检索结果-内蒙古大学图书馆

中华检验医学杂志 2011年第9期34卷 849-854页

作者：耿庆茂李韩平辛天义庄道民鲍作义刘永健李林王铮刘思扬李敬云全军艾滋病检测中心军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物安全国家重点实验室北京100071 河南省沈丘县卫生局

目的评价in—houseHIV—1基因型耐药检测方法的敏感性与准确性。方法收集2004年4月至2008年10月全军艾滋病检测中心检测的来自河南、广西130份血浆标本。以美国FDA批准的HIV-1基因型耐药性检测系统（ViroSeq^TMv2．0）为参考方法，并与... 详细信息

目的评价in—houseHIV—1基因型耐药检测方法的敏感性与准确性。方法收集2004年4月至2008年10月全军艾滋病检测中心检测的来自河南、广西130份血浆标本。以美国FDA批准的HIV-1基因型耐药性检测系统（ViroSeq^TMv2．0）为参考方法，并与建立起的基因型耐药性检测方法（in—house）平行检测待检样本，比较二者在扩增效率、耐药突变位点检测以及耐药报告等方面的一致性。结果已知的14850个耐药突变位点中，2种方法可同时对99．3％（14752／14850）的耐药突变位点准确检出；在对不同突变位点的检测中，2种方法对蛋白酶抑制剂耐药突变位点、逆转录酶抑制剂耐药突变位点及两类抑制剂耐药突变位点检测一致率分别为99．7％、99．0％和99．3％（Kappa值分别为0．9099、0．9521和0．9488，P值均〈0．01）；2种方法出具的两类药物的耐药结果报告一致率94．6％（Kappa=0．6374，P〈0．01）。本研究共检测到34个ViroSeq“数据库（ViroSeq^TMsoftwarev2．7）未收录位点，其中2个突变位点对耐药的影响较大。结论in—house基因型耐药性检测方法与ViroSeq^TM基因型耐药性检测系统在耐药突变位点检测以及评价上具有高度一致性，是一种快速准确、性价比高的HIV-1基因型耐药检测方法，同时在耐药数据库方面具有一定优势。

关键词： HIV-1 基因型抗药性,病毒微生物敏感性试验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

过表达热休克蛋白70提高CHO细胞表达抗体的能力

引用

中国生物工程杂志 2011年第9期31卷 8-13页

作者：黄芬安小平李存何彰华张宝中米志强王娟童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 陕西师范大学生命科学学院西安710062

通过在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中过表达热休克蛋白70以提高其表达抗体的能力。首先从中国仓鼠基因组DNA中扩取HSP70基因,构建真核表达质粒pcDNA3.1-HSP70,再将重组质粒稳定转染到CHO/dhfr-细胞中,筛选获得稳定的细胞系,运用RT-qPCR检测和... 详细信息

通过在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中过表达热休克蛋白70以提高其表达抗体的能力。首先从中国仓鼠基因组DNA中扩取HSP70基因,构建真核表达质粒pcDNA3.1-HSP70,再将重组质粒稳定转染到CHO/dhfr-细胞中,筛选获得稳定的细胞系,运用RT-qPCR检测和Western blot分析HSP70基因的过表达。在过表达HSP70的CHO细胞组和对照细胞组(转染空载体pcDNA3.1的CHO细胞组)中分别转染表达抗-HBs的质粒,应用ELISA检测两组细胞表达抗-HBs的能力。RT-qPCR结果显示实验组CHO细胞中HSP70基因的表达量明显高于对照组细胞;ELISA检测结果表明过表达HSP70的CHO细胞组抗-HBs表达量高于对照组细胞(P<0.05)。研究揭示HSP70能有效促进细胞内分泌性蛋白的表达。

关键词： CHO细胞 HSP70 抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

PSCA-HSP70融合蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化

引用

生物技术通报 2011年第6期27卷 150-154页

作者：董磊张晓鹏房婷易绍琼于婷侯利华付玲于长明陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 空军总医院临床检验中心北京100142

旨在大肠杆菌中表达PSCA-HSP70融合蛋白,并对其进行纯化。克隆人PSCA基因及HSP70基因,构建表达PSCA-HSP融合蛋白的工程菌,优化表达及纯化条件,对重组蛋白进行纯化。结果表明,成功构建重组表达质粒PSCA-HSP,重组蛋白得到可溶性表达,优化... 详细信息

旨在大肠杆菌中表达PSCA-HSP70融合蛋白,并对其进行纯化。克隆人PSCA基因及HSP70基因,构建表达PSCA-HSP融合蛋白的工程菌,优化表达及纯化条件,对重组蛋白进行纯化。结果表明,成功构建重组表达质粒PSCA-HSP,重组蛋白得到可溶性表达,优化纯化条件后获得90%以上纯度的重组蛋白。本研究成功实现了PSCA与HSP的融合表达,为下一步肿瘤疫苗的研制奠定基础。

关键词：前列腺干细胞抗原热休克蛋白表达纯化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于活体成像的表达人PSCA抗原的小鼠肿瘤模型的建立

引用

中国生物工程杂志 2011年第2期31卷 1-6页

作者：董磊张晓鹏易绍琼毛亚丽于婷侯利华付玲于长明陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 空军总医院临床检验中心北京100142 空军总医院药学部北京100142

目的:探讨并建立可供药物评价或生物学功能研究的表达人PSCA抗原的荧光素酶小鼠肿瘤模型。方法:克隆人PSCA基因及荧光素酶基因luc,构建真核表达质粒pcDNA-PSCA及pcDNA-luc,共转染RM-1细胞株;照度计检测转染细胞的荧光素酶活性,RT-PCR及... 详细信息

目的:探讨并建立可供药物评价或生物学功能研究的表达人PSCA抗原的荧光素酶小鼠肿瘤模型。方法:克隆人PSCA基因及荧光素酶基因luc,构建真核表达质粒pcDNA-PSCA及pcDNA-luc,共转染RM-1细胞株;照度计检测转染细胞的荧光素酶活性,RT-PCR及流式细胞术检测PSCA的表达,筛选出共表达荧光素酶及人PSCA的RM-PSCA/luc细胞株;将RM-PSCA/luc细胞接种C57BL/6小鼠,观察所致肿瘤的生长情况及小鼠存活状况,并对小鼠进行活体成像检测Luc的表达;采用免疫组织化学染色方法检测人PSCA在小鼠肿瘤组织中的表达。结果:筛选到了稳定共表达Luc及人PSCA抗原的RM-PSCA/luc细胞,接种实验小鼠全部成瘤,肿瘤生长迅速,小鼠平均存活38天;转染荧光素酶基因的肿瘤细胞生物特性稳定,活体成像仪检测到转染荧光素酶细胞在小鼠体内活体成像,荧光素酶表达活性的强弱能够反映肿瘤大小;免疫组织化学染色方法检测到小鼠肿瘤组织PSCA的表达。结论:成功构建了可用于活体成像表达人PSCA抗原的小鼠肿瘤模型,为相关肿瘤药物及疫苗的研发奠定基础。

关键词：荧光素酶前列腺干细胞抗原肿瘤模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

吗啡对HIV-1在MT2细胞和巨噬细胞中复制的影响

引用

中华检验医学杂志 2011年第7期34卷 650-655页

作者：梁冰玉李敬云庄道民苏齐鉴刘思扬蒋俊俊肖信岑平陈晖梁浩广西医科大学公共卫生学院广西艾滋病防治研究实验室南宁530021 军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物安全国家重点实验室

目的附测定双抗体夹心法检测p24抗原表达.用Student-t检验或方差分析（ANOVA）比较不同细胞处理组间p24抗原表达差异;采用重复测量数据的方差分析比较不同时间吗啡处理组比对照组的p24抗原表达增加或减少倍数的变化趋势.结果 HIV-1感染... 详细信息

目的附测定双抗体夹心法检测p24抗原表达.用Student-t检验或方差分析（ANOVA）比较不同细胞处理组间p24抗原表达差异;采用重复测量数据的方差分析比较不同时间吗啡处理组比对照组的p24抗原表达增加或减少倍数的变化趋势.结果 HIV-1感染MT2细胞后第3、4、5和6天,3个浓度的吗啡处理的（1）组的p24抗原表达[第3天：（4.44±0.30）、（5.59±0.25）和（4.60±0.24） ng/ml;第4天：（24.30±2.66）、（31.73±1.17）和（26.02±0.37） ng/ml;第5天：（56.30±1.26）、（81.77±2.49）和（63.66±2.57） ng/ml;第6天：（150.70±8.97）、（243.09±8.93）和（173.72±7.73） ng/ml]均高于（4）组[第3~6天分别为（1.93±0.05）、（8.03±0.09）、（15.30±0.91）、（41.01±0.84） ng/ml],差异有统计学意义（第3天：t值分别为14.15、24.74和19.14,P均〈0.01;第4天：t值分别为10.59、34.92和81.2,P均〈0.01;第5天：t值分别为45.83、43.51和30.07,P均〈0.01;第6天：t值分别为20.09、39.02和29.55,P均〈0.01）.3个浓度的吗啡处理的（1）组的p24抗原表达比（4）组增加的倍数,随HIV-1感染MT2细胞的时间的延长具有上升的趋势,时间效应具有统计学意义（F=842.18,P〈0.01）.HIV-1感染巨噬细胞组后第4、6、8和10天,3个浓度的吗啡处理的（5）组的p24抗原表达[第4天：（0.68±0.15）、（0.87±0.41）和（0.75±0.09） ng/ml;第6天：（1.64±0.57）、（2.07±0.12）和（1.75±0.17） ng/ml;第8天：（6.31±0.17）、（8.81±0.34）和（7.19±0.11） ng/ml;第10天：（32.30±17.55）、（50.74±17.55）和（39.74±0.56） ng/ml]均高于（8）组[第4、6、8、10天分别为（0.60±0.01）、（1.16±0.07）、（3.84±0.45）、（17.55±0.86） ng/ml],差异有统计学意义（第4天：t值分别为7.27、11.06和3.02,P均〈0.05;第6天：t值分别为8.93、11.3和5.45,P均〈0.01;第8天：t值分别为8.83、15.11和12.42,P均〈0.01;第10天：t值分别为13.65、17.84和36.69,P均〈0.01）.3个浓度的吗啡处理的（5）组的p24抗原表达比（8）组增加的倍数,随HIV-1感染时间的延长具有上升的趋势,时间效应具有统计学意义（F=135.58,P〈0.01）.结论吗啡能够促进HIV-1在MT2细胞和巨噬细胞内的复制,并且随着感染时间的延长而增加;吗啡促进HIV-1复制的作用可被纳洛酮阻断.

关键词：吗啡 HIV-1 HIV核心蛋白质p24 巨噬细胞纳洛酮病毒复制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

对1株疑似鼠疫耶尔森氏菌的系统鉴定

引用

中国人兽共患病学报 2011年第4期27卷 355-358页

作者：何建李艳君祁芝珍崔玉军任玲玲代瑞霞王效义崔百忠张青雯杨瑞馥宋亚军青海省地方病预防控制所西宁811602 海军总医院检验科北京100048 病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

目的对1株可疑菌株进行系列验证实验,以确定其是否为鼠疫耶尔森氏菌(以下简称鼠疫菌)。方法用鼠疫细菌学常规方法和分子生物学手段确定其生物学表型特征、特异性基因及基因组特征。结果该菌株具备鼠疫菌的典型形态特征;能被鼠疫噬菌体... 详细信息

目的对1株可疑菌株进行系列验证实验,以确定其是否为鼠疫耶尔森氏菌(以下简称鼠疫菌)。方法用鼠疫细菌学常规方法和分子生物学手段确定其生物学表型特征、特异性基因及基因组特征。结果该菌株具备鼠疫菌的典型形态特征;能被鼠疫噬菌体完全裂解;主要生化特性为阿胶糖(+)、鼠李糖(-)、麦芽糖(+)、蜜二糖(-)、甘油(+)、脱氮(+),与典型鼠疫菌一致。毒力因子检查结果为均为阴性;对实验动物小白鼠完全无致死能力。全基因组芯片杂交实验和PCR扩增表明55023菌株没有鼠疫菌的三个质粒;也不具鼠疫标识基因;pgm位点代表性基因YPO1954扩增阳性,YPO1908扩增阴性,表明其pgm位点不完整;差异片段(DFR)分型结果表明该菌株缺失了14个DFR,不符合鼠疫菌的特征;多位点序列分型(MLST)分析结果表明该菌株与鼠疫存在16个碱基的差异,而与血清Ⅲ型假结核耶尔森氏菌仅相差两个碱基。结论尽管55023菌株具备鼠疫菌的一些表型特征,但基因组特征表明其不是鼠疫菌,而可能是血清III型的假结核耶尔森氏菌;噬菌体裂解结果等表型不能作为鼠疫菌鉴定的最终标准。

关键词：鼠疫耶尔森氏菌假结核耶尔森氏菌表型鉴定基因型鉴定

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组外膜脂蛋白LipL32与致病性钩端螺旋体抗体的免疫反应性及与不同血清群交叉反应性的Western blotting评价

引用

解放军医学杂志 2011年第3期36卷 241-243页

作者：段鸿元刘志国邱少富何斌赵海宋利华朱虹端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军总医院第一附属医院门诊部北京100037

目的研究钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32与致病性钩体抗体的免疫反应性以及与不同钩体血清群之间的交叉反应性,为钩体病的血清学检测提供抗原。方法依据黄疸出血群赖型56601株外膜脂蛋白LipL32基因序列设计引物,扩增出该基因片段DNA,将其... 详细信息

目的研究钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32与致病性钩体抗体的免疫反应性以及与不同钩体血清群之间的交叉反应性,为钩体病的血清学检测提供抗原。方法依据黄疸出血群赖型56601株外膜脂蛋白LipL32基因序列设计引物,扩增出该基因片段DNA,将其克隆至表达载体pET-28a中。将构建好的重组质粒转化大肠埃希菌BL21并诱导表达,表达的重组蛋白纯化后采用Western blotting评价其与56601株及其他14个血清群致病性钩端螺旋体抗体的免疫反应性和交叉反应能力。结果扩增获得了56601株脂蛋白LipL32基因,成功构建了原核表达重组质粒pET28a-LipL32。重组蛋白rLipL32为包涵体表达,且与56601株及另外14个血清群的致病性钩端螺旋体的兔抗体发生了特异性免疫反应。结论原核表达重组外膜脂蛋白rLipL32在致病性钩体血清群之间有良好的交叉反应能力,可初步作为属范围内的钩端螺旋体抗体检测候选抗原。

关键词：钩端螺旋体,问号,黄疸出血型抗体交叉反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

甲型H1N1流感病毒样颗粒疫苗的初步研究

引用

免疫学杂志 2011年第6期27卷 470-474页

作者：高啸潘玉竹陈中伟邢丽刘坤王文娟杨鹏辉王希良中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 重庆大学A区生物工程学院 400044

目的对甲型H1N1病毒样颗粒的免疫原性和保护效果进行初步研究,为研发不依赖鸡胚生产工艺的流感疫苗提供新的思路。方法使用昆虫-杆状病毒表达系统表达并纯化甲型H1N1流感病毒A/California/07/2009(H1N1)的病毒样颗粒;通过Western blot... 详细信息

目的对甲型H1N1病毒样颗粒的免疫原性和保护效果进行初步研究,为研发不依赖鸡胚生产工艺的流感疫苗提供新的思路。方法使用昆虫-杆状病毒表达系统表达并纯化甲型H1N1流感病毒A/California/07/2009(H1N1)的病毒样颗粒;通过Western blot、血凝、单向免疫扩散,透射电镜等方法鉴定病毒样颗粒;使用A/California/07/2009(H1N1)裂解疫苗作为对照,腹腔注射免疫Balb/c小鼠,并使用A/Beijing/501/2009(H1N1)进行攻毒,评价病毒样颗粒疫苗的免疫原性及保护效果。结果经鉴定,纯化后的病毒样颗粒血凝滴度为1:512,HA含量为92.9μg/ml,颗粒大小在100 nm左右,二免10 d后IgG抗体效价7.9×103,血凝抑制实验测得血抑(Hemagglutination Inhibition,HI)效价384,对50LD50的A/Beijing/501/2009(H1N1)病毒的保护率达到100%。结论甲型H1N1流感病毒样颗粒的免疫原性显著高于裂解疫苗,为发展不依赖鸡胚生产的流感亚单位疫苗提供了技术保证。

关键词：甲型H1N1 病毒样颗粒疫苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

HSV-2 gD融合gB CTL表位重组蛋白的原核表达及免疫原性评价

引用

动物医学进展 2011年第6期32卷 19-23页

作者：李君丽刘坤姜德玉张伟王希良于三科西北农林科技大学动物医学院陕西杨陵712100 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

为研制具有较强细胞免疫作用的单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)疫苗,将HSV-2糖蛋白D(gD)序列与糖蛋白B(gB)上两种CTL表位序列连接,人工合成重组基因gD-gBCTL,通过PCR扩增,将其克隆后连接至原核表达载体pET-22b(+),构建重组基因表达质粒pET-22b(... 详细信息

为研制具有较强细胞免疫作用的单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)疫苗,将HSV-2糖蛋白D(gD)序列与糖蛋白B(gB)上两种CTL表位序列连接,人工合成重组基因gD-gBCTL,通过PCR扩增,将其克隆后连接至原核表达载体pET-22b(+),构建重组基因表达质粒pET-22b(+)-gD-gBCTL,转化***21(DE3),IPTG诱导表达。对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,His TrapTMHP柱纯化目的蛋白并免疫Balb/c小鼠,间接ELISA法检测血清抗体效价,结果显示重组蛋白在大肠埃希菌中得到了高效表达,该重组蛋白具有较好的免疫原性。

关键词： HSV-2 糖蛋白D CTL表位原核表达免疫原性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

淋球菌孔蛋白基因与脂寡糖表位融合基因原核表达载体的构建及表达

引用

动物医学进展 2011年第5期32卷 77-81页

作者：赵莉群陈中伟张伟王希良于三科西北农林科技大学动物医学院陕西杨陵712100 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

PCR扩增淋球菌CMCC29400、CMCC29403株孔蛋白(PI)A、B及表位基因,使用linker GS-GGSG并通过重叠PCR法将表位基因连接在PIA、PIB上形成融合基因PIA-表位、PIB-表位,分别与克隆载体pMD-18T连接,测序正确后将目的基因插入表达载体pET32a(+)... 详细信息

PCR扩增淋球菌CMCC29400、CMCC29403株孔蛋白(PI)A、B及表位基因,使用linker GS-GGSG并通过重叠PCR法将表位基因连接在PIA、PIB上形成融合基因PIA-表位、PIB-表位,分别与克隆载体pMD-18T连接,测序正确后将目的基因插入表达载体pET32a(+)中,构建pET32a-PIA-表位、pET32a-PIB-表位、pET32a-PIA和pET32a-PIB重组表达质粒,PCR、双酶切鉴定及测序正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,经SDS-PAGE鉴定分析,成功表达融合蛋白。

关键词：淋球菌孔蛋白脂寡糖表位基因融合表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：