检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2012年第5期32卷 415-418页

作者：魏婧靖李裕昌吴晓燕司炳银张雨李靖户义祝庆余杨银辉康晓平军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的确定蜱传脑炎病毒（Tick-borne encephalitis virus，TBEV）对人神经母瘤细胞的感染性及复制增殖情况。方法将TBEV感染人神经母瘤细胞SK－N－SH，取不同时间点的细胞培养上清，分别采用real－timeRT－PCR方法及空斑测定的方法测定... 详细信息

目的确定蜱传脑炎病毒（Tick-borne encephalitis virus，TBEV）对人神经母瘤细胞的感染性及复制增殖情况。方法将TBEV感染人神经母瘤细胞SK－N－SH，取不同时间点的细胞培养上清，分别采用real－timeRT－PCR方法及空斑测定的方法测定病毒滴度，以确定TBEV在SK－N－SH细胞中的复制增殖情况；同时进行细胞形态观察及免疫荧光检测，以确定TBEV感染后的SK－N－SH细胞形态变化。结果TBEV感染SK－N－SH细胞后，可进行大量复制增殖，感染后3d，病毒滴度达到峰值，可达2．92×10＾7PFU／ml，感染细胞产生明显的形态改变，免疫荧光法可检测到细胞内的病毒粒子。结论TBEV可在人神经母瘤细胞SK－N－SH中大量复制增殖，并可造成细胞明显的形态改变，因此人神经母瘤细胞SK-N-SH可以作为TBEV培养良好的细胞模型。

关键词：蜱传脑炎病毒神经细胞致病性

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冰毒对HIV-1在巨噬细胞内复制影响的体外实验研究

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中华疾病控制杂志 2013年第12期17卷 1013-1016页

作者：梁冰玉李彧刘思扬蒋俊俊陈晖黄颉刚苏锦明蓝光华黎明强叶力陶人川曹存巍梁浩广西医科大学公共卫生学院广西艾滋病防治研究重点实验室广西南宁530021 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 广西医科大学第一附属医院老年消化内科广西南宁530021 广西疾病预防控制中心艾滋病防制所广西南宁530021 柳州市疾病预防控制中心广西柳州545001

目的探讨冰毒对人类免疫缺陷病毒-1型(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)在巨噬细胞中复制的作用。方法将巨噬细胞按单纯随机分组原则分为:(1)冰毒+多巴胺受体D1阻滞剂(SCH 23390)处理组,(2)冰毒处理组,(3)SCH 23390处理组,(4)病... 详细信息

目的探讨冰毒对人类免疫缺陷病毒-1型(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)在巨噬细胞中复制的作用。方法将巨噬细胞按单纯随机分组原则分为:(1)冰毒+多巴胺受体D1阻滞剂(SCH 23390)处理组,(2)冰毒处理组,(3)SCH 23390处理组,(4)病毒对照组。先用浓度为10-5mol/L的SCH 23390预处理(1)、(3)组1 h,再用10-4mol/L的冰毒处理(1)组24 h,同时用10-5mol/L、10-4mol/L及2.5×10-4mol/L的冰毒处理(2)组24 h,然后每组加入等量的HIV-1进行感染,于感染的第4、6、8、10 d取培养上清,用酶联免疫吸附剂测定(enzymelinked immunosorbnent assay,ELISA)检测培养上清的HIV-1 p24抗原,比较各组之间抗原表达量差异。结果 HIV-1感染巨噬细胞第4、6、8、10 d,病毒对照组的p24抗原表达量均低于3个不同浓度冰毒处理组(均有P<0.01);且各浓度冰毒处理组的p24抗原表达量比对照组增加的倍数,随着感染时间的延长而具有上升的趋势,时间-效应差异有统计学意义(F=155.94,P<0.001);而冰毒+SCH 23390处理组、SCH 23390处理组分别与病毒对照组HIV-1p24抗原表达比较,差异均无统计学意义(均有P>0.05)。结论冰毒能够促进HIV-1在巨噬细胞内的复制,并随感染时间的延长呈递增趋势;冰毒促进HIV-1复制的作用可被多巴胺受体D1阻滞剂(SCH 23390)阻断。

关键词： HIV-1 HIV核心蛋白质p24 巨噬细胞

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两株炭疽芽胞杆菌MLST新序列型(ST)

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微生物学报 2012年第1期52卷 120-123页

作者：左庭婷李岩伟韩雪莲何君端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

【目的】2株炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)17003-14和17003-32的多位点序列分型(Multilocussequence typing,MLST)研究。【方法】选取***基因组7个常见管家基因位点glpF、gmk、ilvD、pta、pur、pycA和tpi进行PCR扩增、测序,与MLST数据库中的等位基因序列进行比对,确定菌株的序列型(sequence type,ST)。【结果】*** 17003-14和17003-32的等位基因编号分别为113、31、1、43、1、53、7和113、31、1、43、1、53、37,比对结果显示这2株细菌的等位基因编号组合未见报道。【结论】17003-14和17003-32为新ST菌株,已被MLST数据库确认,注册号(pubMLST id)分别为id-1053和id-1054。

关键词：炭疽芽胞杆菌多位点序列分型序列型基因分型

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H221Y突变在HIV-1B ＇亚型毒株中的流行状况及突变模式

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中华医学杂志 2012年第4期92卷 250-253页

作者：李韩平郭伟刘永健鲍作义李林庄道民刘思扬王晓林李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨人类免疫缺陷病毒（ HIV）逆转录酶区H221Y突变在抗病毒治疗失败人群HIV-1B’亚型毒株中的流行状况及突变模式.方法提取我国中部地区多个省份1205例抗病毒治疗失败及158例未抗病毒治疗的艾滋病患者血浆样本RNA,扩增HIV B’亚... 详细信息

目的探讨人类免疫缺陷病毒（ HIV）逆转录酶区H221Y突变在抗病毒治疗失败人群HIV-1B’亚型毒株中的流行状况及突变模式.方法提取我国中部地区多个省份1205例抗病毒治疗失败及158例未抗病毒治疗的艾滋病患者血浆样本RNA,扩增HIV B’亚型毒株聚合酶区（pol区）基因序列提交斯坦福大学HIV-1耐药数据库,根据数据库比对结果,分析H221Y突变在2组人群中发生频率及发生模式.结果 H221Y突变在抗病毒治疗失败人群中流行率（6.59％）显著高于未治疗人群（0.60％）（x2=6.59,P=0.027）.该突变的发生常伴随逆转录酶区位点T215、M184、K103、Y181突变的出现,突变模式以TAMs/H221 Y/Y181C/I为主.5种抗病毒治疗方案中,齐多夫定（AZT）/去羟肌苷（ddI）/奈韦拉平（NVP）治疗方案的H221Y突变发生率显著高于其他4种治疗方案（14.6％比3.5％、4.9％、2.3％、2.6％,均P ＜0.01）.结论使用一线方案治疗失败的艾滋病患者中H221Y突变有一定流行,该突变的发生以特有的突变模式出现.

关键词： HIV-1 突变抗药性 H221Y

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武夷山地区3种野生动物体外寄生蜱调查

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寄生虫与医学昆虫学报 2013年第3期20卷 210-211页

作者：张忠旺郭天宇王公东张晓龙许荣满福建出入境检验检疫局武夷山办事处福建武夷山354300 中国检验检疫科学研究院北京100071 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

本论文报道了采自小麂、野猪和野兔3种野生动物的8种体外寄生蜱，并对各宿主的体外寄生蜱种类组成进行计算。

关键词：蜱螨亚纲蜱小麂野猪野兔武夷山

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吉林长白县大林姬鼠中检测到Amur样病毒核酸

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寄生虫与医学昆虫学报 2013年第2期20卷 120-124页

作者：姚李四邵丽筠王刚刘阳刘勇先浦昀燕青丽张晓龙张吉徐宝梁王宝麟赵彤言军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国检验检疫科学研究院北京100123 吉林出入境检验检疫局长春130062 长白出入境检验检疫局吉林长白134400

用针对汉坦病毒L（大）片段的特异引物对21份大林姬鼠鼠肺样本进行检测，有2份扩增出特异性条带，经序列测定显示是Amur样病毒，两株病毒存在一个碱基的差异。随后对一株样本的M和S片段进行了全长扩增，结果显示其M片段和H5株同源性最高... 详细信息

用针对汉坦病毒L（大）片段的特异引物对21份大林姬鼠鼠肺样本进行检测，有2份扩增出特异性条带，经序列测定显示是Amur样病毒，两株病毒存在一个碱基的差异。随后对一株样本的M和S片段进行了全长扩增，结果显示其M片段和H5株同源性最高。S片段和NA33株的同源性最高。根据M片段编码区序列构建的进化树显示，我国和俄罗斯Amur样病毒可归为同一亚型。

关键词：大林姬鼠 Amur样病毒长白县

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2011年第一届牛津国际噬菌体大会介绍

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生物工程学报 2012年第3期28卷 368-375页

作者：范华昊童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

1会议简介噬菌体是一类以原核生物（包括细菌、真菌、放线菌或螺旋体等）为宿主的病毒,它最早于1915年被发现,之后,d＇Herelle在1917年再次发现了这种能裂解细菌的生物类群,并将其命名为＂bacteriophage＂,简称＂phage＂。近年来随着细... 详细信息

1会议简介噬菌体是一类以原核生物（包括细菌、真菌、放线菌或螺旋体等）为宿主的病毒,它最早于1915年被发现,之后,d＇Herelle在1917年再次发现了这种能裂解细菌的生物类群,并将其命名为＂bacteriophage＂,简称＂phage＂。近年来随着细菌耐药形势的日益严峻,越来越多有远见和责任感的科学家和企业开始把目光投向这种细菌的天然病毒，越来越多的科学家开始对噬菌体产生浓厚的兴趣，更多噬菌体产品开始走向市场。

关键词：噬菌体国际牛津会议简介原核生物生物类群科学家细菌

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1株保存的马雅罗病毒基因组序列测定及分析

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军事医学 2012年第9期36卷 662-665页

作者：张雨司炳银刘伯华杨银辉祝庆余军事医学科学院微生物与流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京10007

目的对保存的WJBC株马雅罗病毒(MAYV)基因组序列进行测定,阐明其与已报道毒株的关系及追溯其可能来源。方法将MAYV基因组编码区分10段进行RT-PCR扩增,扩增产物直接进行测序,非编码区采用RACE法进行扩增,扩增产物纯化并连接pGEM-T easy... 详细信息

目的对保存的WJBC株马雅罗病毒(MAYV)基因组序列进行测定,阐明其与已报道毒株的关系及追溯其可能来源。方法将MAYV基因组编码区分10段进行RT-PCR扩增,扩增产物直接进行测序,非编码区采用RACE法进行扩增,扩增产物纯化并连接pGEM-T easy载体后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,挑取阳性克隆鉴定后进行测序,用DNAStar软件将测序结果拼接得到基因组序列。下载MAYV核苷酸序列,利用MEGA5.0软件构建系统进化发生树。结果与结论 WJBC株MAYV基因组核苷酸(nt)共11 429 nt,编码3679个氨基酸,其中5'端的2/3基因组编码4种非结构蛋白nsP1,nsP2,nsP3,nsP4;3'端的1/3基因组编码5种结构蛋白C、E3、E2、6K和E1蛋白。结构基因和非结构基因之间有26 nt的连接区为非翻译区。病毒基因组5'端和3'端分别有76、290 nt的非编码区。进化树结果显示,WJBC株马雅罗病毒与TRVL4675株MAYV亲缘性最高。

关键词：马雅罗病毒基因组逆转录聚合酶链反应

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多重生物检测技术研究进展

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军事医学 2012年第9期36卷 713-717页

作者：张平平王浩然郭兆彪杨瑞馥周蕾军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

多重生物检测因其快速、耗费少、所需样品量少等优点,被广泛用于细菌、病毒、真菌、寄生虫及自身免疫相关抗体等抗原或抗体的快速筛查诊断。多重核酸检测的新技术包括巢式PCR(nPCR)、多重串联PCR、基于毛细管电泳的GeXP平台和luminex x... 详细信息

多重生物检测因其快速、耗费少、所需样品量少等优点,被广泛用于细菌、病毒、真菌、寄生虫及自身免疫相关抗体等抗原或抗体的快速筛查诊断。多重核酸检测的新技术包括巢式PCR(nPCR)、多重串联PCR、基于毛细管电泳的GeXP平台和luminex xMAP多重分析技术平台,多重免疫检测的新技术包括基于上转换发光、多线点、表面等离子共振技术的多重生物检测及基于蛋白芯片的阵列array-ELISA检测。本文综述了近年来多重生物检测新技术在呼吸道感染、腹泻、自身免疫性缺陷和肿瘤等疾病中的应用进展。

关键词：多重PCR 多重免疫检测病原体

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甲型流感病毒H1N1 HA蛋白在果蝇S2细胞中的表达及免疫原性研究

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中国人兽共患病学报 2012年第9期28卷 875-879页

作者：于虹温晶杨裔俞建萍佟双郭彦赵光宇寇志华周育森军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物安全国家重点实验室北京100071

目的在果蝇S2细胞表达甲型流感H1N1HA并分析其免疫原性。方法根据GenBank发表的甲型流感病毒(H1N1)HA基因序列,经过密码子优化,全基因合成编码HA的基因,并于其N端引入特定的空间折叠序列,定向连接至表达载体pMT/Bip/V5-His A,构建重组... 详细信息

目的在果蝇S2细胞表达甲型流感H1N1HA并分析其免疫原性。方法根据GenBank发表的甲型流感病毒(H1N1)HA基因序列,经过密码子优化,全基因合成编码HA的基因,并于其N端引入特定的空间折叠序列,定向连接至表达载体pMT/Bip/V5-His A,构建重组表达载体pMT-HA。酶切鉴定正确后,用脂质体转染法与辅助质粒pCoHygro共转染果蝇S2细胞,潮霉素加压筛选稳定细胞系,在无血清培养基中以硫酸铜溶液诱导表达,SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定,经镍柱纯化后免疫小鼠,ELISA检测其诱导的特异性抗体水平。结果获得了稳定表达HA的S2细胞株,目的蛋白以分泌形式表达于上清,并形成三聚体,可以被H1N1HA抗体识别;免疫小鼠后可诱导机体产生抗HA特异性抗体。结论获得了纯化的三聚体形式表达的HA蛋白,并具有较好的免疫原性,具有很好的疫苗应用前景。

关键词：甲型H1N1流感病毒昆虫S2 细胞 HA

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