检索结果-内蒙古大学图书馆

军事医学科学院院刊 2006年第2期30卷 131-134页

作者：张芳刘玮何君端青吴晓明赵秋敏张泮河杨红曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:了解我国北方部分地区宿主动物感染土拉弗菌状况和基因型别。方法:鼠夹诱捕鼠,从鼠脾组织提取DNA,应用巢式PCR检测土拉弗菌,计算并比较各地区及各鼠种阳性率。阳性标本用型特异性引物及短串联重复序列(SSTR9、SSTR16)引物扩增两区... 详细信息

目的:了解我国北方部分地区宿主动物感染土拉弗菌状况和基因型别。方法:鼠夹诱捕鼠,从鼠脾组织提取DNA,应用巢式PCR检测土拉弗菌,计算并比较各地区及各鼠种阳性率。阳性标本用型特异性引物及短串联重复序列(SSTR9、SSTR16)引物扩增两区域并测序,用C lustalX(5.0)和DNA C lub软件对序列进行比较分析。结果:共捕获鼠421只,分属14种鼠种,其中7个鼠种20份标本PCR检测阳性,总阳性率为4.75%。吉林、新疆、黑龙江、内蒙古和浙江的阳性率分别为11.65%,10.00%,6.54%,1.76%和0%。地区间阳性率差异显著(χ2=20.90,P=0.0003);不同鼠种间阳性率未见差异(χ2=11.82,P=0.066)。对20份扩增阳性标本进行型特异性扩增及SSTR9、SSTR16序列测定并对比分析,结果显示均为土拉弗菌B亚型,但型内差别较大,标本及菌株相互比较均显示基因多态性程度高且地区间有交叉。结论:我国北方部分地区可能依然存在B亚型土拉弗菌型感染(宿主动物)情况,且其基因型内差异较大。

关键词：土拉弗菌感染短串联重复序列巢式PCR 啮齿类动物分子流行病学

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我国部分林区鼠中莱姆病螺旋体的分子流行病学调查研究

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中国人兽共患病学报 2006年第9期22卷 817-820页

作者：褚宸一何静赵秋敏张泮河吴晓明蒋宝贵高燕李红梅黄海楠詹琳曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的了解我国部分林区鼠中莱姆病螺旋体感染及其基因分型情况。方法应用巢式PCR扩增鼠中莱姆病螺旋体5S-23S rRNA间隔区片段,对阳性产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。结果共检测鼠8属19种455只,感染莱姆病螺旋体的有4属8种26只... 详细信息

目的了解我国部分林区鼠中莱姆病螺旋体感染及其基因分型情况。方法应用巢式PCR扩增鼠中莱姆病螺旋体5S-23S rRNA间隔区片段,对阳性产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。结果共检测鼠8属19种455只,感染莱姆病螺旋体的有4属8种26只,感染率为5.71%。内蒙古、黑龙江、浙江、贵州林区鼠的感染率分别为3.45%、4.84%、8.00%、7.14%;其中东北林区(包括内蒙古和黑龙江)棕背鼠平的感染率为9.09%;浙江林区社鼠的感染率为9.26%;未发现新疆林区鼠感染莱姆病螺旋体。RFLP分析结果显示内蒙古、黑龙江林区鼠中莱姆病螺旋体均为***基因型,而浙江、贵州林区鼠感染的莱姆病螺旋体包括***和***两种基因型。结论东北林区及浙江林区以***基因型为主,棕背鼠平、社鼠可能分别是两地林区莱姆病螺旋体的主要储存宿主。

关键词：莱姆病螺旋体基因型鼠

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炭疽芽孢杆菌致病机制与疫苗研制策略研究进展

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军事医学科学院院刊 2006年第3期30卷 276-279页

作者：董梅王希良庄汉澜军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

炭疽杆菌致病过程包括芽孢发芽、菌体繁殖和毒素分泌等多个环节。荚膜和毒素是公认的致病因子。毒素B亚单位(PA)可阻断ET、LT的致病作用,已用作疫苗,但繁殖体生长过程中产生的出血、蛋白溶解分子也是毒力分子。相应的抑制剂有治疗作用... 详细信息

炭疽杆菌致病过程包括芽孢发芽、菌体繁殖和毒素分泌等多个环节。荚膜和毒素是公认的致病因子。毒素B亚单位(PA)可阻断ET、LT的致病作用,已用作疫苗,但繁殖体生长过程中产生的出血、蛋白溶解分子也是毒力分子。相应的抑制剂有治疗作用。现有炭疽粗制PA苗、芽孢苗安全有效,但仍存在不足。根据炭疽致病机制的研究进展,理想炭疽疫苗应同时靶向芽孢、荚膜和毒素及其他毒力因子等多个环节。

关键词：炭疽炭疽芽孢杆菌致病机制疫苗策略

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新分离呼肠病毒基因组片段S1全长cDNA克隆及其序列分析

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军事医学科学院院刊 2006年第1期30卷 15-17,21页

作者：宋立华苏裕心何君朱虹黄如统端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的：克隆测序新分离呼肠病毒的S1全长基因组片段，并对其进行序列分析。方法：从接种呼肠病毒的L929细胞中提取病毒基因组，用改进的单引物扩增技术获得S1片段的全长cDNA克隆井测定其全序列。结果：新分离呼肠病毒的S1片段长1437bp，... 详细信息

目的：克隆测序新分离呼肠病毒的S1全长基因组片段，并对其进行序列分析。方法：从接种呼肠病毒的L929细胞中提取病毒基因组，用改进的单引物扩增技术获得S1片段的全长cDNA克隆井测定其全序列。结果：新分离呼肠病毒的S1片段长1437bp，其核苷酸序列与已知的1—3型呼肠病毒标准株的同源性分另1为59％，61％和48％；推测的cr1序列与标准株的同源性分别为52％，60％和26％。结论：新分离呼肠病毒的S1片段与目前已知的分离株相比有很大差异，有可能是2型呼肠病毒的一个独立分支。

关键词：呼肠病毒 S1片段序列分析

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西尼罗病毒外膜蛋白的表达及其抗原性鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第12期26卷 1102-1103页

作者：张久松张泮河高玉然刘一萍司炳银曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

西尼罗病毒（West Nile virus, WNV）属黄病毒科、黄病毒属，血清学分类与乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）同属JEV复合组。该病毒主要引起人和哺乳动物的西尼罗热和西尼罗脑炎，是近年来倍受关注的新发虫媒传染病之一... 详细信息

西尼罗病毒（West Nile virus, WNV）属黄病毒科、黄病毒属，血清学分类与乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）同属JEV复合组。该病毒主要引起人和哺乳动物的西尼罗热和西尼罗脑炎，是近年来倍受关注的新发虫媒传染病之一。WNV基因组核酸为单股正链RNA，由约11kb核苷酸组成。

关键词：病毒外膜蛋白抗原性鉴定单股正链RNA 乙型脑炎病毒西尼罗病毒血清学分类西尼罗脑炎虫媒传染病

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重组肉毒毒素B重链结合区片段的表达、纯化及其抗原性分析

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军事医学科学院院刊 2006年第2期30卷 127-130页

作者：谢亮王俊虹康琳高姗王景林军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:克隆、表达并纯化肉毒毒素B重链结合区C端(BoNT/B Hc)保护性抗原片段。方法:采用PCR扩增BoNT/B Hc基因,插入表达载体pET-H is,转化***21(pLys)细胞获得表达工程菌株,并对诱导表达条件和纯化条件进行优化。利用W estern印迹和间接EL... 详细信息

目的:克隆、表达并纯化肉毒毒素B重链结合区C端(BoNT/B Hc)保护性抗原片段。方法:采用PCR扩增BoNT/B Hc基因,插入表达载体pET-H is,转化***21(pLys)细胞获得表达工程菌株,并对诱导表达条件和纯化条件进行优化。利用W estern印迹和间接ELISA方法鉴定rBoNT/B Hc的抗原性。结果:表达工程菌BL21/pETH is-BHc于37℃经0.2 mmol/L IPTG诱导6 h后,目的蛋白获得高表达,约占菌体总蛋白的24%。经过N i-NTA亲和层析柱一步纯化,rBoNT/B Hc的纯度可达96%以上。W estern印迹和间接ELISA均显示其具有良好的抗原性。结论:成功克隆、表达并纯化了BoNT/B Hc片段,并可被抗天然BoNT/B马血清所识别,为建立快速检测方法和制备相应的抗体及亚单位疫苗奠定了基础。

关键词：肉毒毒素B 克隆表达纯化抗原性

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应用O-抗原基因簇特异PCR对假结核耶尔森菌分型

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军事医学科学院院刊 2006年第5期30卷 406-409页

作者：王效义李艳君戴二黑郭兆彪宋亚军周冬生杨瑞馥军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的：依据假结核耶尔森菌O-抗原基因簇多态性，应用PCR基因分型方法替代传统的血清分型方法，时本室保存的31株假结核耶尔森菌进行分型研究。方法：通过比较假结核耶尔森菌与已知血清型假结核耶尔森菌标准参考株O-抗原基因簇的差异，... 详细信息

目的：依据假结核耶尔森菌O-抗原基因簇多态性，应用PCR基因分型方法替代传统的血清分型方法，时本室保存的31株假结核耶尔森菌进行分型研究。方法：通过比较假结核耶尔森菌与已知血清型假结核耶尔森菌标准参考株O-抗原基因簇的差异，确定实验株的血清型。结果：应用PCR基因分型方法替代传统的血清分型方法，对本室保存的31株假结核耶尔森菌进行了成功的血清分型，血清组Ⅰ-Ⅴ与血清型0：1～0：5存在着对应关系。结论：应用PCR方法对假结核耶尔森菌进行血清分型，方法简单、迅速，同时不需要制备特异抗血清，是一种理想的血清分型替代方法。

关键词：假结核耶尔森菌血清分型聚合酶链反应 O-抗原基因簇多基因族

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基因芯片技术检测10种烈性RNA病毒

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解放军医学杂志 2006年第3期31卷 203-206页

作者：杨银辉杨瑞馥常国辉司炳银翟俊辉吕富双周东生韩伟国祝庆余军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的利用基因芯片技术检测包括披膜病毒科甲病毒属、黄病毒科黄病毒属、布尼亚病毒科汉坦病毒属及SARS病毒等10种烈性RNA病毒。方法设计了甲病毒属的属保守区通用引物和黄病毒属的通用引物,与布尼亚病毒及SARS病毒的引物一起用于扩增靶... 详细信息

目的利用基因芯片技术检测包括披膜病毒科甲病毒属、黄病毒科黄病毒属、布尼亚病毒科汉坦病毒属及SARS病毒等10种烈性RNA病毒。方法设计了甲病毒属的属保守区通用引物和黄病毒属的通用引物,与布尼亚病毒及SARS病毒的引物一起用于扩增靶核酸。另外,在通用引物所能扩增的区域内设计每种病毒的特异引物,利用该引物通过PCR反应制备cDNA克隆探针,在判定其特异性后,制备氨基化探针。对探针浓度、杂交温度、杂交时间、不同杂交液及杂交后芯片的洗涤方法进行了优化。结果核酸探针浓度为0·3μg/μl时,可获得杂交信号;在杂交液终浓度含20%甲酰胺、杂交60℃、1·5h的条件下,可分别获得以上10种病毒的特异杂交信号。利用多重PCR扩增靶序列时,可获得2种或4种混合病原体的特异性杂交信号。结论利用基因芯片技术检测病毒性病原体是可行的,关键在于设计合适的引物及探针序列。

关键词：寡核苷酸序列分析 RNA,病毒检测

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鹦鹉热衣原体HSP60基因克隆及其表达产物抗原性的实验研究

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中国人兽共患病学报 2006年第3期22卷 209-211页

作者：裴杰萍朱虹何君檀华张美玲端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的验证新获得的鹦鹉热衣原体HSP60基因在***中高效表达的产物是否具有足够的抗原活性,为进一步研究其在鹦鹉热衣原体感染检测上的应用奠定基础。方法根据GenBank鹦鹉热衣原体Hsp60基因序列X51404,设计一对特异性引物,扩增了鹦鹉热衣原... 详细信息

目的验证新获得的鹦鹉热衣原体HSP60基因在***中高效表达的产物是否具有足够的抗原活性,为进一步研究其在鹦鹉热衣原体感染检测上的应用奠定基础。方法根据GenBank鹦鹉热衣原体Hsp60基因序列X51404,设计一对特异性引物,扩增了鹦鹉热衣原体HSP60全长基因,克隆入pET32a(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG诱导获得高效表达。结果扩增了鹦鹉热衣原体HSP60全长基因,表达产物分子量约为68kD,经Western blotting和胶体金免疫层析技术检测,表明表达产物具有较好的抗原性。结论扩增了鹦鹉热衣原体HSP60全长基因,并对其表达产物的抗原性进行免疫印记分析和免疫层析初步检测,表明具有较好的抗原性,为进一步研究其在鹦鹉热衣原体感染检测上的意义打下了基础。

关键词：鹦鹉热衣原体 HSP60 克隆

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E型肉毒神经毒素(BoNT)基因序列分析及其B细胞表位预测

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军事医学科学院院刊 2006年第5期30卷 419-423页

作者：刘艳华贾扬王景林军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的：分析不同E型肉毒梭菌的肉毒神经毒素（BoNT）基因序列的同源性，预测E型BoNT的B细胞表位。方法：用LaserGene软件中的MegAlign程序比对GenBank中5株不同E型肉毒梭菌的BoNT基因序列；分别利用BioSun和LaserGene软件分析E型BoNT的... 详细信息

目的：分析不同E型肉毒梭菌的肉毒神经毒素（BoNT）基因序列的同源性，预测E型BoNT的B细胞表位。方法：用LaserGene软件中的MegAlign程序比对GenBank中5株不同E型肉毒梭菌的BoNT基因序列；分别利用BioSun和LaserGene软件分析E型BoNT的表位参数、蛋白质二级结构及氨基酸序列保守性，利用三维结构显示软件Cn3D，分析E型BoNT可能的B细胞表位的空间定位，进而预测E型BoNT的B细胞表位。结果：5个E型BoNT基因核酸序列同源性为97．2％-100％，氨基酸序列同源性为95％-100％；E型BoNT轻链中的62-78，111-127区段，重链中443-465，661-677，693～709，727-743，853-869，1093-1109，1128-1144，1163-1179区段最有可能是其B细胞优势表位。结论：我们利用不同分析软件，结合多参数综合预测出了E型BoNT的多个B细胞表位，为进一步鉴定E型BoNer的B细胞表位及其多表位疫苗的研究奠定了基础。

关键词：肉毒梭菌 E型肉毒神经毒素 B细胞表位

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