及心、肝、脾、肺、肾组织中的细菌载量及病理变化,并对血清与肺泡灌洗液中的细胞因子及肺组织的重要细胞群的变化趋势进行检测。结果致死剂量感染后小鼠的死亡时间集中在48 h内。亚致死剂量感染小鼠后,肺部的病变以48~72 h最为严重,其余组织器官无严重病变;多种细胞因子在12~48 h浓度升高至峰值,在96 h下降至接近感染前水平;在感染后48 h内的肺中,中性粒细胞、树突状细胞、炎性单核细胞、间质巨噬细胞和内皮细胞的比例明显增加,而T细胞、B细胞、肺泡巨噬细胞和上皮细胞的比例则下降。大部分细胞群的比例在96 h恢复至接近感染前水平。结论本研究成功构建了小鼠吸入MRSA感染肺炎恢复模型,并通过多种指标的检测明确0~96 h是小鼠感染后的应答关键期。该小鼠模型可用于深入开展MRSA感染的发病机理、免疫调控、治疗评价等研究,具有良好的应用价值。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌小鼠模型肺部感染气溶胶

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甲型副伤寒沙门菌外膜BtuB蛋白的原核表达、纯化及其免疫保护性

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中国生物制品学杂志 2012年第6期25卷 672-675页

作者：王斌李娜董晓宇梁昊宇陈翠萍陈薇曾明军事医学科学院微生物与流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的原核表达、纯化甲型副伤寒沙门菌外膜BtuB蛋白,并检测其免疫原性和免疫保护性。方法采用PCR从甲型副伤寒沙门菌(CMCC 50973)基因组DNA中扩增btuB基因,插入原核表达载体pET-30a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋... 详细信息

目的原核表达、纯化甲型副伤寒沙门菌外膜BtuB蛋白,并检测其免疫原性和免疫保护性。方法采用PCR从甲型副伤寒沙门菌(CMCC 50973)基因组DNA中扩增btuB基因,插入原核表达载体pET-30a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经分子筛和亲和层析纯化后,免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠血清中抗BtuB IgG抗体效价,并用最小绝对致死剂量活菌攻毒,计算小鼠的保护率。结果重组原核表达质粒pET-30a-btuB经双酶切和测序证实构建正确;重组蛋白的相对分子质量约为67 000,表达量约为菌体总蛋白的25%,主要以包涵体形式表达;纯化的重组蛋白纯度大于90%,可与鼠抗His-Tag单抗特异性结合;纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠可获得高效价的抗BtuB IgG抗体,且可获得60%的保护率。结论成功原核表达并纯化了甲型副伤寒沙门菌外膜BtuB蛋白,重组蛋白免疫原性良好,并能够为小鼠提供一定的保护作用。

关键词：甲型副伤寒沙门菌细菌外膜蛋白质类 BtuB蛋白原核细胞基因表达免疫原性免疫保护性

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