检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2011年第5期27卷 712-716页

作者：曹瑞源韩剑峰秦鄂德秦成峰军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071

手足口病是由多种肠道病毒感染导致的一种急性儿科传染病。近年来,我国肠道病毒71型(EV71)手足口病发病率急剧上升,重症病例时有报道,严重威胁儿童健康。临床上对于重症手足口病的治疗缺乏有效手段,主要以对症治疗和支持疗法为主。静脉... 详细信息

手足口病是由多种肠道病毒感染导致的一种急性儿科传染病。近年来,我国肠道病毒71型(EV71)手足口病发病率急剧上升,重症病例时有报道,严重威胁儿童健康。临床上对于重症手足口病的治疗缺乏有效手段,主要以对症治疗和支持疗法为主。静脉注射人免疫球蛋白由健康献血员血浆提取纯化而来,含有包括EV71在内的多种肠道病毒的中和抗体,可作为重症手足口病被动免疫和免疫调节的重要手段,值得关注。

关键词：肠道病毒71型手足口病免疫球蛋白中和抗体

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HIV-1B′亚型毒株新型耐药相关突变位点的筛选

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中华流行病学杂志 2011年第5期32卷 499-503页

作者：李韩平郭伟刘永健鲍作义李林庄道民刘思扬王铮王晓林李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的筛选HIV—1 B′亚型病毒株中可能存在的新型耐药相关突变位点。方法收集整理前期研究获得的451条H1V-1B′亚型pol区基因序列，序列含蛋白酶全长（1～99个密码子）和反转录酶全长（1～560个密码子），长度约1977bp。将354条来自接受... 详细信息

目的筛选HIV—1 B′亚型病毒株中可能存在的新型耐药相关突变位点。方法收集整理前期研究获得的451条H1V-1B′亚型pol区基因序列，序列含蛋白酶全长（1～99个密码子）和反转录酶全长（1～560个密码子），长度约1977bp。将354条来自接受抗病毒治疗艾滋病患者的（服药组）序列与97条来自未接受治疗患者的（未服药组）序列，分别与B亚型野生型pol基因共享序列进行逐个密码子比对，筛选在服药组序列中出现的频率显著高于未服药组序列的突变位点，将筛选出来的突变位点在斯坦福大学HIV-1耐药数据库中检索，根据数据库收录的情况及解释，初步分析突变与耐药的关系。结果在服药组序列中反转录酶区有6个位点7个突变的频率显著高于未服药组，分别是D123E、V292I、K366R、T369A、T369V、A371V和1375V，即前2个突变位于反转录酶的聚合酶区、后5个突变位于反转录酶的连接区。检索数据库收录情况，有7个突变均为相应位点的主要变异形式，在服药患者中出现的频率显著高于未服药患者。结论筛选出的HIV-1B′亚型病毒株7个突变可能与耐药有关。

关键词： HIV-1 B′亚型新型耐药突变

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高通量测序技术及其在微生物学研究中的应用

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微生物学报 2011年第4期51卷 445-457页

作者：秦楠栗东芳杨瑞馥深圳华大基因研究院深圳518083 病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

20世纪70年代发明的核酸测序技术为基因组学及其相关学科的发展做出了巨大贡献,本世纪初发展的以Illumina公司的HiSeq 2000,ABI公司的SOLiD,和Roche公司的454技术为代表的高通量测序技术又为基因组学的发展注入了新活力。本文在阐述这... 详细信息

20世纪70年代发明的核酸测序技术为基因组学及其相关学科的发展做出了巨大贡献,本世纪初发展的以Illumina公司的HiSeq 2000,ABI公司的SOLiD,和Roche公司的454技术为代表的高通量测序技术又为基因组学的发展注入了新活力。本文在阐述这些技术的基础上,着重讨论了新一代测序技术在微生物领域中的应用。

关键词：新一代测序技术高通量微生物学应用基因组学

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利用BioNumerics软件读取API50CH试验条方法的建立

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军事医学 2011年第11期35卷 874-876页

作者：左庭婷李岩伟韩雪莲何君端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的建立一种利用BioNumerics生物软件分析API细菌鉴定系统50CH试验条发酵反应结果的方法。方法将70株芽孢杆菌属(Bacillus)细菌API 50CH试验条发酵反应结果储存为数码图像,用BioNumerics软件将图像中的红黄颜色转换为数值,再运用百分... 详细信息

目的建立一种利用BioNumerics生物软件分析API细菌鉴定系统50CH试验条发酵反应结果的方法。方法将70株芽孢杆菌属(Bacillus)细菌API 50CH试验条发酵反应结果储存为数码图像,用BioNumerics软件将图像中的红黄颜色转换为数值,再运用百分位数统计方法分析上述数值并计算出每个反应的阈值,定义大于或等于阈值的反应结果为"+",小于阈值的反应结果为"-"。将"+/-"输入apiweb-API 50CHB V3.0细菌鉴定数据库获取鉴定结果。结果与结论该方法对Bacillus的鉴定结果与API经典方法鉴定结果一致。应用上述方法可帮助初级实验人员客观地获得生化反应结果,有利于实验室检测的标准化建设。

关键词：芽孢杆菌属细菌鉴定 API50CH系统 BioNumerics软件

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WJBC株盖塔病毒基因组序列测定及与其他甲病毒的系统进化关系

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军事医学 2011年第12期35卷 892-895页

作者：张雨司炳银常国辉刘伯华杨银辉祝庆余军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的对WJBC株盖塔病毒(GETV)进行基因组序列测定,阐明其与已报道的GETV及其他甲病毒的关系。方法将GETV基因组编码区分12段分别进行RT-PCR扩增,将扩增产物直接进行测序,非编码区采用RACE法进行扩增,扩增产物纯化后连入pGEM-T easy载体,... 详细信息

目的对WJBC株盖塔病毒(GETV)进行基因组序列测定,阐明其与已报道的GETV及其他甲病毒的关系。方法将GETV基因组编码区分12段分别进行RT-PCR扩增,将扩增产物直接进行测序,非编码区采用RACE法进行扩增,扩增产物纯化后连入pGEM-T easy载体,经转化DH5α感受态细胞,挑取阳性克隆鉴定后测序,应用DNAStar软件将测序结果拼接获得基因组序列。结果与结论 GETV基因组核苷酸共11 696 nt,编码3721个氨基酸,非结构基因编码2468个氨基酸,结构基因编码1253个氨基酸,结构基因和非结构基因之间有44 nt的连接区为非翻译区。病毒基因组5'端和3'端分别有78、411 nt的非编码区。序列同源性分析结果表明,此株病毒与M1株盖塔病毒同源性最高,两者核苷酸序列同源性为99.8%,氨基酸序列同源性为99.2%。

关键词：盖塔病毒基因组 RT-PCR

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黑龙江立克次体感染血管内皮细胞的初步研究

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中国人兽共患病学报 2011年第6期27卷 470-474页

作者：孟艳芬段长松王锡乐熊小路温博海军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的通过黑龙江立克次体感染体外培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)探讨其在内皮细胞内的生长规律。方法将泛影葡胺密度梯度超速离心纯化的黑龙江立克次体(HLJ-054株)感染体外培养的HUVEC,通过间接... 详细信息

目的通过黑龙江立克次体感染体外培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)探讨其在内皮细胞内的生长规律。方法将泛影葡胺密度梯度超速离心纯化的黑龙江立克次体(HLJ-054株)感染体外培养的HUVEC,通过间接免疫荧光和扫描电镜检测与观察不同时相黑龙江立克次体在内皮细胞内的生长状况。热灭活黑龙江立克次体做平行对照。结果立克次体粘附并侵入内皮细胞,在感染后第6 h及第24 h分别为感染高峰;感染5 d后细胞内立克次体逐渐增殖,第8～9 d细胞内立克次体急剧增殖,并见细胞核内有少量立克次体,细胞出现病变,第12 d细胞内充满立克次体,大部分细胞皱缩脱落。结论黑龙江立克次体能够感染血管内皮细胞,在血管内皮细胞内不断增殖而使细胞死亡。

关键词：黑龙江立克次体血管内皮细胞细胞病变

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生物毒素战剂：检测识别分子与防治药物

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军事医学 2011年第8期35卷 561-565页

作者：王景林军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

自然界中存在着种类繁多的毒素物质,但最有可能用作战剂的是那些获取方便、制备容易、毒性强、施放后可致人死亡或失能的毒素。毒素战剂既不同于传统的细菌、病毒战剂,也不同于化学毒剂,其最大的威胁来自它的高毒性及缺乏有效的治疗手... 详细信息

自然界中存在着种类繁多的毒素物质,但最有可能用作战剂的是那些获取方便、制备容易、毒性强、施放后可致人死亡或失能的毒素。毒素战剂既不同于传统的细菌、病毒战剂,也不同于化学毒剂,其最大的威胁来自它的高毒性及缺乏有效的治疗手段。因此,发展毒素战剂的检测识别分子与防治药物就显得尤为重要。本文讨论了生物毒素战剂相关概念、特征,重点综述了毒素战剂的检测识别分子与防治药物研究进展。

关键词：生物毒素生物战剂识别分子治疗药物疫苗

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结核分枝杆菌Rv3881c抗原鼠单克隆抗体的制备及初步鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第8期27卷 891-892页

作者：刘树玲李浩任军付玲李建民侯利华徐俊杰陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:制备抗结核分枝杆菌Rv3881c抗原鼠mAb。方法:采用杂交瘤技术,获得了11株针对结核分枝杆菌Rv3881c抗原鼠mAb杂交瘤细胞株,对其中的5株进行了小鼠腹水的制备及相关鉴定。结果:5株mAb的腹水效价达到1∶32 000～1∶512 000,将这5株mAb... 详细信息

目的:制备抗结核分枝杆菌Rv3881c抗原鼠mAb。方法:采用杂交瘤技术,获得了11株针对结核分枝杆菌Rv3881c抗原鼠mAb杂交瘤细胞株,对其中的5株进行了小鼠腹水的制备及相关鉴定。结果:5株mAb的腹水效价达到1∶32 000～1∶512 000,将这5株mAb进行了纯化,纯化后纯度大于90%,抗体亚类(型)均为IgG1/κ型,ELISA结果显示制备的mAb与结核分枝杆菌Rv3881c抗原可发生特异反应。结论:制备了抗结核分枝杆菌Rv3881c抗原鼠mAb,为结核分枝杆菌Rv3881c生物学功能的研究奠定基础。

关键词：结核分枝杆菌 Rv3881c 杂交瘤 mAb ELISA

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人源高致病性H5N1不同蚀斑特性病毒致病力研究

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解放军医学杂志 2011年第6期36卷 582-584页

作者：李永强李靖户义孙伟常国辉杨银辉康晓平吴晓燕祝庆余军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的分析不同空斑特性病毒致病力的差异,为禽流感病毒跨种属传播机制研究提供新的思路与依据。方法利用病毒蚀斑技术,从A/Beijing/01/03(H5N1)(BJ01)病毒中分离纯化不同蚀斑特性的病毒——较大和较小蚀斑病毒。采用纯化的大、小斑病毒... 详细信息

目的分析不同空斑特性病毒致病力的差异,为禽流感病毒跨种属传播机制研究提供新的思路与依据。方法利用病毒蚀斑技术,从A/Beijing/01/03(H5N1)(BJ01)病毒中分离纯化不同蚀斑特性的病毒——较大和较小蚀斑病毒。采用纯化的大、小斑病毒滴鼻感染小鼠,观察并记录感染后14d小鼠体重和死亡数变化,分析大、小斑病毒致病力的差异。结果 BJ01株原始病毒呈现大小不一的混合斑状态,从BJ01株分离纯化了大斑病毒L1、L2和小斑病毒S1、S2、S3,其中小斑病毒S1和S2的致病力较强,大斑病毒L1和小斑病毒S3的致病力较弱,大斑病毒L2病毒致病力最弱。同种空斑特性的病毒致病力差异显著,不同空斑特性病毒在致病力上也存在显著差异。结论 H5N1病毒的空斑大小与病毒致病力没有线性相关性,但可以根据空斑大小,利用蚀斑技术分离纯化出致病力差异明显的病毒。

关键词：流感病毒A型,H5N1亚型毒力

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一株新分离的肠杆菌噬菌体的快速遗传鉴定及其宿主识别基因的快速克隆(英文)

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生物工程学报 2011年第6期27卷 884-890页

作者：姜焕焕王盛李存刘大斌于长明安小平米志强陈建魁童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 军事医学科学院解放军307医院临床检验科北京100071

以大肠杆菌8099为宿主自医院污水中分离出一株肠杆菌噬菌体IME08,其遗传物质经RNA酶、DNA酶处理证实其为DNA,用限制性内切酶处理该DNA证实其为双链DNA。利用随机引物PCR技术扩增并克隆该噬菌体基因组的随机片段,经测序后同源比对,判断... 详细信息

以大肠杆菌8099为宿主自医院污水中分离出一株肠杆菌噬菌体IME08,其遗传物质经RNA酶、DNA酶处理证实其为DNA,用限制性内切酶处理该DNA证实其为双链DNA。利用随机引物PCR技术扩增并克隆该噬菌体基因组的随机片段,经测序后同源比对,判断该噬菌体是一株新的T4-like噬菌体。根据4株T4-like噬菌体(T4,JS98,T2及K3)宿主识别基因(g37)5'端的高度保守序列,采用随机PCR与巢式PCR结合的"基因组跳跃"策略快速克隆出了该噬菌体的宿主识别基因g37和g38。

关键词：肠杆菌噬菌体 T4噬菌体属 PCR 基因组跳跃宿主识别基因

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