检索结果-内蒙古大学图书馆

科学通报 2024年第33期69卷 4917-4927页

作者：田颖武媚李凯周超张蓉蓉周航宇叶青秦成峰黄升海李晓峰安徽医科大学基础医学院合肥230000 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国医学科学院北京协和医学院系统医学研究所北京100005

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是虫媒黄病毒属的重要成员,因其在2015年的南美寨卡疫情中导致大量新生儿小头症而备受关注,目前尚无获批上市的寨卡病毒疫苗.与传统疫苗相比,mRNA疫苗在安全性、有效性和产能方面优势明显,代表未来全新的疫苗... 详细信息

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是虫媒黄病毒属的重要成员,因其在2015年的南美寨卡疫情中导致大量新生儿小头症而备受关注,目前尚无获批上市的寨卡病毒疫苗.与传统疫苗相比,mRNA疫苗在安全性、有效性和产能方面优势明显,代表未来全新的疫苗形式.本研究选取寨卡病毒FSS13025株包膜蛋白E的Ⅲ区(EDⅢ)作为免疫原,设计构建包含EDⅢ编码序列、非编码区和poly(A)尾的重组质粒,通过体外转录和加帽反应获得EDⅢ-mRNA转录体,其转染至HEK293TN细胞后能表达特异的目的抗原并能分泌至胞外.进一步利用微流控技术将EDⅢ-mRNA转录体制备成脂质纳米颗粒(lipid nanoparticle,LNP),以间隔3周加强一次的免疫方案分别将5和20μg的EDⅢ-mRNA经肌肉注射至BALB/c小鼠.酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和空斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)的结果显示,该分子可刺激小鼠产生剂量依赖性的高水平的E蛋白特异IgG抗体与寨卡病毒中和抗体,并产生Th1细胞偏向的分泌型IFN-γ、TNF-α和IL-2细胞因子.攻毒保护试验结果显示,免疫组小鼠的病毒血症和主要脏器中的病毒RNA载量相较于磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline,PBS)对照组小鼠均明显降低,其中孕鼠大脑及胎鼠大脑未检测到病毒核酸,体现出良好的免疫保护和垂直传播阻断效果.本研究设计的编码寨卡病毒E蛋白Ⅲ区的mRNA-LNP疫苗可为寨卡病毒疫苗提供新的候选.

关键词：寨卡病毒 mRNA疫苗 E蛋白Ⅲ区免疫原性免疫保护

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基于FRET构建A型肉毒毒素活性检测的高通量方法

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安徽医科大学学报 2023年第1期58卷 15-21页

作者：罗森郭丽娜李涛王琴王慧遵义医药高等专科学校细胞生物学与免疫学教研室遵义563006 军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的利用荧光共振能量转移(FRET)构建针对A型肉毒毒素酶活性检测的高通量体外方法。方法构建只识别A型肉毒毒素的基于双荧光标记底物的重组表达质粒,将其构建的质粒转入大肠杆菌表达系统进行表达,对表达后的荧光标记底物重组蛋白进行纯... 详细信息

目的利用荧光共振能量转移(FRET)构建针对A型肉毒毒素酶活性检测的高通量体外方法。方法构建只识别A型肉毒毒素的基于双荧光标记底物的重组表达质粒,将其构建的质粒转入大肠杆菌表达系统进行表达,对表达后的荧光标记底物重组蛋白进行纯化和透析并保存备用;利用A型肉毒毒素轻链(ALc)对重组蛋白进行酶切检测活性;对本检测方法的条件进行优化;ALc切割荧光标记底物测定其酶动力学参数K_(m)与K_(cat)值。结果重组表达质粒构建成功,通过大肠杆菌表达系统表达后检测明显出现目的条带,对其纯化后获得的重组蛋白纯度在90%左右,命名重组蛋白为CYA。对CYA通过酶ALc、B型肉毒毒素轻链(BLc)进行酶切鉴定,结果显示CYA只能被ALc酶切产生与预期相符的两个蛋白片段,不能被BLc酶切。对基于FRET底物的条件优化得到:设定滤光片灵敏度在65~110之间;实时动态检测间隔为2 min/次,动态检测时间为30~120 min,底物CYA合适的浓度范围0.5~32μmol/L。CYA在ALc酶作用下随时时间的变化与荧光值528与485的比值作图最小在0.5左右,最大时约为0.9。酶动力学参数测定ALc切割CYA的值K_(cat)值为(5±0.4)s^(-1)和K_(m)为(2.33±0.21)μmol/L。结论成功构建了基于FRET技术的A型肉毒毒素活性检测的高通量体外分析方法。

关键词： FRET 肉毒毒素高通量检测

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武夷山自然保护区蚊虫种类调查与重要蚊种种群遗传结构分析

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中国热带医学 2024年第5期24卷 499-505页

作者：王明谢静文杜雨彤王刚尹紫鸽蔡京虹刘庆张恒端赵彤言史丽内蒙古农业大学园艺与植物保护学院昆虫系统进化与多样性研究室内蒙古呼和浩特010018 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全全国重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071 杭州国际旅行卫生保健中心浙江杭州310061

目的了解武夷山自然保护区蚊虫种类分布特征和重要蚊种的种群遗传多样性,为该地区蚊媒传染病防制提供科学依据。方法2022—2023年在武夷山自然保护区内选择16个采样点,幼虫采集使用吸管法、成蚊采集使用诱蚊灯法。利用形态特征和基于细... 详细信息

目的了解武夷山自然保护区蚊虫种类分布特征和重要蚊种的种群遗传多样性,为该地区蚊媒传染病防制提供科学依据。方法2022—2023年在武夷山自然保护区内选择16个采样点,幼虫采集使用吸管法、成蚊采集使用诱蚊灯法。利用形态特征和基于细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome c oxidase subunitⅠ,COⅠ)和细胞色素氧化酶亚基Ⅱ(cytochrome c oxidase subunitⅡ,COⅡ)的分子鉴定技术相结合鉴定蚊种。利用ClustalX、DnaSP 5.0、Network 4.6.1.0等软件进行日本伊蚊(***)、白纹伊蚊(***)、骚扰阿蚊(***)种群遗传分化程度和基因流的分析。结果经鉴定,本研究在武夷山自然保护区采集的蚊虫隶属于蚊科8属30种。其中伊蚊属10种,库蚊属13种,阿蚊属1种,直角蚊属1种,蓝带蚊属1种,杵蚊亚属1种,按蚊属1种,巨蚊属2种。3种重要蚊虫种群遗传结构分析结果表明,日本伊蚊单倍体多样性指数为0.9947,种群间普遍达到中等分化程度,种群6与种群12之间遗传分化程度较高;白纹伊蚊单倍体多样性指数为0.6340,种群1和2与各种群之间遗传分化程度较大;骚扰阿蚊单倍体多样性指数为0.7033,种群2与种群3、种群4、种群6、种群7之间遗传分化程度较大,基因流较小。结论武夷山自然保护区蚊虫物种丰富。本研究对蚊种组成、分布开展了较为全面的调查,分析了日本伊蚊、白纹伊蚊、骚扰阿蚊重要蚊种的种群遗传结构特征,为当地蚊媒生态研究和蚊媒疾病防控等方面提供了科学数据参考。

关键词：蚊武夷山细胞色素氧化酶亚基Ⅰ 细胞色素氧化酶亚基Ⅱ 物种鉴定种群遗传结构

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铜绿假单胞菌噬菌体vB_PaS_IME307的生物学特性研究及全基因组分析

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陆军军医大学学报 2023年第19期45卷 2045-2056页

作者：王灿刘慧莹高明明米丽媛喻鑫婷米志强柏长青安徽医科大学附属阜阳医院呼吸内科安徽阜阳236000 解放军总医院第五医学中心呼吸与危重症医学科北京100071 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 深圳大学总医院呼吸与危重症医学科广东深圳518000

目的以实验室保存菌株Pa175为宿主菌,从医院污水中分离得到1株铜绿假单胞菌噬菌体,研究其生物学特性及全基因组学特征。方法利用双层平板法、噬斑法分离并鉴定噬菌体;PEG8000浓缩NaCl沉淀法纯化噬菌体;蔗糖梯度离心进一步纯化噬菌体,经... 详细信息

目的以实验室保存菌株Pa175为宿主菌,从医院污水中分离得到1株铜绿假单胞菌噬菌体,研究其生物学特性及全基因组学特征。方法利用双层平板法、噬斑法分离并鉴定噬菌体;PEG8000浓缩NaCl沉淀法纯化噬菌体;蔗糖梯度离心进一步纯化噬菌体,经磷钨酸负染染色后,使用透射电子显微镜观察其形态;蛋白酶K/SDS法提取噬菌体DNA,对提取的核酸进行全基因组测序和生物信息学分析。结果得到1株裂解性铜绿假单胞菌噬菌体vB_PaS_IME307,该噬菌体可以形成透明且有晕环的噬菌斑,全基因组大小为51545 bp。透射电镜结果显示vB_PaS_IME307的头部呈正二十面体形状,直径(66±2)nm,尾长(116±2)nm;进化树分析发现该噬菌体为Mccleskeyvirinae病毒属,长尾噬菌体科(Siphoviridae)。生物学特性研究发现:vB_PaS_IME307在pH=4.0~11.0、60℃以下能够保持较高活性,感染周期约为60 min,其中包括10 min潜伏期和50 min暴发期,其暴发量为150 PFU/cell。结论噬菌体vB_PaS_IME307具有宿主特异性,对温度和pH具有较好的耐受能力,具有防治铜绿假单胞菌细菌感染的潜力。

关键词：铜绿假单胞菌噬菌体生物学特性基因组学分析

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人皮肤微生物对蚊虫嗅觉行为影响的研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2022年第1期40卷 94-98页

作者：郭红霞赵腾吴家红李春晓贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071

蚊虫是疟疾、登革热、黄热病等传染病的传播媒介。蚊虫防制可以降低传染病的发生和流行。近年来研究发现,人皮肤微生物的代谢产物或产生的挥发性气味物质对蚊虫具有一定的吸引力,有望为蚊虫控制提供新方法。本文就人皮肤微生物的组成、... 详细信息

蚊虫是疟疾、登革热、黄热病等传染病的传播媒介。蚊虫防制可以降低传染病的发生和流行。近年来研究发现,人皮肤微生物的代谢产物或产生的挥发性气味物质对蚊虫具有一定的吸引力,有望为蚊虫控制提供新方法。本文就人皮肤微生物的组成、分布及其产生的挥发性气味物质对蚊虫嗅觉行为的影响进行综述,为新型蚊虫驱避剂和引诱剂的开发及应用提供参考。

关键词：蚊虫嗅觉行为人皮肤微生物挥发性物质引诱

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SARS-CoV-2亚单位疫苗制备及免疫原性初步研究

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病毒学报 2024年第5期40卷 943-951页

作者：徐骁黄涛刘铁柱芜为孙丽娜李川李建东王世文王希良传染病溯源与智能决策全国重点实验室中国疾病预防控制中心病毒性疾病预防控制所北京100052 国家卫生健康委医学病毒学与病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100052 病原与生物安全国家重点实验室军事医学科学院北京微生物与流行病学研究所北京100071

严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)自2019年年末出现以来,给全人类造成了严重的公共卫生事件和社会经济负担。本实验以SARS-CoV-2突变株XBB1.5的受体结合域(Receptor binding domain,RBD)序列为疫苗核心分子串联SARS-CoV-2的全长S蛋白制备了亚单位纳米颗粒疫苗。将S蛋白的6个氨基酸残基突变为6个脯氨酸残基,提高表达量和蛋白质分子的稳定性。而且将弗林酶酶切位点进行突变以增加蛋白质的稳定性。在羧基端串联昆虫铁蛋白的氨基酸序列,利用铁蛋白纳米颗粒多面体可结合抗原蛋白的特性,增加抗原递呈。在氢氧化铝和CpG1018双佐剂组合免疫小鼠后,可诱导小鼠产生针对SARS-CoV-2多种变异株的中和抗体,且可诱导小鼠产生了较强的细胞免疫和体液免疫。本研究表明,XBB1.5突变株RBD区域串联S蛋白全长序列及昆虫铁蛋白制备的纳米颗粒疫苗可以有效预防SARS-CoV-2变体,是一个很好的候选疫苗分子。

关键词：新型冠状病毒亚单位疫苗受体结合域血管紧张素转化酶2

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湛江市白纹伊蚊对常用杀虫剂抗药性调查研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2023年第2期30卷 80-82页

作者：张恒端麻祖吴群刘钦梅邢丹李春晓郭晓霞赵彤言军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071

测定湛江市白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性水平,为登革热媒介防制提供科学用药指导。从湛江市霞山区、雷州市乌石镇和企水镇采集白纹伊蚊幼虫,在实验室繁殖1~2代,用WHO推荐的浸渍法测定抗药性指数。结果显示,霞山区白纹伊蚊对残杀威(2.99... 详细信息

测定湛江市白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性水平,为登革热媒介防制提供科学用药指导。从湛江市霞山区、雷州市乌石镇和企水镇采集白纹伊蚊幼虫,在实验室繁殖1~2代,用WHO推荐的浸渍法测定抗药性指数。结果显示,霞山区白纹伊蚊对残杀威(2.99)、毒死蜱(2.19)、氯菊酯(8.09)和溴氰菊酯(14.32)产生抗性;雷州市乌石镇白纹伊蚊对残杀威(0.67)、毒死蜱(0.76)较敏感但对氯菊酯(5.53)、溴氰菊酯(5.66)产生抗性;企水镇白纹伊蚊对溴氰菊酯(21.68)达到了高抗水平,对残杀威(2.46)、氯菊酯(5.38)具有一定抗性,对毒死蜱(1.25)较敏感。结果表明,毒死蜱药效较好,雷州市乌石镇和企水镇白纹伊蚊都对其敏感;3个地区白纹伊蚊对溴氰菊酯产生较高抗性,尤其是企水镇达到高抗水平。

关键词：白纹伊蚊杀虫剂抗药性湛江市

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四环素降低致倦库蚊共生Wolbachia密度方法的建立及效果评价

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寄生虫与医学昆虫学报 2023年第2期30卷 74-79页

作者：吕慧鑫姜玉庭郭晓霞倪孟邢丹赵彤言张灵玲福建农林大学生命科学学院福州350002 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071

胞内共生菌Wolbachia在昆虫生理生殖和天然免疫方面发挥着重要作用,蚊虫体内的Wolbachia密度与其抗病毒作用有很强的相关关系。本研究建立了一种利用四环素处理幼虫降低致倦库蚊共生Wolbachia密度的方法,并采用实时荧光定量PCR进行了效... 详细信息

胞内共生菌Wolbachia在昆虫生理生殖和天然免疫方面发挥着重要作用,蚊虫体内的Wolbachia密度与其抗病毒作用有很强的相关关系。本研究建立了一种利用四环素处理幼虫降低致倦库蚊共生Wolbachia密度的方法,并采用实时荧光定量PCR进行了效果评估。结果显示,使用0.05 mg/mL四环素处理致倦库蚊海口株和温州株,处理后Wolbachia密度中位数分别下降2729和3507倍;卵巢及其余组织的Wolbachia密度均下降至0.001以下,其中,卵巢中Wolbachia密度下降825629倍。可见,0.05 mg/mL四环素处理幼虫能显著降低蚊虫体内Wolbachia密度,为后续清除Wolbachia、探究Wolbachia对致倦库蚊感染和传播病毒的影响提供了技术基础。

关键词：致倦库蚊四环素沃尔巴克氏体

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利用Aag2细胞过表达体系筛选埃及伊蚊对DENV2易感相关免疫基因

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寄生虫与医学昆虫学报 2022年第1期29卷 25-32页

作者：王迪谢晓雪周新宇赵腾郭晓霞邢丹李春晓军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071

埃及伊蚊Aedes aegypti是登革病毒的主要传播媒介,埃及伊蚊感染登革Ⅱ型病毒(dengue virus typeⅡ,DENV2)后产生先天免疫反应的相关研究,有助于进一步理解埃及伊蚊感染DENV2的过程和机制。本研究通过埃及伊蚊和Aag2细胞感染DENV2进行转... 详细信息

埃及伊蚊Aedes aegypti是登革病毒的主要传播媒介,埃及伊蚊感染登革Ⅱ型病毒(dengue virus typeⅡ,DENV2)后产生先天免疫反应的相关研究,有助于进一步理解埃及伊蚊感染DENV2的过程和机制。本研究通过埃及伊蚊和Aag2细胞感染DENV2进行转录组分析,与未染毒的蚊虫和细胞进行对比,筛选出12个表达变化较大的基因,之后分别构建含有这12个基因的PSL1180polyUBdsRED质粒载体,并使用细胞转染技术在Aag2细胞中建立目标基因的瞬时转染过表达模型,观察了目标基因过表达后细胞上清中DENV2的复制水平。结果显示,12个基因中羟基类固醇脱氢酶样蛋白、蜕皮激素20单加氧酶、3β-羟基类固醇脱氢酶3个基因过表达后细胞上清中病毒拷贝数出现了具有统计学意义的降低,表明这3个基因的表达可能影响DENV2在Aag2细胞中的复制。这3个基因的相关蛋白都涉及到20-羟基脱皮酮的合成,这提示20-羟基脱皮酮可能在蚊虫感染DENV2时介导了重要的免疫调节途径,为进一步研究蚊虫与虫媒病毒的互作机制提供了新的思路。

关键词：埃及伊蚊 Aag2细胞 DENV2 转染过表达

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蚊虫肠道沙雷氏菌相关研究进展

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寄生虫与医学昆虫学报 2022年第3期29卷 196-202页

作者：李建航赵腾李春晓军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071

蚊虫是一种重要的医学昆虫,在蚊媒传染病的传播过程中担任重要的角色。蚊虫肠道内定殖有复杂多样的微生物群,其中沙雷氏菌属占据重要组分。沙雷氏菌属在与蚊虫的互作共生过程中,在很多方面对蚊虫产生重要的影响。本综述从沙雷氏菌对蚊... 详细信息

蚊虫是一种重要的医学昆虫,在蚊媒传染病的传播过程中担任重要的角色。蚊虫肠道内定殖有复杂多样的微生物群,其中沙雷氏菌属占据重要组分。沙雷氏菌属在与蚊虫的互作共生过程中,在很多方面对蚊虫产生重要的影响。本综述从沙雷氏菌对蚊虫生理行为的影响及其在蚊媒传染病防治中的应用等方面总结了蚊虫肠道沙雷氏菌的研究进展,为发现蚊虫防控新靶标、拓展蚊虫防控新策略提供理论基础。

关键词：蚊虫肠道沙雷氏菌

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