检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2006年第1期33卷 100-104页

作者：李冠霖徐俊杰董大勇宋小红陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

炭疽杆菌芽孢外壁胶原样蛋白(Bc lA)是芽孢外壁发状菌丝的主要结构成分,也是芽孢的主要免疫原。从国内分离的3株炭疽杆菌中克隆出Bc lA基因并进行了序列分析,结果发现有2株(A16R和40048)的Bc lA与国外报道菌株长度不同,分别含有388个和... 详细信息

炭疽杆菌芽孢外壁胶原样蛋白(Bc lA)是芽孢外壁发状菌丝的主要结构成分,也是芽孢的主要免疫原。从国内分离的3株炭疽杆菌中克隆出Bc lA基因并进行了序列分析,结果发现有2株(A16R和40048)的Bc lA与国外报道菌株长度不同,分别含有388个和322个氨基酸,72个和50个GXX三氨基酸重复序列,5个和3个含21个氨基酸的(GPT)5GDTGTT重复序列(Bc lA重复)。另一株40022的Bc lA与国外报道的53169株完全一致,含有370个氨基酸,66个GXX重复,5个Bc lA重复。对我国炭疽杆菌Bc lA蛋白多态性的分析为进行炭疽杆菌的基因分型以及研究炭疽芽孢的免疫原性和致病机理打下基础。

关键词：炭疽杆菌 BclA蛋白多态性芽孢

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鹦鹉热嗜衣原体实时定量PCR检测方法的建立

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中国人兽共患病学报 2006年第8期22卷 701-703页

作者：王争强朱虹苏裕心何君端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的建立一种简便、快速、特异的荧光定量PCR检测方法,用于鹦鹉热嗜衣原体的快速检测。方法以主要外膜蛋白(MOMP)基因为靶序列设计特异性引物,采用SYBR GreenⅠ随机渗入法建立实时定量PCR检测方法。结果循环阈值(Ct)与标准DNA模板在1.0&... 详细信息

目的建立一种简便、快速、特异的荧光定量PCR检测方法,用于鹦鹉热嗜衣原体的快速检测。方法以主要外膜蛋白(MOMP)基因为靶序列设计特异性引物,采用SYBR GreenⅠ随机渗入法建立实时定量PCR检测方法。结果循环阈值(Ct)与标准DNA模板在1.0×102-1.0×107拷贝/μl浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.989。该方法用于鹦鹉热嗜衣原体的检测具有很高的特异性,其敏感性与常规PCR相比可以提高100倍。结论本研究建立的检测鹦鹉热嗜衣原体的实时定量PCR检测方法具有很高的特异性和敏感性,可以用于鹦鹉热嗜衣原体的检测。

关键词：鹦鹉热嗜衣原体实时定量PCR MOMP基因熔解曲线

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干扰素系统与病毒的相互作用

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中国生物工程杂志 2006年第4期26卷 95-100页

作者：徐春娥陈薇军事医学科学院微生物流行病学研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

干扰素是最早发现的细胞因子之一,不同类型的IFN生物活性基本相同,具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等作用。病毒侵染细胞,诱导细胞产生IFN,IFN通过不同的作用机制启动宿主防御系统,激活酶和作用因子来拮抗病毒的侵染、复制和转录过程。正... 详细信息

干扰素是最早发现的细胞因子之一,不同类型的IFN生物活性基本相同,具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等作用。病毒侵染细胞,诱导细胞产生IFN,IFN通过不同的作用机制启动宿主防御系统,激活酶和作用因子来拮抗病毒的侵染、复制和转录过程。正因为干扰素在抗病毒防御过程中的关键作用,病毒已经衍生出了有效的方式能够成功的侵染宿主。病毒通过表达一些拮抗蛋白来干扰IFN的诱导产生、IFN的信号转导或效应蛋白的作用,从而终止干扰素的产生,并破坏干扰素诱导的其它因子的作用来逃避干扰素的作用。

关键词：干扰素系统病毒抑制干扰素拮抗

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布氏杆菌BCSP_(31)/pVAX1重组表达质粒的构建及其免疫保护效果的研究

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中国人兽共患病学报 2006年第6期22卷 493-497页

作者：李鹏罗德炎高永辉张松乐宋艳王希良军事医学科学院微生物流行病研究所三室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的构建布氏杆菌BCSP31/pVAX1重组表达质粒,免疫BALB/c小鼠,观察其免疫应答及免疫保护效果。方法克隆BCSP31基因,构建BCSP31/pVAX1重组表达质粒。转染COS7细胞,免疫组化检测其BCSP31蛋白抗原的表达。BCSP31/pVAX1重组表达质粒肌肉注射... 详细信息

目的构建布氏杆菌BCSP31/pVAX1重组表达质粒,免疫BALB/c小鼠,观察其免疫应答及免疫保护效果。方法克隆BCSP31基因,构建BCSP31/pVAX1重组表达质粒。转染COS7细胞,免疫组化检测其BCSP31蛋白抗原的表达。BCSP31/pVAX1重组表达质粒肌肉注射免疫BALB/c小鼠,观察特异性体液免疫和细胞免疫效果。进一步用1.25×104布氏杆菌A544强毒株腹腔攻毒,观察BCSP31/pVAX1重组表达质粒的免疫保护效果。结果扩增的BCSP31保护性抗原基因片断在牛、羊和猪布氏杆菌株中具有高度保守性,构建的BCSP31/pVAX1重组表达质粒在COS7细胞有目的蛋白抗原的表达。制备的BCSP31/pVAX1重组表达质粒肌肉免疫BALB/c小鼠4次,ELISA检测BCSP31/pVAX1重组表达质粒产生了较高水平的特异性IgG抗体,并随免疫次数增加抗体的滴度也递增,且抗体亚型以IgG2a为主,表明主要引起Th1型的免疫应答。FCM检测BCSP31/pVAX1重组表达质粒的CD4+/CD8+比值明显下降,说明激发了显著的CTL效应。MTT测定BCSP31/pVAX1重组表达质粒的淋巴细胞增殖能力与对照组比较差异显著。布氏杆菌A544强毒株攻毒后,动物存活及脾组织细菌数与对照组比较有显著性差异,说明BCSP31/pVAX1重组表达质粒能够产生有效的保护效果。结论研制的BCSP31/pVAX1重组表达质粒免疫BALB/c小鼠能产生高水平的特异性体液免疫和细胞免疫,以细胞免疫为主,并产生有效的免疫保护效果,为布氏杆菌病新型疫苗的研究奠定了基础。

关键词：布氏杆菌BCSP31 重组表达质粒免疫应答免疫保护

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青海省2004年人间鼠疫分离株基因分型及流行病学意义

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中华流行病学杂志 2006年第4期27卷 316-318页

作者：祁芝珍戴二黑周冬生杨永海于守鸿戴瑞霞赵海红李敏杨瑞馥青海省地方病预防控制所西宁811602 军事医学科学院微生物流行病研究所病原生物安全国家重点实验室

目的探讨鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)基因分型在鼠疫暴发中的流行病学意义。方法根据已经证实的23个差异区段设计引物,对2004年青海省人间鼠疫流行期间分离到的13株鼠疫菌进行PCR扩增。结果 13株鼠疫菌可分为4个基因组型,即Genomovar 8、10、1... 详细信息

目的探讨鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)基因分型在鼠疫暴发中的流行病学意义。方法根据已经证实的23个差异区段设计引物,对2004年青海省人间鼠疫流行期间分离到的13株鼠疫菌进行PCR扩增。结果 13株鼠疫菌可分为4个基因组型,即Genomovar 8、10、15和16。其中囊谦的8 株菌全部为Genomovar 10;乌兰的2株菌分别为Genomovar 8和15;祁连、曲麻莱、称多的3株鼠疫菌的基因组型均为Genomovar 16。结论鼠疫菌基因分型是鼠疫疫情暴发流行病学调查的有力工具。

关键词：鼠疫鼠疫菌基因分型流行病学

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人IFN-β启动子基因报告质粒的构建及SARS-CoV3a和7a蛋白对IFN-β诱生作用的初步研究

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中国生物工程杂志 2006年第12期26卷 6-10页

作者：徐春娥付玲侯丽华翁少洁来大志李健民于婷于长明陈薇军事医学科学院微生物流行病学研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

3a蛋白和7a蛋白是SARS-CoV的非结构蛋白,分别主要由SARS基因组中ORF3a和ORF7a所编码。在体内和体外感染病毒的细胞中均发现了有3a蛋白的表达。首先将pGL3-Control载体进行了改构,除去了SV40启动子基因,获得了pGL3-Enhancer载体,将获得的... 详细信息

3a蛋白和7a蛋白是SARS-CoV的非结构蛋白,分别主要由SARS基因组中ORF3a和ORF7a所编码。在体内和体外感染病毒的细胞中均发现了有3a蛋白的表达。首先将pGL3-Control载体进行了改构,除去了SV40启动子基因,获得了pGL3-Enhancer载体,将获得的IFN-β启动子基因连入载体中,构建了带有人IFN-β启动子基因的荧光素酶报告质粒IP-21,并且通过实验证明所构建的质粒在干扰素的诱导剂NDV的作用下能够表达荧光素酶活性,照度计检测荧光素酶活性增强,从而验证了所构建的重组质粒的有效性。为了观察SARS-CoV非结构蛋白3a和7a对干扰素诱生途径的影响,将IP-21瞬转入稳定表达有3a和7a蛋白的CHO细胞,通过荧光素酶的信号强弱对3a和7a的作用进行分析,结果表明SARS-CoV的3a和7a蛋白能够刺激荧光素酶的表达,即在体外的细胞实验中,3a和7a能有效地激活IFN-β的启动子部分。此结果对进一步研究3a和7a的功能以及对SARS-CoV的致病机制的进一步研究有一定意义。

关键词： SARS-CoV 3a蛋白7a蛋白 IFN-β启动子荧光素酶报告系统

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清洁级Wistar大鼠血常规及生化指标正常值观察

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中国消毒学杂志 2006年第2期23卷 119-120,123页

作者：张敏纪晓光王京燕军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

建立清洁级Wistar大鼠的血液常规、生化正常值，为药物毒理学评价提供参考。采用实验室评价方法，对10—12周清洁级Wistar大鼠进行了观测。结果，经对220只大鼠（雌雄各半）检测证明，动物血清生化指标中，除血清总胆固醇之外，其它指... 详细信息

建立清洁级Wistar大鼠的血液常规、生化正常值，为药物毒理学评价提供参考。采用实验室评价方法，对10—12周清洁级Wistar大鼠进行了观测。结果，经对220只大鼠（雌雄各半）检测证明，动物血清生化指标中，除血清总胆固醇之外，其它指标在雌雄动物之间均存在差异。雄性大鼠血液自细胞、血清谷丙转氨酶比雌性大鼠明显偏高（P〈0．01）；雌性大鼠血清肌酐和总蛋白比雄性大鼠明显偏高（P〈0．01）。结论，本研究结果在雌雄大鼠之间血清生化指标多数存在差异，血液学指标受动物性别、年龄及检测方法等因素的影响。

关键词：大鼠清洁级血液生化血液常规

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我国东北林区蜱中伯氏疏螺旋体的分离及分型鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第5期26卷 404-408页

作者：高燕何静王剑波哈森高娃张泮河蒋宝贵吴晓明褚宸一黄海楠詹琳赵秋敏曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 内蒙古自治区牙克石林业防疫站

目的从我国东北地区全沟硬蜱中分离新的伯氏疏螺旋体菌株,了解其基因型及分布。方法应用BSKH培养基从硬蜱中分离菌株,PCR扩增5S^23SrRNA基因间隔区,进行限制性片段长度多态性分析及序列测定。结果新分离出伯氏疏螺旋体25株,其中11株来... 详细信息

目的从我国东北地区全沟硬蜱中分离新的伯氏疏螺旋体菌株,了解其基因型及分布。方法应用BSKH培养基从硬蜱中分离菌株,PCR扩增5S^23SrRNA基因间隔区,进行限制性片段长度多态性分析及序列测定。结果新分离出伯氏疏螺旋体25株,其中11株来自内蒙古自治区,13株来自黑龙江省,1株来自吉林省。RFLP结果显示其中22株属于Borreliagarinii基因型,3株属***基因型,1株产生了新的酶切带型,序列测定表明其属于***。结论东北地区的伯氏疏螺旋体菌株为***和***两种基因型,***为主要基因型。采用5S^23SrRNA间隔区RFLP分型方法对菌株进行分型研究时应结合序列分析方法,以保证分型结果的可靠性。

关键词：伯氏疏螺旋体分离 5S^23S rRNA基因间隔区 RFLP 序列测定

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中国中部农村艾滋病病毒感染状况不一致夫妻的随访研究

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中华流行病学杂志 2006年第3期27卷 192-195页

作者：李敬云李林李宏鲍作义李韩平王哲庄道民刘永健刘思扬军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 河南省疾病预防控制中心

目的在河南省某地农村建立艾滋病病毒(HI V)感染状况不一致(DC)的夫妻队列并进行随访,观察HI V通过异性性传播的频率及其影响因素。方法通过访谈和血清学检测,确定了52对(一方HI V阳性而另一方阴性但无吸毒、性乱、输血等HI V感染危险行... 详细信息

目的在河南省某地农村建立艾滋病病毒(HI V)感染状况不一致(DC)的夫妻队列并进行随访,观察HI V通过异性性传播的频率及其影响因素。方法通过访谈和血清学检测,确定了52对(一方HI V阳性而另一方阴性但无吸毒、性乱、输血等HI V感染危险行为)夫妻进入研究队列,在0.5、1和2.5年进行3次随访,每次随访均询问夫妻双方的性生活和安全套使用情况,同时抽取20ml抗凝静脉血检测HI V抗体、CD4+T淋巴细胞计数以及病毒载量。结果(1)0.5、1和2.5年的随访率分别是92.3%、75.0%和28.8%。在随访的过程中,DC夫妻中HI V阴性一方HI V抗体始终保持阴性,未出现HI V抗体阳转及HI V的传播。(2)在队列建立时(0年)以及0.5、1和2.5年随访时,DC夫妻性生活次数每月1次至每周1次的分别占65.4%、72.9%、71.7%和80.0%,有时使用或从来不用安全套的比例分别是76.9%、66.6%、69.1%和60.0%,不同随访时间性生活次数和安全套使用频率的差异无统计学意义。(3)DC夫妻中的HI V阳性一方在0.5、1和2.5年随访时,CD4+T淋巴细胞计数保持稳定或上升的比例分别是85.4%、66.6%和60.0%。15对在2.5年随访到双方的夫妻,HI V阳性一方中病毒载量稳定和下降的占66.7%,绝大部分病毒载量保持稳定或下降者同时CD4+T淋巴细胞计数也保持稳定或上升。结论研究中未观察到HI V在夫妻之间的传播。HI V阳性一方稳定的病毒载量和CD4+T细胞计数可能是HI V未发生传播的原因之一,宿主的遗传免疫学因素以及HI V的生物学特性对传播的影响值得深入研究。

关键词：艾滋病病毒异性性传播艾滋病病毒感染状况不一致夫妻

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大兴安岭林区蜱和鼠中莱姆病螺旋体感染及其基因分型研究

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中华流行病学杂志 2006年第8期27卷 681-684页

作者：褚宸一何静王剑波哈森高娃张泮河吴晓明赵秋敏蒋宝贵高燕曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 内蒙古自治区牙克石林业防疫站

目的了解内蒙古大兴安岭林区蜱和鼠中伯氏疏螺旋体的感染及基因分型情况。方法应用巢式PCR扩增蜱和鼠中伯氏疏螺旋体5S-23S rRNA间隔区片段,对阳性产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析和单链构象多态性(SSCP)分析,RFLP分析显示特殊... 详细信息

目的了解内蒙古大兴安岭林区蜱和鼠中伯氏疏螺旋体的感染及基因分型情况。方法应用巢式PCR扩增蜱和鼠中伯氏疏螺旋体5S-23S rRNA间隔区片段,对阳性产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析和单链构象多态性(SSCP)分析,RFLP分析显示特殊带型的样本测序分析。结果检测全沟硬蜱1336只,293只阳性,阳性率为21．93％;森林革蜱144只,6只阳性,阳性率为4．17％;嗜群血蜱144只,未发现有伯氏疏螺旋体感染。检测鼠9种145只,感染伯氏疏螺旋体的4种5只,感染率为3．45％;其中检测8只棕背鼫(鼠平),2只阳性。RFLP分析及序列分析显示蜱中有***20047亚型、***29亚型、***基因型以及不同基因型或亚型伯氏疏螺旋体的混合感染;鼠感染的伯氏疏螺旋体包括***20047亚型和***29亚型。SSCP分析结果显示带型多于36种。结论大兴安岭林区蜱及鼠中均存在伯氏疏螺旋体的感染,其中全沟硬蜱的感染率较高;***型为主要基因型,且该地区伯氏疏螺旋体存在遗传多态性。单只蜱中存在同时感染不同基因型伯氏疏螺旋体的情况,人和宿主动物是否存在不同基因型伯氏疏螺旋体混合感染尚待进一步研究。全沟硬蜱和棕背(鼠平)分别是该林区伯氏疏螺旋体的主要媒介和主要储存宿主。

关键词：伯氏疏螺旋体基因型蜱鼠

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