检索结果-内蒙古大学图书馆

中国消毒学杂志 2012年第5期29卷 367-369页

作者：温占波王洁李劲松胡凌飞杨文慧李娜董晓凯鹿建春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室国家生物防护装备工程技术中心北京100071

目的评价一种多因子组合型空气净化器对实验产生的细菌、真菌气溶胶的净化效果。方法通过在气溶胶密闭测试柜内人工发生细菌、真菌气溶胶,采用安德森微生物采样器采样和检测方法,评价该组合型空气净化器对空气中细菌、真菌净化效果。结... 详细信息

目的评价一种多因子组合型空气净化器对实验产生的细菌、真菌气溶胶的净化效果。方法通过在气溶胶密闭测试柜内人工发生细菌、真菌气溶胶,采用安德森微生物采样器采样和检测方法,评价该组合型空气净化器对空气中细菌、真菌净化效果。结果在本实验条件下,产生的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌等3种微生物气溶胶发生量为(220～228)μl/min;此3种微生物气溶胶粒子数量中值直径分别为1.79μm、1.94μm和1.60μm。本试验多因子组合型空气净化器对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌气溶胶的净化效率(除菌率)分别为99.23%、99.69%和99.70%。结论本实验室人工产生的细菌、真菌气溶胶符合试验要求,所检测的多因子组合型空气净化器对3种试验菌气溶胶净化效果均达到99%以上。

关键词：空气净化器微生物气溶胶净化效果

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猪链球菌胞壁蛋白SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第5期28卷 500-502页

作者：陈哲郑玉玲郝淮杰律清宇姜永强吕淑霞沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁沈阳110866 军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

目的:研究猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控。方法:采用免疫荧光、实时定量PCR、Western blot等方法从基因转录和表达水平研究SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控。结果:实时定量PCR结... 详细信息

目的:研究猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控。方法:采用免疫荧光、实时定量PCR、Western blot等方法从基因转录和表达水平研究SSU05_0272对人脑微血管内皮细胞β-catenin的调控。结果:实时定量PCR结果显示SSU05_0272蛋白能下调β-catenin在人脑微血管内皮细胞中的表达;免疫荧光和免疫印迹结果也显示,SSU05_0272蛋白能下调β-catenin在人脑微血管内皮细胞中的含量。结论:SSU05_0272调控人脑微血管内皮细胞β-catenin的表达。

关键词：猪链球菌人脑微血管内皮细胞 SSU05_0272 β-catenin

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肾综合征出血热防治决策应用系统构建

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中国公共卫生 2012年第1期28卷 1-4页

作者：孙麇方立群张文义杨红李亚品周洁萍龚建华曹务春中国科学院遥感应用研究所遥感科学国家重点实验室北京100101 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的利用空间信息技术和信息可视化技术建立肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)防治决策应用系统。方法在Windows XP系统环境下,采用ArcGIS Engine 9.2组件,在Visual Basic 6.0环境中完成组件式开发,并利用Act... 详细信息

目的利用空间信息技术和信息可视化技术建立肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)防治决策应用系统。方法在Windows XP系统环境下,采用ArcGIS Engine 9.2组件,在Visual Basic 6.0环境中完成组件式开发,并利用ActiveX Data Object(ADO)连接其他属性数据库,将地理数据库和属性数据库、知识数据库等有机集成,完成以GIS系统为核心的信息可视化系统,将HFRS相关信息转化为知识提供给决策者。结果建立一个综合集成HFRS监测数据、传播媒介及动物宿主数据、相关地理环境等数据的防治决策应用系统,为HFRS现场流行病学调查、数据管理与分析、鉴别诊断、媒介与动物宿主识别、地图制作等提供工具,并提供数据导出功能,可使多个部门与机构进行数据共享。结论将地理空间数据与流行病学多元数据结合、将传统GIS与多元信息可视化技术结合,才能让空间信息技术在疾病预防控制方面发挥决策支持的作用。

关键词：空间信息肾综合症出血热流行病学

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基于随机聚合酶链反应的病原菌基因芯片检测技术

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军事医学 2012年第4期36卷 304-308页

作者：高兴曲险峰孙伟李华宇辛文文李箐王景林军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军63850部队防疫检验及环境监测所吉林白城137001

目的建立一种基于随机聚合酶链反应的病原细菌基因芯片筛查检测技术。方法用生物学软件分析7种病原菌特异性基因序列的保守性区域,利用Oligo 6.0软件设计针对靶细菌的一系列探针,制备检测用基因芯片。细菌基因组DNA在随机引物扩增中掺... 详细信息

目的建立一种基于随机聚合酶链反应的病原细菌基因芯片筛查检测技术。方法用生物学软件分析7种病原菌特异性基因序列的保守性区域,利用Oligo 6.0软件设计针对靶细菌的一系列探针,制备检测用基因芯片。细菌基因组DNA在随机引物扩增中掺入氨基丙烯-dUTP,产物偶联荧光染料后与芯片上探针杂交,通过芯片扫描仪和图像分析软件对结果进行判断。选取19种病原菌基因组DNA进行芯片特异性验证和灵敏度评价,使用问号钩端螺旋体对应靶探针进行基因芯片检测方法重复性验证,并制备问号钩端螺旋体模拟水污染样本进行芯片检测。结果在均一的杂交条件下4种靶细菌均能得到相应特异性杂交图谱,其他非目的细菌均为阴性结果,3种靶细菌基因组DNA最低检测浓度为14.43～363.4 pg/μl,芯片重复性变异系数CV值<15%,最低可检测含问号钩端螺旋体7×105条/ml模拟水污染样本。结论初步建立的随机聚合酶链反应结合芯片技术的检测方法可用于多种病原菌筛查检测,为细菌高通量筛查与鉴定技术提供了新的思路和实验依据。

关键词：细菌基因芯片特异基因随机聚合酶链反应

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重组表达乙肝病毒x蛋白的腺病毒构建及在HepG2细胞的表达

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郑州大学学报（医学版） 2012年第4期47卷 450-453页

作者：张红飞李军锋户义张慧娜鲍春旸王凯娟周育森郑州大学公共卫生学院流行病学教研室郑州450001 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:构建重组表达HBx的腺病毒,并通过感染细胞建立HBx高表达的细胞模型。方法:首先将HBx基因插入腺病毒穿梭质粒pAdTrack中,限制性酶切鉴定正确后将其用PmeⅠ酶切线性化,转到BJ5183感受态细菌进行同源重组,重组后的腺病毒载体pAd-HBx经... 详细信息

目的:构建重组表达HBx的腺病毒,并通过感染细胞建立HBx高表达的细胞模型。方法:首先将HBx基因插入腺病毒穿梭质粒pAdTrack中,限制性酶切鉴定正确后将其用PmeⅠ酶切线性化,转到BJ5183感受态细菌进行同源重组,重组后的腺病毒载体pAd-HBx经PacⅠ酶切线性化后,转染到QBI-293A细胞中,根据EGFP的表达判断重组腺病毒的包装情况。RT-PCR鉴定重组腺病毒的HBx基因表达。根据GFP的表达检测病毒滴度和感染效率。将病毒感染人肝癌HepG2细胞,48h后收集裂解细胞,Westernblot检测HBx蛋白的表达。结果:重组腺病毒载体pAd-HBx经酶切鉴定确认构建成功。将pAd-HBx转染到QBI-293A细胞,荧光检测提示病毒获得成功包装,RT-PCR检测到细胞中HBx基因的表达。重组病毒感染人肝癌HepG2细胞,Westernblot检测到HBx蛋白表达。结论:成功构建了携带HBx基因的重组腺病毒,感染肝癌HepG2细胞后检测到了HBx蛋白的表达,提示建立了HBx高表达的细胞模型,为后续的HBx的功能研究奠定了基础。

关键词：腺病毒载体 HBx基因肝癌细胞

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用rAAV8-1.3HBV制备两种品系小鼠乙型肝炎病毒感染模型的比较研究

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病毒学报 2012年第5期28卷 541-547页

作者：王刚董小岩田文洪尉迟捷郑刚高杰王国婧魏国超周育森吴小兵中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 北京五加和分子医学研究所北京100176 吉林大学生命科学学院长春130012 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

我们先前用rAAV8-1.3HBV静脉注射C57BL/6小鼠成功地制备了慢性乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染模型。为了探讨不同品系的小鼠对rAAV8-1.3HBV静脉注射是否具有不同反应,本研究比较了C57BL/6和BALB/c小鼠静脉注射重组病毒后外周... 详细信息

我们先前用rAAV8-1.3HBV静脉注射C57BL/6小鼠成功地制备了慢性乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染模型。为了探讨不同品系的小鼠对rAAV8-1.3HBV静脉注射是否具有不同反应,本研究比较了C57BL/6和BALB/c小鼠静脉注射重组病毒后外周血中HBV抗原和抗体水平、病毒载量和肝脏组织HBcAg表达情况,以及不同剂量重组病毒注射与这些指标的关系。将低(4×109 Viral genome,vg)、中(4×1010vg)和高(4×1011vg)三种剂量的rAAV8-1.3HBV通过尾静脉注射至C57BL/6和BALB/c小鼠,分别利用ELISA和荧光定量PCR方法检测血清中的HBV抗原、抗体水平以及HBV DNA,利用免疫组化检测肝脏组织HBcAg的表达。结果发现,对于C57BL/6小鼠,三种不同剂量rAAV8-1.3HBV注射均可造成100%小鼠出现HBV持续感染;血清HBsAg、HBeAg和HBV DNA以及肝组织HBcAg稳定表达超过8个月,其表达水平随重组病毒注射剂量的增加而升高,高剂量注射时可造成超过40%的肝细胞感染HBV,血清中HBV DNA可达105 IU/mL以上;未检测到针对HBV的抗体。对于BALB/c小鼠,三种不同剂量rAAV8-1.3HBV注射也可造成100%小鼠出现HBV持续感染;血清HBeAg和HBV DNA以及肝组织HBcAg稳定表达超过8个月,但是血清HBsAg在重组病毒注射2周之后显著下降甚至消失;在中剂量注射组的BALB/c小鼠血清中检测到低水平的Anti-HBs;血清HBeAg和肝组织HBcAg的表达水平随重组病毒注射剂量的增加而增高,并且各剂量组表达水平均高于C57BL/6小鼠,高剂量注射时可造成超过50%的肝细胞感染HBV。本研究表明,低至4×109 vg剂量的rAAV8-1.3HBV注射即可造成C57BL/6和BALB/c两种品系小鼠出现HBV持续感染,并且HBV复制水平随重组病毒注射剂量增加而增高;BALB/c小鼠对HBV的免疫反应强于C57BL/6小鼠,可以产生针对HBsAg的体液免疫反应而使血清HBsAg转阴,但无法清除携带HBV的肝细胞。

关键词：动物模型乙型肝炎病毒重组8型腺相关病毒小鼠品系

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中国蠛蠓的地理分布特征

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寄生虫与医学昆虫学报 2012年第2期19卷 102-109页

作者：虞以新军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

根据以往多年及近期对蠛蠓属的研究报道，分析探讨了世界已知175种蠛蠓的分布概况，叙述了中国已知68种蠛蠓的分布区系特征。

关键词：蠛蠓属蠓科区系地理分布中国

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胶体金免疫层析试纸条快速检测乙型流感病毒

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免疫学杂志 2012年第11期28卷 981-984页

作者：张绍庚段跃强张德玺张培瑞李志伟王希良杨鹏辉中国人民解放军第302医院肝胆外科北京100039 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京阿斯可来生物工程有限公司 101500

目的建立有效、简便的胶体金免疫层析试纸条快速检测乙型流感病毒感染的方法。方法通过对乙型流感病毒核蛋白单克隆抗体进行胶体金标记,成功研制了乙型流感病毒免疫层析检测试纸条。结果该试纸条操作简单,肉眼于10～15 min内判定结果,... 详细信息

目的建立有效、简便的胶体金免疫层析试纸条快速检测乙型流感病毒感染的方法。方法通过对乙型流感病毒核蛋白单克隆抗体进行胶体金标记,成功研制了乙型流感病毒免疫层析检测试纸条。结果该试纸条操作简单,肉眼于10～15 min内判定结果,对乙型流感病毒具有高度特异性,与甲型H1N1、H3N2亚型流感病毒等其他重要呼吸道病毒无交叉反应。试纸条在室温保存12个月、2～8℃保存18个月,其特异性和灵敏度无明显变化。对从内蒙自治区医院收集的流感样症状病人的702份鼻咽部分泌物进行检测,与美国Quidel公司同类产品的符合率为95%。结论建立的乙型流感病毒免疫层析检测方法具有简便、快速、特异、敏感和稳定等特点,对乙型流感病毒感染疾病的临床检测与早期诊断具有重要意义。

关键词：乙型流感病毒免疫层析试纸条单克隆抗体

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LETMD1单克隆抗体的鉴定及其在肝细胞癌临床诊断研究中的初步应用

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中国卫生检验杂志 2012年第2期22卷 201-204页

作者：胡冬李军锋于虹陈万荣周育森四川省绵阳市中心医院检验科四川绵阳621000 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:对制备的LETMD1-C末端单克隆抗体进行免疫特性鉴定,并将其应用于肝细胞癌的临床诊断研究。方法:使用ELISA,细胞免疫荧光及Western blot等免疫学技术对所制备的单克隆抗体进行免疫特性鉴定;以鉴定的抗体为工具,检测肝癌组织中LETMD... 详细信息

目的:对制备的LETMD1-C末端单克隆抗体进行免疫特性鉴定,并将其应用于肝细胞癌的临床诊断研究。方法:使用ELISA,细胞免疫荧光及Western blot等免疫学技术对所制备的单克隆抗体进行免疫特性鉴定;以鉴定的抗体为工具,检测肝癌组织中LETMD1编码产物表达情况。结果:免疫学鉴定结果验证了制备的单克隆抗体具有较高的使用效价和良好的特异性。检测肝组织标本中LETMD1编码产物表达情况,发现其在正常组织中不表达,在肝癌组织表达明显高于癌旁组织。结论:制备了抗-LETMD1-C末端的单克隆抗体,经鉴定具有较高的效价和良好的特异性,可以应用于LETMD1癌基因的功能研究和肝细胞癌的临床诊断研究,为深入研究LETMD1蛋白的生物学功能和建立新的肝细胞癌早期诊断方法奠定了可靠基础。

关键词：单克隆抗体 LETMD1 肝细胞癌临床诊断

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基于Luminex悬浮芯片的鼠疫耶尔森菌SNP分型方法研究

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军事医学 2012年第7期36卷 502-507页

作者：朱鹏张青雯祁芝珍崔玉军肖潇杨瑞馥谭周进宋亚军湖南农业大学生物安全科学技术学院长沙410128 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 青海省地方病预防控制所西宁811602 湖南中医药大学微生物学教研室长沙410208

目的利用Luminex悬浮芯片技术,基于单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)建立我国鼠疫耶尔森菌东方型菌株(以下简称东方型鼠疫菌)的基因分型方法,为进一步研究东方型鼠疫菌多态性并分析其系统发育关系奠定基础。方法利... 详细信息

目的利用Luminex悬浮芯片技术,基于单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)建立我国鼠疫耶尔森菌东方型菌株(以下简称东方型鼠疫菌)的基因分型方法,为进一步研究东方型鼠疫菌多态性并分析其系统发育关系奠定基础。方法利用多重PCR,同时扩增东方型鼠疫菌中18个具有分型意义的SNP位点,扩增产物进行多重等位基因特异性引物延伸(allele specific primer extension,ASPE)反应以及Luminex悬浮芯片技术分析,随后利用MasterPlex GT V2.3软件计算平均荧光强度(median fluorescence intensity,MFI)比值,判断各SNP位点的碱基状态;并对SNP分型方法的重现性进行评价。结果 Luminex多重SNP技术能够快速、高通量地检测出各SNP位点的MFI值,从而在8 h内一次性成功确定东方型鼠疫菌中18个SNP的碱基状态;36株东方型鼠疫菌基于18个SNP可以分为7个基因型。结论本文建立的Luminex多重SNP检测方法作为一种高通量检测SNP的技术平台,为后期的东方型鼠疫菌SNP分型及系统发育分析奠定了基础。

关键词： Luminex技术耶尔森菌,鼠疫多态性,单核苷酸基因分型

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