检索结果-内蒙古大学图书馆

科学通报 2024年第33期69卷 4917-4927页

作者：田颖武媚李凯周超张蓉蓉周航宇叶青秦成峰黄升海李晓峰安徽医科大学基础医学院合肥230000 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国医学科学院北京协和医学院系统医学研究所北京100005

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是虫媒黄病毒属的重要成员,因其在2015年的南美寨卡疫情中导致大量新生儿小头症而备受关注,目前尚无获批上市的寨卡病毒疫苗.与传统疫苗相比,mRNA疫苗在安全性、有效性和产能方面优势明显,代表未来全新的疫苗... 详细信息

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是虫媒黄病毒属的重要成员,因其在2015年的南美寨卡疫情中导致大量新生儿小头症而备受关注,目前尚无获批上市的寨卡病毒疫苗.与传统疫苗相比,mRNA疫苗在安全性、有效性和产能方面优势明显,代表未来全新的疫苗形式.本研究选取寨卡病毒FSS13025株包膜蛋白E的Ⅲ区(EDⅢ)作为免疫原,设计构建包含EDⅢ编码序列、非编码区和poly(A)尾的重组质粒,通过体外转录和加帽反应获得EDⅢ-mRNA转录体,其转染至HEK293TN细胞后能表达特异的目的抗原并能分泌至胞外.进一步利用微流控技术将EDⅢ-mRNA转录体制备成脂质纳米颗粒(lipid nanoparticle,LNP),以间隔3周加强一次的免疫方案分别将5和20μg的EDⅢ-mRNA经肌肉注射至BALB/c小鼠.酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和空斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)的结果显示,该分子可刺激小鼠产生剂量依赖性的高水平的E蛋白特异IgG抗体与寨卡病毒中和抗体,并产生Th1细胞偏向的分泌型IFN-γ、TNF-α和IL-2细胞因子.攻毒保护试验结果显示,免疫组小鼠的病毒血症和主要脏器中的病毒RNA载量相较于磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline,PBS)对照组小鼠均明显降低,其中孕鼠大脑及胎鼠大脑未检测到病毒核酸,体现出良好的免疫保护和垂直传播阻断效果.本研究设计的编码寨卡病毒E蛋白Ⅲ区的mRNA-LNP疫苗可为寨卡病毒疫苗提供新的候选.

关键词：寨卡病毒 mRNA疫苗 E蛋白Ⅲ区免疫原性免疫保护

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益生菌与健康专题序言

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微生物学报 2022年第3期62卷 771-773页

作者：朱宝利杨瑞馥中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101 军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

益生菌作为促进人体健康的微生物制剂,具有维持肠黏膜屏障功能,调节免疫功能和促进营养物质的代谢吸收等重要作用,因此,适当的饮用益生菌产品对肠道菌群紊乱、功能性消化不良、肠胃炎、腹泻、便秘、肠绞痛、肠易激综合征、炎症性肠病以... 详细信息

益生菌作为促进人体健康的微生物制剂,具有维持肠黏膜屏障功能,调节免疫功能和促进营养物质的代谢吸收等重要作用,因此,适当的饮用益生菌产品对肠道菌群紊乱、功能性消化不良、肠胃炎、腹泻、便秘、肠绞痛、肠易激综合征、炎症性肠病以及幽门螺旋杆菌感染等胃肠道疾病具有良好的应用。联合国粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)的联合专家委员会在2001年首次明确了益生菌的科学定义,即益生菌是指当摄取足够数量时,对宿主健康有益的活的微生物。

关键词：功能性消化不良肠黏膜屏障功能幽门螺旋杆菌感染肠绞痛肠易激综合征胃肠道疾病炎症性肠病肠道菌群紊乱

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基于FRET构建A型肉毒毒素活性检测的高通量方法

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安徽医科大学学报 2023年第1期58卷 15-21页

作者：罗森郭丽娜李涛王琴王慧遵义医药高等专科学校细胞生物学与免疫学教研室遵义563006 军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的利用荧光共振能量转移(FRET)构建针对A型肉毒毒素酶活性检测的高通量体外方法。方法构建只识别A型肉毒毒素的基于双荧光标记底物的重组表达质粒,将其构建的质粒转入大肠杆菌表达系统进行表达,对表达后的荧光标记底物重组蛋白进行纯... 详细信息

目的利用荧光共振能量转移(FRET)构建针对A型肉毒毒素酶活性检测的高通量体外方法。方法构建只识别A型肉毒毒素的基于双荧光标记底物的重组表达质粒,将其构建的质粒转入大肠杆菌表达系统进行表达,对表达后的荧光标记底物重组蛋白进行纯化和透析并保存备用;利用A型肉毒毒素轻链(ALc)对重组蛋白进行酶切检测活性;对本检测方法的条件进行优化;ALc切割荧光标记底物测定其酶动力学参数K_(m)与K_(cat)值。结果重组表达质粒构建成功,通过大肠杆菌表达系统表达后检测明显出现目的条带,对其纯化后获得的重组蛋白纯度在90%左右,命名重组蛋白为CYA。对CYA通过酶ALc、B型肉毒毒素轻链(BLc)进行酶切鉴定,结果显示CYA只能被ALc酶切产生与预期相符的两个蛋白片段,不能被BLc酶切。对基于FRET底物的条件优化得到:设定滤光片灵敏度在65~110之间;实时动态检测间隔为2 min/次,动态检测时间为30~120 min,底物CYA合适的浓度范围0.5~32μmol/L。CYA在ALc酶作用下随时时间的变化与荧光值528与485的比值作图最小在0.5左右,最大时约为0.9。酶动力学参数测定ALc切割CYA的值K_(cat)值为(5±0.4)s^(-1)和K_(m)为(2.33±0.21)μmol/L。结论成功构建了基于FRET技术的A型肉毒毒素活性检测的高通量体外分析方法。

关键词： FRET 肉毒毒素高通量检测

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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染小鼠致肺炎的模型构建与特征分析

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中国人兽共患病学报 2023年第5期39卷 447-454页

作者：赵玥周冬生杨文慧秦佟童吕蒙翟丽娜张丽丽商正玲贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵阳550025 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 军事科学院军事医学研究院实验动物中心北京100071

目的建立耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的BALB/c小鼠吸入感染肺炎恢复模型,并评价模型的病原学、病理学、免疫学特征。方法将MRSA以气溶胶肺递送途径感染小鼠,在7 d内观察小鼠状态与死... 详细信息

目的建立耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的BALB/c小鼠吸入感染肺炎恢复模型,并评价模型的病原学、病理学、免疫学特征。方法将MRSA以气溶胶肺递送途径感染小鼠,在7 d内观察小鼠状态与死亡情况。选择亚致死剂量构建小鼠肺炎恢复模型,检测感染后小鼠的血液及心、肝、脾、肺、肾组织中的细菌载量及病理变化,并对血清与肺泡灌洗液中的细胞因子及肺组织的重要细胞群的变化趋势进行检测。结果致死剂量感染后小鼠的死亡时间集中在48 h内。亚致死剂量感染小鼠后,肺部的病变以48~72 h最为严重,其余组织器官无严重病变;多种细胞因子在12~48 h浓度升高至峰值,在96 h下降至接近感染前水平;在感染后48 h内的肺中,中性粒细胞、树突状细胞、炎性单核细胞、间质巨噬细胞和内皮细胞的比例明显增加,而T细胞、B细胞、肺泡巨噬细胞和上皮细胞的比例则下降。大部分细胞群的比例在96 h恢复至接近感染前水平。结论本研究成功构建了小鼠吸入MRSA感染肺炎恢复模型,并通过多种指标的检测明确0~96 h是小鼠感染后的应答关键期。该小鼠模型可用于深入开展MRSA感染的发病机理、免疫调控、治疗评价等研究,具有良好的应用价值。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌小鼠模型肺部感染气溶胶

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SARS-CoV-2亚单位疫苗制备及免疫原性初步研究

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病毒学报 2024年第5期40卷 943-951页

作者：徐骁黄涛刘铁柱芜为孙丽娜李川李建东王世文王希良传染病溯源与智能决策全国重点实验室中国疾病预防控制中心病毒性疾病预防控制所北京100052 国家卫生健康委医学病毒学与病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 病原与生物安全国家重点实验室军事医学科学院北京微生物与流行病学研究所北京100071

严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)自2019年年末出现以来,给全人类造成了严重的公共卫生事件和社会经济负担。本实验以SARS-CoV-2突变株XBB1.5的受体结合域(Receptor binding domain,RBD)序列为疫苗核心分子串联SARS-CoV-2的全长S蛋白制备了亚单位纳米颗粒疫苗。将S蛋白的6个氨基酸残基突变为6个脯氨酸残基,提高表达量和蛋白质分子的稳定性。而且将弗林酶酶切位点进行突变以增加蛋白质的稳定性。在羧基端串联昆虫铁蛋白的氨基酸序列,利用铁蛋白纳米颗粒多面体可结合抗原蛋白的特性,增加抗原递呈。在氢氧化铝和CpG1018双佐剂组合免疫小鼠后,可诱导小鼠产生针对SARS-CoV-2多种变异株的中和抗体,且可诱导小鼠产生了较强的细胞免疫和体液免疫。本研究表明,XBB1.5突变株RBD区域串联S蛋白全长序列及昆虫铁蛋白制备的纳米颗粒疫苗可以有效预防SARS-CoV-2变体,是一个很好的候选疫苗分子。

关键词：新型冠状病毒亚单位疫苗受体结合域血管紧张素转化酶2

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118　Fv抗体研究的新进展——二硫键稳定性Fv抗体（dsFv）

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国外医学免疫学分册 2021年第5期21卷 258-262页

作者：宋宏彬毛春生王海涛徐德忠第四军医大学流行病学教研军事医学科学院微生物流行病研究所

单链抗体（scFv）虽然有诸多优点，如分子小，易通过血管壁，穿透实体瘤，但其稳定性差，亲和力较低。近年来出现了二硫键稳定性Fv抗体（dsFv），就是在V H和V L间通过形成二硫键来稳定Fv片段，dsFv极大地提高了Fv片段的稳定... 详细信息

单链抗体（scFv）虽然有诸多优点，如分子小，易通过血管壁，穿透实体瘤，但其稳定性差，亲和力较低。近年来出现了二硫键稳定性Fv抗体（dsFv），就是在V H和V L间通过形成二硫键来稳定Fv片段，dsFv极大地提高了Fv片段的稳定性和亲和力，不仅继承了scFv的优点，也弥补了其缺点，从而极大地提高了dsFv和dsFv-免疫毒素在临床上的应用价值。

关键词： Fv抗体 dsFv dsFv-免疫毒素

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传染病监测预警体系智慧化建设的特点、功能与实施策略

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疾病监测 2025年第1期40卷 16-22页

作者：霍大柱张婷李中杰刘珏方立群兰亚佳叶楚楚范子亮王丽萍杨维中王辰中国医学科学院北京协和医学院卫生健康管理政策学院北京100730 中国医学科学院北京协和医学院群医学及公共卫生学院北京100730 北京大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系北京100191 军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071 四川大学华西公共卫生学院四川成都610041 上海市浦东新区疾病预防控制中心急性传染病防治科上海200136 潍坊市疾病预防控制中心传染病防制科山东潍坊261061 中国疾病预防控制中心传染病管理处传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室北京102206

本研究系统探讨总结了传染病监测预警体系智慧化建设的主要特点、关键功能、模式变革、价值意义及实施策略。研究表明,智慧化建设以体系整体性优化、数据驱动、新一代信息技术深度融合以及将城市作为建设基本单元为主要特点,应具备多源... 详细信息

本研究系统探讨总结了传染病监测预警体系智慧化建设的主要特点、关键功能、模式变革、价值意义及实施策略。研究表明,智慧化建设以体系整体性优化、数据驱动、新一代信息技术深度融合以及将城市作为建设基本单元为主要特点,应具备多源数据智能采集、多模态数据治理、多点触发智能预警、疫情趋势预测、智能辅助决策及可视化平台展示等六大关键功能,推动监测预警模式实现了从单一渠道到多源整合、从被动监测到主动感知、从“苗头”识别到风险预测以及从经验驱动到数据赋能的全面变革,并提出通过嵌入智慧城市治理框架、推动跨部门数据标准化治理、培养多学科交叉人才及强化数据安全与伦理保障等实施策略,为构建智慧高效、韧性可持续的传染病监测预警体系提供了理论指导。

关键词：传染病监测预警体系智慧化特点功能实施策略

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DNA甲基化与病毒感染的研究进展

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微生物学免疫学进展 2022年第4期50卷 60-65页

作者：赵志艳(综述) 张森(审校) 姜涛(审校) 安徽医科大学基础医学院微生物教研室安徽合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

DNA甲基化是基因表达的表观遗传调控机制之一,在细胞分化和疾病发生过程中发挥着重要的作用。病毒感染可导致DNA甲基化水平变化,从而影响疾病的发生与发展。随着全基因组甲基化测序等生物学新技术的飞速发展,对DNA甲基化也有了更深的认... 详细信息

DNA甲基化是基因表达的表观遗传调控机制之一,在细胞分化和疾病发生过程中发挥着重要的作用。病毒感染可导致DNA甲基化水平变化,从而影响疾病的发生与发展。随着全基因组甲基化测序等生物学新技术的飞速发展,对DNA甲基化也有了更深的认识。现就DNA甲基化和去甲基化的主要影响因素以及病毒感染过程中导致甲基化水平改变的机制做一概述,为从表观遗传角度研究病毒致病机制提供一定的理论依据。

关键词：表观遗传学 DNA甲基化 DNA去甲基化病毒感染

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低温和短日照诱导白纹伊蚊滞育的代谢适应研究

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中国媒介生物学及控制杂志 2024年第2期35卷 145-149页

作者：王淼简藓懿刘庆梁国锐谢静文王明姜玉庭赵彤言郭晓霞安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全全国重点实验室北京100071

目的检测白纹伊蚊滞育期间成蚊及卵内总糖、糖原、总胆固醇、甘油三酯、山梨醇、海藻糖指标含量的变化,为白纹伊蚊的滞育生理学研究提供理论基础。方法在实验室条件下,通过设置短日照和低温诱导白纹伊蚊滞育,取产卵后雌蚊及滞育维持期蚊... 详细信息

目的检测白纹伊蚊滞育期间成蚊及卵内总糖、糖原、总胆固醇、甘油三酯、山梨醇、海藻糖指标含量的变化,为白纹伊蚊的滞育生理学研究提供理论基础。方法在实验室条件下,通过设置短日照和低温诱导白纹伊蚊滞育,取产卵后雌蚊及滞育维持期蚊卵,对总糖、糖原、海藻糖、甘油三酯、总胆固醇、山梨醇等生化物质进行提取,通过酶标仪检测其含量。运用GraphPad 8.0软件对实验数据进行非配对t检验统计分析。结果在滞育诱导条件下,白纹伊蚊成蚊总糖、糖原、海藻糖、山梨醇、甘油三酯、总胆固醇含量分别为(21.60±2.21)、(28.23±0.16)、(6.89±0.28)、(21.71±3.89)、(52.54±4.98)mg/g和(19.08±1.68)μmol/g,总糖、糖原、山梨醇较正常发育组高(均P<0.05)。蚊卵内总糖、糖原、海藻糖、总胆固醇生化指标含量分别为(103.94±8.06)、(8.61±1.54)、(1.35±0.07)mg/g和(13.58±0.28)μmol/g,均高于正常发育组(均P<0.01)。结论白纹伊蚊在滞育诱导条件下,卵内及成蚊体内生化指标发生不同程度的升高。总糖、糖原、海藻糖、总胆固醇等生化指标在蚊虫滞育生理中的作用在接下来的实验中可以进一步研究。

关键词：滞育白纹伊蚊滞育卵代谢

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新型脆弱拟杆菌ZY-312多糖TP2安全性评价

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现代消化及介入诊疗 2024年第10期29卷 1173-1179页

作者：邓慧敏杨斯琪毕玉晶刘洋洋王晔白杨杨瑞馥智发朝惠州市中心人民医院消化内科 516000 广州知易生物科技有限公司 510515 南方医科大学南方医院消化病学研究所消化内科广东省消化病学重点实验室 510515 军事医学科学院、微生物与流行病学研究所、病原与生物安全国家重点实验室 100071 南方医科大学南方医院增城院区消化内科 511340

目的通过细胞实验及动物实验评价一株新型脆弱拟杆菌ZY-312菌株表面多糖TP2的安全性。方法通过MTT法及实时细胞分析仪器检测不同剂量浓度的TP2对LoVo、SW480、HT-29细胞系的存活、黏附、增殖影响以检测TP2细胞毒性;给予SPF级6~8周龄BAL... 详细信息

目的通过细胞实验及动物实验评价一株新型脆弱拟杆菌ZY-312菌株表面多糖TP2的安全性。方法通过MTT法及实时细胞分析仪器检测不同剂量浓度的TP2对LoVo、SW480、HT-29细胞系的存活、黏附、增殖影响以检测TP2细胞毒性;给予SPF级6~8周龄BALB/c小鼠灌服50μg TP240次(隔日1次,共80日),监测一般情况、评估脏器病理、检测血清炎症因子及肠道菌群变化评估TP2对活体动物的影响。结果不同剂量(10~1000μg/mL)对结肠细胞系的存活、黏附、增殖无显著影响;长期服用TP2不导致小鼠腹泻、体重下降,不引起脏器病理变化,不引起血清炎症因子升高,并能显著增加小鼠肠道菌群的多样性,增加Bacteroidete、Muribaculaceae、Prevotellaceae等肠道菌群的丰度,展示了其调节肠道菌群的作用。结论脆弱拟杆菌ZY-312表面多糖TP2具有细胞及动物安全性,有望成为一种应用于临床的新型生物制剂。

关键词：脆弱拟杆菌多糖A 安全性评价肠道菌群

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