目的:初步探讨柯萨奇病毒-腺病毒受体(Coxsackie and adenovirus receptor,CAR)与人肺鳞状细胞癌及腺癌发生、发展的关系,为设计腺病毒载体对肺癌进行基因治疗的方案提供理论依据。方法:采用免疫组织化学方法检测112例肺癌(包括鳞状细胞...
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目的:初步探讨柯萨奇病毒-腺病毒受体(Coxsackie and adenovirus receptor,CAR)与人肺鳞状细胞癌及腺癌发生、发展的关系,为设计腺病毒载体对肺癌进行基因治疗的方案提供理论依据。方法:采用免疫组织化学方法检测112例肺癌(包括鳞状细胞癌65例,腺癌47例)组织中CAR的表达情况,利用统计学方法(SPSS10.0软件)分析CAR的表达在鳞状细胞癌、腺癌以及癌旁正常肺组织中有否差异。结果:正常肺组织中仅有少量CAR的表达。两类型肺癌分别与癌旁组织CAR的表达差别有统计学意义(P<0.01),在鳞状细胞癌中CAR的表达较癌旁组织提高34.75%,在腺癌中CAR的表达较癌旁组织提高38.30%。其中,鳞状细胞癌的CAR阳性率为43.08%,腺癌的阳性率为70.21%,两类型肺癌间CAR表达的阳性率差别亦有统计学意义(P<0.01)。但CAR的表达在肺鳞状细胞癌不同组织学分级中(Ⅰ～Ⅲ级)的差别未有统计学意义(P>0.05)。此外,我们发现在肺腺癌中所包含的细支气管肺泡癌部分几乎都有CAR的表达。结论:肺癌组织(鳞状细胞癌和腺癌)CAR的表达普遍提高,提示CAR与肺癌的发生、发展有一定的联系,并且与肺腺癌的形成及发展的关系更为密切,因此为进一步实现用腺病毒载体对肺癌进行基因治疗提供了理论基础。
目的制备Pb-DTPA-BSA复合物,作为完全抗原,用以免疫动物制备铅抗体。方法首先用金属螯合剂二乙基三胺五乙酸(Diethylene triamine pentacetate,DTPA)与铅离子(Pb2+)结合,再分别用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC)、戊二醛、三乙胺作偶联剂将其与大分子载体蛋白-牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)偶联,制备Pb-DTPA-BSA复合物。将复合物做聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption Time of Flight mass Spectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定并免疫小鼠,获得抗PbDTPA抗体。结果 SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS结果均验证合成了复合物Pb-DTPA-BSA,平均分子量76435;Pb-DTPA与BSA的偶联比为11∶1。免疫小鼠后,小鼠血清中产生了抗Pb-DTPA抗体,抗体最高效价达到1.0×105。结论经分析证明成功合成了免疫复合物Pb-DTPA-BSA,可用于重金属Pb抗体的制备。
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