检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽医科大学学报 2016年第3期51卷 315-319页

作者：刘小东王伟黄勇张湘莉兰孙强安小平米志强童贻刚安徽医科大学军事医学科学院微生物流行病研究所合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的从医院污水中分离一株能裂解弗氏柠檬酸杆菌的噬菌体,观察其形态,并进行全基因组测序和全基因组分析,为治疗和控制弗氏柠檬酸杆菌感染提供基础。方法以弗氏柠檬酸杆菌为宿主,从医院污水分离噬菌体,用透射电镜观察其形态;使用Ion Tor... 详细信息

目的从医院污水中分离一株能裂解弗氏柠檬酸杆菌的噬菌体,观察其形态,并进行全基因组测序和全基因组分析,为治疗和控制弗氏柠檬酸杆菌感染提供基础。方法以弗氏柠檬酸杆菌为宿主,从医院污水分离噬菌体,用透射电镜观察其形态;使用Ion Torrent测序平台进行噬菌体全基因组测序,测序后进行噬菌体全基因组序列组装、注释、进化分析和比较分析。结果成功分离一株弗氏柠檬酸杆菌噬菌体,命名为IME-CF2;电镜观察显示,该噬菌体具有二十面体的头部,形态类似肌尾噬菌体科;IME-CF2核酸类型为DNA,基因组全长为177 685 bp,GC含量为43.2%;编码267个编码区(CDS),2个tRNA;进化分析表明,IME-CF2属于T4类噬菌体,全基因组比较分析表明,IME-CF2与柠檬酸杆菌噬菌体Miller同源性最高。结论分离鉴定了一株弗氏柠檬酸杆菌噬菌体,进行了全基因组测序和分析,为噬菌体治疗多重耐药细菌奠定了基础。

关键词：弗氏柠檬酸杆菌噬菌体全基因组测序基因组分析

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肠出血性大肠杆菌效应因子z2151的E3泛素连接酶活性鉴定

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安徽医科大学学报 2016年第8期51卷 1077-1080页

作者：陈芳红李涛李崭孙超尘王慧安徽医科大学军事医学科学院微生物流行病研究所合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的利用基因工程方法原核表达z2151蛋白,并鉴定其E3泛素连接酶活性。方法以肠出血性大肠杆菌O157∶H7为模板,PCR扩增目的基因,构建重组表达载体p ET22b-z2151,转化BL21(DE3),诱导蛋白表达,采用镍柱亲和纯化获取目的蛋白;通过体外泛素... 详细信息

目的利用基因工程方法原核表达z2151蛋白,并鉴定其E3泛素连接酶活性。方法以肠出血性大肠杆菌O157∶H7为模板,PCR扩增目的基因,构建重组表达载体p ET22b-z2151,转化BL21(DE3),诱导蛋白表达,采用镍柱亲和纯化获取目的蛋白;通过体外泛素化实验检测蛋白泛素连接酶活性。结果亲和纯化得到较高浓度和纯度的z2151蛋白,其在体外泛素化反应中能够促使泛素小分子形成多聚泛素链,即有E3泛素连接酶活性;而且对E2泛素结合酶具有一定的选择特异性。结论原核表达质粒p ET22b-z2151构建成功,目的蛋白z2151具有泛素连接酶的体外泛素化能力,并且针对不同的E2酶亲和力不同,这些都为后续功能机制研究奠定了基础。

关键词：基因工程肠出血性大肠杆菌O157∶H7 泛素连接酶体外泛素化

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蜱传脑炎病毒prM-E蛋白的真核表达及其在荧光素酶免疫共沉淀技术中的应用？

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寄生虫与医学昆虫学报 2016年第1期23卷 39-44页

作者：冉鑫康晓平李裕昌吴晓燕霍耐凡贾佳曹雪峰杨银辉安徽医科大学合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

为了探索一种新型的血清学技术的荧光素酶免疫共沉淀技术（LIPS），本研究利用真核表达系统制备了蜱传脑炎病毒结构蛋白prM-E与荧光素酶融合蛋白，并评价了其在LIPS系统中的检测效果。首先以蜱传脑炎病毒RNA为模板，采用RT-PCR技术扩增p... 详细信息

为了探索一种新型的血清学技术的荧光素酶免疫共沉淀技术（LIPS），本研究利用真核表达系统制备了蜱传脑炎病毒结构蛋白prM-E与荧光素酶融合蛋白，并评价了其在LIPS系统中的检测效果。首先以蜱传脑炎病毒RNA为模板，采用RT-PCR技术扩增prM-E抗原基因，连接到pNLF1-secN质粒上构建真核表达载体pNLF-prM-E，使prM-E蛋白与荧光素酶串联融合表达，并将该质粒转染到Cos7细胞中。结果显示，转染重组质粒pNLF-prM-E的细胞上清中可检测到荧光素酶的高表达；进而用间接免疫荧光试验（ IFA）检测到转染的细胞与蜱传脑炎病毒抗体特异性结合；在此基础上，用LIPS方法对蜱传脑炎病毒感染患者血清进行检测，从20份患者血清中检出19份阳性，7份对照血清均为阴性。结果表明该重组抗原具有良好的特异性和灵敏性，可以用于LIPS系统中的候选检测抗原。

关键词：蜱传脑炎病毒 prM-E蛋白真核表达诊断抗原

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我国中东部地区蜱中斑点热群立克次体与新型布尼亚病毒复合感染调查研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2016年第2期23卷 86-90页

作者：范亚迪胡建功崔晓鸣郭辰涛沃颖张小爱张泮河黎浩刘玮曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 安徽医科大学合肥230032

为了验证我国中东部发热伴血小板减少综合征流行地区-信阳和济南的蜱中有斑点热群立克次体存在，且有复合感染新型布尼亚病毒的情况，用布旗法和动物体表检查法在河南省信阳市和山东省济南市捕获蜱，采用PCR和RT-RCR进行病原体感染筛查... 详细信息

为了验证我国中东部发热伴血小板减少综合征流行地区-信阳和济南的蜱中有斑点热群立克次体存在，且有复合感染新型布尼亚病毒的情况，用布旗法和动物体表检查法在河南省信阳市和山东省济南市捕获蜱，采用PCR和RT-RCR进行病原体感染筛查。信阳市捕获长角血蜱215只，其中游离蜱164只，寄生蜱51只。37只蜱斑点热群立克次体检测阳性，阳性率17．2％；38只蜱新型布尼亚病毒检测阳性，阳性率为17．7％；4只蜱斑点热群立克次体与新型布尼亚病毒复合感染，复合感染率为1．9％。山东省捕捉到166只寄生蜱，均为长角血蜱，4只蜱斑点热群立克次体检测阳性，阳性率为2．4％。6只蜱新型布尼亚病毒检测阳性，阳性率为3．6％；2只蜱为斑点热立克次体与新型布尼亚病毒复合感染，复合感染率为1．2％。结果证实我国中东部地区存在斑点热立克次体与新型布尼亚病毒复合感染。

关键词：斑点热群立克次体新型布尼亚病毒蜱复合感染

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北京市房山区长角血蜱携带山羊无形体的调查？

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寄生虫与医学昆虫学报 2016年第1期23卷 45-50页

作者：王亚伟江佳富贾娜郭东辉江瑞若常巧呈蒋宝贵刘洪波魏然曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 黑龙江八一农垦大学黑龙江大庆163319

为确认我国华北地区广泛分布的长角血蜱是否携带新近发现的山羊无形体Anaplasma capra，2012、2015年5～9月期间，在北京房山地区采集长角血蜱并进行检测。结果共采集游离的长角血蜱311只，其中成蜱95只，若蜱156只，幼蜱60只。提取蜱... 详细信息

为确认我国华北地区广泛分布的长角血蜱是否携带新近发现的山羊无形体Anaplasma capra，2012、2015年5～9月期间，在北京房山地区采集长角血蜱并进行检测。结果共采集游离的长角血蜱311只，其中成蜱95只，若蜱156只，幼蜱60只。提取蜱基因组DNA后对山羊无形体的gltA和16S rRNA两个基因片段进行PCR扩增。结果显示，共有3（3.2％）只成蜱阳性，若蜱和幼蜱中未检测到山羊无形体。遗传进化分析显示，扩增出的gltA和16S rRNA序列和早先报道的牡丹江人感染的A． capra的序列相一致。证实了在我国华北地区的媒介蜱携带该新发现的山羊无形体，该地区为山羊无形体潜在的自然疫源地。加强该地区蜱媒传染病的防控工作具有必要性和紧迫性。

关键词：山羊无形体长角血蜱北京房山区

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细菌的噬菌体感染耐受机制研究进展

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军事医学 2016年第7期40卷 606-609页

作者：肖丽生祁芝珍宋亚军安徽医科大学合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所，病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 青海省地方病预防控制所西宁811602

噬菌体是能感染细菌的病毒,在自然界中分布十分广泛。随着发酵工业中的噬菌体污染以及多药耐药菌株的出现,噬菌体越来越受到关注。噬菌体感染细菌包括吸附、注入、复制、组装、释放等环节;细菌在与噬菌体的共进化过程中,针对这些环节产... 详细信息

噬菌体是能感染细菌的病毒,在自然界中分布十分广泛。随着发酵工业中的噬菌体污染以及多药耐药菌株的出现,噬菌体越来越受到关注。噬菌体感染细菌包括吸附、注入、复制、组装、释放等环节;细菌在与噬菌体的共进化过程中,针对这些环节产生了不同的抗感染机制。该文围绕抗吸附、超感染排斥、限制修饰系统、CRISPR系统、流产感染、组装感染等细菌的噬菌体感染耐受机制研究进行了简要综述。

关键词：细菌噬菌体超感染排斥限制修饰系统流产感染

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云南省登革热媒介埃及伊蚊入侵扩散现状

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寄生虫与医学昆虫学报 2016年第3期23卷 175-182页

作者：石清明赵彤言军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 成都军区疾病预防控制中心成都610021

全球化发展以及全球气候变暖，为媒介生物的扩散提供了更加便利的条件。埃及伊蚊是登革热主要传播媒介之一，云南省历史上未有过埃及伊蚊的记载，但自2002年2月首次在云南省发现以来，现已在瑞丽、芒市、勐腊、勐海、景洪、盈江、陇川... 详细信息

全球化发展以及全球气候变暖，为媒介生物的扩散提供了更加便利的条件。埃及伊蚊是登革热主要传播媒介之一，云南省历史上未有过埃及伊蚊的记载，但自2002年2月首次在云南省发现以来，现已在瑞丽、芒市、勐腊、勐海、景洪、盈江、陇川、泸水、耿马等地陆续发现，分布范围不断扩大。本文拟从云南自然地理状况、埃及伊蚊的主要习性及在云南省境内的入侵扩散历程及其与云南省近年来的登革热暴发疫情关系、埃及伊蚊的防治策略及面临的挑战等方面予以综述。

关键词：登革热埃及伊蚊入侵扩散云南省

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一株携带MCR-1的食品动物源多药耐药奇异变形杆菌耐药性状研究

一株携带MCR-1的食品动物源多药耐药奇异变形杆菌耐药性状研究

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中国食品科学技术学会第十四届年会暨第九届中美食品业高层论坛

作者：张德福赵禹宗安慧冯娇刘雪飞杨立娜白凤翎李春周冬生殷喆励建荣渤海大学食品科学与工程学院辽宁省食品安全重点实验室生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室渤海大学数理学院

在对食品动物源性多药耐药菌的调查过程中,发现一株携带MCR-1的多药耐药奇异变形杆菌F160211,对其耐药表型及基因型进行了进一步研究。通过扩增16S rRNA基因对该菌进行了鉴定,用纸片扩散法初步鉴定了该菌的耐药谱,在此基础上又鉴定了多... 详细信息

在对食品动物源性多药耐药菌的调查过程中,发现一株携带MCR-1的多药耐药奇异变形杆菌F160211,对其耐药表型及基因型进行了进一步研究。通过扩增16S rRNA基因对该菌进行了鉴定,用纸片扩散法初步鉴定了该菌的耐药谱,在此基础上又鉴定了多种药物对其最小抑菌浓度,用PCR方法扩增了常见的耐药基因,最后分析了携带MCR-1的质粒的复制类型。结果表明,该菌为奇异变形杆菌;纸片扩散法和肉汤稀释法测定MIC表明,该菌对青霉素类、第1代和第2代头孢菌素类、大环内酯类、氨基糖苷类、酰胺醇类、四环素类、磺胺类、利福霉素类和粘菌素类等耐药,对呋喃类、多肽类、喹诺酮类中介耐药,对第3代和第4代头孢菌素类、单环β-内酰胺类、碳青酶烯类、甘氨酰四环素类敏感;携带bla、bla、bla、bla、mph（A）、qnrS和mcr-1等多种耐药基因;mcr-1基因位于与文献报道的pHNSHP45类似的IncI2型不相容性质粒上。本研究表明,mer-1基因的宿主范围已由报道的大肠杆菌、沙门氏菌等进一步扩大至奇异变形杆菌,食品动物源性细菌耐药的形势正加严峻,对食品安全和公众健康都是严重的威胁。

关键词：副溶血弧菌耐药质粒移动元件

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H-NS蛋白对副溶血弧菌hcp1的转录调控

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微生物学报 2016年第1期56卷 143-149页

作者：王洁董新波高丽晓周冬生殷喆张义全军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 江苏大学医学院江苏镇江212013 中国人民解放军总装备部科技信息研究中心门诊部北京100142

【目的】研究调控子H-NS对副溶血弧菌T6SS1结构蛋白基因hcp1的转录调控机制。【方法】利用Western blot检测Hcp1蛋白在野生株(WT)和hns基因敲除株(Δhns)中表达水平的差异。提取WT和Δhns的总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法验证H-NS对hcp... 详细信息

【目的】研究调控子H-NS对副溶血弧菌T6SS1结构蛋白基因hcp1的转录调控机制。【方法】利用Western blot检测Hcp1蛋白在野生株(WT)和hns基因敲除株(Δhns)中表达水平的差异。提取WT和Δhns的总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法验证H-NS对hcp1的转录调控关系。进而采用引物延伸实验研究hcp1的转录起始位点,并根据产物的丰度判断H-NS对hcp1的调控关系。PCR扩增hcp1的整个启动子区DNA序列,并纯化His-H-NS蛋白,通过凝胶阻滞实验(EMSA)验证His-H-NS对hcp1启动子区是否具有直接的结合作用。【结果】Western blot和实时定量RT-PCR结果显示H-NS能抑制hcp1的表达;引物延伸结果显示hcp1只有一个转录起始位点T(–62)(翻译起始位点为+1),且其转录活性是H-NS和σ54依赖性的;EMSA实验表明H-NS对hcp1的启动子区具有直接的结合作用。【结论】H-NS能直接结合到hcp1启动子区而抑制其转录表达。

关键词：副溶血弧菌 H-NS hcp1 转录调控

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3种方法对鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌的鉴定

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第三军医大学学报 2016年第11期38卷 1205-1209页

作者：康琳高姗周阳辛文文杨浩方瑶毛旭虎王景林军事医学科学院微生物流行病学研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 第三军医大学西南医院医学检验系临床微生物及免疫学教研室重庆400038

目的用3种检测方法对同源性较高的鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌进行鉴定,比较该3种检测方法的鉴定效果。方法分别利用基于MALDI-TOF-MS的蛋白指纹图谱方法、双重荧光定量PCR方法和16S rRNA基因序列分析方法对5株鼻疽伯克霍尔... 详细信息

目的用3种检测方法对同源性较高的鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌进行鉴定,比较该3种检测方法的鉴定效果。方法分别利用基于MALDI-TOF-MS的蛋白指纹图谱方法、双重荧光定量PCR方法和16S rRNA基因序列分析方法对5株鼻疽伯克霍尔德菌和5株类鼻疽伯克霍尔德菌进行鉴定,综合判断鉴定结果,并与传统的形态学和生化鉴定结果比较,寻找更适合于该两种菌的鉴定方法。结果在10株受试菌株中,2株排除是鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌的可能,剩余8株之中,MALDI-TOF-MS方法正确鉴定了6株,双重荧光定量PCR方法正确鉴定了8株,16S rRNA基因序列分析方法正确鉴定4株。结论 MALDI-TOF-MS的蛋白指纹图谱方法和双重荧光定量PCR方法对鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌具有很好的鉴定能力,16S rRNA基因序列分析方法不适合用于该2种菌的鉴定。

关键词：鼻疽伯克霍尔德菌类鼻疽伯克霍尔德菌 MALDI-TOF-MS FQ-PCR 16S rRNA基因序列分析

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