检索结果-内蒙古大学图书馆

解放军医学杂志 2006年第12期31卷 1169-1172页

作者：王虹刘海洪吴小红高亚兵王津郭兆彪彭瑞云宋亚军李才杨瑞馥军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 吉林大学再生医学科学研究所病理研究室军事医学科学院放射医学研究所

目的探讨吸入感染鼠疫的发生、发展过程及重要鼠疫菌致病相关基因的体内表达规律。方法采用滴鼻法建立小鼠吸入性鼠疫感染模型,并观察不同感染时间的组织病理学改变;采用免疫组化和逆转录-实时定量PCR方法检测感染小鼠组织中鼠疫菌5种... 详细信息

目的探讨吸入感染鼠疫的发生、发展过程及重要鼠疫菌致病相关基因的体内表达规律。方法采用滴鼻法建立小鼠吸入性鼠疫感染模型,并观察不同感染时间的组织病理学改变;采用免疫组化和逆转录-实时定量PCR方法检测感染小鼠组织中鼠疫菌5种毒力相关蛋白及其基因(caf1、lcrV、lcrG、pla、psaA)的表达和转录。结果鼠疫菌吸入后可诱导小鼠产生肺鼠疫型和非肺鼠疫型鼠疫。在小鼠体内感染状态下的鼠疫菌体表面能够检测到上述5种毒力相关蛋白的表达。其毒力基因的转录呈时相、组织差异性。结论在体内感染状态下,5种毒力相关蛋白均呈菌体表面可检测到的表达;各毒力相关基因在不同时间、不同组织中转录具有很大的差异性,这种差异性可能与其功能及宿主细胞的作用密切相关。

关键词：耶尔森菌,鼠疫组织病理学毒力相关基因

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鼠疫F1-V重组蛋白疫苗滴鼻免疫应答效果的研究

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免疫学杂志 2006年第3期22卷 269-272,276页

作者：吴秀芳于三科谢应国王栋袁源刑丽武素琴王希良西北农林科技大学动物科技学院陕西杨陵712100 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的以重组霍乱毒素B亚单位(rCT-B)为鼠疫F1-V重组蛋白的佐剂制备黏膜疫苗,观察小鼠诱导的黏膜免疫和系统免疫应答效果。方法以制备的鼠疫黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠4次免疫后,采用间接ELISA检测血清特异性抗F1-V的IgG和IgA抗体及抗体亚型分... 详细信息

目的以重组霍乱毒素B亚单位(rCT-B)为鼠疫F1-V重组蛋白的佐剂制备黏膜疫苗,观察小鼠诱导的黏膜免疫和系统免疫应答效果。方法以制备的鼠疫黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠4次免疫后,采用间接ELISA检测血清特异性抗F1-V的IgG和IgA抗体及抗体亚型分类,检测鼻咽喉、肺、小肠及阴道灌洗液中特异性抗F1-V的黏膜分泌型IgA;采用流式细胞术检测鼻相关淋巴组织淋巴细胞、脾淋巴细胞、肠系膜淋巴结及小肠PP结T淋巴细胞表型的变化。结果以rCT-B为佐剂的鼠疫F1-V重组蛋白黏膜疫苗滴鼻免疫后,能够诱导血清中IgGI、gA抗体比正常对照组显著升高(P<0.01),同时诱导鼻咽、肺、小肠和阴道内特异性黏膜抗体升高,尤其是肺和生殖道冲冼液内抗体升高极为显著(P<0.01)。与单纯的F1-V组相比,不同剂量比例疫苗组都能诱导较高、较快的血清IgGI、gA和黏膜sIgA,其中1∶2疫苗组能诱导更强的系统免疫和黏膜免疫,但是相比之下,5∶1疫苗组是最合适的免疫剂量。结论rCT-B佐剂不仅能提高鼠疫F1-V黏膜疫苗的系统全身免疫应答,还能促进诱导呼吸道、消化道和生殖道等局部黏膜sIgA抗体,增强局部免疫应答,提示rCT-B佐剂能显著提高鼠疫感染的免疫应答作用,这为下一步疫苗的免疫保护评价奠定了基础。

关键词：鼠疫F1-V重组蛋白黏膜疫苗重组霍乱毒素B亚单位黏膜免疫系统免疫

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重组流感病毒H1N1活菌疫苗的构建及其免疫效果的初步研究

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免疫学杂志 2006年第6期22卷 686-689页

作者：姚碧涛李鹏焦新安周丽丽刘秀梵王希良军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 扬州大学畜牧兽医学院江苏扬州225002

目的获得两种流感病毒重组沙门氏菌X4550(asd-pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-NA)活菌疫苗,并对其免疫效果进行初步的研究。方法将本室已构建好的重组质粒pVAX1-HA及pVAX1-NA双酶切后得到HA、NA基因,将其克隆入asd-pVAX1构建重组的表达质... 详细信息

目的获得两种流感病毒重组沙门氏菌X4550(asd-pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-NA)活菌疫苗,并对其免疫效果进行初步的研究。方法将本室已构建好的重组质粒pVAX1-HA及pVAX1-NA双酶切后得到HA、NA基因,将其克隆入asd-pVAX1构建重组的表达质粒。将重组质粒转染COS-7细胞,用免疫细胞化学方法鉴定重组质粒体外的表达。进一步将重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550,以2×109CFU/只的剂量三次口服免疫Balb/c小鼠。结果asd-pVAX1-HA和asd-pVAX1-NA均能在COS-7细胞中表达;免疫小鼠不仅可以检测到HA、NA特异性的血清IgG及IgA抗体;刺激黏膜免疫反应,产生sIgA抗体,而且能抵抗40LD50同型病毒滴鼻的攻击。结论H1N1流感病毒DNA疫苗的减毒沙门氏菌运送系统在体内能够成功释放所携带的质粒,并且能够刺激机体产生保护性免疫应答。

关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗 H1N1亚型流感病毒免疫保护性

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北京市城区鼠间汉坦病毒感染的流行病学研究

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中国媒介生物学及控制杂志 2006年第2期17卷 93-97页

作者：江佳富吴晓明王日明徐伟才左曙青张纪军李忠麟陈立泉郭天宇曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京市东城区疾病预防控制中心

目的了解北京城区中心地带鼠间汉坦病毒(HV)感染状况及其病毒型别差异。方法选取北京城区某方圆约1km两街区之内的食物资源丰富、场所隐蔽的中、小餐饮行业、蔬菜集贸市场及周边垃圾堆、卫生死角等生态环境,从2003年12月至2004年11月每... 详细信息

目的了解北京城区中心地带鼠间汉坦病毒(HV)感染状况及其病毒型别差异。方法选取北京城区某方圆约1km两街区之内的食物资源丰富、场所隐蔽的中、小餐饮行业、蔬菜集贸市场及周边垃圾堆、卫生死角等生态环境,从2003年12月至2004年11月每月连续采用夹夜法捕鼠,计算鼠密度和鼠种构成。应用间接ELISA法检测鼠血清IgG抗体;针对汉坦病毒M基因部分片段设计汉城型汉坦病毒(SEOV)特异性引物,应用RTPCR法检测宿主动物携带HV情况,阳性标本直接测序。利用Excel和SPSS软件分析宿主动物HV感染的动态特征。最后用DNASTAR软件对获得序列进行比较分析。结果共捕获啮齿动物229只,平均鼠密度6.41%(229/3570),褐家鼠和小家鼠分别为餐饮业、农贸市场生境的优势鼠种。褐家鼠血清抗体阳性率3.51%(6/171),带病毒率为0.58%(1/171);小家鼠血清抗体阳性率为6.90%(4/58),带病毒率为1.72%(1/58)。病毒检出率以11、12月最高,抗体水平冬春季(1、4月)最高,与春季人群肾综合征出血热(HFRS)流行季节基本一致。2份扩增阳性标本(分别来源于小家鼠和褐家鼠)均为SEOV,差异为5.40%,系统发育分析显示他们位于2个不同的较小分支,但均位于Z37支系。结论北京城区2种主要的HV宿主在一些鼠害重点行业密度仍较高,虽然HV基础感染率不高,但持续存在,为春季人群HFRS发病高峰的重要影响因素。来自2个不同宿主的HV基因有一定的差异。小家鼠的传播作用有所加强,应予重视。

关键词：汉坦病毒啮齿动物流行病学

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吉林林区动物莱姆病螺旋体感染的调查研究

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中国人兽共患病学报 2006年第8期22卷 785-788页

作者：黄海楠丁壮何静吴晓明蒋宝贵高燕赵秋敏王玉福曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 吉林大学畜牧兽医学院重要病原与疫病研究室吉林省畜牧兽医总站

目的了解吉林珲春林区的蜱、野鼠及牛、绵羊感染莱姆病的情况。方法对蜱和野鼠进行莱姆病螺旋体的PCR扩增,阳性标本RFLP分型,应用间接免疫荧光法检测家畜血清中的IgG抗体。结果PCR检测全沟硬蜱和森林革蜱的带菌率为36.0%和30.9%;在五种... 详细信息

目的了解吉林珲春林区的蜱、野鼠及牛、绵羊感染莱姆病的情况。方法对蜱和野鼠进行莱姆病螺旋体的PCR扩增,阳性标本RFLP分型,应用间接免疫荧光法检测家畜血清中的IgG抗体。结果PCR检测全沟硬蜱和森林革蜱的带菌率为36.0%和30.9%;在五种鼠中检测到莱姆病螺旋体的特异性片段,带菌率分别为14.0%、8.3%、13.0%、25.0%和33.3%。阳性标本RFLP分型结果属于***和***型;牛、羊血清学检测阳性率为27.5%和31.5%。结论野鼠、蜱和牛羊中都检测到伯氏疏螺旋体的感染,证实吉林珲春林区存在莱姆病的自然疫源地。

关键词：伯氏疏螺旋体蜱野鼠家畜

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褐家鼠种群特征与汉坦病毒感染的关联分析

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中华流行病学杂志 2006年第3期27卷 196-199页

作者：江佳富吴晓明左曙青王日明陈立泉王炳才敦哲张泮河郭天宇曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 北京市东城区疾病预防控制中心北京市海淀区疾病预防控制中心

目的了解汉坦病毒(HV)优势宿主褐家鼠感染HV的相关危险因素。方法采集北京不同地区、生境捕获的褐家鼠,用统一的调查表记录宿主动物及环境特征,采用针对HV M基因片段的巢式RT-PCR法检测其带病毒情况,运用SPSS软件多因素非条件logistic... 详细信息

目的了解汉坦病毒(HV)优势宿主褐家鼠感染HV的相关危险因素。方法采集北京不同地区、生境捕获的褐家鼠,用统一的调查表记录宿主动物及环境特征,采用针对HV M基因片段的巢式RT-PCR法检测其带病毒情况,运用SPSS软件多因素非条件logistic回归分析。结果在所调查的10种相关因素中,6种与褐家鼠HV感染相关。多因素非条件logistic回归分析结果显示:成年鼠、处于繁殖期、体表皮肤有伤痕是褐家鼠HV感染的危险因素。雄性睾丸位于阴囊内与雄性HV感染有非常高的危险度(OR=30.92)。发情期雄性个体的体表疤痕率高于非发情期个体(P=0.049),两者的交互作用与HV感染相关有统计学意义(P<0.001)。结论从现场多途径观察研究证实:HV在褐家鼠中存在平行传播,雄性的侵犯行为促进HV的传播。

关键词：汉坦病毒褐家鼠危险因素

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驻石某部肾综合征出血热流行病学调查

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中国媒介生物学及控制杂志 2006年第2期17卷 104-106页

作者：汤芳李森林高东旗宋文静左曙青张云霜付云川江佳富曹务春北京军区疾病预防控制中心疾病监控科北京100042 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室石家庄机械化步兵学院

目的探讨某部肾综合征出血热(HFRS)的流行状况、啮齿动物间汉坦病毒(HV)感染特点及HV基因型,为HFRS的预防控制提供科学依据。方法夹夜法捕鼠,计算鼠密度,确定鼠种构成。针对HV基因M片段部分序列设计2种型特异性引物,应用RTPCR法检测宿... 详细信息

目的探讨某部肾综合征出血热(HFRS)的流行状况、啮齿动物间汉坦病毒(HV)感染特点及HV基因型,为HFRS的预防控制提供科学依据。方法夹夜法捕鼠,计算鼠密度,确定鼠种构成。针对HV基因M片段部分序列设计2种型特异性引物,应用RTPCR法检测宿主动物带病毒情况。结果共捕获宿主动物14只,血清抗体阳性率为21.43%,RTPCR扩增检测出阳性标本1份,为褐家鼠,分型为汉城型阳性标本。密切接触人群血清抗体阳性率为3.64%。结论该地区存在汉城型HV感染,提示应加强疫情监测,防止疫情的扩大蔓延。

关键词：肾综合征出血热汉坦病毒流行病学

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炭疽中性蛋白酶部分片段的重组表达、纯化及免疫效果研究

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现代免疫学 2006年第4期26卷 289-292页

作者：谢应国吴秀芳武素琴罗德炎张松乐王希良西北农林科技大学动物科技学院杨凌712100 军事医学科学院微生物流行病学研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

构建表达炭疽杆菌中性蛋白酶基因部分片段N蛋白（位于248～532氨基酸），并对其免疫效果进行研究；设计引物采用PCR法自炭疽杆菌扩增中性蛋白酶部分片段N，T-A克隆后构建原核表达质粒pET28a（＋）-N，通过Western blot检测重组蛋白的免... 详细信息

构建表达炭疽杆菌中性蛋白酶基因部分片段N蛋白（位于248～532氨基酸），并对其免疫效果进行研究；设计引物采用PCR法自炭疽杆菌扩增中性蛋白酶部分片段N，T-A克隆后构建原核表达质粒pET28a（＋）-N，通过Western blot检测重组蛋白的免疫原性。以AI（OH）3为佐剂皮下注射免疫BALB／c小鼠，用ELISA方法测血清总IgG水平，MTT比色法测定脾T淋巴细胞增殖，采用流式分选法对脾T淋巴细胞亚群分类；Western blot显示重组蛋白具有免疫原性，rN免疫BALB／c小鼠后，ELISA检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生；T淋巴细胞亚群试验表明，重组N蛋白以诱发Th2型免疫反应为主；MTT试验表明，rN蛋白对小鼠脾细胞在体外有促进生长和增殖能力，说明该重组蛋白具有生物学活性。纯化的rN可诱导高水平的抗体反应，为进一步的功能研究奠定了基础。

关键词：炭疽杆菌中性蛋白酶蛋白表达纯化

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山东地区不同季节优势恙螨自然感染恙虫病东方体的分子流行病学调查

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中华流行病学杂志 2006年第7期27卷 600-603页

作者：张倩刘运喜高媛赵仲堂张景兰杨占清薛健曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 济南军区联勤部疾病预防控制中心山东大学公共卫生学院

目的从分子水平探讨山东地区不同季节优势恙螨自然感染恙虫病东方体(Ot)情况及其作为恙虫病传播媒介的可能性。方法根据Ot-Sta56 kDa外膜蛋白基因部分序列设计Ot种和型特异性引物,对标本提取的DNA先采用种特异性引物扩增,然后再采用型... 详细信息

目的从分子水平探讨山东地区不同季节优势恙螨自然感染恙虫病东方体(Ot)情况及其作为恙虫病传播媒介的可能性。方法根据Ot-Sta56 kDa外膜蛋白基因部分序列设计Ot种和型特异性引物,对标本提取的DNA先采用种特异性引物扩增,然后再采用型特异性引物扩增分型,并对部分标本进行序列测定。结果从不同季节优势恙螨幼虫共得到11株Ot分离株和16份恙螨匀浆,从这27份标本提取的DNA经首轮PCR扩增后,18份标本有预期的目的带。对首轮PCR产物采用nested PCR扩增分型,结果17份为Kawasaki型,1份(LHGM2株)为Karp型。序列同源性分析结果证实了nested PCR分型结果:XDM2株首轮PCR产物碱基序列与。Kawasaki型相应DNA片段的碱基序列同源性最高,为97．00％,在系统发育树上与Kawasaki株位于同一分支,应属于Kawasaki型; LHGM2株首轮PCR产物碱基序列与Karp型相应DNA片段的碱基序列同源性最高,为96．45％,在系统发育树上与Karp株位于同一分支,应属于Karp型。结论山东地区不同季节优势恙螨中存在Ot自然感染,Ot主要基因型为Kawasaki型。

关键词：恙虫病恙螨恙虫病东方体 Sta56基因

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通用型病毒检测芯片在三种人类致病病毒属检测中的应用

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中华实验和临床病毒学杂志 2006年第4期20卷 327-330页

作者：陈建明韩俊董辰方高晨雷艳君安润谭文杰周永东郭瑜姜慧英祝庆余董小平中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京100052 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的研究制备对人类有致病作用的38个属的病毒寡核苷酸(oligo)基因芯片对三种人类致病病毒的检测能力。方法应用生物信息学软件设计70-meroligo探针,固定于玻片载体制备成基因芯片。以痘苗病毒天坛株、甲肝病毒、乙肝病毒作为检测样本,... 详细信息

目的研究制备对人类有致病作用的38个属的病毒寡核苷酸(oligo)基因芯片对三种人类致病病毒的检测能力。方法应用生物信息学软件设计70-meroligo探针,固定于玻片载体制备成基因芯片。以痘苗病毒天坛株、甲肝病毒、乙肝病毒作为检测样本,提取病毒核酸,经随机引物扩增、荧光标记,用于芯片杂交,清洗和干燥后对芯片进行扫描和数据分析。结果芯片上oligo探针能与相应病毒的PCR扩增样品杂交,呈现阳性荧光信号。结论建立的病毒寡核苷酸基因芯片能够检出和区分三种检测病毒,为进行未知病毒的基因芯片筛查方法的建立奠定了基础。

关键词：基因寡核苷酸类序列分析病毒学诊断鉴别

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