检索结果-内蒙古大学图书馆

中国动物传染病学报 2023年

作者：方盈盈郭彦孙世惠韩雪莲李敏赵光宇崔玉军王原安徽医科大学基础医学院军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

本研究利用鼠肝炎病毒3株（MHV-3）感染免疫缺陷小鼠建立肝损伤模型，通过组织病理学实验，免疫组化，血清丙氨酸氨基转移酶浓度检测，血清炎症因子检测等，对被感染小鼠肝组织进行病理学分析以及血清学的分析，比较野生型小鼠和MBL缺... 详细信息

本研究利用鼠肝炎病毒3株（MHV-3）感染免疫缺陷小鼠建立肝损伤模型，通过组织病理学实验，免疫组化，血清丙氨酸氨基转移酶浓度检测，血清炎症因子检测等，对被感染小鼠肝组织进行病理学分析以及血清学的分析，比较野生型小鼠和MBL缺陷型小鼠中肝损伤的差异，研究MBL途径在鼠冠状病毒感染导致的小鼠肝损伤中作用。结果表明MHV-3攻毒后，与野生型小鼠比较，MBL缺陷小鼠遭受更加严重的肝损伤和更加严重的炎性反应。这些提示MBL在鼠冠状病毒感染中具有缓解小鼠肝损伤的作用，这可能给暴发性肝衰竭提供一些新的治疗思路。

关键词：鼠冠状病毒甘露糖结合凝集素暴发性肝衰竭补体

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持续低氧条件下大鼠肠道微生物变化及其与心肌损伤的关联研究

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微生物学报 2023年第8期63卷 3054-3067页

作者：王珍周亚洲王立坤黄自然常宇骁侯凤仪张欢凌慧孙一凡谭亚芳杨瑞馥毕玉晶潘志远赣南医学院公共卫生与健康管理学院江西赣州341000 军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 安徽医科大学基础医学院安徽合肥230000

【目的】研究持续性常压低氧对大鼠肠道微生物的影响,并分析其与低氧性心肌肥厚的关联性。【方法】雌性无特异性病原体(specific-pathogen-free,SPF)级SD(Sprague-Dawley)大鼠,按随机数字表法分为2组:常氧组和低氧组。实验开始后,低氧... 详细信息

【目的】研究持续性常压低氧对大鼠肠道微生物的影响,并分析其与低氧性心肌肥厚的关联性。【方法】雌性无特异性病原体(specific-pathogen-free,SPF)级SD(Sprague-Dawley)大鼠,按随机数字表法分为2组:常氧组和低氧组。实验开始后,低氧组大鼠置于低氧舱中,氧气浓度设定为10%,持续暴露30 d,常氧组大鼠正常条件饲养。每天记录大鼠体重,并于低氧前(0 d)和低氧后(30 d)分别收集粪便进行16S rRNA基因扩增子测序,测定肠道微生物组的变化。实验结束后进行血常规、血生化和器官指数分析;采用实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测右心室组织中4种分子标志物心房利钠肽基因(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠肽基因(brain natriuretic peptide,BNP)、心肌肌球蛋白重链6基因(myosin heavy chain 6,Myh6)、心肌肌球蛋白重链7基因(myosin heavy chain 7,Myh7)的mRNA表达;并在肠道微生物组和各类指标之间进行Spearman关联分析。【结果】低氧大鼠体重降低,红细胞数量、红细胞比容、血红蛋白浓度均明显升高。低氧大鼠右心指数显著升高,血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性增高,BNP和Myh7的表达显著升高而Myh6的表达降低,表明低氧导致大鼠心肌损伤并发生了右心室病理性肥厚。低氧改变了大鼠肠道微生物的α多样性和β多样性;线性判别分析效应大小(linear discriminant analysis effect size,LEfSe)分析结果提示常氧组大鼠的普雷沃氏菌科(Prevotellaceae)和毛螺菌科(Lachnospiraceae)相对丰度较高,而低氧组大鼠的乳酸杆菌科(Lactobacilliaceae)和乳杆菌属(Lactobacillus)相对丰度较高。LDH与摩根菌属(Monoglobus)和帕鲁迪杆菌(Papillibacter)正相关,与苜蓿科(Defluviitaleaceae_UCG-011)负相关;CK与菌株RF39正相关;Myh6的表达量与Prevotellaceae_NK3B31_group和幽门螺杆菌(Helicobacter)正相关;BNP的表达量与瘤胃球菌科(Ruminococcaceae_UCG_009)正相关。【结论】持续性低氧显著改变了大鼠肠道微生物的丰富度、均匀度和菌群结构;该变化与心肌损伤指标之间存在显著相关性,表明肠道菌群可能在低氧性心肌肥厚中发挥重要作用。

关键词：常压低氧病理性心肌肥厚器官指数肠道微生物脑钠肽肌球蛋白重链

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人巴贝虫病的临床特征及诊疗研究进展

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中国血吸虫病防治杂志 2021年第2期33卷 218-224页

作者：王帆江佳富田杰杜春红云南省地方病防治所大理671000 大理大学公共卫生学院中国人民解放军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室

巴贝虫病是一种重要的蜱传人兽共患血液寄生虫病,在全球分布较广泛。对人致病的巴贝虫主要有田鼠巴贝虫、分歧巴贝虫、猎户巴贝虫和邓肯巴贝虫等12种。巴贝虫感染人体后主要临床症状为发热、头痛、寒战、肌痛和疲劳等,严重时可致死。巴... 详细信息

巴贝虫病是一种重要的蜱传人兽共患血液寄生虫病,在全球分布较广泛。对人致病的巴贝虫主要有田鼠巴贝虫、分歧巴贝虫、猎户巴贝虫和邓肯巴贝虫等12种。巴贝虫感染人体后主要临床症状为发热、头痛、寒战、肌痛和疲劳等,严重时可致死。巴贝虫病主要通过实验室检测结合临床特征、流行病学调查进行诊断,诊断技术主要包括血涂片镜检、血清学检测和分子生物学检测。目前,巴贝虫病常采用阿奇霉素与阿托伐醌联用或克林霉素与奎宁联用进行治疗。本文对不同巴贝虫虫种感染人体后的临床特征、巴贝虫病诊断技术和诊断标准,以及国内外常用治疗方法进行综述。

关键词：巴贝虫病临床特征诊断治疗

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胶体金免疫层析技术快速定量检测相思子毒素

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军事医学科学院院刊 2009年第6期33卷 546-549页

作者：聂聪王静孙肖红高姗于源华康琳王景林军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国检验检疫科学研究院卫生检疫研究所北京100123

目的:建立胶体金免疫层析技术快速定量检测相思子毒素。方法:利用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析技术,建立相思子毒素的快速检测方法,评价其特异性和敏感性,并拟合检测曲线进行定量检测。在面粉、饼干、奶粉、苹果汁、牛奶、果冻等食... 详细信息

目的:建立胶体金免疫层析技术快速定量检测相思子毒素。方法:利用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析技术,建立相思子毒素的快速检测方法,评价其特异性和敏感性,并拟合检测曲线进行定量检测。在面粉、饼干、奶粉、苹果汁、牛奶、果冻等食品样品中添加相思子毒素模拟污染样品,评价该方法对固体、半固体、液体等食品样品的检测能力。结果与结论:该法可在15min内完成定性和半定量检测,灵敏度为30ng/ml,线性范围30～600ng/ml、回收率80%～110%,变异系数小于15%。所建立的检测相思子毒素的胶体金免疫层析方法,能快速、灵敏、特异、准确地检测样品中的相思子毒素,并可实现定量,适用于现场快速检测。

关键词：相思子毒素胶体金免疫层析定量检测

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产气荚膜梭菌α毒素突变体构建及其卵黄抗体制备

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军事医学 2013年第9期37卷 671-675页

作者：李箐辛文文康琳高姗王景林安徽医科大学研究生院安徽230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的制备特异性的产气荚膜梭菌α毒素(Clostridium perfringens alpha-toxin,CPA)卵黄抗体(yolk immunoglobulin,IgY)。方法利用定点突变技术,将CPA第56位天冬氨酸和第68位组氨酸分别突变为丝氨酸,构建了重组表达载体pTIG-mCPAD56S和pTIG-mCPAH68S,将其转化入*** Origami中进行诱导表达。用亲和层析的方法对突变体蛋白进行纯化并对其活性及抗原性进行检测,将获得的突变体蛋白分别免疫健康母鸡,收集鸡蛋;经水稀释法纯化卵黄中IgY;用酶联免疫吸附试验检测IgY效价;通过筛选保护剂而选择最佳的IgY冻干条件。结果与结论pTIG-mCPA在Origami表达菌株中得到高效表达,经验证,mCPAD56S和mCPAH68S均完全失去生物学活性同时保留抗原性;纯化卵黄后得到较高纯度的特异性IgY,其效价可达到1∶200 000;经过IgY冻干条件的筛选,最终选择不添加保护剂大量冻干IgY作为抗体的储备。该研究为研制基于IgY抗体的检测方法奠定了基础。

关键词：产气荚膜梭菌α毒素突变 IgY 重组表达

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布鲁杆菌M16株pgm基因突变活菌苗株的构建和鉴定

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中国地方病学杂志 2011年第3期30卷 289-293页

作者：李鹏朱嘉婧罗德炎王希良空军航空医学研究所附属医院检验科北京100089 吉林大学中日联谊医院耳鼻咽喉头颈外科军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室免疫室

目的构建自杀性质粒载体,对布鲁杆菌M16株pgm基因进行精确突变,并对得到的pgm基因突变活菌苗株进行鉴定.方法在puc19质粒载体上构建正向筛选标记--蔗糖敏感基因和反向筛选标记--卡那霉素抗性基因融合序列;用卡那霉素抗性基因融合序列... 详细信息

目的构建自杀性质粒载体,对布鲁杆菌M16株pgm基因进行精确突变,并对得到的pgm基因突变活菌苗株进行鉴定.方法在puc19质粒载体上构建正向筛选标记--蔗糖敏感基因和反向筛选标记--卡那霉素抗性基因融合序列;用卡那霉素抗性基因融合序列对布鲁杆菌pgm基因进行修饰（插入突变）,完成pucS1.6K自杀性质粒载体的构建;通过电转化获得布鲁杆菌M16株pgm基因突变菌株;应用PCR方法对pgm基因突变菌株进行鉴定.结果鉴定结果显示,布鲁杆菌M16株pgm基因在卡那霉素抗性基因插入后失活,突变后的布鲁杆菌M16株pgm基因DNA片段长度约为3525 bp,与预期的相符,布鲁杆菌M16株pgm基因突变菌株构建成功.结论构建的自杀性质粒载体能成功对布鲁杆菌进行精确毒力基因突变,为获得布鲁杆菌突变株提供了一个有效的技术平台,也为新型减毒活疫苗的研制奠定了基础.

关键词：布鲁杆菌菌苗 pgm基因基因融合诱变插入

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基于致倦库蚊转录组的溴氰菊酯抗性相关基因分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2020年第4期38卷 453-463页

作者：沈瑞鑫王意婷李春晓吴家红赵彤言陈艳贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵阳550000 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071

目的通过对致倦库蚊溴氰菊酯敏感株和抗性株进行转录组分析,筛选可能与抗性相关的差异表达基因。方法对致倦库蚊实验室敏感株(SS株)、海南株(HN株)和溴氰菊酯药筛抗性株(RR株) 3个不同抗性水平的株系进行生物测定,分别构建3个株系的cDN... 详细信息

目的通过对致倦库蚊溴氰菊酯敏感株和抗性株进行转录组分析,筛选可能与抗性相关的差异表达基因。方法对致倦库蚊实验室敏感株(SS株)、海南株(HN株)和溴氰菊酯药筛抗性株(RR株) 3个不同抗性水平的株系进行生物测定,分别构建3个株系的cDNA文库,提取RNA,进行转录组测序。基于FPKM值进行差异性分析,对差异基因进行GO和KEGG功能注释与富集分析。筛选出致倦库蚊不同株系中表达量有显著性差异的基因,并采用实时定量PCR验证。结果生物测定结果显示,与致倦库蚊SS株相比,HN株和RR株的抗性倍数分别达到了4 828倍和197 241倍,为高等抗性水平。RNA-seq测序结果显示,致倦库蚊SS株、HN株和RR株转录组共注释基因转录本197 079个。GO富集分析结果显示,在结合、催化活性、细胞过程、代谢过程、单一生物过程、细胞、细胞连接、细胞器中基因富集数量较多。KEGG富集分析结果显示,在富集度最高的前20个条目中,RR株主要富集于剪接体、核糖体等通路,HN株则主要富集于剪切体、RNA转运、hedgehog信号通路、细胞周期、核苷酸切除修复、DNA复制等方向。基于FPKM值的差异性分析结果显示,致倦库蚊RR株和HN株较SS株均上调的有5 357个,均下调的有10 978个。与溴氰菊酯抗性相关基因的靶向性筛选结果显示,与SS株相比,RR株和HN株注释的细胞色素P450基因、谷胱甘肽转移酶基因、气味结合蛋白基因、气味受体基因、视觉基因、核糖体蛋白基因和碳酸酐酶基因转录本中,均上调的分别为100、17、13、4、16、191和1个,均下调的分别为253、48、43、4、15、504和9个。从上调基因中挑选的12个基因(2个细胞色素P450基因、1个谷胱甘肽转移酶基因、1个视觉基因、1个核糖体蛋白基因、1个碳酸酐酶基因、1个核酸内切酶基因、2个气味结合蛋白基因、3个气味受体基因)进行实时定量PCR验证结果显示,在RR株和HN株中,这12个基因较SS株均显著上调,其中RR株较SS株上调1.62~80.26倍,HN株较SS株上调2.01~189.48倍。相关性分析结果显示,12个目标基因的RNA-seq结果与实时定量PCR结果在HN株和RR株中均呈正相关(r=0.802、0.710)。证明这12个目标基因的实时定量PCR结果与转录组测序结果趋势一致。结论基于高通量测序结果和定量PCR验证分析,致倦库蚊中的某些细胞色素P450基因、谷胱甘肽S转移酶基因、视觉基因、嗅觉蛋白基因可能在其对溴氰菊酯的抗性中起一定作用。

关键词：致倦库蚊溴氰菊酯抗性基因转录组测序实时定量PCR

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携带氨基糖苷类耐药基因aacC2的质粒pA1137耐药机制研究

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军事医学 2017年第12期41卷 973-977页

作者：占喆冯娇殷喆赵禹宗蒋晓圆罗文博曾利军沈杨高波周冬生安徽医科大学合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的对携带氨基糖苷类耐药基因aacC2的阴沟肠杆菌质粒pA1137全序进行分析并研究其耐药机制。方法 PCR实验检测相关菌株耐药基因,接合转移实验验证质粒pA1137是否具备可转移特性,抗生素敏感实验检测相关菌株耐药谱,采用全基因组测序分析... 详细信息

目的对携带氨基糖苷类耐药基因aacC2的阴沟肠杆菌质粒pA1137全序进行分析并研究其耐药机制。方法 PCR实验检测相关菌株耐药基因,接合转移实验验证质粒pA1137是否具备可转移特性,抗生素敏感实验检测相关菌株耐药谱,采用全基因组测序分析质粒基因环境、移动元件,并研究其耐药机制。结果阴沟肠杆菌A1137同时携带碳青霉烯酶耐药基因blaIMP-8和氨基糖苷类耐药基因aacC2和aacA4。blaIMP-8和aac A4基因均位于染色体上,而aacC2基因则位于pA1137质粒上。pA1137是大小为68.97 kb的IncFⅡ型质粒,GenBank登录号为MF190369。该质粒含有典型的多复制子结构且有完整的接合转移区,可通过接合转移方式进入受体菌EC600并表达相应的耐药谱。结论 IncFⅡ型质粒pA1137有一个外源插入区,是首次发现基于Tn5403转座子的aacC2-tmrB相关耐药区,可稳定遗传并介导阴沟肠杆菌A1137对氨基糖苷类抗生素耐药。

关键词：阴沟肠杆菌 pA1137 aacC2

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我国3个主要民族HIV感染者基因组中人内源性逆转录病毒K113和K115基因分布研究

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军事医学 2018年第11期42卷 845-849页

作者：裴志超韩婧婉王晓林李天一李林李敬云安徽医科大学合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的分析人内源性逆转录病毒(HERV) K113和K115基因在我国不同民族HIV感染者基因组中的分布,为进一步研究其与HIV感染和复制的关系奠定基础。方法收集我国广西、云南、四川和河南HIV感染者的血液样本,提取基因组DNA,通过PCR扩增及核酸... 详细信息

目的分析人内源性逆转录病毒(HERV) K113和K115基因在我国不同民族HIV感染者基因组中的分布,为进一步研究其与HIV感染和复制的关系奠定基础。方法收集我国广西、云南、四川和河南HIV感染者的血液样本,提取基因组DNA,通过PCR扩增及核酸电泳检测,判断样本基因组中HERV-K113、HERV-K115基因插入状况。采用2检验和Fisher精确检验分析HERV-K113、HERV-K115基因在不同民族、地区HIV感染者中的分布是否存在差异。结果收集我国汉、彝、壮族3个民族共504份HIV感染者血液样本(汉族238例,彝族175例,壮族91例),基因组中HERV-K113和HERV-K115插入率分别为30. 0%和4. 8%;不同民族HERV-K113插入率分别为39. 6%(壮族)、30. 3%(汉族)和24. 6%(彝族); HERV-K115插入率分别为7. 7%(壮族)、5. 0%(汉族)和2. 9%(彝族)。HERV-K113在不同民族的分布存在显著性差异(P <0. 05)。结论首次阐明HERV-K113、HERV-K115基因在我国不同民族HIV感染者基因组中的频率分布,为进一步研究其与HIV感染及疾病进程的相关性奠定了基础。

关键词：人内源性逆转录病毒 HIV-1 HERV-K113 HERV-K115 民族

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肠出血性大肠杆菌z5150毒素基因在细胞黏附过程中的作用

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军事医学 2017年第12期41卷 978-982页

作者：何志利谭琳琳王建新李崭陈芳红李涛王慧安徽医科大学合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的通过体内过度表达验证z5150基因毒性,利用Red重组系统构建肠出血性大肠杆菌(EHEC)z5150基因缺失突变株并探究其致病力。方法在菌体内过度表达z5150基因,测定细菌生长曲线验证其毒性。应用PCR技术扩增出含有卡那霉素抗性基因的目的... 详细信息

目的通过体内过度表达验证z5150基因毒性,利用Red重组系统构建肠出血性大肠杆菌(EHEC)z5150基因缺失突变株并探究其致病力。方法在菌体内过度表达z5150基因,测定细菌生长曲线验证其毒性。应用PCR技术扩增出含有卡那霉素抗性基因的目的基因上下游同源臂片段,电转入含有p KD46质粒的EHEC中,在阿拉伯糖诱导下使打靶片段重组到基因组。卡那霉素基因的两端包含FRT位点,p FLP2质粒可介导FLP位点专一性重组去除抗性标记。经DNA测序验证目的基因缺失后,通过菌株感染HT29细胞和BALB/c雌鼠检测缺失株细胞黏附能力和毒力的改变。结果与结论成功构建EHEC△z5150缺失突变株。z5150的缺失不影响细菌的正常生长,但过度表达后明显抑制细菌生长,发挥毒素效应。与野生株相比,EHEC△z5150缺失突变株对肠上皮细胞黏附能力明显增强;小鼠致死率增高,提示其致病力增强。该研究为EHEC基因功能研究提供了基因敲除技术,证明了Rel E家族z5150参与EHEC细胞黏附,并增强菌株毒力,为进一步研究EHEC致病机制奠定了基础。

关键词：肠出血性大肠杆菌 Red重组系统毒素 Rel E 致病性

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