检索结果-内蒙古大学图书馆

HSA-sTRAIL融合蛋白的表达质粒pPICZαA-HSA-sTRAIL的构建

西北国防医学杂志 2008年第4期29卷 280-282页

作者：樊红艳李建民张峰陈薇兰州军区兰州总医院检验科甘肃兰州730050 军事医学科学院微生物流行病研究所分子生物学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室

目的:构建pPICZαA-HSA-sTRAIL真核表达质粒。方法:用PCR方法扩增sTRAIL基因,然后克隆入pPICZαA载体,构建pPICZαA-sTRAIL质粒,然后将HSA基因克隆入pPICZαA-sTRAIL质粒,构建pPICZαA-HSA-sTRAIL真核表达质粒。重组子均进行酶切鉴定和PCR鉴定,最后进行DNA测序验证。结果:PCR方法克隆出目的基因,并成功构建了pPICZαA-HSA-sTRAIL质粒。酶切鉴定、PCR鉴定和DNA测序均证明构建的表达质粒完全与预期一致。结论:成功构建了pPICZαA-HSA-sTRAIL真核表达质粒。

关键词： TRAIL HSA 克隆

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增强DNA疫苗免疫效果策略研究进展

引用

军事医学科学院院刊 2007年第6期31卷 579-581,585页

作者：张晓鹏董磊陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室分子生物学实验室北京100071

在近年发展的疫苗策略中,DNA疫苗由于具备独特的优势而成为研究的热点。然而,虽然DNA疫苗的效果已经在多种动物模型中得到了证实,但是在人体临床试验的结果却不尽如人意。近年来,研究人员发展了多种新的方法来提高DNA疫苗的免疫效果。... 详细信息

在近年发展的疫苗策略中,DNA疫苗由于具备独特的优势而成为研究的热点。然而,虽然DNA疫苗的效果已经在多种动物模型中得到了证实,但是在人体临床试验的结果却不尽如人意。近年来,研究人员发展了多种新的方法来提高DNA疫苗的免疫效果。本文就这一领域的进展进行综述,并对DNA疫苗的应用前景做一展望。

关键词： DNA疫苗递呈系统佐剂

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新发病毒(SARS和H5N1病毒)新型表位性疫苗研究

新发病毒(SARS和H5N1病毒)新型表位性疫苗研究

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第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会

作者：周育森赵光宇孙世惠王弋嘉陈万荣中国军事医学科学院微生物流行病研究所分子病原生物学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室病原分子生物学专业实验室

新发病毒性疾病是影响人类健康的重要传染病,防治该类疾病的有力措施是发展预防该类病毒感染的疫苗。SARS和H5N1病毒是两种烈性的新发病毒,已经或正在对人类的健康带来危害。SARS和高致病禽流感病毒都是以急性感染为主的传染病,病后获... 详细信息

新发病毒性疾病是影响人类健康的重要传染病,防治该类疾病的有力措施是发展预防该类病毒感染的疫苗。SARS和H5N1病毒是两种烈性的新发病毒,已经或正在对人类的健康带来危害。SARS和高致病禽流感病毒都是以急性感染为主的传染病,病后获得性免疫是特异的保护性免疫。深入进行病毒主要结构蛋白在感染免疫保护及免疫致病中的作用是阐明病毒感染免疫规律的核心;而对病毒主要免疫保护蛋白免疫优势表位及其在免疫保护中的作用研究则是免疫规律研究的基础。

关键词：新发病毒 SARS H5N1病毒结构蛋白新型表位性疫苗传染病防治

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单链二硫键稳定抗体靶向超抗原SEA(D227A)分子的表达、纯化及鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第3期21卷 269-272页

作者：郝淮杰郑玉玲余多慰马茹姜永强南京师范大学生命科学学院分子生物学实验室江苏南京210097 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:提高抗肝癌靶向超抗原SEA(D227A)的产量和稳定性,构建单链二硫键稳定抗体靶向超抗原分子scdsFv-SEA(D227A)。方法:构建scdsFv SEA(D227A)表达质粒,用IPTG诱导其在大肠杆菌BL21plusS表达。包涵体经洗涤和复性后,用QSepharoseHP和Hip... 详细信息

目的:提高抗肝癌靶向超抗原SEA(D227A)的产量和稳定性,构建单链二硫键稳定抗体靶向超抗原分子scdsFv-SEA(D227A)。方法:构建scdsFv SEA(D227A)表达质粒,用IPTG诱导其在大肠杆菌BL21plusS表达。包涵体经洗涤和复性后,用QSepharoseHP和Hiprep26/60SephacrylS-200HR纯化。纯化蛋白经AMS烷化处理并结合PAGE电泳来检测二硫键形成情况,并通过ELISA和MTS分别检测重组蛋白与肝癌细胞的结合活性、稳定性和细胞杀伤活性。结果:重组蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上。通过复性及QSepharoseHP离子交换柱和Hiprep26/60SephacrylS-200H凝胶过滤两步纯化后,获得目的蛋白,每升诱导菌液的产量高达60mg。活性测定结果表明,相比与单链抗体靶向超抗原和二硫键抗体靶向超抗原SEA,二硫键抗体靶向超抗原在不影响结合活性和杀伤效果的情况下,稳定性有了较大提高。结论:建立了一种新的稳定的免疫毒素和提高其产量的方法,为hscFv25抗体靶向超抗原的临床应用奠定了基础,同时为其他低稳定性或低产量抗体的改造提供了借鉴的方法。

关键词：单链二硫键稳定抗体产量超抗原 SEA(D227A) 稳定性

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SARS-CoV S蛋白B细胞优势表位的筛选

SARS-CoV S蛋白B细胞优势表位的筛选

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第二届全国现代免疫诊断技术学术研讨会

作者：沈成利陈万荣寇志华何玉先周育森病原微生物及生物安全国家重点实验室 100071 中国军事医学科学院微生物流行病研究所分子病原生物学研究室

目的：确定严重急性呼吸综合症冠状病毒(SARS-CoV)S蛋白B细胞优势表位区. 方法：应用合成覆盖整个S蛋白的168条重叠肽,通过ELISA方法检测SARS-CoV感染恢复期42份患者的血清,筛选确定该病毒S蛋白的线形优势表位区域.合成优势表位区... 详细信息

目的：确定严重急性呼吸综合症冠状病毒(SARS-CoV)S蛋白B细胞优势表位区. 方法：应用合成覆盖整个S蛋白的168条重叠肽,通过ELISA方法检测SARS-CoV感染恢复期42份患者的血清,筛选确定该病毒S蛋白的线形优势表位区域.合成优势表位区的长肽,进一步验证. 结果：筛选出SARS-CoVS蛋白的5个免疫优势表位区,所有来源于免疫优势表位区域的肽段都能与大部分的恢复期SARS患者血清反应,Ⅳ区的肽段(S603-634)检测所有42份SARS恢复期患者的血清IgG抗体均为阳性,而与所有健康对照反应均呈阴性. 结论：SARS-CoVS蛋白优势表位区对于疾病的诊断、疫苗的研制及病理机制的研究提供重要信息.

关键词： SARS-CoV S蛋白B细胞优势表位区急性呼吸综合症冠状病毒 ELISA法病理机制免疫诊断

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