检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通讯 2012年第4期23卷 554-557页

作者：和晋渝邱景富刘梦颖闫小娟李迎丽郭兆彪周冬生重庆医科大学公共卫生与管理学院重庆400016 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:了解肺炎克雷伯菌强毒性血清型K1、K2、K54和K57型菌株在我国重庆、北京、深圳三地的分布及流行趋势。方法:采用PCR对310株肺炎克雷伯菌临床分离株进行血清型K1、K2、K54和K57检测。结果:310株菌中,K1、K2、K54和K57血清型分别占14... 详细信息

目的:了解肺炎克雷伯菌强毒性血清型K1、K2、K54和K57型菌株在我国重庆、北京、深圳三地的分布及流行趋势。方法:采用PCR对310株肺炎克雷伯菌临床分离株进行血清型K1、K2、K54和K57检测。结果:310株菌中,K1、K2、K54和K57血清型分别占14.2%、9.4%、6.5%和4.2%;来自呼吸系统标本分离株中的K1血清型菌株在4种检测的强毒血清型中占首位,为呼吸系统总数的17.4%。结论:310株肺炎克雷伯菌的4种强毒性血清型中,K1血清型菌株所占比例高,较为流行。

关键词：肺炎克雷伯菌血清型强毒株聚合酶链反应

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流行性乙型脑炎发病率的气象影响因子分析

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中国媒介生物学及控制杂志 2012年第4期23卷 332-334页

作者：赵俊英代培芳刘美德孔祥盛张久松刘竹萍管翠强王海娇程璟侠山西省疾病预防控制中心病媒生物防控科山西太原030012 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室太原市疾病预防控制中心山西医科大学第一医院

目的探讨山西省运城地区流行性乙型脑炎(乙脑)发病率与气象因子之间的关系。方法收集2000-2009年7-9月运城地区乙脑发病率及同期气象资料,用SPSS17.0软件分析两者相关性,并用逐步回归分析建立乙脑发病率的气象因子拟合模型。结果运城地... 详细信息

目的探讨山西省运城地区流行性乙型脑炎(乙脑)发病率与气象因子之间的关系。方法收集2000-2009年7-9月运城地区乙脑发病率及同期气象资料,用SPSS17.0软件分析两者相关性,并用逐步回归分析建立乙脑发病率的气象因子拟合模型。结果运城地区乙脑病例多在6月开始出现,7月增多,8月达到高峰,9月减少,10月偶有发生。乙脑发病率与月平均温度、月平均气压等相关,与月温差、月日照、相对湿度、月降雨量无关。逐步回归分析得出乙脑发病率的气压回归方程,ap1(提前1个月的平均气压)有良好的拟合效果。结论气象因子对乙脑发病有重要影响,可以利用气压拟合模型预测乙脑发病率变化趋势。

关键词：流行性乙型脑炎发病率气象因子拟合模型

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EV71型手足口病乳鼠动物模型的建立及免疫、内分泌及病理特征研究

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免疫学杂志 2012年第10期28卷 867-871页

作者：李仲任庆杰门丽管晨杨巧芝赵忠鹏田庆玲闫芳王希良山西农业大学动物科技学院太原030801 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京中医药大学第一临床学院中医内科 100029 聊城市人民医院儿科 252000 唐山市妇幼保健院感染性疾病科 063000

目的建立EV71型手足口病乳鼠动物模型并进行免疫、致病特性研究。方法将临床分离的EV71病毒株经蚀斑纯化,3T3细胞适应,乳鼠驯化,最终获得1株能致死7日龄乳鼠的EV71毒株,命名为BJ09/07(GenBank Accession ***319054,EV71-BJ)。EV71-BJ感... 详细信息

目的建立EV71型手足口病乳鼠动物模型并进行免疫、致病特性研究。方法将临床分离的EV71病毒株经蚀斑纯化,3T3细胞适应,乳鼠驯化,最终获得1株能致死7日龄乳鼠的EV71毒株,命名为BJ09/07(GenBank Accession ***319054,EV71-BJ)。EV71-BJ感染7日龄ICR乳鼠后,观测临床疾病得分、体质量变化、死亡率并测定病毒载量、免疫分子、内分泌水平、组织病理损伤等病毒、免疫、内分泌、病理指标。结果 EV71-BJ毒株感染7日龄ICR乳鼠,其病毒毒力为150 LD50/ml,感染后不同时期肌肉病毒载量均高于脑中,至第4天达到高峰,后不断下降。至感染后第6天发病达高峰时做病理检测,相对于脑组织,肌肉中有更严重的淋巴细胞浸润,引起更严重的炎性分子升高。肌肉研磨液和血清中MCP-1、IFN-γ、IL-6和TNF-α显著升高,而肾上腺素和皮质醇未见明显变化。结论初步建立了EV71型手足口病乳鼠动物模型,为药物筛选、疫苗研发及免疫机理研究奠定了基础。

关键词： EV71 ICR乳鼠免疫内分泌病理

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吲哚胺2,3双加氧酶与乙肝病毒不同感染状态T淋巴细胞亚群及病毒载量的相关性研究

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北京医学 2012年第12期34卷 1025-1029页

作者：曾道炳卢实春李军峰胡冬周育森首都医科大学附属北京佑安医院肝胆外科暨肝移植中心 100069 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的探讨乙肝病毒(HBV)不同感染状态下,吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)表达水平及其与T淋巴细胞亚群及病毒载量的相关性。方法检测受检者外周静脉血IDO mRNA、IDO蛋白、IDO活性,T淋巴细胞亚群及病毒载量(对照组除... 详细信息

目的探讨乙肝病毒(HBV)不同感染状态下,吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)表达水平及其与T淋巴细胞亚群及病毒载量的相关性。方法检测受检者外周静脉血IDO mRNA、IDO蛋白、IDO活性,T淋巴细胞亚群及病毒载量(对照组除外);进行各组间均数比较及相关性分析。结果 IDO mRNA、IDO蛋白及IDO活性从高到低依次为急性乙型肝炎组(acute hepatitis B,AHB)、肝硬化组(HBV-related liver cirrhosis,LC)、慢性乙型肝炎组(chronic hepatitis B,CHB)、肝癌组(HBV-related hepatocellularcar cinoma,HCC)、对照组。HCC组及对照组均明显低于其他3组(P<0.01),其余各组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CD3+、CD4+T淋巴细胞在AHB组最高,对照组次之,LC组最低;AHB组、对照组及CHB组均明显高于LC组(P<0.05);AHB组、对照组明显高于HCC组(P<0.05)。CD8+T淋巴细胞在对照组最高,AHB组次之,LC组最低;但仅AHB组、对照组明显高于LC组(P<0.05)。AHB组CD4+/CD8+明显高于其他组(P<0.01)。CHB及LC组病毒载量最高,均明显高于HCC及AHB组(P<0.05)。CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞与病毒载量、IDO蛋白及IDO活性均呈负相关,CD8+T淋巴细胞与I-DO mRNA呈负相关(r=-0.287,P=0.039);CD4+/CD8+与IDO蛋白及IDO活性均呈正相关(r=0.470,P=0.000;r=0.285,P=0.040),病毒载量与IDO mRNA、IDO蛋白及IDO活性均呈正相关(r=0.530,P=0.001;r=0.416,P=0.002;r=0.649,P=0.000)。结论 HBV感染者IDO表达明显增强,与病毒载量呈正相关,与T淋巴细胞呈负相关,其早期升高有利于病毒清除,但持续升高会导致HBV特异性T淋巴细胞功能抑制,使HBV慢性化。

关键词：吲哚胺2,3双加氧酶乙型肝炎病毒 T淋巴细胞

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快速从医院废水中大规模分离铜绿假单胞杆菌噬菌体

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生物技术通讯 2012年第4期23卷 567-571页

作者：范华昊范俊芬滑玉会裴广倩张文惠张博陈晨李建彬王晓娜安小平米志强王琳尹秀云陈建魁童贻刚中南大学基础医学院湖南长沙410013 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 军事医学科学院附属医院临床检验科北京100071

目的:从医院废水中快速分离多株不同的铜绿假单胞杆菌噬菌体,研究其生物学特性,为建立铜绿假单胞杆菌噬菌体库做准备。方法:利用噬菌斑法从未经处理的医院污水中分离和鉴定铜绿假单胞杆菌噬菌体,根据感染谱的不同确定它们为不同的铜绿... 详细信息

目的:从医院废水中快速分离多株不同的铜绿假单胞杆菌噬菌体,研究其生物学特性,为建立铜绿假单胞杆菌噬菌体库做准备。方法:利用噬菌斑法从未经处理的医院污水中分离和鉴定铜绿假单胞杆菌噬菌体,根据感染谱的不同确定它们为不同的铜绿假单胞杆菌噬菌体;重点研究其中一株宿主谱较广的噬菌体的生物学特性,采用负染法电镜观察噬菌体的形态和大小,提取该噬菌体的基因组并进行酶切电泳分析,测定噬菌体感染复数并观察其一步生长曲线。结果:通过噬菌斑法分离出90株铜绿假单胞杆菌噬菌体。电镜观察显示,噬菌体Pa27P1头部呈立体对称,有一长尾;酶切结果显示,噬菌体Pa27P1的基因组为双链DNA;生长曲线表明噬菌体Pa27P1感染宿主菌的潜伏期为25 min,爆发时间为25 min,裂解量为514。结论:90株铜绿假单胞杆菌噬菌体中有5株具有较广的噬菌谱,其组合能裂解所有18株铜绿假单胞杆菌,为深入研究铜绿假单胞杆菌噬菌体的生物学特性及其功能提供了依据。

关键词：铜绿假单胞杆菌噬菌体大规模分离细菌耐药生物学特征

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2型猪链球菌表面蛋白Hp0272的原核表达及其结合人血清IgA的活性分析

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生物技术通讯 2012年第6期23卷 800-803页

作者：甘淑珍任志强袁媛郑玉玲姜永强陈福生华中农业大学食品科学技术学院湖北武汉430070 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的：构建带GST标签的2型猪链球菌功能未知表面蛋白Hp0272的原核表达质粒并在大肠杆菌中表达，获得纯度较高的GST-Hp0272重组融合蛋白，鉴定其与人血清IgA（higA）的结合活性。方法：采用分子生物学方法构建pGEX-4T-1-0272重组表达载... 详细信息

目的：构建带GST标签的2型猪链球菌功能未知表面蛋白Hp0272的原核表达质粒并在大肠杆菌中表达，获得纯度较高的GST-Hp0272重组融合蛋白，鉴定其与人血清IgA（higA）的结合活性。方法：采用分子生物学方法构建pGEX-4T-1-0272重组表达载体，将其转入大肠杆菌BL21（DE3）菌株，IPTG诱导表达后，通过SDS-PAGE分析蛋白表达情况；用GSTrap柱亲和纯化目的蛋白并经Western印迹验证，采用配体印迹和ELISA方法鉴定GST-Hp0272与hlgA的结合活性。结果：构建了GST融合蛋白原核表达质粒，并获得GST-Hp0272融合蛋白，鉴定到Hp0272特异性地与hisA结合，且结合区域位于Hp0272的N端（41-318an）。结论：获得了GST-Hp0272融合蛋白，并鉴定到其能特异性结合hlgA，为进一步了解Hp0272在猪链球菌致病过程中的作用提供了基础。

关键词：猪链球菌 Hp0272 原核表达人血清IgA 特异结合

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携带blaNDM-1的质粒pNDM-BJ01在鲁氏不动杆菌中的适应度代价研究

携带blaNDM-1的质粒pNDM-BJ01在鲁氏不动杆菌中的适应度代价研究

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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会

作者：徐丽吕瑞辰王海燕胡红焱赵向娜杨瑞馥赵建宏宋亚军河北医科大学第二医院石家庄 050000 病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京 100071 病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京 100071 武警总医院检验科北京 100039 河北医科大学第二医院石家庄 050000

本研究通过无抗性液体培养基连续传代培养，获得抗性质粒丢失的10621衍生菌株，分析10621NDM(+)及质粒缺失的10621NDM(-)之间的适应度差异。结果：pNDM-BJO1在10621菌株中不稳定，连续传代11次即在群体中完全丢失。结论编码b1arNDM-1，... 详细信息

本研究通过无抗性液体培养基连续传代培养，获得抗性质粒丢失的10621衍生菌株，分析10621NDM(+)及质粒缺失的10621NDM(-)之间的适应度差异。结果：pNDM-BJO1在10621菌株中不稳定，连续传代11次即在群体中完全丢失。结论编码b1arNDM-1，的质粒pNDM-BJO1在鲁氏不动杆菌中具有较大的适应度代价，缺失这一质粒的菌株在外界环境中的生存能力强于抗性菌株，pNDM-BJO1在鲁氏不动杆菌存续与扩散的能力有限。

关键词：鲁氏不动杆菌传代培养稳定性分析适应度代价

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基于荧光检测的新型细胞传感器

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生物化学与生物物理进展 2011年第2期38卷 185-190页

作者：辛文文王景林军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

主要介绍了一类基于荧光检测的新型细胞传感器,这类传感器利用免疫细胞表面分子特异性识别、结合抗原的特性和生物(或化学)发光技术,通过检测荧光信号在数分钟内达到检测病原体或其他抗原的目的.这类传感器的发光原理主要是利用钙离子... 详细信息

主要介绍了一类基于荧光检测的新型细胞传感器,这类传感器利用免疫细胞表面分子特异性识别、结合抗原的特性和生物(或化学)发光技术,通过检测荧光信号在数分钟内达到检测病原体或其他抗原的目的.这类传感器的发光原理主要是利用钙离子敏感型化学荧光探针发光,如Fluo-4等,或钙离子敏感型发光蛋白发光,如水母发光蛋白、绿色荧光蛋白等.现在已经应用的主要是B细胞传感器和肥大细胞传感器.这类传感器具有灵敏度高、检测准确、反应速度快的优点.同时又存在交叉反应、细胞不易保存等不足之处.这类传感器在疾病诊断、环境监测、生物战剂检测等领域具有较大的应用前景.

关键词：细胞传感器荧光检测免疫细胞病原体检测

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副溶血弧菌毒力评价小鼠模型的建立与应用

副溶血弧菌毒力评价小鼠模型的建立与应用

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2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会

作者：郭李平徐镔蕊杜德燕姜汉雯邱业峰周冬生中国农业大学动物医学院农业部动物流行病学与人兽共患病重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院实验动物中心

目的本研究旨在建立评价副溶血性弧菌毒力的小鼠模型,为研究副溶血性弧菌的致病机制奠定基础。材料方法将不同剂量的RIMD210633菌液经腹腔感染4-5周龄雌性Balb/c小鼠,注射剂量分别为10～9、10～8、10～7、10～6CFU/只,观察小鼠的症状及... 详细信息

目的本研究旨在建立评价副溶血性弧菌毒力的小鼠模型,为研究副溶血性弧菌的致病机制奠定基础。材料方法将不同剂量的RIMD210633菌液经腹腔感染4-5周龄雌性Balb/c小鼠,注射剂量分别为10～9、10～8、10～7、10～6CFU/只,观察小鼠的症状及死亡数,以确定最佳感染量;然后将不同盐分浓

关键词：副溶血弧菌小鼠模型建立与应用

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鼠肝炎冠状病毒非结构蛋白1及其突变体的原核表达

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生物技术通讯 2012年第4期23卷 471-475页

作者：柳洪涛林磊孙走南罗彦军何湘吴晓燕杨益苏文莉祝庆余刘景梅常国辉广西医科大学基础医学院广西南宁530021 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 军事医学科学院疾病预防控制所北京100071

目的:构建鼠肝炎冠状病毒(MHV)非结构蛋白1(NSP1)及其突变体(NSP1 mu)的原核重组表达质粒,在大肠杆菌中分别融合表达重组NSP1及NSP1 mu。方法:以现有质粒载体为模板,扩增编码NSP1及NSP1 mu的基因片段,并克隆至pMD18-T克隆载体;菌落PCR... 详细信息

目的:构建鼠肝炎冠状病毒(MHV)非结构蛋白1(NSP1)及其突变体(NSP1 mu)的原核重组表达质粒,在大肠杆菌中分别融合表达重组NSP1及NSP1 mu。方法:以现有质粒载体为模板,扩增编码NSP1及NSP1 mu的基因片段,并克隆至pMD18-T克隆载体;菌落PCR鉴定阳性克隆并测序分析;将阳性克隆的目的片段亚克隆至表达载体pET-28a,并转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,PCR和双酶切鉴定转化菌落;将阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并加入IPTG诱导表达,SDS-PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的表达。结果:PCR扩增得到表达NSP1及NSP1 mu的特异片段,并克隆到pMD18-T载体,测序结果正确无误;构建了NSP1和NSP1 mu的重组表达质粒,并在大肠杆菌BL21(DE3)中分别融合表达了重组NSP1及NSP1 mu,表达的目的蛋白均能与His单克隆抗体特异结合;用Ni-NTA琼脂糖试剂盒纯化重组蛋白,获得可溶性的NSP1及NSP1 mu,相对分子质量分别为27×103和28×103。结论:在大肠杆菌中分别表达并纯化获得了大量可溶性重组NSP1及NSP1 mu。

关键词：鼠肝炎冠状病毒非结构蛋白1 突变体表达纯化

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