检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2005年第4期21卷 452-455页

作者：李韩平郑玉玲周宏熊正英姜永强军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 军事医学科学院生物工程研究所北京100071 陕西师范大学运动生物学研究所陕西西安710062

目的:从噬菌体展示肽库中,筛选可与肝癌细胞特异性结合的抗体模拟肽。方法:通过生物淘选使噬菌体富集。利用ELISA法,鉴定噬菌体单克隆原种的亲和性,并进行统计学分析。通过竞争ELISA,分析筛选所得抗体模拟肽的结合位点,并进一步分析抗... 详细信息

目的:从噬菌体展示肽库中,筛选可与肝癌细胞特异性结合的抗体模拟肽。方法:通过生物淘选使噬菌体富集。利用ELISA法,鉴定噬菌体单克隆原种的亲和性,并进行统计学分析。通过竞争ELISA,分析筛选所得抗体模拟肽的结合位点,并进一步分析抗体模拟肽的序列组成。结果:随着淘选次数的增加,出现噬菌体的富集。ELISA的结果显示,相对于正常肝细胞,筛选所得环状7肽对肝癌细胞系SMMC7721和BEL7402均有良好的结合活性(P<0.05),且与SMMC7721细胞的结合活性明显优于与BEL7402细胞的亲和性(P<0.05)。在α=0.01的水平上,7肽单克隆噬菌体原种可明显与scFv竞争结合SMMC7721细胞(0.005所挑选的7肽阳性克隆的测序结果均相同。结论:通过淘选获得的抗体模拟肽(CLPRQSSFC)是有效的,为导向治疗提供了新的实验依据。

关键词：噬菌体肽库淘选肝细胞癌

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单链二硫键稳定抗体靶向超抗原SEA(D227A)分子的表达、纯化及鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第3期21卷 269-272页

作者：郝淮杰郑玉玲余多慰马茹姜永强南京师范大学生命科学学院分子生物学实验室江苏南京210097 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:提高抗肝癌靶向超抗原SEA(D227A)的产量和稳定性,构建单链二硫键稳定抗体靶向超抗原分子scdsFv-SEA(D227A)。方法:构建scdsFv SEA(D227A)表达质粒,用IPTG诱导其在大肠杆菌BL21plusS表达。包涵体经洗涤和复性后,用QSepharoseHP和Hip... 详细信息

目的:提高抗肝癌靶向超抗原SEA(D227A)的产量和稳定性,构建单链二硫键稳定抗体靶向超抗原分子scdsFv-SEA(D227A)。方法:构建scdsFv SEA(D227A)表达质粒,用IPTG诱导其在大肠杆菌BL21plusS表达。包涵体经洗涤和复性后,用QSepharoseHP和Hiprep26/60SephacrylS-200HR纯化。纯化蛋白经AMS烷化处理并结合PAGE电泳来检测二硫键形成情况,并通过ELISA和MTS分别检测重组蛋白与肝癌细胞的结合活性、稳定性和细胞杀伤活性。结果:重组蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上。通过复性及QSepharoseHP离子交换柱和Hiprep26/60SephacrylS-200H凝胶过滤两步纯化后,获得目的蛋白,每升诱导菌液的产量高达60mg。活性测定结果表明,相比与单链抗体靶向超抗原和二硫键抗体靶向超抗原SEA,二硫键抗体靶向超抗原在不影响结合活性和杀伤效果的情况下,稳定性有了较大提高。结论:建立了一种新的稳定的免疫毒素和提高其产量的方法,为hscFv25抗体靶向超抗原的临床应用奠定了基础,同时为其他低稳定性或低产量抗体的改造提供了借鉴的方法。

关键词：单链二硫键稳定抗体产量超抗原 SEA(D227A) 稳定性

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肠上皮内淋巴细胞对肠上皮屏障功能的影响

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军事医学科学院院刊 2005年第4期29卷 301-304页

作者：徐鹏辉高杰英陈德蕙陈洁曾丽玲何乐思陈小章军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 香港中文大学上皮细胞生物学研究中心

目的:研究在痢疾志贺菌F2a-12脂多糖刺激下,大鼠小肠上皮内淋巴细胞(IEL)对人结肠癌上皮细胞系Caco-2屏障功能的影响。方法:新鲜分离的大鼠小肠IEL与Caco-2共培养,并用F2a-12LPS刺激共培养细胞。通过检测短路电流、紧密连接相关蛋白表... 详细信息

目的:研究在痢疾志贺菌F2a-12脂多糖刺激下,大鼠小肠上皮内淋巴细胞(IEL)对人结肠癌上皮细胞系Caco-2屏障功能的影响。方法:新鲜分离的大鼠小肠IEL与Caco-2共培养,并用F2a-12LPS刺激共培养细胞。通过检测短路电流、紧密连接相关蛋白表达及透射电镜来反映上皮屏障功能的变化。结果:共培养后跨上皮电阻增加,但在LPS刺激后显著降低;紧密连接相关蛋白ZO-2mRNA表达在共培养后增加,LPS刺激后共培养细胞ZO-1mRNA表达显著下降;透射电镜下可见共培养后细胞间紧密连接显著增强,但在LPS刺激后共培养细胞间的连接几乎消失。首次在电镜下发现上皮细胞与IEL间有连接样结构的存在,为其相互作用提供了形态学的证据。结论:IEL对上皮屏障功能具双向调节作用,在生理状态下增强,但在感染信号存在时降低。

关键词：肠黏膜上皮细胞上皮内淋巴细胞共培养跨上皮电阻紧密连接屏障功能

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SARS-CoV S蛋白受体结合区的重组表达及免疫原性分析

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中国病毒学 2005年第5期20卷 472-475页

作者：马翠卿周育森王弋嘉郭彦管洁魏林何玉先军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 河北医科大学免疫学教研室河北石家庄050017

为了表达SARS-CoV的S蛋白的受体结合区并对其免疫原性进行分析,用PCR方法扩增S蛋白的受体结合区基因片段,克隆至原核表达质粒pET-32a+并在大肠杆菌中表达,应用Western-blot鉴定表达的目的蛋白,而后以该蛋白作为诊断抗原包被酶联板来检... 详细信息

为了表达SARS-CoV的S蛋白的受体结合区并对其免疫原性进行分析,用PCR方法扩增S蛋白的受体结合区基因片段,克隆至原核表达质粒pET-32a+并在大肠杆菌中表达,应用Western-blot鉴定表达的目的蛋白,而后以该蛋白作为诊断抗原包被酶联板来检测20份SARS病人血清和28份健康人血清,结果原核表达的S蛋白能够和所用的SARS病人血清反应。这提示表达的S重组蛋白具有良好的抗原性。将变性纯化的重组蛋白和复性蛋白分别皮下免疫小鼠,第三次免疫一周后收集抗血清,用ELISA测定抗体和同时测定中和抗体活性。用变性的抗原免疫的小鼠血清均无中和活性;而用复性的蛋白免疫的小鼠产生了中和抗体。实验表明,S蛋白受体结合区无线性中和表位,中和抗体的产生是由构象表位诱导的。提示该蛋白有可能应用于亚单位疫苗的研究。

关键词：严重急性呼吸窘迫综合征病毒(SARS-CoV) 刺突蛋白(S蛋白) 受体结合区

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马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01株中和作用的研究

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微生物学免疫学进展 2005年第4期33卷 1-6页

作者：石辛甫张良艳赵光宇邢丽安玉军刘士山朱和平王希良军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学实验室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

观察马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01毒株的中和作用,为马抗SARS-CoV免疫球蛋白用于SARS的治疗提供科学的依据。采用CPE、MTT测定马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01株的中和作用。结果显示,马抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab’)... 详细信息

观察马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01毒株的中和作用,为马抗SARS-CoV免疫球蛋白用于SARS的治疗提供科学的依据。采用CPE、MTT测定马抗SARS-CoV免疫球蛋白对SARS-CoV GZ-01株的中和作用。结果显示,马抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab’)2治疗性抗体对SARS-CoV GZ-01株具有很好的中和作用,三批马抗SARS-CoV免疫球蛋白的CPE和MTT中和效价分别达到1:6400、1:6400、1:12800,且两种方法测得结果一致。

关键词： SARS SARS-CoV GZ-01株马抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab')2 中和抗体活性

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单克隆抗体夹心ELISA检测SARS病毒抗原的探索

单克隆抗体夹心ELISA检测SARS病毒抗原的探索

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第二届全国现代免疫诊断技术学术研讨会

作者：李佳明杨保安杨银辉常国辉刘洪吕富双尉继征祝庆余军事医学科学院微生物流行病学研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的：探索单克隆抗体(McAb)夹心-ELISA方法检测SARS-CoV抗原的效果. 方法:利用夹心-ELISA法比较McAb及其组合捕捉及标记SARS-CoV抗原的效果,采用过碘酸钠法标记HRP,用优化后的条件检测SARS-CoV. 结果:从12株抗SARS-CoV鼠McAb中... 详细信息

目的：探索单克隆抗体(McAb)夹心-ELISA方法检测SARS-CoV抗原的效果. 方法:利用夹心-ELISA法比较McAb及其组合捕捉及标记SARS-CoV抗原的效果,采用过碘酸钠法标记HRP,用优化后的条件检测SARS-CoV. 结果:从12株抗SARS-CoV鼠McAb中筛选出组合2A31C5用于捕捉SARS-CoV、1A5/1B4用于标记辣根过氧化物酶(HRP);优化后2A3/1C5的工作浓度为1∶4000、HRP-1A5/1B4工作浓度为1∶2000;本方法检测SARS-CoV的敏感度为105pfu/ml. 结论:McAb夹心-ELISA法可特异性检测SARS-CoV抗原.

关键词： SARS-CoV抗原夹心-ELISA法单克隆抗体急性呼吸综合症冠状病毒免疫诊断

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新疆绳蚋一新种记述(双翅目:蚋科)(英文)

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寄生虫与医学昆虫学报 2005年第3期12卷 177-179页

作者：蔡茹安继尧李朝品军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室2004DAV00214 安徽理工大学医学院病原学与免疫学教研室

记述采自新疆维吾尔自治区阿勒泰地区蚋属绳蚋亚属Simulium(Gomphostilbia)一新种,即阿勒泰绳蚋Simulium(Gomphostilbia)altayensesp. nov.,仅对雌虫形态进行了描述并与其近缘种比较作分类讨论。

关键词：双翅目蚋科蚋属绳蚋亚属新种新疆维吾尔自治区新种记述双翅目阿勒泰地区蚋科绳蚋亚属分类讨论 sp. 近缘种

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新疆绳蚋一新种记述(双翅目:蚋科)

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寄生虫与医学昆虫学报 2005年第3期12卷 177-179页

作者：蔡茹安继尧李朝品军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室2004DAV00214北京100071 安徽理工大学医学院病原学与免疫学教研室合肥232001

记述采自新疆维吾尔自治区阿勒泰地区蚋属绳蚋亚属Simulium(Gomphostilbia)一新种,即阿勒泰绳蚋Simulium (Gomphostilibia)altayense sp。nov。,仅对雌虫形态进行了描述并与其近缘种比较作分类讨论。

关键词：新疆[维吾尔自治区] 蚋科动物

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