检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2014年第6期30卷 469-473页

作者：袁媛刘鑫周娅段跃强杨晓岚张立赵忠鹏王希良宁夏医科大学基础医学院病原生物学和免疫学教研室银川750004 军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军第302医院临床检验中心北京100039 总参警卫局卫生保健处北京100017

目的运用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达EV71和CVA16的病毒样颗粒，并对纯化的重组EV71、CVA16双价病毒样颗粒疫苗进行免疫效果评价。方法构建重组杆状病毒Bacmid-P1-3CD，转染Sf9昆虫细胞，纯化EV71、CVA16的病毒样颗粒并检测其形态... 详细信息

目的运用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达EV71和CVA16的病毒样颗粒，并对纯化的重组EV71、CVA16双价病毒样颗粒疫苗进行免疫效果评价。方法构建重组杆状病毒Bacmid-P1-3CD，转染Sf9昆虫细胞，纯化EV71、CVA16的病毒样颗粒并检测其形态和生物特性；通过EV71、CVA16的病毒样颗粒免疫ICR雌鼠后，以EV71、CVA16强毒株腹腔攻击5日龄乳鼠，对重组EV71、CVA16型双价VLP免疫保护性进行评价。结果利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功构建并表达EV71和CVA16病毒样颗粒，颗粒大小约为23-30nm，存在Mr约39000VP1特异性蛋白表达。重组EV71、CVA16双价VLP疫苗免疫接种能够诱导小鼠机体产生高效价的特异性抗体（EV71中和抗体效价为1：960，CVA16中和抗体效价为1：624）并发挥优于单价VLP疫苗的有效免疫保护效果。结论重组EV71、CVA16型双价VLP疫苗免疫原性和保护性显著高于单价疫苗，为手足口病疫苗的研发提供了新的思路及实验基础。。

关键词： EV71 CVA16 双价疫苗病毒样颗粒

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长角血蜱携带发热伴血小板减少综合征病毒调查及基因特征分析

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中国病原生物学杂志 2014年第7期9卷 629-632页

作者：王黎源杨振东孙毅庄璐汤芳崔宁秦书理王炳军刘玮安徽医科大学军事医学科学院临床学院流行病与卫生统计学教研室安徽合肥230032 解放军第一五四医院河南信阳464000 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 武警疾病预防控制中心北京102206

目的探讨长角血蜱携带发热伴血小板减少综合征病毒（SFTSV）情况及其基因特征,分析长角血蜱在发热伴血小板减少综合征（SFTS）传播中的作用。方法在SFTS严重流行区河南省信阳市采集长角血蜱,采用实时RTPCR方法检测蜱中SFTSV核酸,阳性蜱... 详细信息

目的探讨长角血蜱携带发热伴血小板减少综合征病毒（SFTSV）情况及其基因特征,分析长角血蜱在发热伴血小板减少综合征（SFTS）传播中的作用。方法在SFTS严重流行区河南省信阳市采集长角血蜱,采用实时RTPCR方法检测蜱中SFTSV核酸,阳性蜱进行SFTSV全基因组序列测定,并与当地病人血液中的SFTSV序列及GenBank中公布的SFTSV全基因组序列进行比较。结果共检测285只长角血蜱,SFTSV携带率为20.4%（58/285）。其中,游离蜱携带率31.9%（46/144）,寄生蜱携带率8.5%（12/141）,差异有统计学意义（χ2=24.136,P〈0.01）。基于SFTSV的L、M和S片段构建的系统发育树,信阳地区长角血蜱的SFTSV序列与来自当地病人的SFTSV序列聚在同一分支,序列同源性分别为99.5%～99.7%,99.4%～99.5%和99.4%～99.5%。结论信阳地区SFTS高发病率与当地长角血蜱SFTSV高携带率有关,长角血蜱可能是SFTSV的传播媒介。

关键词：发热伴血小板减少综合征病毒全基因组长角血蜱传播媒介

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新型水包油佐剂SP01的安全性评价

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中国生物制品学杂志 2014年第7期27卷 885-889页

作者：姜佳琪于姝邢丽段跃强孟和宝力高牛燕王希良额尔敦内蒙古医科大学基础医学院免疫学教研室内蒙古呼和浩特010021 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国人民解放军第253医院免疫中心内蒙古呼和浩特010021

目的通过动物实验评价新型水包油佐剂SP01的安全性。方法通过昆明小鼠安全药理试验、昆明小鼠急性毒性试验、Hartley豚鼠过敏反应试验、溶血性试验、日本大白兔局部刺激性试验、SD大鼠长期毒性试验及BALB/c小鼠致突变、致畸、致瘤试验,... 详细信息

目的通过动物实验评价新型水包油佐剂SP01的安全性。方法通过昆明小鼠安全药理试验、昆明小鼠急性毒性试验、Hartley豚鼠过敏反应试验、溶血性试验、日本大白兔局部刺激性试验、SD大鼠长期毒性试验及BALB/c小鼠致突变、致畸、致瘤试验,对水包油佐剂SP01的安全性进行全面评价。结果水包油佐剂SP01对昆明小鼠的自主活动无明显影响;急性毒性试验中可观察到水包油佐剂SP01组昆明小鼠给药后无死亡,体重明显增加,且各组织器官无病理变化;水包油佐剂SP01注射豚鼠未见任何过敏反应及症状;溶血性试验结果显示,水包油佐剂SP01在体外对兔红细胞无溶血作用,不引起红细胞凝聚;将水包油佐剂SP01经日本大白兔耳缘静脉注射连续刺激5 d后,佐剂组与氯化钠注射液组家兔耳缘静脉给药部位肉眼观察均无明显变化,病理切片显微镜观察均未见炎性浸润、血管周围组织出血及坏死等刺激现象;将水包油佐剂SP01经肌肉连续注射大鼠1个月,佐剂组大鼠体重明显增加,精神状态、食欲、睡眠情况与氯化钠注射液组无明显差异,停药后连续观察3个月,大鼠精神状态、食欲、睡眠情况均良好;将水包油佐剂SP01连续经BALB/c小鼠腿部肌肉注射14 d后,其肌肉组织病理切片显示,与氯化钠注射液组小鼠的肌肉组织无明显差异。结论水包油佐剂SP01对实验动物无急性毒性、过敏反应、局部性刺激、长期毒性及致突变、致畸、致瘤作用,是安全、可应用的油类佐剂,本研究为该系列水包油佐剂的临床应用提供了实验依据。

关键词：水包油佐剂动物实验安全性评价

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H7亚型禽流感病毒感染人的组织嗜性分析

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科学通报 2013年第18期58卷 1701-1705页

作者：年庆功孙伟姜涛张雨李靖祝庆余秦成峰军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室病毒学专业实验室北京100071

截至2013年5月1日,我国大陆地区共报告确诊人感染H7N9禽流感病毒病例127例,其中死亡26人,公共卫生安全受到严重威胁.历史上,H7亚型禽流感病毒曾多次感染人类.早期报告的人感染H7亚型禽流感病毒主要表现为结膜炎等温和疾病,而此次H7N9禽... 详细信息

截至2013年5月1日,我国大陆地区共报告确诊人感染H7N9禽流感病毒病例127例,其中死亡26人,公共卫生安全受到严重威胁.历史上,H7亚型禽流感病毒曾多次感染人类.早期报告的人感染H7亚型禽流感病毒主要表现为结膜炎等温和疾病,而此次H7N9禽流感病毒感染却表现为严重的急性呼吸道疾病,呈现出不同寻常的感染特征.本文对H7亚型禽流感病毒感染人组织嗜性特征及其决定因素进行了解析,以期为此次H7N9疫情的科学防控提供依据.

关键词： H7N9 禽流感病毒人类感染组织嗜性

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猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_1000的表达、纯化及活性分析

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中国人兽共患病学报 2013年第8期29卷 757-761页

作者：王涛郑玉玲袁媛江华郝淮杰李雪琴姜永强安徽医科大学研究生学院合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

目的构建猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_1000基因的重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并研究其对细胞间紧密连接的调控作用。方法以05ZYH33基因组为模板设计引物,构建pET30a-SSU05_1000重组表达质粒,转化到大肠杆菌中诱导表达,用... 详细信息

目的构建猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_1000基因的重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并研究其对细胞间紧密连接的调控作用。方法以05ZYH33基因组为模板设计引物,构建pET30a-SSU05_1000重组表达质粒,转化到大肠杆菌中诱导表达,用镍亲和层析的方法对目的蛋白进行纯化,Western blot检测其对人脑微血管内皮细胞紧密连接的调控。结果构建的SSU05_1000重组表达质粒能够在大肠杆菌中高效表达,纯化的SSU05_1000蛋白纯度达90%以上,Western blot结果显示其与人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D3)相互作用后,可以下调细胞间紧密连接蛋白Claudin-5的表达。结论 SSU05_1000蛋白能够破坏人脑微血管内皮细胞的紧密连接结构,提示其在猪链球菌穿血脑屏障(BBB,bloodbrain barrier)过程中起重要作用。

关键词：猪链球菌 SSU05_1000 紧密连接

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基于NP和M1蛋白的甲型流感通用疫苗的初步研究

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免疫学杂志 2013年第5期29卷 376-381页

作者：王文娟刘坤段跃强高啸邢丽张良艳王希良杨鹏辉安徽医科大学研究生学院合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的克隆、表达并纯化NP-M1-HSP60融合蛋白,免疫Balb/c小鼠,评价其免疫原性及免疫保护性,为候选甲型流感通用疫苗抗原提供新靶标。方法合成NP-M1-HSP60融合基因,构建pET28a-NP-M1-HSP60重组质粒,表达并纯化NP-M1-HSP60融合蛋白,抗原与S... 详细信息

目的克隆、表达并纯化NP-M1-HSP60融合蛋白,免疫Balb/c小鼠,评价其免疫原性及免疫保护性,为候选甲型流感通用疫苗抗原提供新靶标。方法合成NP-M1-HSP60融合基因,构建pET28a-NP-M1-HSP60重组质粒,表达并纯化NP-M1-HSP60融合蛋白,抗原与SP01水包油佐剂混匀,制备候选甲型流感通用疫苗,滴鼻免疫Balb/c小鼠,评价其免疫原性及免疫保护性。结果成功构建pET28a-NP-M1-HSP60表达载体,表达并纯化了NP-M1-HSP60融合蛋白;与SP01水包油乳剂佐剂混合免疫小鼠后,小鼠血清IgG抗体效价较对照组显著提升,鼻、肺灌洗液中sIgA水平显著升高,IgG亚型分析及细胞因子分泌细胞实验表明该候选疫苗可诱导相对均衡的Th1和Th2反应。免疫后小鼠分别对100LD50剂量的A/Beijing/501/2009(H1N1)毒株,100LD50剂量的PR8(H1N1)毒株和50LD50剂量的A/ostrich/Suzhou/097/2003(H5N1)毒株的攻击分别具有100%、100%和67%保护效果。结论 NP-M1-HSP60融合蛋白抗原具有一定的效果,为发展甲型流感通用疫苗提供了实验依据。

关键词： NP M1 HSP60 流感病毒通用疫苗

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病原微生物实验室实验操作对室内空气产生微生物污染的研究

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军事医学 2013年第1期37卷 1-5页

作者：温占波陈咏杜茜杨文慧李劲松胡凌飞王洁李娜张柯殷喆董晓凯军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室国家生物防护装备工程技术中心中国医学科学院医学生物学研究所

目的通过模拟病原微生物实验室实验操作产生的微生物气溶胶,对实验室产生微生物污染风险进行定量研究,为实验操作人员危害评估和防护措施提供科学依据。方法使用黏质沙雷菌作为指示细菌,在实验室内对多种实验操作如吹吸混匀、培养瓶意... 详细信息

目的通过模拟病原微生物实验室实验操作产生的微生物气溶胶,对实验室产生微生物污染风险进行定量研究,为实验操作人员危害评估和防护措施提供科学依据。方法使用黏质沙雷菌作为指示细菌,在实验室内对多种实验操作如吹吸混匀、培养瓶意外跌落、正常离心、离心管破裂、注射攻毒、解剖动物和安全柜泄漏等进行正常操作和意外事故模拟,使用定量空气采样和沉降平皿的方法对各种操作造成的微生物气溶胶风险进行定量分析。结果在本实验条件下,局部环境产生的微生物气溶胶浓度差异较大。吹吸混匀、培养瓶意外跌落、正常离心、离心管破裂、注射攻毒、解剖动物和安全柜泄漏产生的最大源强分别为1409、9346、<10、138、>8232、<4和>801 CFU/m3。结论病原微生物实验室各种实验操作产生的气溶胶源强差异较大,在局部环境中可以产生较高的气溶胶污染,应加强实验技能的培训和一级呼吸道防护装备的应用。

关键词：病原微生物微生物气溶胶源强实验室感染

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重组嵌合表达G蛋白中和表位的流感病毒载体RSV疫苗构建和免疫保护效果

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免疫学杂志 2013年第5期29卷 369-375页

作者：卞成蓉刘娜邢丽段跃强王希良周娅杨鹏辉宁夏医科大学基础医学院病原生物学和免疫学教研室银川750004 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军第302医院临床检验中心北京100039

目的构建和拯救重组嵌合表达G蛋白表位的流感病毒载体RSV疫苗株,并通过动物实验评价其免疫原性及免疫保护性。方法利用流感病毒反向遗传学技术,以流感病毒为载体,将RSV保护性抗原G蛋白表位的基因插入到流感病毒非结构蛋白NS1基因,拯救... 详细信息

目的构建和拯救重组嵌合表达G蛋白表位的流感病毒载体RSV疫苗株,并通过动物实验评价其免疫原性及免疫保护性。方法利用流感病毒反向遗传学技术,以流感病毒为载体,将RSV保护性抗原G蛋白表位的基因插入到流感病毒非结构蛋白NS1基因,拯救重组嵌合表达G蛋白中和表位的流感病毒载体RSV疫苗株rFLU/RSV/G,进而对rFLU/RSV/G的特性进行全面鉴定。rFLU/RSV/G滴鼻免疫Balb/c小鼠,通过检测中和抗体效价、血清抗体(IgG、IgG1、IgG2a)和黏膜抗体sIgA效价以及细胞因子(IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ和TNF-α)的分泌量来评价机体产生的体液、细胞和黏膜免疫反应。攻毒实验评价rFLU/RSV/G的免疫保护性,观测小鼠的体质量变化、病毒载量、存活情况以及肺病理变化。结果成功拯救出重组嵌合表达G蛋白表位的流感病毒载体RSV疫苗株rFLU/RSV/G。重组病毒rFLU/RSV/G与流感病毒颗粒形态和大小分布相符,并且表达针对RSV的特异性蛋白NS1-G。动物实验表明rFLU/RSV/G诱导小鼠机体产生较高的中和抗体、RSV特异性的Th1型细胞免疫反应以及黏膜免疫反应。攻毒实验显示rFLU/RSV/G对RSV A2株和PR8流感病毒野毒株具有一定免疫保护效果,能够有效降低肺鼻的病毒载量,肺组织病变情况明显减轻,且无小鼠死亡。结论重组嵌合表达G蛋白表位的流感病毒载体RSV疫苗株rFLU/RSV/G是一个有前景的RSV候选疫苗株,具有较高的免疫原性和免疫保护性,值得在棉鼠和猴子进行进一步研究。

关键词：流感病毒 RSV G蛋白表位病毒载体

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相思子毒素A链截短片段作为候选疫苗的毒副作用分析

相思子毒素A链截短片段作为候选疫苗的毒副作用分析

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第十一届中国生物毒素研究及医药应用年会

作者：张弢王景林军事医学科学院微生物与流行病学研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

相思子毒素（ab血）是从植物相思子种子种提取的一种剧毒性蛋白毒素,是迄今为止所发现的毒性最强的一种植物毒素,小鼠腹腔LD约为0.04μg/kg,其毒性强度是蓖麻毒素的70多倍。相思子毒素为A-B链结构,A链为毒性链,B链为结合链。本实验构建... 详细信息

相思子毒素（ab血）是从植物相思子种子种提取的一种剧毒性蛋白毒素,是迄今为止所发现的毒性最强的一种植物毒素,小鼠腹腔LD约为0.04μg/kg,其毒性强度是蓖麻毒素的70多倍。相思子毒素为A-B链结构,A链为毒性链,B链为结合链。本实验构建了A链截短截短片段作为候选疫苗,截短片段免疫小鼠后,能保护小鼠至少抵抗20LD的天然相思子毒素攻击,通过体内外实验分析其毒副作用,为探索找寻毒副作用

关键词：相思子毒素候选疫苗毒副作用

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穿心莲内酯通过抗炎和调节免疫提高EV71感染小鼠的生存率

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免疫学杂志 2013年第9期29卷 737-744页

作者：管晨李敏任庆杰张伟单敏敏王融冰张广州刘清泉王希良赵忠鹏王玉光北京中医药大学第一临床学院中医内科 100029 军事医学科学院实验动物中心北京100071 军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 首都医科大学附属北京地坛医院感染科 100015 首都医科大学附属北京中医医院呼吸科 100010

目的阐明穿心莲内酯磺化物(喜炎平注射液)防治手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)的效果和机制。方法将不同质量浓度的喜炎平注射液分别作用于Vero细胞和7日龄乳鼠,观测细胞的CPE和乳鼠的死亡率,测定喜炎平注射液的CC50(50%cel... 详细信息

目的阐明穿心莲内酯磺化物(喜炎平注射液)防治手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)的效果和机制。方法将不同质量浓度的喜炎平注射液分别作用于Vero细胞和7日龄乳鼠,观测细胞的CPE和乳鼠的死亡率,测定喜炎平注射液的CC50(50%cell cytotoxicity)和MLD(median lethal dose);将1.25×107TCID50的71型肠道病毒(Enterovirus 71,EV71)BJ09/07毒株腹腔注射7日龄ICR乳鼠,建立HFMD重症感染模型;在喜炎平注射液无毒浓度下,通过比较喜炎平注射液药物组,相对于生理盐水对照组对EV71重症感染模型临床体征改善情况,测定喜炎平注射液防治EV71感染的效果;通过比较药物组,相对于对照组对EV71感染Vero细胞CPE的改善情况,测定喜炎平注射液的抗病毒效果;通过比较药物组和对照组的组织病变程度、炎症因子浓度、脾淋巴细胞增殖和激活程度,初步探索喜炎平注射液防治EV71的细胞和分子机制;通过比较药物组和对照组中性粒细胞MAPK/NF-κB信号通路分子表达和激活状态,初步揭示喜炎平注射液防治EV71的信号传导机制。结果在无毒质量浓度条件下,喜炎平注射液可显著降低EV71重症感染模型的死亡率和临床疾病得分,降低组织病变程度和炎症分子的质量浓度,提升脾T淋巴细胞的数量和激活状态;而喜炎平注射液防治HFMD的效果不是通过抗EV71病毒作用,而是主要通过降低炎性信号通路信号分子的表达和激活,从而抑制炎症因子分泌、改善机体细胞免疫状态,进而减轻组织炎症损伤而获得。结论喜炎平注射液可通过调节免疫治疗EV71感染引起的重症HFMD,暗示穿心莲内酯衍生物可能是1种有效的HFMD防治药物。

关键词：肠道病毒71 穿心莲内酯衍生物抗炎免疫调节

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