检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学与毒理学杂志 2019年第6期33卷 462-463页

作者：曾菊程肖蕊周文霞张永祥军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所北京100850 国家抗毒药物和毒理学重点实验室北京100850

目的神经炎症参是阿尔茨海默病(AD)的发生发展的重要因素之一,可抑制海马突触可塑性。六味地黄苷糖(LW-AFC)是从经典名方六味地黄汤中提取活性组分所构成的活性成分群,包括糖苷、寡糖和多糖。本研究主要考察LW-AFC对神经炎症所致突触可... 详细信息

目的神经炎症参是阿尔茨海默病(AD)的发生发展的重要因素之一,可抑制海马突触可塑性。六味地黄苷糖(LW-AFC)是从经典名方六味地黄汤中提取活性组分所构成的活性成分群,包括糖苷、寡糖和多糖。本研究主要考察LW-AFC对神经炎症所致突触可塑性损伤的作用,并对其所含单体免疫活性进行初步评价。方法灌胃给予雄性BALB/c小鼠LW-AFC两周,在体记录海马-齿状回长时程增强变化,检测外周血淋巴细胞亚群、外周血和脑组织中炎性细胞因子,免疫荧光染色观察小胶质细胞激活水平,单次腹腔注射脂多糖(LPS)(250μg·kg-1,ip)建立炎症模型,观察LW-AFC的作用。在体外,对LW-AFC中部分单体对正常BV-2细胞及LPS刺激BV-2所致TNF-α分泌水平进行检测。结果腹腔注射LPS 4 h后小鼠的兴奋性突触后电位降低,即长时程增强减弱,预防给予LW-AFC可显著改善炎症所导致小鼠神经突触可塑性的降低,可显著减轻海马中小胶质细胞及星形胶质细胞的激活水平。LW-AFC可显著上调炎症模型小鼠脾脏淋巴细胞中CD19+细胞的比例,降低CD3+CD4+细胞比例;同时,LW-AFC能明显升高外周血中CD3+CD4+和CD3+CD25+细胞比例。LW-AFC可显著降低海马中IL-1β,IL-6,G-CSF和MCP-1,皮质中MCP-1以及外周血中TNF-α,IL-6,IL-12和INF-γ炎性细胞因子的水平。体外研究表明,LW-AFC中单体芍药苷、马钱苷酸、莫诺苷和水苏糖对正常BV-2细胞TNF-α的分泌有降低作用,而100μmol·L-1的芍药苷、马钱苷酸、莫诺苷以及10μmol·L-1的甘露三糖和CA-4-3对LPS刺激的BV-2细胞TNF-α的分泌有促进作用。结论LW-AFC对LPS所致突触可塑性损伤的改善作用以及对胶质细胞过度激活的减轻与LW-AFC对中枢神经和外周免疫系统炎症因子的降低及调节外周B细胞、辅助T细胞和调节性T细胞比例相关。

关键词： LW-AFC LTP 小胶质细胞细胞因子淋巴细胞亚群

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基于高内涵分析方法建立稳定共表达人δ阿片受体与PKAcat-EGFP的CHO细胞模型

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中国药理学与毒理学杂志 2018年第3期32卷 176-182页

作者：李玉蕾颜慧王莉莉宫泽辉苏瑞斌军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所北京100850 军事科学院抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850 军事科学院神经精神药理学北京市重点实验室北京100850

目的利用高内涵分析(HCA)方法用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞建立人δ阿片受体(h DOR)及增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的蛋白激酶A催化亚基(PKAcat)融合蛋白(PKAcat-EGFP)稳定共表达的细胞模型,为体外高通量筛选作用于h DOR的药物及药物分子... 详细信息

目的利用高内涵分析(HCA)方法用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞建立人δ阿片受体(h DOR)及增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的蛋白激酶A催化亚基(PKAcat)融合蛋白(PKAcat-EGFP)稳定共表达的细胞模型,为体外高通量筛选作用于h DOR的药物及药物分子机制研究奠定基础。方法通过脂质体介导法将潮霉素B抗性的h DOR重组质粒(pc DNA3.1/Hygro(+)-h DOR)转染入已稳定表达PKAcat-EGFP的CHO细胞中,随后用含潮霉素B的选择性培养基培养细胞,有限稀释法挑取耐药单克隆,PKA重分布实验筛选阳性克隆,利用Z′因子对建立的细胞模型的可靠性进行评价,利用PKA重分布实验与LANCE c AMP 384试剂盒检测受体功能。结果 PKA重分布实验与LANCE c AMP 384试剂盒检测结果表明,CHO-PKAcatEGFP/h DOR-3号克隆反应性良好,特异性DOR激动剂SNC80 100 nmol·L-1作用时的Z′平均值为0.615,表明该细胞模型可靠,经多次传代后,细胞中的h DOR在40代以内能保持稳定表达,SNC80可浓度依赖性地激活细胞上的h DOR,其EC50值为(6.192±1.225)×10-9mol·L-1。结论成功建立了h DOR与PKAcatEGFP融合蛋白稳定共表达的细胞模型CHO-PKAcat-EGFP/h DOR-3。

关键词：受体阿片 δ 蛋白激酶A 高内涵分析信号转导 CHO细胞

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激动NMDA受体甘氨酸位点可改善皮质酮致海马长时程增强损伤

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中国药理学与毒理学杂志 2019年第10期 869-870页

作者：王陈黄晏周文霞张永祥军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所军事科学院军事医学研究院抗毒药物与毒理学国家重点实验室

目的研究N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体甘氨酸位点与皮质酮（CORT）致长时程增强（LTP）损伤之间的关系。方法应用雄性BALB/c小鼠,采用皮下注射CORT50 mg·kg;造模,60 min后进行电生理实验。NMDA受体甘氨酸位点激动剂300 nmol/只D... 详细信息

目的研究N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体甘氨酸位点与皮质酮（CORT）致长时程增强（LTP）损伤之间的关系。方法应用雄性BALB/c小鼠,采用皮下注射CORT50 mg·kg;造模,60 min后进行电生理实验。NMDA受体甘氨酸位点激动剂300 nmol/只D-丝氨酸,300 nmol/只L-丝氨酸,100 nmol/只甘氨酸（侧脑室注射）和100 mg·kg;D-氨基酸氧化酶抑制剂MPC（腹腔注射）在CORT前30 min注射,1 mg·kg;NMDA受体甘氨酸位点拮抗剂L-701,324在D-丝氨酸和MPC前30 min腹腔注射。结果与正常小鼠相比,CORT可显著损伤小鼠海马的LTP（P<0.01）,D-丝氨酸、L-丝氨酸、甘氨酸和MPC均可显著改善CORT引起的海马LTP损伤（P<0.01）,甘氨酸位点拮抗剂L-701,324可阻断D-丝氨酸和MPC对CORT致海马LTP损伤的改善作用（P<0.01）。结论激动NMDA受体甘氨酸位点可改善CORT致海马LTP损伤,提示CORT引起的LTP损伤可能与NMDA受体功能下降相关。

关键词：皮质酮长时程增强丝氨酸

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大株红景天胶囊提高小鼠耐常压缺氧能力和抗疲劳作用

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中国药理学与毒理学杂志 2021年第6期35卷 420-426页

作者：王艺博王峰肖智勇周文霞张永祥广东药科大学中药学院广东广州510006 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的探讨大株红景天胶囊(LPRC)提高小鼠耐常压缺氧能力和抗疲劳作用及其机制。方法6~8周龄雄性BALB/c小鼠按体重和自主活动性均衡随机分为对照组和LPRC 0.35,0.70和1.40 g·kg^(-1)组,每组10只。ig给药7 d后,采用低氧混合气体缺氧... 详细信息

目的探讨大株红景天胶囊(LPRC)提高小鼠耐常压缺氧能力和抗疲劳作用及其机制。方法6~8周龄雄性BALB/c小鼠按体重和自主活动性均衡随机分为对照组和LPRC 0.35,0.70和1.40 g·kg^(-1)组,每组10只。ig给药7 d后,采用低氧混合气体缺氧和密闭缺氧模型观察LPRC耐缺氧作用;采用负重游泳实验和转棒实验观察LPRC抗疲劳作用;采用比色法检测小鼠非负重游泳力竭后肝和腓肠肌组织中糖原含量,以及血清中疲劳相关指标[尿素氮(BUN)和乳酸(LA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)活性]和氧化应激相关指标[超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量]。结果与对照组相比,LPRC 0.70和1.40 g·kg^(-1)组小鼠低氧混合气体缺氧存活时间和负重游泳时间显著延长(P<0.05,P<0.01);LPRC 1.40 g·kg^(-1)组小鼠转棒实验学习期和测试期在棒时间显著延长(P<0.05,P<0.01);LPRC组小鼠非负重游泳力竭后肝和腓肠肌组织中糖原含量及血清中LDH,SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05,P<0.01),而血清中BUN,LA和MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论LPRC可显著提高小鼠耐常压缺氧和抗疲劳能力,其作用可能与增加糖原储备、清除代谢物堆积及增强抗氧化活性有关。

关键词：大株红景天缺氧疲劳氧化应激

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α2B-肾上腺素能受体与增强型绿色荧光蛋白标记的活化T细胞核因子2共表达稳转细胞株的构建

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中国药理学与毒理学杂志 2019年第2期33卷 116-122页

作者：王震李玉蕾周培岚苏瑞斌傅风华烟台大学药学院山东烟台264005 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所北京100850 抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的建立能够稳定表达α2B-肾上腺素能受体(α2B-AR)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的活化T细胞核因子2(NFAT2)(EGFP-NFAT2)的稳转细胞株。方法构建具有潮霉素(Hydro)抗性的pcDNA3.1α2B-AR重组质粒(pcDNA3.1-Hygro-α2B-AR),转染至表... 详细信息

目的建立能够稳定表达α2B-肾上腺素能受体(α2B-AR)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的活化T细胞核因子2(NFAT2)(EGFP-NFAT2)的稳转细胞株。方法构建具有潮霉素(Hydro)抗性的pcDNA3.1α2B-AR重组质粒(pcDNA3.1-Hygro-α2B-AR),转染至表达EGFP-NFAT2的U2OS细胞(U2OS-EGFP-NFAT2细胞),使用Hygro 200 mg·L-1压力筛选10 d后,进行NFAT2核转位实验筛选细胞株并用Z’因子法评价细胞模型的可靠性,采用实时定量PCR和Western蛋白印迹法,检测α2B-AR的mRNA和蛋白表达水平,选择α2-AR的激动剂盐酸右美托咪啶(DMED)和拮抗剂盐酸阿替美唑(ATI)通过NFAT2核转位实验评价α2B-AR的功能活性。结果成功构建重组质粒pc DNA3.1-Hygro-α2B-AR后,稳定转染至U2OS-EGFP-NFAT2细胞,采用NFAT2核转位实验筛选发现,编号12的细胞株相对核转位指数为0.445,活性最高;3次独立实验中,Z’因子分别为0.664,0.533和0.634。实时定量PCR结果显示,编号12的细胞株α2B-AR mRNA表达水平是U2OS-EGFP-NFAT2细胞株的140倍,表达显著增加(P<0.01),且在20代次内表达稳定。Western蛋白印迹结果显示,编号12的细胞株出现明显的α2B-AR蛋白条带,而U2OS-EGFP-NFAT2细胞中未检测到α2B-AR蛋白表达。DMED可以浓度依赖性地提高该细胞株的核转位水平[EC50=(2.616±0.121)nmol·L-1],ATI可以浓度依赖性地对抗DMED的作用[IC50=(89.05±0.22)nmol·L-1]。结论成功构建了共表达α2B-AR与EGFP-NFAT2的稳转细胞株,可用于靶向α2B-AR化合物的筛选和受体分子机制的研究。

关键词：肾上腺素能受体,α2 NFAT转录因子类核转位实验右美托咪啶

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血小板型磷酸果糖激酶介导的代谢重编程机制及其在疾病中的作用研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2022年第2期36卷 141-148页

作者：王道辉刘凤英骆媛王天王永安烟台大学药学院分子药理和药物评价教育部重点实验室山东烟台264005 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)是细胞能量代谢糖酵解途径中重要的限速酶,在细胞内的表达保持动态平衡且相对稳定,发挥着调控细胞生物合成和能量代谢的作用,是代谢类疾病和癌症领域的研究热点。当细胞所处微环境发生变化时,如氧供应不足、... 详细信息

血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)是细胞能量代谢糖酵解途径中重要的限速酶,在细胞内的表达保持动态平衡且相对稳定,发挥着调控细胞生物合成和能量代谢的作用,是代谢类疾病和癌症领域的研究热点。当细胞所处微环境发生变化时,如氧供应不足、代谢底物匮乏或细胞癌变时,细胞内出现PFKP介导的通过改变自身代谢模式而形成的代谢重编程,从而改善环境变化引起的不利影响;另一方面,PFKP在调控以Warburg效应为主的代谢模式中发挥重要作用,使代谢模式向糖酵解转移,形成有氧糖酵解方式。本文主要围绕PFKP介导的代谢重编程作用机制及其参与肿瘤、呼吸系统等疾病的病理生理机制和靶向治疗研究进展进行综述。

关键词：血小板型磷酸果糖激酶代谢重编程肿瘤糖酵解细胞能量代谢

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基于LINCS转录组数据以囊泡谷氨酸转运体1为靶点的抗阿尔茨海默病药物重定位

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中国药理学与毒理学杂志 2022年第9期36卷 641-648页

作者：谢宗杰王静韩露王同兴高圣乔程肖蕊周文霞张永祥南京中医药大学研究生学院江苏南京210023 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的利用基于网络细胞反应印记整合文库(LINCS)提供的药物扰动基因表达谱数据和阿尔茨海默病(AD)谷氨酸毒性发病机制,以囊泡谷氨酸转运体1(VGLUT1)为靶点进行抗AD药物重定位预测。方法利用MetaCore数据库构建VGLUT1调控基因集,基于LINC... 详细信息

目的利用基于网络细胞反应印记整合文库(LINCS)提供的药物扰动基因表达谱数据和阿尔茨海默病(AD)谷氨酸毒性发病机制,以囊泡谷氨酸转运体1(VGLUT1)为靶点进行抗AD药物重定位预测。方法利用MetaCore数据库构建VGLUT1调控基因集,基于LINCS提供的药物扰动基因表达谱数据,采用基因富集分析评估药物调控VGLUT1转录潜能,预测靶向调控VGLUT1转录的抗AD药物。以快速老化模型小鼠(SAMP8)为模型,用Morris水迷宫实验和新异物体识别实验评价小鼠学习记忆功能,对预测药物的抗AD作用进行验证。结果获得了包括16个激活VGLUT1转录和11个抑制VGLUT1转录的基因集;富集分数排名前5具有促进VGLUT1转录作用的药物为氟尼缩松、谷氨酰胺、阿那曲唑、米非司酮和雷替曲塞。米非司酮可显著增加SAMP8在水迷宫目标象限的游泳时间(P<0.05),而对新异物体识别实验中的偏好指数无显著影响。结论基于LINCS转录组数据和VGLUT1特征基因集的药物重定位为抗AD药物发现提供了一个新的易实现的参考方法。米非司酮具有成为抗AD药物的前景。

关键词：阿尔茨海默病药物重定位基因表达谱囊泡谷氨酸转运体米非司酮

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葡糖转运蛋白1和葡糖转运蛋白2在槲皮苷和异槲皮苷跨膜吸收中的作用

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中国药理学与毒理学杂志 2018年第3期32卷 192-200页

作者：李素云李峥高薇娜李敬来张振清郭长江首都医科大学附属北京世纪坛医院临床营养科北京100038 军事科学院军事医学研究院环境医学和作业医学研究所天津300050 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的比较槲皮素糖苷衍生物槲皮苷(Que)和异槲皮苷(IQue)在人小肠吸收模型单层Caco-2细胞上的吸收特征,以及葡糖转运蛋白1(GLUT1)和GLUT2在Que和IQue跨膜吸收中的作用,探讨槲皮素糖苷衍生物的跨膜吸收机制。方法采用单层Caco-2细胞,在腔... 详细信息

目的比较槲皮素糖苷衍生物槲皮苷(Que)和异槲皮苷(IQue)在人小肠吸收模型单层Caco-2细胞上的吸收特征,以及葡糖转运蛋白1(GLUT1)和GLUT2在Que和IQue跨膜吸收中的作用,探讨槲皮素糖苷衍生物的跨膜吸收机制。方法采用单层Caco-2细胞,在腔侧或基底侧加入Que或IQue 9.0和18.0 mg·L-1(终浓度,PBS配制),分别于30,60,90,120和150 min,用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)法测定对侧PBS中Que或IQue的透过量及其代谢产物槲皮素、异鼠李亭和柽柳黄素生成量。为考察GLUT1和GLUT2在Que和IQue跨膜吸收中的作用,在Que或IQue 9.0 mg·L-1(终浓度)腔侧→基底侧转运过程中,在腔侧预先加入GLUT1和GLUT2特异性抑制剂根皮苷(PHL)和根皮素(Pt)2 mmol·L-1孵育15 min,再加入Que或IQue,分别于30,60,90,120和150 min,用HPLC-MS法测定基底侧Que或IQue的透过量。结果(1)在腔侧→基底侧和基底侧→腔侧双向跨膜转运中,Que和IQue 9.0和18.0 mg·L-1孵育30~150 min,均在对侧检测到二者原形,其透过量与孵育时间正相关,且18.0 mg·L-1组透过量>9.0 mg·L-1组(P<0.01)。(2)双向跨膜转运中不同方向之间比较,Que和IQue 9.0和18.0 mg·L-1组腔侧→基底侧的透过量均显著高于基底侧→腔侧(P<0.01)。(3)Que 18.0 mg·L-1从基底侧→腔侧转运孵育90 min时,在腔侧检测到微量的异鼠李亭和柽柳黄素(<2μg·L-1),在9.0和18.0 mg·L-1双向转运中,在孵育120和150 min时均在对侧检测到微量槲皮素,但低于定量检测限微量槲皮素。IQue 18.0 mg·L-1组在腔侧→基底侧和基底侧→腔侧转运孵育90 min时,均在对侧检测到微量的异鼠李亭和柽柳黄素(<2μg·L-1),IQue 9.0和18.0 mg·L-1组双向转运中槲皮素检测结果与Que相同。(4)Que和IQue 9.0 mg·L-1腔侧→基底侧转运,在30~150 min内,PHL和Pt对Que和IQue跨膜转运均有明显的抑制作用(P<0.01),且对Que转运的抑制率明显高于对IQue的抑制率(P<0.01);另外,Pt对Que的抑制作用强于PHL(P<0.01),PHL对IQue的抑制作用强于Pt(P<0.01)。结论 Que和IQue均可以完整的分子形式透过单层Caco-2细胞,并在跨膜转运过程中伴有广泛的代谢转化;GLUT1和GLUT2可能同时参与Que和IQue的跨膜转运,且GLUT2在Que跨膜转运中的作用更大,而GLUT1则在IQue跨膜转运中的作用更大。

关键词：槲皮苷异槲皮苷葡糖转运蛋白跨膜转运

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胍丁胺对生理及应激状态下小鼠空间参考记忆的影响

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国际药学研究杂志 2020年第9期47卷 722-730,737页

作者：王炳昕郝晓清王采玲吴宁李锦南京中医药大学南京210046 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室神经精神药理学北京市重点实验室北京100850

目的研究胍丁胺对生理及应激状态下小鼠空间参考记忆形成及提取的影响。方法采用Morris水迷宫隐蔽平台实验范式研究胍丁胺对小鼠生理和应激状态下空间参考记忆的形成及提取的影响。应激处理:每天隐蔽平台训练(共5 d)前分别施与束缚2 h+... 详细信息

目的研究胍丁胺对生理及应激状态下小鼠空间参考记忆形成及提取的影响。方法采用Morris水迷宫隐蔽平台实验范式研究胍丁胺对小鼠生理和应激状态下空间参考记忆的形成及提取的影响。应激处理:每天隐蔽平台训练(共5 d)前分别施与束缚2 h+不可预知尾部电击、天敌暴露2 h、不可预知足底电击+噪声、转棒运动疲劳1 h、束缚2 h+噪声;探查测试前施与束缚2 h+不可预知尾部电击。酶联免疫吸附法测定小鼠血浆皮质酮浓度。结果生理状态下,与正常对照组相比,隐蔽平台训练前给予胍丁胺(3~30 mg/kg,ig)小鼠逃避潜伏期呈剂量依赖性缩短,其中胍丁胺30 mg/kg组有显著性差异(P<0.05);探查测试前给予胍丁胺(30 mg/kg,ig)小鼠在平台所在目标象限的停留时间及探查距离显著提高(P<0.05)。在应激状态下,训练前急性应激处理有增加小鼠逃避潜伏期的趋势,胍丁胺(30 mg/kg,ig)组小鼠应激状态下小鼠逃避潜伏期显著降低(P<0.05);探查测试前急性应激处理小鼠在平台所在目标象限的停留时间及游泳距离显著降低(P<0.05),应激前给予胍丁胺具有提高小鼠探查测试表现的趋势。应激处理提高小鼠血浆皮质酮水平,给予胍丁胺(3~30 mg/kg,ig)不能降低应激所致小鼠血浆皮质酮水平的升高(P>0.05)。结论胍丁胺增强生理状态下小鼠空间参考记忆的形成和提取;急性应激刺激呈现下调小鼠空间参考记忆形成的趋势、并抑制其提取,但具有改善急性应激状态下空间参考记忆能力下降的趋势。

关键词：胍丁胺空间参考记忆急性应激皮质酮

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非阿片类药物改善阿片类药物致呼吸抑制研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2021年第2期35卷 132-138页

作者：樊永正雍政苏瑞斌军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室神经精神药理学北京市重点实验室北京100850 联勤保障部队第991医院湖北襄阳441000

阿片类药物通过作用于阿片受体,激活与受体偶联的G蛋白和(或)β-抑制蛋白等信号通路而发挥镇痛和麻醉等效应,但同时阿片类药物致呼吸抑制(OIRD)则是临床常见的严重问题。目前通常采用阿片受体拮抗剂纳洛酮等改善OIRD,但纳洛酮可能会拮... 详细信息

阿片类药物通过作用于阿片受体,激活与受体偶联的G蛋白和(或)β-抑制蛋白等信号通路而发挥镇痛和麻醉等效应,但同时阿片类药物致呼吸抑制(OIRD)则是临床常见的严重问题。目前通常采用阿片受体拮抗剂纳洛酮等改善OIRD,但纳洛酮可能会拮抗阿片类药物的镇痛作用,甚至带来许多不可预知的不良反应。近年来,使用非阿片类药物直接和(或)间接调节呼吸中枢,在改善OIRD的同时不影响阿片类药物的镇痛已成为一种新的研究思路。本文围绕近年来研究报道较多的α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-恶唑丙酸受体调节剂、5-羟色胺受体激动剂、磷酸二酯酶4抑制剂、胶质细胞抑制剂、烟碱乙酰胆碱受体激动剂和钾离子通道阻滞剂等非阿片类药物展开综述。

关键词：阿片受体呼吸抑制阿片类药物

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