检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2013年第11期33卷 1685-1690页

作者：任庆杰李敏杨晓岚管晨张广州王希良王玉光赵忠鹏宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心北京100071 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京中医药大学第一临床学院中医内科北京100029

为建立Cox.A16型手足口病乳鼠动物模型并进行免疫、致病特性研究。将临床分离的Cox.A16病毒株经蚀斑纯化,乳鼠驯化,最终获得1株能致死11日龄乳鼠的Cox.A16毒株,命名为TS10/08(GenBank Accession ***068829,Cox.A16-TS)。Cox.A16-TS感染1... 详细信息

为建立Cox.A16型手足口病乳鼠动物模型并进行免疫、致病特性研究。将临床分离的Cox.A16病毒株经蚀斑纯化,乳鼠驯化,最终获得1株能致死11日龄乳鼠的Cox.A16毒株,命名为TS10/08(GenBank Accession ***068829,Cox.A16-TS)。Cox.A16-TS感染11日龄C57BL/6J乳鼠后,观测临床疾病得分、体质量变化、死亡率并测定病毒载量、免疫分子、组织病理损伤等病毒、免疫、病理指标。结果表明,Cox.A16-TS毒株感染11日龄C57BL/6J乳鼠,其病毒毒力为50LD50/mL,感染后不同时期肌肉病毒载量均高于其他组织中,至4d达到高峰,后不断下降。至感染后6d发病达高峰时做病理检测,相对于脑组织,肌肉中有更严重的淋巴细胞浸润,引起更严重的炎性分子升高。血清中MCP-1,MIP-1alpha,MIP-1beta和CSF3动态变化,并在不同时间形成峰值。本试验初步建立了Cox.A16型手足口病乳鼠动物模型,为药物筛选、疫苗研发和免疫机理研究奠定了基础。

关键词： Cox A16 乳鼠免疫病理

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SARS冠状病毒多抗原表位融合蛋白的表达及其诊断应用

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解放军预防医学杂志 2013年第3期31卷 196-199页

作者：张珍珍郭彦于虹高基民邱洪杰赵光宇周育森温州医学院检验医学院暨生命科学学院医学病毒学研究所浙江温州325035 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的制备SARS冠状病毒(SARS-CoV)多抗原表位融合蛋白,建立一种可特异性诊断SARS的血清学方法,用于SARS的明确诊断和流行病学调查研究。方法设计含有SARS冠状病毒S、M和N蛋白优势抗原表位区的多表位融合蛋白SMN,利用大肠杆菌表达SMN蛋白... 详细信息

目的制备SARS冠状病毒(SARS-CoV)多抗原表位融合蛋白,建立一种可特异性诊断SARS的血清学方法,用于SARS的明确诊断和流行病学调查研究。方法设计含有SARS冠状病毒S、M和N蛋白优势抗原表位区的多表位融合蛋白SMN,利用大肠杆菌表达SMN蛋白,并作为包被抗原建立ELISA方法,用于SARS患者血清检测。结果设计出包含S603-635、M2-31、N362-412表位区的多表位融合蛋白SMN,并在大肠杆菌中成功表达。以SMN蛋白为包被抗原,ELISA检测74份SARS患者血清全部为阳性,另44份非SARS-CoV感染的发热病人血清和62份健康人血清均为阴性。结论 SARS-CoV多抗原表位融合蛋白SMN在大肠杆菌中成功表达,以SMN为检测抗原建立的ELISA方法为SARS血清学诊断奠定了基础。

关键词： SARS冠状病毒表位蛋白表达酶联免疫吸附测定诊断

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病原微生物实验室实验操作对室内空气产生微生物污染的研究

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中国社会工作 2013年第5期 1-5页

作者：温占波陈咏杜茜杨文慧李劲松胡凌飞王洁李娜张柯殷喆董晓凯军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室国家生物防护装备工程技术中心北京100071 中国医学科学院医学生物学研究所昆明650118

目的通过模拟病原微生物实验室实验操作产生的微生物气溶胶,对实验室产生微生物污染风险进行定量研究,为实验操作人员危害评估和防护措施提供科学依据。方法使用黏质沙雷菌作为指示细菌,在实验室内对多种实验操作如吹吸混匀、培养瓶意... 详细信息

目的通过模拟病原微生物实验室实验操作产生的微生物气溶胶,对实验室产生微生物污染风险进行定量研究,为实验操作人员危害评估和防护措施提供科学依据。方法使用黏质沙雷菌作为指示细菌,在实验室内对多种实验操作如吹吸混匀、培养瓶意外跌落、正常离心、离心管破裂、注射攻毒、解剖动物和安全柜泄漏等进行正常操作和意外事故模拟,使用定量空气采样和沉降平皿的方法对各种操作造成的微生物气溶胶风险进行定量分析。结果在本实验条件下,局部环境产生的微生物气溶胶浓度差异较大。吹吸混匀、培养瓶意外跌落、正常离心、离心管破裂、注射攻毒、解剖动物和安全柜泄漏产生的最大源强分别为1409、9346、<10、138、>8232、<4和>801 CFU/m3。结论病原微生物实验室各种实验操作产生的气溶胶源强差异较大,在局部环境中可以产生较高的气溶胶污染,应加强实验技能的培训和一级呼吸道防护装备的应用。

关键词：病原微生物微生物气溶胶源强实验室感染

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猪溶血素突变体的构建及活性评价

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第6期28卷 580-582页

作者：任志强郑玉玲甘淑珍律清宇郝淮杰姜永强宗浩四川师范大学生命科学学院四川成都610101 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

目的:构建无溶血活性的猪溶血素突变体,并对制备蛋白进行功能评价。方法:根据猪溶素的晶体结构,采用定点突变分别将其353位脯氨酸突变为丙氨酸、亮氨酸和缬氨酸。重组表达的突变体蛋白采用镍柱亲和层析进行柱上复性后,评价纯化蛋白的溶... 详细信息

目的:构建无溶血活性的猪溶血素突变体,并对制备蛋白进行功能评价。方法:根据猪溶素的晶体结构,采用定点突变分别将其353位脯氨酸突变为丙氨酸、亮氨酸和缬氨酸。重组表达的突变体蛋白采用镍柱亲和层析进行柱上复性后,评价纯化蛋白的溶血活性和免疫原性。结果:获得三种猪溶素突变体,SLY(P353A),SLY(P353L)和SLY(P353V)。溶血试证明SLY(P353V)无溶血活性,蛋白质免疫印迹和动物实验显示SLY(P353V)具有免疫原性。结论:猪溶素突变体SLY(P353V)无溶血活性,有免疫原性。

关键词：猪溶血素定点突变猪链球菌

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登革病毒抗体依赖性感染增强作用的研究进展

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军事医学 2012年第1期36卷 73-76页

作者：宋克玉李晓峰江振友秦成峰暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广州510632 病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

抗体依赖性感染增强作用(antibody-dependent enhancement,ADE)在登革病毒的致病机制中发挥重要作用。在存在亚中和浓度抗体的条件下,登革病毒可通过Fc受体或补体受体等途径进入靶细胞,进而导致ADE的发生。ADE的发生受病毒和宿主一系列... 详细信息

抗体依赖性感染增强作用(antibody-dependent enhancement,ADE)在登革病毒的致病机制中发挥重要作用。在存在亚中和浓度抗体的条件下,登革病毒可通过Fc受体或补体受体等途径进入靶细胞,进而导致ADE的发生。ADE的发生受病毒和宿主一系列复杂因素的调节,直接影响患者的临床表现和病情进展,对其作用机制的研究有助于加深对登革出血热发病机制的认识,对登革热疫苗以及治疗性抗体的研发具有重要意义。本文综述了登革病毒ADE的研究进展。

关键词：登革病毒抗体依赖性感染增强疫苗抗体

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猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_0272的表达、纯化及生物活性分析

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中国人兽共患病学报 2012年第5期28卷 457-460页

作者：陈哲郑玉玲郝淮杰律清宇任志强王涛姜永强吕淑霞沈阳农业大学生物科学技术学院沈阳110866 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

目的制备获得高纯度的重组SSU05_0272蛋白,并研究其对细胞因子的调控。方法以05ZYH33基因组为模版,PCR扩增SSU05_0272基因,构建表达质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中并诱导表达。上清表达蛋白先后经过镍亲和层析和离子交换层析方法进行... 详细信息

目的制备获得高纯度的重组SSU05_0272蛋白,并研究其对细胞因子的调控。方法以05ZYH33基因组为模版,PCR扩增SSU05_0272基因,构建表达质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中并诱导表达。上清表达蛋白先后经过镍亲和层析和离子交换层析方法进行纯化。实时定量PCR方法检测纯化后的SSU05_0272蛋白与人脑微血管内皮细胞作用后其细胞因子的转录水平变化。结果制备的SSU05_0272蛋白具有较高的纯度,RT-PCR结果显示,SSU05_0272蛋白与人脑微血管内皮细胞作用后能上调IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1β的表达,下调IL-12P40的表达。结论 SSU05_0272蛋白能够调控促炎症细胞因子和趋化因子转录水平变化,提示其在猪链球菌致炎症反应中起重要作用。

关键词：猪链球菌 SSU05_0272 细胞因子

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猪链球菌胞壁蛋白SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第5期28卷 500-502页

作者：陈哲郑玉玲郝淮杰律清宇姜永强吕淑霞沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁沈阳110866 军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

目的:研究猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控。方法:采用免疫荧光、实时定量PCR、Western blot等方法从基因转录和表达水平研究SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控。结果:实时定量PCR结... 详细信息

目的:研究猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控。方法:采用免疫荧光、实时定量PCR、Western blot等方法从基因转录和表达水平研究SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控。结果:实时定量PCR结果显示SSU05_0272蛋白能下调β-catenin在人脑微血管内皮细胞中的表达;免疫荧光和免疫印迹结果也显示,SSU05_0272蛋白能下调β-catenin在人脑微血管内皮细胞中的含量。结论:SSU05_0272调控人脑微血管内皮细胞β-catenin的表达。

关键词：猪链球菌人脑微血管内皮细胞 SSU05_0272 β-catenin

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重组表达乙肝病毒x蛋白的腺病毒构建及在HepG2细胞的表达

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郑州大学学报（医学版） 2012年第4期47卷 450-453页

作者：张红飞李军锋户义张慧娜鲍春旸王凯娟周育森郑州大学公共卫生学院流行病学教研室郑州450001 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:构建重组表达HBx的腺病毒,并通过感染细胞建立HBx高表达的细胞模型。方法:首先将HBx基因插入腺病毒穿梭质粒pAdTrack中,限制性酶切鉴定正确后将其用PmeⅠ酶切线性化,转到BJ5183感受态细菌进行同源重组,重组后的腺病毒载体pAd-HBx经... 详细信息

目的:构建重组表达HBx的腺病毒,并通过感染细胞建立HBx高表达的细胞模型。方法:首先将HBx基因插入腺病毒穿梭质粒pAdTrack中,限制性酶切鉴定正确后将其用PmeⅠ酶切线性化,转到BJ5183感受态细菌进行同源重组,重组后的腺病毒载体pAd-HBx经PacⅠ酶切线性化后,转染到QBI-293A细胞中,根据EGFP的表达判断重组腺病毒的包装情况。RT-PCR鉴定重组腺病毒的HBx基因表达。根据GFP的表达检测病毒滴度和感染效率。将病毒感染人肝癌HepG2细胞,48h后收集裂解细胞,Westernblot检测HBx蛋白的表达。结果:重组腺病毒载体pAd-HBx经酶切鉴定确认构建成功。将pAd-HBx转染到QBI-293A细胞,荧光检测提示病毒获得成功包装,RT-PCR检测到细胞中HBx基因的表达。重组病毒感染人肝癌HepG2细胞,Westernblot检测到HBx蛋白表达。结论:成功构建了携带HBx基因的重组腺病毒,感染肝癌HepG2细胞后检测到了HBx蛋白的表达,提示建立了HBx高表达的细胞模型,为后续的HBx的功能研究奠定了基础。

关键词：腺病毒载体 HBx基因肝癌细胞

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基于Luminex悬浮芯片的鼠疫耶尔森菌SNP分型方法研究

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军事医学 2012年第7期36卷 502-507页

作者：朱鹏张青雯祁芝珍崔玉军肖潇杨瑞馥谭周进宋亚军湖南农业大学生物安全科学技术学院长沙410128 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 青海省地方病预防控制所西宁811602 湖南中医药大学微生物学教研室长沙410208

目的利用Luminex悬浮芯片技术,基于单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)建立我国鼠疫耶尔森菌东方型菌株(以下简称东方型鼠疫菌)的基因分型方法,为进一步研究东方型鼠疫菌多态性并分析其系统发育关系奠定基础。方法利... 详细信息

目的利用Luminex悬浮芯片技术,基于单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)建立我国鼠疫耶尔森菌东方型菌株(以下简称东方型鼠疫菌)的基因分型方法,为进一步研究东方型鼠疫菌多态性并分析其系统发育关系奠定基础。方法利用多重PCR,同时扩增东方型鼠疫菌中18个具有分型意义的SNP位点,扩增产物进行多重等位基因特异性引物延伸(allele specific primer extension,ASPE)反应以及Luminex悬浮芯片技术分析,随后利用MasterPlex GT V2.3软件计算平均荧光强度(median fluorescence intensity,MFI)比值,判断各SNP位点的碱基状态;并对SNP分型方法的重现性进行评价。结果 Luminex多重SNP技术能够快速、高通量地检测出各SNP位点的MFI值,从而在8 h内一次性成功确定东方型鼠疫菌中18个SNP的碱基状态;36株东方型鼠疫菌基于18个SNP可以分为7个基因型。结论本文建立的Luminex多重SNP检测方法作为一种高通量检测SNP的技术平台,为后期的东方型鼠疫菌SNP分型及系统发育分析奠定了基础。

关键词： Luminex技术耶尔森菌,鼠疫多态性,单核苷酸基因分型

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副溶血弧菌毒力评价小鼠模型的建立与应用

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中国实验动物学报 2012年第4期20卷 31-34页

作者：郭李平徐镔蕊杜德燕姜汉雯邱业峰周冬生中国农业大学动物医学院农业部动物流行病学与人兽共患病重点实验室北京100193 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 军事医学科学院实验动物中心北京100071

目的建立用于评价副溶血弧菌毒力的小鼠模型,为研究副溶血弧菌的致病机制奠定基础。方法将适宜浓度的菌液经腹腔感染4～5周龄雌性BALB/c小鼠,观察小鼠的症状及死亡数。结果高盐(2%NaCl)条件下培养的强毒株RIMD2210633,经腹腔感染107CFU... 详细信息

目的建立用于评价副溶血弧菌毒力的小鼠模型,为研究副溶血弧菌的致病机制奠定基础。方法将适宜浓度的菌液经腹腔感染4～5周龄雌性BALB/c小鼠,观察小鼠的症状及死亡数。结果高盐(2%NaCl)条件下培养的强毒株RIMD2210633,经腹腔感染107CFU的菌量,小鼠存活率为20%～30%,而环境无毒株S251的小鼠存活率为100%。结论建立了评价副溶血弧菌毒力的实验小鼠模型,并应用于不同盐分浓度培养的强毒株与环境无毒株的毒力比较实验。

关键词：副溶血弧菌小鼠致死性

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