检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学与毒理学杂志 2019年第2期33卷 102-108页

作者：朱明好蒋宁周文霞南京中医药大学研究生学院江苏南京210023 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所北京100850 抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的通过比较不确定性空瓶饮水刺激法和束缚应激法诱发小鼠产生焦虑样情绪,筛选一种重复性好、刺激性小且易于操作的方法建立小鼠焦虑模型,为寻找合适的抗焦虑药物的药效学评价模型提供实验依据。方法 SPF级雄性C57BL/6J小鼠采用不确定... 详细信息

目的通过比较不确定性空瓶饮水刺激法和束缚应激法诱发小鼠产生焦虑样情绪,筛选一种重复性好、刺激性小且易于操作的方法建立小鼠焦虑模型,为寻找合适的抗焦虑药物的药效学评价模型提供实验依据。方法 SPF级雄性C57BL/6J小鼠采用不确定性空瓶饮水刺激法建立小鼠焦虑模型,实验分为自由饮水组、定时饮水组、生理应激组和空瓶刺激组,每组8只。自由饮水组小鼠全天自由进食饮水;定时饮水组小鼠每天固定2个时间点、间隔12 h,每次饮水10 min;在相同的时间点,生理应激组小鼠每天确保1次饮水10 min,另一次既不给水也不给空瓶;空瓶刺激组小鼠每天饮水时间随机给予1次或2次空瓶进行刺激,共计饮水12次,空瓶16次;实验持续14 d。采用束缚应激法建立小鼠焦虑模型,实验分为正常对照组和束缚应激组,每组8只。正常对照组小鼠正常饲养,束缚应激组小鼠于每天早上9∶00头朝离心管的底部束缚在管内,第1天束缚2 h,随后每天束缚时间延长2 h,直至每天8 h,连续21 d。小鼠在空瓶刺激7和14 d后或束缚应激7,14和21 d后观察体质量的变化。造模结束后,通过旷场实验检测小鼠自主活动和探索行为,高架十字迷宫实验检测小鼠进入开放臂的次数和在开放臂内停留时间;采用ELISA测定束缚应激21 d后小鼠血浆皮质酮(CORT)水平和海马组织中5-羟色胺(5-HT)含量。结果不确定性空瓶饮水刺激法:与自由饮水组相比,定时饮水组小鼠在开放臂内停留时间显著下降(P<0.05);与定时饮水组相比,空瓶刺激7 d后,小鼠体质量显著下降(P<0.05),其他各项行为学指标无明显变化。束缚应激法:与正常对照组相比,束缚应激14 d后,小鼠体质量显著降低(P<0.05),小鼠的自主活动和探索行为无明显变化,进入开放臂的次数和在开放臂内停留时间均显著下降(P<0.05);束缚应激21 d后,小鼠体质量显著降低(P<0.05),血浆CORT含量和海马组织中5-HT含量显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论不确定性空瓶饮水刺激法建立小鼠焦虑模型的稳定性和敏感性欠佳,不可控因素较多,刺激14 d未成功建立小鼠焦虑模型。束缚应激14 d可成功建立小鼠焦虑模型,其机制可能与下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱和5-HT代谢异常相关。

关键词：空瓶刺激束缚应激焦虑

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急性应激障碍向创伤后应激障碍转化模型的建立

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中国药理学与毒理学杂志 2019年第10期 839-840页

作者：王子元王昊黄晏周文霞张永祥军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室南京中医药大学

目的建立小鼠急性应激障碍(ASD)向创伤后应激障碍(PTSD)转化的模型。方法雄性C57BL/6J小鼠(6-8周龄)采用电击刺激(0.8 m A,每次10 s,每天15次,3 d)造模,造模后24 h和28 d后测量焦虑、回避、再体验症状。通过行为轮廓法(behavior profil... 详细信息

目的建立小鼠急性应激障碍(ASD)向创伤后应激障碍(PTSD)转化的模型。方法雄性C57BL/6J小鼠(6-8周龄)采用电击刺激(0.8 m A,每次10 s,每天15次,3 d)造模,造模后24 h和28 d后测量焦虑、回避、再体验症状。通过行为轮廓法(behavior profile),分离出在急性期和慢性期患病的小鼠。结果在电击应激后24 h,应激组小鼠表现出明显的回避行为(P=0.0012)、在电击环境中的僵直行为(P<0.01)和明显的焦虑行为(P=0.002)。在电击后28天,应激组小鼠同对照组相比仍然表现出显著的焦虑行为(P=0.0889)、回避行为(P<0.01)和在电击环境中的僵直行为(P=0.0138)。通过行为轮廓法,以对照组各项行为学数据的"平均值±0.5标准差"为界限,定义在三项行为学测试中,均超过或低于界限的小鼠为患病小鼠。通过筛选,在应激后24 h对照组小鼠有1只患病,模型组有15只患病,患病率分别为4%和57.69%。在应激后28 d,对照组小鼠患病2只,应激组患病8只,患病率分别为8%和30.77%,应激组小鼠的创伤后应激障碍患病率同临床数据相似。其中应激组在急性期和慢性期均患病的小鼠有6只,急性应激障碍向创伤后应激障碍的转化率为40%。结论成功建立了小鼠急性应激障碍向创伤后应激障碍转化的模型,可用于相关机制研究和药物筛选。

关键词：急性应激障碍创伤后应激障碍动物模型

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基于肼化学富集法分析人血浆外泌体中的N-糖基化蛋白质

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中国药理学与毒理学杂志 2019年第3期33卷 216-223页

作者：白海红王兴河车津晶首都医科大学附属北京世纪坛医院药物Ⅰ期临床试验研究室北京100038 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的对人血浆外泌体中N-糖基化蛋白质的组成和功能进行分析。方法通过超速离心法分离获得健康人血浆外泌体,超声处理获得外泌体蛋白,胰蛋白酶将蛋白酶解为肽段。肼化学法分离富集血浆外泌体中的N-糖基化肽段,液相色谱及高分辨质谱对其... 详细信息

目的对人血浆外泌体中N-糖基化蛋白质的组成和功能进行分析。方法通过超速离心法分离获得健康人血浆外泌体,超声处理获得外泌体蛋白,胰蛋白酶将蛋白酶解为肽段。肼化学法分离富集血浆外泌体中的N-糖基化肽段,液相色谱及高分辨质谱对其进行鉴定,基因本体法对鉴定的N-糖基化蛋白质的生物学功能进行分析。结果获得的外泌体具有外泌体典型的茶托样双层膜结构,形态完整,大小均匀,直径分布在100 nm左右。在1 mL健康人血浆外泌体中共鉴定到252个N-糖基化修饰位点,归属于131个N-糖基化蛋白质。可能在丝氨酸型内肽酶活性、丝氨酸型内肽酶活性抑制及钙离子结合等生命过程中发挥重要作用。其中,67个N-糖基化蛋白质与疾病的发生发展密切相关。结论本研究在人血浆外泌体中共鉴定到131个N-糖基化蛋白质。它们可能参与关键的生命活动及疾病的发生发展。

关键词： N-糖基化蛋白质血浆外泌体肼化学富集

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岛叶皮质在观察性恐惧习得中的作用

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中国药理学与毒理学杂志 2019年第10期 860-861页

作者：郭丽萍石天尧周文霞军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室南京中医药大学

目的通过建立稳定可靠的观察性恐惧习得模型研究岛叶皮质在观察性恐惧习得行为中的作用。方法 OB组小鼠置于有电击一侧的鼠笼中给与一没有提示不可预测的电击1 m A(2 s)一次后,24 h后置于有电击的一侧适应5 min后,立即放置于没有电击的... 详细信息

目的通过建立稳定可靠的观察性恐惧习得模型研究岛叶皮质在观察性恐惧习得行为中的作用。方法 OB组小鼠置于有电击一侧的鼠笼中给与一没有提示不可预测的电击1 m A(2 s)一次后,24 h后置于有电击的一侧适应5 min后,立即放置于没有电击的一侧,再将DM组小鼠放置于有电击的一侧中给予可预测性电击10次/30 s,(电流0.8 m A,2 s),并在电击前28 s给与300 HZ的60 d B声音刺激。CON组小鼠不给于电击,给与DM相一致的声音刺激,统计有声音的各阶段小鼠静止不动时间。24 h后,进行Cue context小鼠放置于一新环境中,5 min内每30 s给予声音刺激30 s,共5次,统计5次30 s内的小鼠活动静止时间。通过化学损毁的方式损毁岛叶皮质确定岛叶皮层是否参与小鼠观察性恐惧行为。然后通过化学遗传的手段调控岛叶皮质神经元的活动。结果观察性恐惧习得过程中,经历电击的小鼠在各时间阶段静止时间显著高于未经历电击的小鼠(P<0.01),且各阶段静止总时间显著性高于未经历电击的小鼠(P<0.01),损毁岛叶皮质显著性增高小鼠的各阶段的静止时间(P<0.01),抑制岛叶皮质活性的增强小鼠各阶段活动静止时间(P<0.01);Cue test测试中经历电击的小鼠静止时间显著高于正常对照组(P<0.01),损毁岛叶皮层的小鼠静止时间显著高于假手术组(P<0.01);经历过电击且抑制岛叶皮质活性的小鼠静止时间相比于模型组显著性升高(P<0.01)。结论有一先前的刺激经历可以使小鼠更易于获取观察性恐惧,岛叶皮质参与调控观察性恐惧习得行为,抑制岛叶皮质活动可能会增强小鼠观察性恐惧习得。

关键词：岛叶皮质观察性恐惧习得化学损毁化学遗传

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舒芬太尼与右美托咪啶联合用药在大鼠中的药动学及其镇静作用

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中国药理学与毒理学杂志 2019年第1期33卷 63-69页

作者：许畅俞晨晨李桦宋远见车津晶徐州医科大学遗传学教研室江苏徐州221004 抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所北京100850

目的研究舒芬太尼(SFTN)与右美托咪啶(DEM)联合用药大鼠中的血浆动力学、靶器官分布及其镇静作用和呼吸抑制毒性,分析两药的药-药相互作用。方法雄性SD大鼠分别iv给予SFTN 20.0μg·kg^(-1),DEM 25.2μg·kg^(-1)或SFTN 20.0μg... 详细信息

目的研究舒芬太尼(SFTN)与右美托咪啶(DEM)联合用药大鼠中的血浆动力学、靶器官分布及其镇静作用和呼吸抑制毒性,分析两药的药-药相互作用。方法雄性SD大鼠分别iv给予SFTN 20.0μg·kg^(-1),DEM 25.2μg·kg^(-1)或SFTN 20.0μg·kg^(-1)+DEM 25.2μg·kg^(-1),于给药后2,5,15,30 min和1,2,4,6和8 h采血,用本研究建立的液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)定量检测方法测定血浆中SFTN和DEM浓度;于给药后5,15,30,60和120 min取血和脑组织样品,同法测定血浆和脑组织中SFTN和DEM浓度。采用WinNonlin 7.0软件拟合并获得药动学参数。采用清醒大鼠肺功能仪考察两药联合应用后呼吸抑制作用,通过观察翻正反射消失(LORR)持续时间考察其中枢镇静作用。结果建立并验证了定量检测血浆样品SFTN和DEM浓度的LC-MS/MS方法。大鼠给药后,SFTN组SFTN的血浆峰浓度(C_(max)),消除半衰期(t_(1/2))和血浆清除率(Cl)分别为(22.2±2.6)μg·L^(-1),(2.13±0.69)h和(2288±446)mL·h^(-1)·kg^(-1),SFTN+DEM组SFTN分别为(15.9±9.4)μg·L^(-1),(1.22±0.13)h和(3565±743)m L·h^(-1)·kg^(-1);DEM组DEM分别为(14.0±8.9)μg·L^(-1),(1.21±0.15)h和(4235±752)mL·h^(-1)·kg^(-1),SFTN+DEM组DEM分别为(9.4±3.5)μg·L^(-1),(1.08±0.26)h和(4796±744)mL·h^(-1)·kg^(-1)。SFTN+DEM组SFTN的脑/血浆C_(max)比值为0.49,是SFTN组(0.45)的1.3倍;SFTN+DEM组DEM的脑/血浆C_(max)比值为16.9,是DEM组(1.42)的12倍。SFTN,DEM和SFTN+DEM组大鼠LORR持续时间分别为37±13,41±5和(104±24)min,SFTN+DEM组LORR持续时间相比SFTN和DEM组显著延长(P<0.01)。SFTN+DEM组大鼠呼吸功能被抑制程度与SFTN组相比无明显加重,但抑制时间有一定延长(P<0.05,P<0.01)。结论 SFTN与DEM联合用药存在一定的药-药相互作用,可能通过增加脑组织DEM暴露水平而延长镇静作用和呼吸抑制作用的持续时间,临床应用时应关注两药联合应用可能导致的药效或副作用的协同作用。

关键词：舒芬太尼右美托咪啶药物相互作用药动学镇静呼吸抑制

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胸腺素α1及其系列结构修饰物的体外肝匀浆稳定性评价

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军事医学 2019年第2期43卷 146-149页

作者：孙会仙陈佳郭磊谢剑炜刘克良武警北京总队医院北京100027 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的考察并评价胸腺素α1(Tα1)不同位点修饰PEG聚合物的体外肝匀浆酶稳定性,为修饰物的结构优化提供数据支持。方法应用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)研究Tα1及其结构修饰物TC系列和PT系列在大鼠肝匀浆中的体外代谢性质,检测波长均为20... 详细信息

目的考察并评价胸腺素α1(Tα1)不同位点修饰PEG聚合物的体外肝匀浆酶稳定性,为修饰物的结构优化提供数据支持。方法应用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)研究Tα1及其结构修饰物TC系列和PT系列在大鼠肝匀浆中的体外代谢性质,检测波长均为200 nm。结果多肽药物的浓度在4.0~800 mg/ml范围内与其峰面积呈良好线性关系(r>0.9990),绝对回收率>85%,日内相对标准偏差(RSD)<1.50%,日间RSD<2.10%。各修饰物的半衰期依次为PT系列>Tα1>TC系列。结论 Cys替换的TC系列结构修饰物的半衰期均TC系列,表明Cys位点PEG化后修饰物更加稳定。

关键词：肽类药物肝匀浆反相高效液相色谱半衰期大鼠

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束缚应激与单程长时应激致小鼠焦虑障碍的应激参数比较与优化

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国际药学研究杂志 2019年第2期46卷 109-115页

作者：贾晶晶石天尧周文霞南京中医药大学南京210023 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的通过比较与优化束缚应激(restraint stress,RS)和单程长时应激(single-prolonged stress,SPS)法致小鼠焦虑障碍的应激参数,筛选一种重复性好、用时少且操作简易的方法建立小鼠焦虑障碍模型,为深入研究焦虑障碍的发病机制提供可靠的... 详细信息

目的通过比较与优化束缚应激(restraint stress,RS)和单程长时应激(single-prolonged stress,SPS)法致小鼠焦虑障碍的应激参数,筛选一种重复性好、用时少且操作简易的方法建立小鼠焦虑障碍模型,为深入研究焦虑障碍的发病机制提供可靠的实验动物模型建立方法。方法①将C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白对照组、RS 14 d组和SPS 14 d组。RS造模方法为:每天给予RS 2 h,连续应激14 d;SPS造模方法为:每天先给予小鼠2 h RS,之后立即强迫游泳20 min,休息15 min后用异氟烷麻醉放回原笼,连续应激14 d。②将C57BL/6J雄性小鼠分为空白对照组和不同时长RS(2、4、6或8 h/d)7 d组;RS造模方法为:每天分别给予RS 2、4、6或8 h,连续应激7 d。造模期间每天观察小鼠体质量的变化。造模结束后,通过旷场实验检测小鼠自主活动和在中心区域停留时间,高架十字迷宫实验检测小鼠进入开放臂的次数和在开放臂内停留时间,观察小鼠的焦虑样行为变化。结果①与空白对照组相比,RS 14 d组和SPS 14 d组小鼠在应激第7~14天期间体质量均显著降低(P<0.01),其他各项行为学指标无明显变化;②在2、4、6或8 h/d不同时长RS连续应激7 d实验中,与空白对照组相比,RS 8 h组小鼠应激第7天的体质量显著降低(P<0.01),RS 2、4、6和8 h组小鼠应激第7天的自主活动和在旷场中心区域停留时间无明显变化,RS 2、4和6 h组小鼠在应激第7天高架十字迷宫内停留时间显著下降(P<0.05)。结论每天RS 2、4或6 h连续应激7 d可能成功建立小鼠焦虑障碍模型,其中每天RS 2 h用时少、重复性好、稳定性高,是理想的建立焦虑障碍模型的应激参数。

关键词：焦虑障碍束缚应激单程长时应激

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盐酸右美托咪定凝胶剂的原辅料相容性研究

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国际药学研究杂志 2019年第11期46卷 867-872页

作者：李先福李蒙李龙高静张慧高翔刘楠陈洪国郑爱萍湖北科技学院咸宁437200 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所药物制剂研究室抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850 空军军医大学预防医学系西安610100

目的建立盐酸右美托咪定凝胶剂有关物质检测方法,并对其与不同辅料的相容性进行研究。方法采用高效液相色谱法,以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,以乙腈-0.008 mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相梯度洗脱;流速1.0 ml/min;柱温30℃;进样量50μl... 详细信息

目的建立盐酸右美托咪定凝胶剂有关物质检测方法,并对其与不同辅料的相容性进行研究。方法采用高效液相色谱法,以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,以乙腈-0.008 mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相梯度洗脱;流速1.0 ml/min;柱温30℃;进样量50μl;检测波长210 nm,并进行方法学验证。同时参照《化学药物制剂研究基本技术指导原则》,主药与各辅料按一定比例混合,置高温(60℃)、强光照射(4500±500)Lx条件下进行高温光照处理,并分别于第0、10和30天取样,考察样品性状,并采用建立的HPLC法检测有关物质。结果建立的有关物质测定方法专属性、耐用性良好,可用于准确有效测定有关物质的变化情况。在所试高温、强光照射条件下,原辅料相容性测试样品均无性状变化,且有关物质未增加。结论所选用的辅料(羟丙甲纤维素、丙二醇、羟苯甲酯、苯甲酸钠、苯甲醇)与盐酸右美托咪定的相容性良好,原辅料混合样品在高温和强光照射条件下均稳定,可用来进行盐酸右美托咪定凝胶的处方筛选。

关键词：盐酸右美托咪定凝胶剂原辅料相容性有关物质

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大鼠灌胃黄独素B单体和黄药子醇提物后黄独素B的药动学和组织分布比较

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中国药理学与毒理学杂志 2018年第1期32卷 72-78页

作者：许玉凤阳海鹰原梅李桦军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物和毒理学国家重点实验室北京100850

目的研究黄独素B(DIOB)在大鼠体内的血浆药动学和组织分布特征,并比较DIOB单体和黄药子醇提物(EEDB)给药后DIOB血浆和组织暴露以及消除的差异。方法建立并验证了定量分析血浆和组织样品DIOB的液相-串联质谱法(LC-MS/MS)。SD大鼠ig给予DI... 详细信息

目的研究黄独素B(DIOB)在大鼠体内的血浆药动学和组织分布特征,并比较DIOB单体和黄药子醇提物(EEDB)给药后DIOB血浆和组织暴露以及消除的差异。方法建立并验证了定量分析血浆和组织样品DIOB的液相-串联质谱法(LC-MS/MS)。SD大鼠ig给予DIOB 1.3 mg·kg^(-1)和EEDB 1.0 g·kg^(-1),不同时间点采样,测定血浆和组织样品中的DIOB浓度。快速平衡透析法测定DIOB在血浆和组织的蛋白结合率。采用Win Nonlin 6.4软件拟合并获得药动学参数。结果大鼠给予DIOB单体和EEDB后,血浆DIOB的峰浓度(c_(max))和达峰时间(t_(max))分别为312±67和(131±84)μg·L^(-1)(P<0.01)以及0.12±0.07和(0.23±0.17)h;消除半衰期(t1/2)分别为1.17±0.28和(2.34±0.83)h(P<0.05)。组织分布研究结果表明,DIOB在肺的分布浓度最高,其次是肝和肾。DIOB单体组DIOB在肺、肝和肾组织的AUC(0-24 h)分别为4527.0±557.7,183.0±51.1和(64.4±22.4)ng·h·g^(-1),EEDB组分别为6507.9±424.3(P<0.01),467.5±202.7(P<0.05)和(238.6±70.0)ng·h·g^(-1)(P<0.01)。DIOB的血浆、肝和肺组织的蛋白结合率为38.7%~43.6%,61.3%~66.9%和61.4%~64.7%。DIOB肺/血浆游离浓度AUC比值>48。结论 DIOB以单体和EEDB 2种形式给药后,大鼠血浆动力学和组织分布存在一定的差异。DIOB在肺组织的分布具有较强的靶向性。在黄药子和DIOB的药效学和毒理学研究中应关注上述特征和差异。

关键词：黄独素B 黄药子药动学组织分布蛋白结合

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雷公藤甲素在人和大鼠肝微粒体代谢消除和酶动力学的比较研究

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中国药理学通报 2018年第10期34卷 1414-1419页

作者：吴桐阳海鹰原梅车津晶李桦军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物和毒理学国家重点实验室北京100850

目的研究中药活性成分雷公藤甲素(triptolide,TP)在人和大鼠肝微粒体的代谢消除性质和酶促动力学特征,比较种属间差异,为深入研究代谢与肝毒性的关系提供科学依据。方法应用前期验证的LC-MS/MS方法,定量检测孵育体系中的雷公藤甲素,考... 详细信息

目的研究中药活性成分雷公藤甲素(triptolide,TP)在人和大鼠肝微粒体的代谢消除性质和酶促动力学特征,比较种属间差异,为深入研究代谢与肝毒性的关系提供科学依据。方法应用前期验证的LC-MS/MS方法,定量检测孵育体系中的雷公藤甲素,考察其在人和大鼠肝微粒体的代谢稳定性和酶促动力学;研究雷公藤甲素在人源重组CYP3A4、大鼠源重组CYP3A1和3A2同工酶孵育体系中的酶促动力学,计算并比较酶动力学参数。结果雷公藤甲素在人肝微粒体的代谢消除明显慢于大鼠,消除半衰期T^(1/2)分别为(154±9.4)、(19.9±0.09)min(P<0.01)。雷公藤甲素在人和大鼠肝微粒体的表观酶动力学参数K_m分别为(11.2±3.45)、(18.4±3.29)μmol·L^(-1),V_(max)分别为(139±12.6)、(2194±176.7)pmol·min^(-1)·mg^(-1);在CYP3A4、3A1、3A2的K_m分别为(15.5±1.80)、(5.89±0.96)、(9.55±3.13)μmol·L^(-1),V_(max)分别为(11.1±0.91)、(62.8±16.17)、(51.6±10.19)pmol·min^(-1)·pmol^(-1),差异具有显著性。结论雷公藤甲素的肝微粒体代谢消除和酶促动力学存在明显的种属差异,其与人和大鼠CYP3A亚型的亲和力和反应速率差异是代谢消除种属差异的原因之一。

关键词：雷公藤甲素肝微粒体细胞色素P4503A酶代谢消除酶动力学种属差异

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