检索结果-内蒙古大学图书馆

中国媒介生物学及控制杂志 2016年第2期27卷 179-180页

作者：蔡茹张依生刘一荻储雅雅安继尧安徽理工大学医学院病原生物学教研室安徽淮南232001 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的调查安徽省黄山和九华山旅游区蚋类并进行区系分类,了解两地区的蚋类本底资料。方法 2014年5-7月选取黄山和九华山旅游区5个不同地理位置的采集地点,采用常规方法捕获幼蚋,经隔离培养育出成虫,制片、鉴定、编制名录。结果共捕获蚋类... 详细信息

目的调查安徽省黄山和九华山旅游区蚋类并进行区系分类,了解两地区的蚋类本底资料。方法 2014年5-7月选取黄山和九华山旅游区5个不同地理位置的采集地点,采用常规方法捕获幼蚋,经隔离培养育出成虫,制片、鉴定、编制名录。结果共捕获蚋类6种,含1新种。结论安徽省黄山和九华山旅游区蚋类具有多样性,具有东洋界华中区的区系特征。

关键词：蚋科名录安徽省

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创建国家卫生城市对病媒生物防治效果的影响研究

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中华卫生杀虫药械 2016年第2期22卷 145-147,152页

作者：齐宏亮董言德梅扬曾晓芃胡小濛赵彤言军事医学科学院微生物流行病学研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 国家卫生计生委疾病预防控制局北京100044 北京市疾病预防控制中心北京100013

目的评价创建国家卫生城市对病媒生物防治工作的影响。方法配对选择20个卫生城市和20个非卫生城市,分析病媒生物防治工作的政府重视因素、工作开展因素和防治效果等方面的差异。结果国家卫生城市建成区面积和人均GDP与非卫生城市相比无... 详细信息

目的评价创建国家卫生城市对病媒生物防治工作的影响。方法配对选择20个卫生城市和20个非卫生城市,分析病媒生物防治工作的政府重视因素、工作开展因素和防治效果等方面的差异。结果国家卫生城市建成区面积和人均GDP与非卫生城市相比无显著差异(P>0.05);国家卫生城市与非卫生城市的管理制度、防治经费、编制人员、抗药性监测工作、病媒生物密度达标情况、病媒生物防治效果经统计学分析P<0.01;专业机构、专业机构管理间P<0.05;国家卫生城市均优于非国家卫生城市。结论创建国家卫生城市对推动病媒生物防治工作的开展具有积极作用。

关键词：国家卫生城市病媒生物防治影响因素

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猪链球菌2型Ⅳ型分泌系统组分VirD4与毒力相关性分析

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微生物学报 2015年第5期55卷 643-649页

作者：王俊平郑玉玲骈亚亚郭洁郝淮杰姜永强军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

【目的】构建猪链球菌2型强毒株05ZYH33毒力岛89 K上的Ⅳ型分泌系统组分Vir D4敲除突变株,初步分析其活性和毒力,为进一步研究猪链球菌2型在逃避宿主天然免疫杀伤中的作用提供基础。【方法】以05ZYH33基因组为模板,PCR扩增Vir D4基因上... 详细信息

【目的】构建猪链球菌2型强毒株05ZYH33毒力岛89 K上的Ⅳ型分泌系统组分Vir D4敲除突变株,初步分析其活性和毒力,为进一步研究猪链球菌2型在逃避宿主天然免疫杀伤中的作用提供基础。【方法】以05ZYH33基因组为模板,PCR扩增Vir D4基因上下游同源臂,以穿梭质粒p SET1为模板,PCR扩增氯霉素抗性基因Cm,通过重叠PCR技术搭建上述3个片段并连接至温敏载体p SET4s,构建基因敲除载体p SET4s∷Vir D4;通过同源重组构建基因敲除突变株ΔVir D4;通过体外全血杀伤实验、CD1小鼠竞争感染及攻毒实验对突变株和野生株的毒力进行比较分析。【结果】获得了基因敲除突变株ΔVir D4,通过对比发现其毒力与野生株相比有所降低。【结论】猪链球菌2型Ⅳ型分泌系统组分Vir D4与其毒力相关,并在早期抵抗天然免疫细胞杀伤中发挥一定作用。

关键词：猪链球菌2型 89 K毒力岛 Ⅳ型分泌系统毒力

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创建国家卫生县城对蚊媒防制的影响研究

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中华卫生杀虫药械 2016年第4期22卷 366-371页

作者：杨娜董言德柳伟伟齐宏亮李静佟颖张勇王炳玲曾晓芃崔钢赵彤言军事医学科学院微生物流行病学研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 国家卫生计生委疾病预防控制局北京100044 北京市疾病预防控制中心北京100013 青岛市疾病预防控制中心山东青岛266033

目的研究创建国家卫生县城对蚊媒防制的影响。方法通过德尔菲法筛选出影响灭蚊工作的主要因素,对全国病媒生物防制基本信息调查的国家卫生县城和非国家卫生县城、灭蚊达标县和灭蚊未达标县分别进行统计学分析,综合对照分析创建国家卫生... 详细信息

目的研究创建国家卫生县城对蚊媒防制的影响。方法通过德尔菲法筛选出影响灭蚊工作的主要因素,对全国病媒生物防制基本信息调查的国家卫生县城和非国家卫生县城、灭蚊达标县和灭蚊未达标县分别进行统计学分析,综合对照分析创建国家卫生县城是否对蚊媒防制工作有促进作用。结果灭蚊达标是蚊媒防制工作的最重要效果评价指标,灭蚊达标县和灭蚊未达标县的多因素分析结果显示,是否是国家卫生县城与灭蚊达标有明显关联。国家卫生县城灭蚊达标比例是非国家卫生县城灭蚊达标比例的2倍,国家卫生县城在政府重视、政策保障、经费投入、防制机构建设、专业队伍建设、社会化服务机构建设管理、密度监测和抗药性监测工作等情况均优于非国家卫生县城。结论创建国家卫生县城对蚊媒防制工作有显著促进作用。

关键词：蚊媒防制国家卫生县城影响因素

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呼吸道合胞病毒的分离鉴定及其致病力的初步评价

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免疫学杂志 2015年第4期31卷 322-325页

作者：朱萍谷宏静谢正德周娅杨鹏辉王希良宁夏医科大学基础医学院病原生物学教研室银川750004 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京儿童医院病毒研究室 100045 解放军第302医院肝胆外科北京100039

目的分离鉴定临床呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV),评价其致病力,为疫苗评价及致病机制的研究提供实验材料。方法收集临床呼吸道感染重症患儿的鼻咽分泌物样本进行RT-PCR初步鉴定,通过病毒培养,空斑纯化,电镜观察及病... 详细信息

目的分离鉴定临床呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV),评价其致病力,为疫苗评价及致病机制的研究提供实验材料。方法收集临床呼吸道感染重症患儿的鼻咽分泌物样本进行RT-PCR初步鉴定,通过病毒培养,空斑纯化,电镜观察及病毒滴度测定,筛选出1株呼吸道合胞病毒候选株,经全基因组测序后命名为BJ016。选用14日龄C57乳鼠,每组26只,采用BJ016为实验组,PBS为对照组,分别对小鼠滴鼻感染,30μl/只。连续14日监测2组小鼠体质量变化及死亡率,肺组织的病毒载量、湿干比,HE染色观察肺病理变化并计数炎性细胞总量,同时采用CBA测定血清中细胞因子的变化。结果 100份临床呼吸道感染重症患儿鼻咽分泌物样本中,RT-PCR鉴定为RSV A亚型阳性共21例,经病毒分离培养、空斑纯化、电镜观察及RT-PCR鉴定后得到16株RSV临床分离株,通过TCID50测定病毒滴度筛选出1株滴度为106.5TCID50/ml的候选株,基因组序列分析显示其为NA1基因型,命名为BJ016。BJ016感染14日龄C57乳鼠后造成肺损伤,在第5日达到发病高峰时测定病载、湿干比、病理检测并计数炎性细胞,实验组较对照组具有明显统计学差异,血清中MCP-1、IL-6、G-CSF及MIP-1α均显著性升高。结论成功分离出1株能致死14日龄C57乳鼠的RSV病毒株并初步评价了其致病力,为疫苗评价及RSV致病机制的研究提供了良好的实验材料。

关键词： RSV 病毒分离 C57乳鼠致病力

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携带脑组织特异性microRNA靶序列的重组日本脑炎病毒的构建与鉴定

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解放军医学杂志 2014年第6期39卷 429-432页

作者：曹文媛叶青李晓峰王洪江朱舜亚秦鄂德江振友秦成峰暨南大学医学院微生物学与免疫学系广州510632 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的构建携带脑组织特异性miRNA靶序列的重组日本脑炎病毒株。方法利用反向遗传学技术将脑组织特异性的miR-124和miR-125靶序列引入日本脑炎病毒cDNA全长感染性克隆,将重组质粒用XhoⅠ线性化后采用SP6转录试剂盒进行体外转录,以获得的RN... 详细信息

目的构建携带脑组织特异性miRNA靶序列的重组日本脑炎病毒株。方法利用反向遗传学技术将脑组织特异性的miR-124和miR-125靶序列引入日本脑炎病毒cDNA全长感染性克隆,将重组质粒用XhoⅠ线性化后采用SP6转录试剂盒进行体外转录,以获得的RNA转染BHK-21细胞,37℃、5%CO2孵箱培养3d后取上清盲传1代观察细胞病变,并通过RT-PCR、细胞蚀斑形成实验和病毒生长曲线等方法对恢复病毒的生物学特性进行鉴定。结果成功在BHK-21细胞中拯救获得了携带miRNA靶序列的重组病毒,与野生型病毒株具有相似的蚀斑形态和生长特性。结论通过反向遗传学技术获得了携带脑组织特异性miRNA靶序列的重组日本脑炎病毒,为miRNA介导的组织特异性减毒机制研究奠定了基础。

关键词：微RNAs 脑炎病毒,日本感染性克隆疫苗

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艰难梭菌鞭毛帽蛋白的功能研究

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安徽医科大学学报 2014年第11期49卷 1582-1586页

作者：王德慧谭林林王琴陈芳红李涛王慧安徽医科大学军事医学科学院微生物流行病研究所微生物组学与生物信息学研究室合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的验证艰难梭菌鞭毛帽蛋白FliD的黏附细胞活性以推测其在艰难梭菌感染中的作用,并鉴定其抗原性以测试其应用于候选艰难梭菌疫苗组分的可能性。方法 PCR获取VPI 10463全长fliD基因,构建pET-22b-fliD原核表达质粒,转化至BL21（DE3）中,... 详细信息

目的验证艰难梭菌鞭毛帽蛋白FliD的黏附细胞活性以推测其在艰难梭菌感染中的作用,并鉴定其抗原性以测试其应用于候选艰难梭菌疫苗组分的可能性。方法 PCR获取VPI 10463全长fliD基因,构建pET-22b-fliD原核表达质粒,转化至BL21（DE3）中,诱导表达,Ni2＋亲和层析纯化,进行N端测序验证。蛋白3次皮下免疫大耳白兔后间接ELISA法检测其血清特异IgG水平并鉴定抗原性。间接免疫荧光染色后流式细胞术检测黏附Vero细胞能力。结果 VPI10463的fliD基因钓取成功,与GenBank公布的其他9株艰难梭菌的fliD基因相似度在89%～100%。pET-22b-fliD表达质粒构建成功,表达蛋白大小为56 ku,N端测序序列为MSSIS,与预期一致。一步纯化得到的蛋白纯度为99%以上。ELISA检测3次免疫后效价达到105。用流式细胞术检测其可以黏附在Vero细胞表面。结论构建的pET-22bfliD表达质粒成功表达FliD,具有黏附细胞活性,在艰难梭菌感染过程中起黏附因子作用,其具有较高的抗原性可以作为预防艰难梭菌感染的候选抗原之一。

关键词：艰难梭菌鞭毛帽蛋白FliD 重组表达流式细胞术黏附因子

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甲型H7N9流感裂解疫苗制备及免疫保护效果的评价

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免疫学杂志 2014年第7期30卷 608-611页

作者：陈锐段跃强赵忠鹏张良艳邢丽刘娜张立周娅王希良杨鹏辉宁夏医科大学基础医学院病原生物学和免疫学教研室银川750004 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军第302医院医疗部北京100039 总参警卫局卫生保健处北京100071

目的构建、拯救重配甲型H7N9流感病毒疫苗候选株并制备甲型H7N9流感裂解疫苗,动物实验评价甲型H7N9流感裂解疫苗的免疫原性及免疫保护性效果。方法采用反向遗传学技术将A/Anhui/1/2013(H7N9)疫苗株的HA、NA基因和A/Puerto Rico/8/34(PR8... 详细信息

目的构建、拯救重配甲型H7N9流感病毒疫苗候选株并制备甲型H7N9流感裂解疫苗,动物实验评价甲型H7N9流感裂解疫苗的免疫原性及免疫保护性效果。方法采用反向遗传学技术将A/Anhui/1/2013(H7N9)疫苗株的HA、NA基因和A/Puerto Rico/8/34(PR8)毒株的PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因进行重配,转染细胞后筛选拯救甲型H7N9流感病毒疫苗候选株,制备rgPR8-H7N9流感裂解疫苗抗原。腹腔注射免疫Balb/c小鼠,检测血清IgG、IgG1、IgG2a、HI效价,进一步用野生株攻毒,评价rgPR8-H7N9流感裂解疫苗的免疫保护效果。结果成功拯救甲型H7N9流感病毒疫苗候选株rgPR8-H7N9。制备的重配甲型H7N9流感裂解疫苗对小鼠产生较高的HI抗体效价。IgG1/IgG2a亚型检测结果表明小鼠体内以诱导体液免疫为主。攻毒实验显示甲型H7N9流感裂解疫苗能够有效降低肺部的病毒载量,肺组织病变显著减轻、体质量下降后趋于稳定,疫苗剂量达到15μg即可全部存活。A/Anhui/1/2013(H7N9)野生株流感病毒攻毒,甲型H7N9流感裂解疫苗能够达到保护小鼠效果。结论成功拯救重配甲型H7N9流感病毒疫苗候选株rgPR8-H7N9,制备的甲型H7N9流感裂解疫苗具有较好的免疫原性及免疫保护性,为H7N9流感裂解疫苗的研发及进入临床研究提供了实验依据。

关键词：反向遗传学 H7N9流感病毒裂解疫苗免疫保护性

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嵌合HAdV六邻体蛋白抗原表位的rFLU/HAdV/Hexon疫苗候选株构建及免疫效果研究

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免疫学杂志 2014年第5期30卷 375-381页

作者：刘娜卞成蓉陈锐段跃强邢丽周娅王希良杨鹏辉宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室银川750004 军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军第302医院医疗科北京100039 解放军第302医院临床检验中心北京100039

目的构建、拯救以PR8流感病毒为载体嵌合HAdV六邻体蛋白抗原表位的疫苗候选株,对其免疫原性及免疫保护性进行评价。方法应用反向遗传学技术,以流感病毒PR8为载体,将HAdV六邻体蛋白抗原表位的基因插入流感病毒非结构蛋白NS基因,构建重组... 详细信息

目的构建、拯救以PR8流感病毒为载体嵌合HAdV六邻体蛋白抗原表位的疫苗候选株,对其免疫原性及免疫保护性进行评价。方法应用反向遗传学技术,以流感病毒PR8为载体,将HAdV六邻体蛋白抗原表位的基因插入流感病毒非结构蛋白NS基因,构建重组质粒NS1-Hexon,将重组质粒与PR8流感病毒其他7个基因组质粒共转染COS-1/MDCK共培养细胞,成功拯救嵌合HAdV六邻体抗原表位重组疫苗候选株,命名为rFLU/HAdV/Hexon,通过HA、RT-PCR、IFA、Western blotting和电镜等方法对rFLU/HAdV/Hexon进行鉴定。rFLU/HAdV/Hexon经鸡胚培养、浓缩纯化后滴鼻免疫Balb/c小鼠,评价小鼠机体产生的体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫应答,进一步采用PR8流感病毒和HAdV-3病毒攻击小鼠评价其免疫保护性。结果成功拯救出基于PR8流感病毒为载体嵌合HAdV六邻体蛋白抗原表位的rFLU/HAdV/Hexon疫苗候选株。rFLU/HAdV/Hexon疫苗株形态符合流感病毒典型特征,能够诱导小鼠机体产生高效价的针对PR8和HAdV-3的特异性抗体,肺鼻灌洗液可检测到高效价的sIgA抗体;攻毒实验结果显示,rFLU/HAdV/Hexon疫苗株免疫小鼠可明显减轻感染症状、有效降低肺鼻的病毒载量、显著改善肺组织的病理病变情况。结论研制的嵌合HAdV六邻体蛋白抗原表位的rFLU/HAdV/Hexon疫苗株是有发展前景的腺病毒候选疫苗株,为腺病毒疫苗的研究提供了新思路。

关键词：腺病毒 PR8流感病毒载体六邻体蛋白抗原表位免疫应答免疫保护

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山羊支原体山羊肺炎亚种单克隆抗体的制备及抗体结合抗原表位的筛选

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中国畜牧兽医 2014年第8期41卷 21-24页

作者：郑莹莹骈亚亚储岳峰赵萍贺英简莹娜姜永强逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

本研究旨在制备山羊支原体山羊肺炎亚种(***,Mccp)的单克隆抗体并筛选与抗体结合的抗原表位。试验用甲醛灭活的Mccp免疫BALB/c小鼠,运用传统的细胞融合技术进行融合获得杂交瘤细胞,亚克隆,制备单克隆抗体腹水,采用酶联免疫技术(ELISA)... 详细信息

本研究旨在制备山羊支原体山羊肺炎亚种(***,Mccp)的单克隆抗体并筛选与抗体结合的抗原表位。试验用甲醛灭活的Mccp免疫BALB/c小鼠,运用传统的细胞融合技术进行融合获得杂交瘤细胞,亚克隆,制备单克隆抗体腹水,采用酶联免疫技术(ELISA)和免疫印迹(Western blotting)技术鉴定单克隆抗体的特异性及胶内酶切鉴定与抗体结合的抗原表位。最终成功筛选获得5株单克隆抗体,鉴定到3个与抗体结合的抗原表位,为下一步科学研究提供了初步且可靠的试验基础。

关键词：山羊支原体山羊肺炎亚种单克隆抗体抗体结合的抗原表位

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