检索结果-内蒙古大学图书馆

生命科学 2011年第9期23卷 917-920页

作者：赵向娜杨瑞馥军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

噬菌体(bacteriophage,phage)是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的细菌病毒的总称。噬菌体在生态、微生物进化、细菌性疾病预防和治疗、细菌鉴定与疾病诊断等方面扮演重要角色。基因组测序技术和高效合成平台促进了合成基因组... 详细信息

噬菌体(bacteriophage,phage)是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的细菌病毒的总称。噬菌体在生态、微生物进化、细菌性疾病预防和治疗、细菌鉴定与疾病诊断等方面扮演重要角色。基因组测序技术和高效合成平台促进了合成基因组学的发展。利用合成基因组学技术,对噬菌体基因组进行设计或者合成出新的噬菌体来服务人类在不久的未来可能成为现实。但与此同时,合成噬菌体带来的风险也必须认真考虑。

关键词：噬菌体合成基因组学细菌性疾病

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河南某农村艾滋病患者劣势耐药毒株的进化及原发耐药研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第4期31卷 356-360页

作者：李韩平郭伟朱新鹏王哲刘永健鲍作义李林庄道民刘思扬王铮王晓林李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 100071 河南省疾病预防控制中心

目的了解河南省部分艾滋病患者抗病毒治疗效果及耐药发生情况，分析劣势耐药毒株在该人群本底存在情况。方法以河南某农村149名初始接受抗病毒治疗的艾滋病患者为研究对象，采用自建（In-house）基因型耐药检测方法分析抗病毒治疗失败患... 详细信息

目的了解河南省部分艾滋病患者抗病毒治疗效果及耐药发生情况，分析劣势耐药毒株在该人群本底存在情况。方法以河南某农村149名初始接受抗病毒治疗的艾滋病患者为研究对象，采用自建（In-house）基因型耐药检测方法分析抗病毒治疗失败患者HIV-1耐药发生情况，对抗病毒治疗后产生耐药的病例采用等位基因特异性实时定量PCR（allele-specificreal-timePCR，ASPCR）方法检测其抗病毒治疗前样本劣势耐药毒株存在情况。结果抗病毒治疗后患者的HIV-1病毒载量显著下降（t=275，P：0．0001），但CD4’T淋巴细胞绝对数无明显变化（t=1．765168，P=0．0852）。抗病毒治疗失败患者中耐药的发生率为4．88％，ASPCR检测发现，在调查基线时，7例耐药患者全部存在劣势M184V突变，5例存在劣势K103N突变。结论河南省部分未治疗的艾滋病患者存在HIV-1原发性耐药毒株，劣势耐药突变可能发展为优势耐药毒株并影响抗病毒治疗的效果。

关键词：抗病毒治疗原发耐药 In-house ASPCR

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河南某农村接受抗病毒治疗的艾滋病患者HIV-1耐药发生的六年队列分析

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中华医学杂志 2011年第21期91卷 1443-1447页

作者：李韩平郭伟李宏王哲刘永健鲍作义李林庄道民刘思扬王铮王晓林李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 河南省疾病预防控制中心

目的揭示在中国农村特殊的抗病毒治疗模式下HIV．1耐药发生的规律。方法2004年3月在中国河南某农村招募75例于2003年9月开始接受齐多夫定（AZT）＋去羟肌苷（ddI）＋奈韦拉平（NVP）治疗的艾滋病患者，进行封闭式队列研究，共随访12次、... 详细信息

目的揭示在中国农村特殊的抗病毒治疗模式下HIV．1耐药发生的规律。方法2004年3月在中国河南某农村招募75例于2003年9月开始接受齐多夫定（AZT）＋去羟肌苷（ddI）＋奈韦拉平（NVP）治疗的艾滋病患者，进行封闭式队列研究，共随访12次、788人次、历时6年3个月，每次随访均检测病毒载量及CD4细胞计数，对病毒未抑制的患者进行基因型耐药检测，采用生存分析方法分析耐药发生时问。结果患者累计病死率为16％（12／75）；共有66例发生耐药，累计耐药率为88％；生存分析发现，开始治疗的第1年，累计耐药率达到54．7％，患者不耐药的概率由100％下降到45．3％。半数患者保持对药物敏感的时间约为治疗后时间12．0个月（95％C18．6～17．0）；首次病毒载量≤4．01gU／ml和〉4．01gU／ml的两组患者，半数药物敏感的时间分别为25．1个月（95％CI19．0—33．3）和4．8个月（95％Cj4．1—5．6）。治疗过程中早发生耐药（12个月以内）的患者，病毒抑制失败和CD4细胞数下降的危险均较大。结论耐药的发生随治疗时间上升，抗病毒治疗第1年发生耐药的危险最大，病毒载量高的患者耐药发生的速度快，发生耐药对治疗的效果影响显著。初期治疗取得最大的病毒抑制是控制耐药发生的关键。

关键词： HIV-1 抗病毒药抗药性病毒

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实时RT-PCR检测甲型H3N2流感病毒R292K耐药位点

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军事医学 2011年第6期35卷 432-436页

作者：刘娟姜涛徐莉娟于曼秦鄂德秦成峰军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 空军总医院输血科北京100142

目的建立快速检测甲型H3N2流感病毒神经氨酸酶(NA)奥司他韦耐药突变位点的实时RT-PCR方法。方法通过设计特异性靶向NAR292K突变位点的Taq-MGB探针进行实时RT-PCR反应,并利用模拟样本和临床标本进行灵敏性和特异性评价。结果与结论建立... 详细信息

目的建立快速检测甲型H3N2流感病毒神经氨酸酶(NA)奥司他韦耐药突变位点的实时RT-PCR方法。方法通过设计特异性靶向NAR292K突变位点的Taq-MGB探针进行实时RT-PCR反应,并利用模拟样本和临床标本进行灵敏性和特异性评价。结果与结论建立了快速检测NAR292K位点的实时RT-PCR检测方法;本方法灵敏性高,可检测低至500拷贝/μl;特异性好,与无耐药突变的甲型H3N2流感病毒及其他呼吸道病毒均无交叉反应,为流感耐药监测提供了有效工具。

关键词：流感病毒 H3N2亚型抗病毒药物耐药性实时RT-PCR

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登革热的实验室诊断

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实用医学杂志 2011年第19期27卷 3466-3468页

作者：赵慧秦成峰病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京市100071

登革病毒是一种重要的虫媒病毒,主要通过白纹伊蚊和埃及伊蚊叮咬传播,其基因组为单股正链RNA,含单一的开放读码框依次编码3种结构蛋白（C、prM和E）和7种非结构蛋白（NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B和NS5）。

关键词：实验室诊断登革热单股正链RNA 非结构蛋白开放读码框虫媒病毒登革病毒埃及伊蚊

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2型猪链球菌细胞壁蛋白SSU1664的表达、纯化及活性分析

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第7期27卷 757-759页

作者：律清宇陈哲郑玉玲郝淮杰姜永强吕淑霞沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁沈阳110866 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:从猪链球菌05ZY中扩增SSU1664基因,在大肠杆菌中表达并评价其重组蛋白的活性。方法:根据05ZY基因组序列设计引物,PCR扩增SSU1664基因,构建表达载体,利用亲和层析对目的蛋白进行纯化,Western blot和ELISA法鉴定其免疫原性。结果:SSU... 详细信息

目的:从猪链球菌05ZY中扩增SSU1664基因,在大肠杆菌中表达并评价其重组蛋白的活性。方法:根据05ZY基因组序列设计引物,PCR扩增SSU1664基因,构建表达载体,利用亲和层析对目的蛋白进行纯化,Western blot和ELISA法鉴定其免疫原性。结果:SSU1664基因能够在大肠杆菌中可溶性表达,Western blot显示其能与猪链球菌菌体免疫后的大鼠血清反应,ELISA检测显示在人感染猪链球菌患者血清中针对SSU1664蛋白的IgM含量显著性升高。结论:SSU1664蛋白具有较高的免疫原性,可作为潜在的猪链球菌疫苗候选分子和猪链球菌早期感染诊断的标志物。

关键词：猪链球菌细胞壁蛋白疫苗

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猪链球菌2型溶血素的纯化及生物学活性研究

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第4期27卷 374-376页

作者：律清宇郝淮杰毕丽丽郑玉玲姜永强吕淑霞沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁沈阳110866 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:摸索天然和重组猪链球菌2型溶血素的纯化工艺,评价制备蛋白的生物学活性。方法:天然猪溶血素的纯化采用硫酸铵沉淀,阴离子交换层析和疏水层析制备,重组猪溶血素采用镍柱亲和层析进行柱上变复性后,用Th iolproyl-sepharose 6B进一... 详细信息

目的:摸索天然和重组猪链球菌2型溶血素的纯化工艺,评价制备蛋白的生物学活性。方法:天然猪溶血素的纯化采用硫酸铵沉淀,阴离子交换层析和疏水层析制备,重组猪溶血素采用镍柱亲和层析进行柱上变复性后,用Th iolproyl-sepharose 6B进一步亲和纯化。通过溶血实验,细胞毒性测定实验评价纯化蛋白的活性。结果:制备的天然和重组猪溶血素纯度均在90%以上,具有较高的溶血活性,较高浓度时能损伤靶细胞,胆固醇能够完全封闭其活性。结论:制备获得的重组猪溶素与天然蛋白具有相近的生物学活性,为进一步研究猪链球菌2型溶血素在猪链球菌致病机制方面的作用奠定了基础。

关键词：猪链球菌2型猪链球菌溶血素溶血活性细胞毒性

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传染病模型分析与预测方法研究进展

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中华流行病学杂志 2011年第1期32卷 81-85页

作者：肖洪田怀玉赵暕李亚品湖南师范大学资源与环境科学学院长沙410081 北京大学医学部军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

近年来,新发传染病不断出现,曾经被消灭和控制的旧传染病也有死灰复燃之势,生物袭击造成的传染病发生和流行时有出现,所有这些使得人类面临传染病形势日趋严峻.在这种复杂的情况下如何最大限度地减轻疫情影响和造成的损失已经成为值得... 详细信息

近年来,新发传染病不断出现,曾经被消灭和控制的旧传染病也有死灰复燃之势,生物袭击造成的传染病发生和流行时有出现,所有这些使得人类面临传染病形势日趋严峻.在这种复杂的情况下如何最大限度地减轻疫情影响和造成的损失已经成为值得研究的重要课题.

关键词：传染病模型分析预测

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霍乱弧菌外膜蛋白W的原核表达及抗原性分析

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军事医学 2011年第10期35卷 746-748,753页

作者：李建华王忠田何君左庭婷韩雪莲李岩伟朱虹端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国兽医药品监察所北京100081

目的在大肠杆菌中表达霍乱弧菌种特异性外膜蛋白(Omp)W,纯化后制备检测用OmpW抗体。方法采用PCR法以霍乱弧菌基因组为模板扩增ompW基因,插入表达载体pET-32a(+)的多克隆位点,构建重组表达质粒pET-32a-ompW;重组质粒转化至大肠杆菌BL21(D... 详细信息

目的在大肠杆菌中表达霍乱弧菌种特异性外膜蛋白(Omp)W,纯化后制备检测用OmpW抗体。方法采用PCR法以霍乱弧菌基因组为模板扩增ompW基因,插入表达载体pET-32a(+)的多克隆位点,构建重组表达质粒pET-32a-ompW;重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,筛选阳性重组菌株,经IPTG诱导获得目的蛋白,纯化后免疫新西兰大耳白兔,制备OmpW的多克隆抗体并进行鉴定。结果扩增得到ompW基因片段,并成功构建pET-32a-ompW原核表达系统,重组蛋白OmpW以包涵体形式高效表达;制备的OmpW抗体能与天然的O1群和O139群霍乱弧菌结合。结论霍乱弧菌OmpW可由原核系统高效表达,免疫获得的抗体具有较好的效价,为进一步制备霍乱弧菌检测用抗体奠定基础。

关键词：外膜蛋白W 霍乱弧菌原核表达抗原性

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甲型H1N1流感病毒疫苗株高适应性MDCK细胞的筛选及鉴定

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免疫学杂志 2011年第3期27卷 189-192页

作者：姚志东张良艳刘坤邢丽王希良中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071

目的筛选甲型H1N1流感病毒疫苗株高适应的MDCK单克隆细胞株,用于培养生产流感病毒疫苗,为细胞代替鸡胚生产制备流感病毒疫苗提供保证。方法通过有限稀释法将MDCK细胞进行单克隆化,扩大培养建立单克隆化细胞库,通过血凝和TCID50筛选甲型H... 详细信息

目的筛选甲型H1N1流感病毒疫苗株高适应的MDCK单克隆细胞株,用于培养生产流感病毒疫苗,为细胞代替鸡胚生产制备流感病毒疫苗提供保证。方法通过有限稀释法将MDCK细胞进行单克隆化,扩大培养建立单克隆化细胞库,通过血凝和TCID50筛选甲型H1N1流感病毒疫苗株的高适应性单克隆化细胞株,并鉴定所获得的细胞株细胞表面NeuAcα2,6 Gal的丰度。结果共制备了97株单克隆化MDCK细胞,经过甲型H1N1流感病毒疫苗株的筛选,共筛选到2株高适应甲型H1N1流感病毒疫苗株的MDCK单克隆化细胞株,其TCID50分别为6.68 log10 TCID50/ml和6.77 log10 TCID50/ml,其表面NeuAcα2,6 Gal的丰度明显提高。结论成功培养了MDCK单克隆细胞株,经筛选获得的单克隆细胞株其血凝滴度,TCID50都比普通MDCK细胞有明显提高,为细胞培养生产流感病毒疫苗奠定了基础。

关键词： MDCK细胞单克隆化甲型H1N1流感病毒

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