检索结果-内蒙古大学图书馆

美军化生防御战场管理现状

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军事医学科学院院刊 2005年第6期29卷 587-590页

作者：崔玉军马静田青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

化生防御领域战场管理已经成为美军战场指挥管理的重要组成部分,在应对化生恐怖袭击行动的指挥决策中也起到重要作用。本文介绍了美军化生防御领域战场管理的理念、内容和相关的科研项目,并简要分析了其演变和发展趋势。

关键词：化生防御战场管理警报和报告模型和模拟

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融合蛋白D2C-SN对登革2型病毒增殖的影响

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军事医学科学院院刊 2005年第6期29卷 506-508,511页

作者：秦成峰赵慧姜涛陈水平邓永强秦鄂德军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:观察登革2型病毒衣壳蛋白(D2C)与葡萄球菌核酸酶(SN)融合蛋白在哺乳动物细胞中对登革2型病毒增殖的影响.方法:通过基因重组构建可在哺乳动物细胞中表达融合蛋白D2C-SN的重组质粒pc/D2C-SN,同步构建pc/D2C-SN*用作对照.病毒感染BHK2... 详细信息

目的:观察登革2型病毒衣壳蛋白(D2C)与葡萄球菌核酸酶(SN)融合蛋白在哺乳动物细胞中对登革2型病毒增殖的影响.方法:通过基因重组构建可在哺乳动物细胞中表达融合蛋白D2C-SN的重组质粒pc/D2C-SN,同步构建pc/D2C-SN*用作对照.病毒感染BHK21细胞后,通过阳离子转染试剂将重组质粒导入感染细胞,在此基础上评价融合蛋白D2C-SN抗登革病毒感染的治疗效果.结果: 融合蛋白D2C-SN能够在哺乳动物细胞中表达,对宿主细胞没有明显的毒性;与正常BHK21细胞相比较,可导致病毒感染性滴度降到原来的1/60～1/12.结论:融合蛋白D2C-SN在细胞水平能够有效抑制登革病毒的增殖,有可能成为潜在的抗登革病毒感染的治疗性药物.

关键词：登革病毒衣壳蛋白葡萄球菌核酸酶抗病毒作用

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新分离呼肠病毒的空斑试验及病毒纯化

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军事医学科学院院刊 2005年第5期29卷 418-420页

作者：苏裕心何君朱虹宋立华黄如统端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:建立新分离呼肠病毒(reovirus)的空斑技术,进行病毒纯化,为呼肠病毒生物学和分子生物学的研究奠定基础.方法: 4株新分离呼肠病毒的早代毒种经L929细胞连续传代,当产生细胞病变后进行空斑试验,加营养琼脂培养6 d后加中性红,24 h内... 详细信息

目的:建立新分离呼肠病毒(reovirus)的空斑技术,进行病毒纯化,为呼肠病毒生物学和分子生物学的研究奠定基础.方法: 4株新分离呼肠病毒的早代毒种经L929细胞连续传代,当产生细胞病变后进行空斑试验,加营养琼脂培养6 d后加中性红,24 h内挑取空斑,扩增一次后做PCR鉴定.取呼肠病毒PCR阳性病毒进行第2次克隆纯化.结果:4株新分离呼肠病毒经L929细胞连续传2～4代,均能观察到明显的细胞病变.用10-3和10-4接种L929单层细胞,第6～7天均能产生空斑,空斑呈圆形,直径为0.2～1.0 mm,并分别测定其空斑滴度(PFU/ml).两次纯化后进行PCR检测,呼肠病毒基因扩增阳性、脊髓灰质炎病毒基因扩增阴性.结论:4株呼肠病毒的空斑出斑规律,通过两次克隆,获得纯化的病毒.

关键词：呼肠病毒空斑试验 RT-PCR 病毒纯化

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PCR和DNA斑点杂交分析贝氏柯克斯体的核酸标识

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中国人兽共患病杂志 2005年第5期21卷 375-378页

作者：张军朱丽娜张晶波温博海陈梅玲邱玲牛东升军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071 病原微生物生物安全国家重点实验室

目的确认贝氏柯克斯体特异的核酸标识。方法用PCR法特异扩增贝氏柯克斯体24kDa,27kDa、30kDa、34kDa、热休克蛋白B等表面蛋白基因,以及23SrRNA插入序列和16S23SrRNA间区序列等基因片段,从DNA电泳凝胶中回收纯化PCR扩增的目的DNA片段,用... 详细信息

目的确认贝氏柯克斯体特异的核酸标识。方法用PCR法特异扩增贝氏柯克斯体24kDa,27kDa、30kDa、34kDa、热休克蛋白B等表面蛋白基因,以及23SrRNA插入序列和16S23SrRNA间区序列等基因片段,从DNA电泳凝胶中回收纯化PCR扩增的目的DNA片段,用地高辛随机引物标记法标记目的DNA片段作探针,行DNA斑点杂交。结果PCR扩得的7个贝氏柯克斯体DNA片段探针只能与贝氏柯克斯体基因组DNA杂交而不能与其他种属的立克次体的基因组杂交,每种探针检测同源目的基因的灵敏度可达到10pg。结论这7种贝氏柯克斯体DNA片段是贝氏柯克斯体特异的DNA片段,可作为贝氏柯克斯体的核酸标识,基于它们的序列设计的引物和探针具有极高的贝氏柯克斯体种特异性。

关键词：贝氏柯克斯体 PCR DNA探针斑点杂交

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重组肉毒神经毒素A轻链(BoNT/ALC)蛋白的表达、纯化与鉴定

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军事医学科学院院刊 2005年第1期29卷 30-33页

作者：贾宏丽王景林军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071

　目的:克隆、表达并纯化肉毒神经毒素A轻链(BoNT/ALC)片段,为BoNT/A的抗体制备和检测方法的建立奠定基础。方法:以PCR方法自肉毒梭菌中扩增BoNT/A轻链基因,直接插入pGEM T载体,测序正确后再与表达载体pET21a构建重组表达载体pET21a 轻... 详细信息

　目的:克隆、表达并纯化肉毒神经毒素A轻链(BoNT/ALC)片段,为BoNT/A的抗体制备和检测方法的建立奠定基础。方法:以PCR方法自肉毒梭菌中扩增BoNT/A轻链基因,直接插入pGEM T载体,测序正确后再与表达载体pET21a构建重组表达载体pET21a 轻链,转化***21(pLys)感受态细胞获得表达工程菌株并进行诱导表达,用Western印迹鉴定重组BoNT/A轻链。结果:经PCR获得的BoNT/A轻链序列与GenBank中的BoNT/A轻链基因序列的一致性达 99. 9%以上。表达工程菌BL21 /pET21a ALC于 37℃经 0. 7mmol/LIPTG诱导 6h,目的蛋白获得高表达,约占菌体总蛋白的 23%。经过镍离子螯合次氨基三乙酸 (Ni NTA)亲和层析一步纯化,重组BoNT/A轻链的纯度可达 97%以上。Western印迹结果表明,重组BoNT/A轻链与抗天然BoNT/A的马血清发生特异性的抗原抗体结合反应。结论:成功克隆、表达并纯化了BoNT/A轻链片段,其抗原性良好。

关键词：肉毒神经毒素A(BoNT/A) 轻链克隆表达 Ni—NTA亲和层析

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应用AFLP方法对我国土拉弗菌基因分型的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第7期25卷 606-607页

作者：张芳刘玮何君端青张泮河杨红曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物安全国家重点实验室北京100071

土拉菌病又称"野兔热",是由土拉弗菌经患病野生动物、吸血昆虫或遭受污染的水或食物传播的一种自然疫源性疾病,呈世界性分布.其致病菌是革兰阴性胞内寄生菌,包括4种基因型.由于不同基因型在地理分布、毒性等方面存在较大差异... 详细信息

土拉菌病又称"野兔热",是由土拉弗菌经患病野生动物、吸血昆虫或遭受污染的水或食物传播的一种自然疫源性疾病,呈世界性分布.其致病菌是革兰阴性胞内寄生菌,包括4种基因型.由于不同基因型在地理分布、毒性等方面存在较大差异,基因分型研究一直是该领域的研究热点,而近年来随着16S rRNA的序列分析、随机引物扩增多态性(RAPD)、限制性片段长度多态性(RFLP)、扩增片段长度多态性(AFLP)等分子生物学方法在细菌分型中的应用,世界范围内许多地区的土拉弗菌株得到了很好的基因型鉴别,也对一些传统认识提出了新的质疑,如欧亚地区是否也存在致病性较强的A型菌株?事实上在1998年科学家们证实了这一疑问[1]。

关键词：基因分型土拉弗菌 AFLP 限制性片段长度多态性随机引物扩增多态性自然疫源性疾病不同基因型世界性分布土拉菌病

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禽流感病毒跨种属感染人的机制研究进展

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微生物学通报 2005年第3期32卷 121-124页

作者：李靖刘伯华祝庆余军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物安全国家重点实验室北京100071

禽流感病毒(avian influenza virus,简称AIV)不仅引起禽类感染和流行,而且可以打破种属屏障(spec ies barrier)、引起人或其他哺乳动物感染和传播。近年来对人呼吸道抗禽流感病毒感染的非特异屏障机制、禽流感病毒对人感染的机制研究不... 详细信息

禽流感病毒(avian influenza virus,简称AIV)不仅引起禽类感染和流行,而且可以打破种属屏障(spec ies barrier)、引起人或其他哺乳动物感染和传播。近年来对人呼吸道抗禽流感病毒感染的非特异屏障机制、禽流感病毒对人感染的机制研究不断取得新的进展。

关键词：禽流感病毒,种属屏障,跨种属感染机制

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从噬菌体表面展示肽库中筛选葡萄球菌B型肠毒素抑制剂

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中国生物化学与分子生物学报 2005年第3期21卷 352-356页

作者：李韩平郑玉玲邓小红马茹姜永强军事医学科学院微生物与流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

通过生物淘选,从噬菌体表面展示12肽肽库中筛选能与葡萄球菌B型肠毒素(staphylococcalenterotoxinB ,SEB)结合且能抑制其肠毒活性的特异性短肽.采用Phage ELISA和MTT鉴定所得目的肽的亲和性;根据优势噬菌体阳性克隆序列合成相应多肽.利... 详细信息

通过生物淘选,从噬菌体表面展示12肽肽库中筛选能与葡萄球菌B型肠毒素(staphylococcalenterotoxinB ,SEB)结合且能抑制其肠毒活性的特异性短肽.采用Phage ELISA和MTT鉴定所得目的肽的亲和性;根据优势噬菌体阳性克隆序列合成相应多肽.利用竞争ELISA研究合成肽与SEB单克隆抗体竞争结合SEB的情况;通过动物实验考察其抑制SEB的超抗原特性和肠毒活性情况.筛选所得短肽在一定浓度范围内可以抑制SEB对鼠脾淋巴细胞的激活;合成肽与SEB质量比为16 0∶1时,合成肽可较好地抑制SEB对乳猫的肠毒活性,并对SEB引起的小鼠致死具有明显保护作用.结果表明,初步得到了能与SEB特异结合并能抑制SEB超抗原特性和肠毒活性的短肽,为进一步研制SEB高效抑制剂奠定了基础.

关键词：葡萄球菌B型肠毒素(SEB),随机肽库,筛选,SEB抑制剂

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炭疽毒素受体ATRcDNA的合成和克隆及ATR-Fc融合蛋白的真核表达载体的构建

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中国生物工程杂志 2005年第12期25卷 1-8页

作者：胡显文高丽华陈薇徐俊杰赵剑陈惠鹏军事医学科学院生物工程研究所北京100071 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

可溶性炭疽毒素受体(sATR)可以特异性结合炭疽毒素保护抗原(PA),为获得用于中和炭疽毒素以防治炭疽感染的候选抗毒素药物,构建了表达ATRFc抗体样分子融合蛋白的真核表达载体。将全长为681bp的编码炭疽毒素受体N端1～227氨基酸的基因分... 详细信息

可溶性炭疽毒素受体(sATR)可以特异性结合炭疽毒素保护抗原(PA),为获得用于中和炭疽毒素以防治炭疽感染的候选抗毒素药物,构建了表达ATRFc抗体样分子融合蛋白的真核表达载体。将全长为681bp的编码炭疽毒素受体N端1～227氨基酸的基因分成长约50～60碱基的18个寡核苷酸片段,相邻片段重叠部分为20～22个碱基,利用重叠延伸PCR和引物PCR法,将合成的片段组装与扩增,得到了含有ATR1～227的全部编码区和HindIII、BamHI位点在内的DNA片段。回收的基因片段经BamHI/HindIII双酶切连接到pUC19质粒中,挑选阳性克隆进行酶切鉴定和双向序列测定,获得了全序列正确的克隆。将ATR基因与Fc基因连接后插入pcDNA3.1载体多克隆位点HindIII和NotI之间,得到表达ATRFc融合蛋白的真核表达载体pcDNA3.1/ATRFc,为利用CHO哺乳动物细胞表达ATRFc并研究其生物学性质奠定了基础。

关键词：炭疽毒素受体 Fc融合蛋白基因合成抗毒素

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北京昌平鼠间汉坦病毒感染时间动态变化的调查

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中国人兽共患病杂志 2005年第8期21卷 693-698页

作者：江佳富汤芳左曙青曾凡新吴晓明徐伟才郭天宇曹务春 CAO Wu-chun 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物安全国家重点实验室北京100071 66459部队卫生队

目的了解鼠类自然感染汉坦病毒(HV)时间动态变化。方法选取北京昌平南口镇某部驻地,从2002年8月至2004年5月采用夹夜法捕获鼠形动物,针对汉坦病毒M基因部分片段设计SEOV和HTNV型特异性引物,应用RT-PCR法检测宿主肺组织中携带HV-RNA及其... 详细信息

目的了解鼠类自然感染汉坦病毒(HV)时间动态变化。方法选取北京昌平南口镇某部驻地,从2002年8月至2004年5月采用夹夜法捕获鼠形动物,针对汉坦病毒M基因部分片段设计SEOV和HTNV型特异性引物,应用RT-PCR法检测宿主肺组织中携带HV-RNA及其型别情况;应用ELISA法和间接IFAT检测IgG抗体。利用SPSS软件分析宿主动物HV感染的时间动态特征。结果共捕获啮齿动物296只,平均感染率11%。整个调查周期总体宿主种群密度波动不大,局部小生境(养殖场)种群波动明显。优势宿主褐家鼠平均种群密度与其感染率变化之间具相关性(r=0.594,P=0.023),养殖场褐家鼠密度与HV感染率之间相关性极显著(r=0.746,P=0.008)。褐家鼠性比和阳性率变化之间不具统计学意义相关性(r=0.541,P=0.086)。成幼比和阳性率变化之间则具显著相关性(r=0.697,P=0.046)。结论北京昌平鼠间汉坦病毒感染长期持续存在,其感染率与种群密度随时间呈现动态变化,两者之间具有相关性,并因生境而异。优势宿主种群结构特征及其动态变化与HV感染也存在较为复杂的关系。

关键词：汉坦病毒啮齿动物时间动态北京

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