检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2009年第12期29卷 1069-1074页

作者：李冰李建民张军徐俊杰刘树玲任军张金龙付玲侯利华陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的在CHO细胞中表达抗炭疽芽孢杆菌保护性抗原（rPA）人-鼠嵌合抗体，并对其活性进行分析。方法RT—PCR克隆具有中和活性鼠源单克隆抗体的轻、重链可变区基因，分别与人Kappa型轻链恒定区、IgG1重链恒定区基因融合后构建了轻重链嵌合... 详细信息

目的在CHO细胞中表达抗炭疽芽孢杆菌保护性抗原（rPA）人-鼠嵌合抗体，并对其活性进行分析。方法RT—PCR克隆具有中和活性鼠源单克隆抗体的轻、重链可变区基因，分别与人Kappa型轻链恒定区、IgG1重链恒定区基因融合后构建了轻重链嵌合抗体基因。将轻重链嵌合抗体基因克隆表达载体上，构建了嵌合抗体的双启动子表达载体pSecTag-5E1。将pSecTag-5E1转染CHO—dhfr（DG44）细胞，撤掉胸腺嘧啶和次黄嘌呤并不断提高氨甲蝶呤（MTX）的浓度，筛选表达量高的克隆，扩大培养，收集上清，并纯化，用纯化的嵌合抗体进行SDS—PAGE、Westernblot、抗原结合活性、体外细胞保护试验和动物试验。结果在MTX的浓度为5×10^-8mol／L时，获得稳定表达细胞株，表达量为18mg／L。结论成功在CHO—dhfr（DG44）细胞中表达了具有中和活性的抗rPA人-鼠嵌合抗体，为制备抗炭疽的被动免疫制剂奠定了良好的基础。

关键词：炭疽人-鼠嵌合抗体 CHO细胞

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应用细胞模型初筛抗人免疫缺陷病毒药物

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中国药理学与毒理学杂志 2009年第5期23卷 411-416页

作者：庄道民刘思扬董如华李国跃李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨采用已建立的细胞模型初筛抗人免疫缺陷病毒(HIV)药物的可靠性。方法以齐多夫定为阳性对照,使用HIV-1急性感染系统(MT-4/HIV-1ⅢB)、HIV-1耐药性毒株系统(MT-4/3TC耐药株)、HIV-1慢性感染系统(H9/HIV-1ⅢB)和HIV-1临床分离株感... 详细信息

目的探讨采用已建立的细胞模型初筛抗人免疫缺陷病毒(HIV)药物的可靠性。方法以齐多夫定为阳性对照,使用HIV-1急性感染系统(MT-4/HIV-1ⅢB)、HIV-1耐药性毒株系统(MT-4/3TC耐药株)、HIV-1慢性感染系统(H9/HIV-1ⅢB)和HIV-1临床分离株感染系统(PBMC/HIV-1GX02),分别测定药物的细胞毒性和抗HIV-1活性,计算药物的半数细胞毒性浓度(TC50)、半抑制浓度(IC50)和治疗指数(TI)。同时对4种药物DPC961、牛膝多糖、艾乃吉1号和痰热清注射液进行了抗HIV活性检测。结果测定了齐多夫定在4种细胞-病毒系统的TC50,IC50和TI与文献报道相近。DPC961在4种细胞/病毒培养系统的TI分别为979,5348,3912和2745;牛膝多糖分别为323,223,2777和173;艾乃吉1号仅在MT-4/HIV-1ⅢB模型上T1为2.6。结论使用本细胞模型通过检测药物的TC50,IC50及TI进行药物初筛是可靠的。药物DPC961、牛膝多糖和艾乃吉Ⅰ号具有不同程度的体外抗HIV-1活性,痰热清注射液未检测到抗HIV-1活性。

关键词：模型细胞药物评价临床前 HIV-1 抗HIV药

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蜱中玫瑰单胞菌菌株的分离与鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第1期29卷 29-32页

作者：邱尔臣张芳刘玮吴晓明杨红曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的确定从蜱中分离的、使用常规方法不能鉴定的3株粉红色细菌的分类学位置。方法使用16SrDNA序列分析和同源性检索方法及细菌的形态学、生化特性及脂肪酸分析等鉴定方法。结果3株细菌为粉红色的革兰阴性需氧小球杆菌，最适生长温度为3... 详细信息

目的确定从蜱中分离的、使用常规方法不能鉴定的3株粉红色细菌的分类学位置。方法使用16SrDNA序列分析和同源性检索方法及细菌的形态学、生化特性及脂肪酸分析等鉴定方法。结果3株细菌为粉红色的革兰阴性需氧小球杆菌，最适生长温度为37℃，在含有5％以上NaCl的培养基中不能生长。该菌能发酵葡萄糖、利用棕檬酸盐，接触酶试验阳性、脲酶试验阳性、紫外（UV）吸收试验阳性。主要脂肪酸成分为C16：0、C17：0、C18：1 ω9c和C19：0cyc。16SrDNA序列分析和同源性检索发现3株细菌与颈玫瑰单胞菌（Roseomonas cervicalis）同源性最高，达99．1％。结论这3株细菌在分类学上属于玫瑰单胞菌（Roseomonas），但是和已经报道的种都不相同，可能是一个变种。蜱可能是其潜在的媒介宿主。

关键词：玫瑰单胞菌草原革蜱分离鉴定

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5株不同亚型HIV-1毒株gp120序列特征分析及其蛋白的表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第5期29卷 424-430页

作者：王铮李敬云鲍作义李韩平庄道民刘思杨李林军事医学科学院微生物流行病研究所全军艾滋病检测中心病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的分析我国HIV-1主要亚型毒株的gp120区域的序列特征，并表达出gp120糖基化蛋白，为研究gp120的致病机制和设计疫苗奠定基础。方法利用巢式PCR从来自于不同省份的5名HIV-1感染者外周血单个核细胞DNA中扩增全长gp120基因并测序，对序... 详细信息

目的分析我国HIV-1主要亚型毒株的gp120区域的序列特征，并表达出gp120糖基化蛋白，为研究gp120的致病机制和设计疫苗奠定基础。方法利用巢式PCR从来自于不同省份的5名HIV-1感染者外周血单个核细胞DNA中扩增全长gp120基因并测序，对序列特征进行分析，并将获得的gp120基因克隆入真核表达载体，体外表达获得gp120糖基化蛋白。结果序列分析显示，此5条gp120序列分属HIV-1 Thai-B、BC重组和AE重组亚型，虽然亚型不同，但这些gp120序列在相同的位置都存在着一些保守的糖基化位点，且都具备相同的Furin蛋白酶第一切割位点，与参考序列比较发现，不同的HIV亚型序列中，除V3序列长度较为保守外，V1、V2、V4、V5各区域都有不同程度的缺失现象，与BC重组和AE重组亚型相比，Thai-B亚型V3的顶端环呈现出多种组合。最终将这5条gp120序列都克隆入真核表达载体并表达出糖基化的gp120蛋白。结论在设计疫苗和检测试剂时应考虑到膜区的高变性，gp120糖蛋白的体外表达有利于进一步开展针对我国主要HIV流行毒株膜蛋白致病机制和疫苗学的研究。

关键词： HIV-1 gp120 糖基化蛋白

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细菌菌蜕的研究进展

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中国生物制品学杂志 2009年第3期22卷 297-300页

作者：蔡昆王慧军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

细菌菌蜕是革兰阴性细菌被噬菌体PhiX174的裂解基因E裂解后形成的完整细菌空壳。细菌菌蜕兼顾了组合抗原免疫原性、佐剂效应、靶向性载体的作用,特别适合于黏膜免疫及口服免疫;由于缺乏内含物而更加安全;生产过程简单,适宜大规模生产。... 详细信息

细菌菌蜕是革兰阴性细菌被噬菌体PhiX174的裂解基因E裂解后形成的完整细菌空壳。细菌菌蜕兼顾了组合抗原免疫原性、佐剂效应、靶向性载体的作用,特别适合于黏膜免疫及口服免疫;由于缺乏内含物而更加安全;生产过程简单,适宜大规模生产。这些特性决定了细菌菌蜕是一种具有良好应用前景的候选疫苗及递送系统。本文就细菌菌蜕的研究进展作一综述。

关键词：细菌菌蜕递送系统疫苗佐剂

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HIV-1耐药突变及突变型

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中华医学杂志 2009年第13期89卷 931-936页

作者：焦丽燕李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目前已有25个治疗HIV-1的抗逆转录病毒药物（ARV）批准上市：9个核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI），4个非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI），9个蛋白酶抑制剂（PI），1个融合抑制剂，1个CCR5抑制剂，1个整合酶抑制剂。首个CCR5抑制剂和整合... 详细信息

目前已有25个治疗HIV-1的抗逆转录病毒药物（ARV）批准上市：9个核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI），4个非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI），9个蛋白酶抑制剂（PI），1个融合抑制剂，1个CCR5抑制剂，1个整合酶抑制剂。首个CCR5抑制剂和整合酶抑制剂于2007年批准，有的将融合抑制剂、CCR5抑制剂和整合酶抑制剂统称为侵入抑制剂（EI）。

关键词： HIV-1复制非核苷类逆转录酶抑制剂耐药突变 CCR5抑制剂突变型整合酶抑制剂抗逆转录病毒药物融合抑制剂

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鼠疫亚单位疫苗的免疫学效果评价

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中华预防医学杂志 2009年第9期43卷 785-788页

作者：张青雯祁芝珍辛有全杨永海吴海莲杨汉青冯建萍金星崔百忠王棠吴本传邱业峰王旺郭兆彪王祖郧杨瑞馥王虎王效义青海省地方病预防控制所西宁811602 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所生物工程研究所军事医学科学院微生物流行病研究所实验动物中心

目的分别以小鼠、豚鼠和兔为实验动物，比较其在评价鼠疫亚单位疫苗免疫保护中的差别。方法分别以Fl＋rV270鼠疫亚单位疫苗、EV76减毒活疫苗和铝佐剂肌内注射免疫BALB／c小鼠（每组10只）、豚鼠（每组14只）和兔（每组6只）。初次免疫后... 详细信息

目的分别以小鼠、豚鼠和兔为实验动物，比较其在评价鼠疫亚单位疫苗免疫保护中的差别。方法分别以Fl＋rV270鼠疫亚单位疫苗、EV76减毒活疫苗和铝佐剂肌内注射免疫BALB／c小鼠（每组10只）、豚鼠（每组14只）和兔（每组6只）。初次免疫后第8周采血，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测IgG抗体滴度和皮下感染10^6 CFU鼠疫菌141强毒株测定保护率。结果亚单位疫苗免疫小鼠、豚鼠和兔产生的F1 IgG抗体滴度分别为41587．3±2．1、11543．7±2．1、522．4±22．4，差异有统计学意义（F=17．58，P〈0．01）；产生的rV270 IgG抗体滴度分别为15748．7±1．6、12．6±1．4、1648．0±5．0，差异有统计学意义（F=16．34，P〈0．01）。EV76免疫的小鼠、豚鼠和兔产生的F1IgG抗体滴度分别为913．4±4．5、937．0±2．0、342．0±12．0，差异有统计学意义（F=23．67，P〈0．01），而EV76免疫的小鼠、豚鼠和兔产生的rV270IgG抗体滴度分别为12．0±1．0、447．0±10．0、40．0±11．0，差异无统计学意义（F=2．20，P=0．13）。亚单位疫苗免疫小鼠F1IgG抗体滴度均明显高于豚鼠和兔（q值分别为30．57、19．04，P〈0．01），豚鼠与兔产生的F1 IgG抗体滴度差异无统计学意义（q=0．04，P=0．85）；亚单位疫苗免疫小鼠的rV270IgG抗体均明显高于豚鼠和兔（q值分别为27．10、19．49，P〈0．01），而豚鼠与兔产生的rV270 IgG抗体滴度差异无统计学意义（q=0．25，P=0．62）。EV76疫苗免疫的小鼠产生的F1IgG抗体滴度明显高于豚鼠和兔（q值分别为40．67、29．10，P〈0．01），而豚鼠和兔产生的F1IgG抗体滴度的差异无统计学意义（q=0．06，P=0．81）。亚单位疫苗免疫的小鼠、豚鼠和兔免疫保护率分别为100％（10／10）、86％（12／14）和100％（5／5）；EV76疫苗免疫的小鼠、豚鼠和兔免疫保护率分别为100％（6／6）、93％（13／14）和100％（6／6）。结论BALB／c小鼠是较好的评价鼠疫亚单位疫苗的小型动物；豚鼠评价鼠疫亚单位疫苗存在较大个体差异；兔也可用作评价鼠疫亚单位疫苗的动物。

关键词：耶尔森菌,鼠疫鼠疫菌苗免疫小鼠豚鼠兔

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西尼罗热疫苗的研究进展

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中国生物制品学杂志 2009年第12期22卷 1251-1253页

作者：曹飞姜涛秦鄂德秦成峰军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

西尼罗病毒感染可导致轻微或严重的疾病甚至死亡,对人畜健康危害较大。疫苗是预防西尼罗病毒感染的重要手段。近年来,西尼罗热疫苗的研究取得了重大进展,尤其是反向遗传学技术的应用进一步加快了其研发进程。本文就近几年西尼罗热疫苗... 详细信息

西尼罗病毒感染可导致轻微或严重的疾病甚至死亡,对人畜健康危害较大。疫苗是预防西尼罗病毒感染的重要手段。近年来,西尼罗热疫苗的研究取得了重大进展,尤其是反向遗传学技术的应用进一步加快了其研发进程。本文就近几年西尼罗热疫苗的研究进展作一综述。

关键词：西尼罗热疫苗反向遗传学复制子

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高致病性人禽流感H5N1疫苗滴鼻免疫应答效果的初步研究

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免疫学杂志 2009年第1期25卷 16-19页

作者：何蕊吕进张良艳董梅王希良军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的通过高致病性人禽流感H5N1全病毒-MF59佐剂疫苗滴鼻免疫Balb/c小鼠,评价该疫苗所诱导的系统免疫与黏膜免疫应答效果。方法以不同剂量抗原按比例与MF59佐剂配伍制成粘膜疫苗,滴鼻免疫Balb/c小鼠,二免2周采血检测血清IgG、IgM效价及... 详细信息

目的通过高致病性人禽流感H5N1全病毒-MF59佐剂疫苗滴鼻免疫Balb/c小鼠,评价该疫苗所诱导的系统免疫与黏膜免疫应答效果。方法以不同剂量抗原按比例与MF59佐剂配伍制成粘膜疫苗,滴鼻免疫Balb/c小鼠,二免2周采血检测血清IgG、IgM效价及血清中HAI(HAinhibitor)的中和抗体效价,同时收集鼻、肺灌洗液,检测其IgG和sIgA抗体效价。结果H5N1+MF59组血清抗体效价较H5N1组有显著升高(P<0.01);在各剂量组中,随着剂量的增加抗体效价呈上升趋势,12μg后抗体效价呈下降趋势,以H5N1+MF59(12μg)组效价最高;肺鼻灌洗液中,均可检测到特异性分泌型IgA、IgG,其中特异性分泌型IgA效价略高于IgG;抗体亚型的分布以IgG1、IgG2b为主。结论灭活高致病性禽流感全病毒H5N1在佐剂MF59作用下可诱导机体产生体液免疫应答,同时还可以在黏膜局部产生特异性分泌型IgA、IgG,为高致病人禽流感病毒H5N1黏膜疫苗的研制奠定了基础。

关键词：高致病性人禽流感H5N1疫苗滴鼻免疫免疫应答

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禽流感病毒的传播、致病机制及其防治

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解放军医学杂志 2009年第2期34卷 125-130页

作者：李晓峰秦鄂德军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

高致病性禽流感病毒(H5N1)可导致严重的致死性疾病,已给全球禽类养殖及相关产业造成了巨大损失,并对人类健康造成了极大威胁。近30年来,H5N1病毒已在东南亚、中国、欧洲和非洲等地呈区域性流行。尽管目前还未发生人际传播,但该病毒一旦... 详细信息

高致病性禽流感病毒(H5N1)可导致严重的致死性疾病,已给全球禽类养殖及相关产业造成了巨大损失,并对人类健康造成了极大威胁。近30年来,H5N1病毒已在东南亚、中国、欧洲和非洲等地呈区域性流行。尽管目前还未发生人际传播,但该病毒一旦与人流感病毒重组,将会转变为可人间传播的高致死性流感病毒,从而导致新的流感大流行。直接接触感染禽流感病毒的禽类或其含病毒的排泄物是人类感染禽流感病毒的主要途径。禽流感病毒经过不断变异后有可能突破种属屏障而传播给哺乳动物及人类,从而进一步在病毒和宿主的多种因素作用下导致宿主发病乃至死亡。目前,疫苗接种仍是预防人禽流感的有效手段,同时神经氨酸酶抑制剂等抗病毒药物在禽流感的治疗中也发挥着重要作用。

关键词：禽流感流感病毒A型,H5N1亚型毒力

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