检索结果-内蒙古大学图书馆

中国媒介生物学及控制杂志 2006年第2期17卷 104-106页

作者：汤芳李森林高东旗宋文静左曙青张云霜付云川江佳富曹务春北京军区疾病预防控制中心疾病监控科北京100042 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室石家庄机械化步兵学院

目的探讨某部肾综合征出血热(HFRS)的流行状况、啮齿动物间汉坦病毒(HV)感染特点及HV基因型,为HFRS的预防控制提供科学依据。方法夹夜法捕鼠,计算鼠密度,确定鼠种构成。针对HV基因M片段部分序列设计2种型特异性引物,应用RTPCR法检测宿... 详细信息

目的探讨某部肾综合征出血热(HFRS)的流行状况、啮齿动物间汉坦病毒(HV)感染特点及HV基因型,为HFRS的预防控制提供科学依据。方法夹夜法捕鼠,计算鼠密度,确定鼠种构成。针对HV基因M片段部分序列设计2种型特异性引物,应用RTPCR法检测宿主动物带病毒情况。结果共捕获宿主动物14只,血清抗体阳性率为21.43%,RTPCR扩增检测出阳性标本1份,为褐家鼠,分型为汉城型阳性标本。密切接触人群血清抗体阳性率为3.64%。结论该地区存在汉城型HV感染,提示应加强疫情监测,防止疫情的扩大蔓延。

关键词：肾综合征出血热汉坦病毒流行病学

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炭疽中性蛋白酶部分片段的重组表达、纯化及免疫效果研究

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现代免疫学 2006年第4期26卷 289-292页

作者：谢应国吴秀芳武素琴罗德炎张松乐王希良西北农林科技大学动物科技学院杨凌712100 军事医学科学院微生物流行病学研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

构建表达炭疽杆菌中性蛋白酶基因部分片段N蛋白（位于248～532氨基酸），并对其免疫效果进行研究；设计引物采用PCR法自炭疽杆菌扩增中性蛋白酶部分片段N，T-A克隆后构建原核表达质粒pET28a（＋）-N，通过Western blot检测重组蛋白的免... 详细信息

构建表达炭疽杆菌中性蛋白酶基因部分片段N蛋白（位于248～532氨基酸），并对其免疫效果进行研究；设计引物采用PCR法自炭疽杆菌扩增中性蛋白酶部分片段N，T-A克隆后构建原核表达质粒pET28a（＋）-N，通过Western blot检测重组蛋白的免疫原性。以AI（OH）3为佐剂皮下注射免疫BALB／c小鼠，用ELISA方法测血清总IgG水平，MTT比色法测定脾T淋巴细胞增殖，采用流式分选法对脾T淋巴细胞亚群分类；Western blot显示重组蛋白具有免疫原性，rN免疫BALB／c小鼠后，ELISA检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生；T淋巴细胞亚群试验表明，重组N蛋白以诱发Th2型免疫反应为主；MTT试验表明，rN蛋白对小鼠脾细胞在体外有促进生长和增殖能力，说明该重组蛋白具有生物学活性。纯化的rN可诱导高水平的抗体反应，为进一步的功能研究奠定了基础。

关键词：炭疽杆菌中性蛋白酶蛋白表达纯化

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山东地区不同季节优势恙螨自然感染恙虫病东方体的分子流行病学调查

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中华流行病学杂志 2006年第7期27卷 600-603页

作者：张倩刘运喜高媛赵仲堂张景兰杨占清薛健曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 济南军区联勤部疾病预防控制中心山东大学公共卫生学院

目的从分子水平探讨山东地区不同季节优势恙螨自然感染恙虫病东方体(Ot)情况及其作为恙虫病传播媒介的可能性。方法根据Ot-Sta56 kDa外膜蛋白基因部分序列设计Ot种和型特异性引物,对标本提取的DNA先采用种特异性引物扩增,然后再采用型... 详细信息

目的从分子水平探讨山东地区不同季节优势恙螨自然感染恙虫病东方体(Ot)情况及其作为恙虫病传播媒介的可能性。方法根据Ot-Sta56 kDa外膜蛋白基因部分序列设计Ot种和型特异性引物,对标本提取的DNA先采用种特异性引物扩增,然后再采用型特异性引物扩增分型,并对部分标本进行序列测定。结果从不同季节优势恙螨幼虫共得到11株Ot分离株和16份恙螨匀浆,从这27份标本提取的DNA经首轮PCR扩增后,18份标本有预期的目的带。对首轮PCR产物采用nested PCR扩增分型,结果17份为Kawasaki型,1份(LHGM2株)为Karp型。序列同源性分析结果证实了nested PCR分型结果:XDM2株首轮PCR产物碱基序列与。Kawasaki型相应DNA片段的碱基序列同源性最高,为97．00％,在系统发育树上与Kawasaki株位于同一分支,应属于Kawasaki型; LHGM2株首轮PCR产物碱基序列与Karp型相应DNA片段的碱基序列同源性最高,为96．45％,在系统发育树上与Karp株位于同一分支,应属于Karp型。结论山东地区不同季节优势恙螨中存在Ot自然感染,Ot主要基因型为Kawasaki型。

关键词：恙虫病恙螨恙虫病东方体 Sta56基因

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应用巢式RT-PCR结合RFLP、SSCP对山东肾综合征出血热病人血清中HV基因检测和分型研究

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中国人兽共患病学报 2006年第7期22卷 624-628页

作者：刘运喜赵仲堂许晓群李健高媛江佳富张景兰杨占清曹务春病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071 济南军区联勤部疾病预防控制中心山东大学公共卫生学院流行病学与卫生统计学研究所山东省医学科学院基础医学研究所

目的探讨山东肾综合征出血热重疫区病人血清中HV分子生物学特征,同时寻找准确、简便、迅速的HV检测与分型方法,从而为制定防治决策提供科学根据。方法从山东肾综合征出血热重疫区临沂市费县收集病人早期血清,应用巢式RT-PCR对病人血清中... 详细信息

目的探讨山东肾综合征出血热重疫区病人血清中HV分子生物学特征,同时寻找准确、简便、迅速的HV检测与分型方法,从而为制定防治决策提供科学根据。方法从山东肾综合征出血热重疫区临沂市费县收集病人早期血清,应用巢式RT-PCR对病人血清中的HV进行基因扩增,采用RFLP、SSCP分型,并进行序列测定与分析。结果48份临床和ELISA检测确诊的HFRS病人血清经巢式RT-PCR扩增后,41份阳性,阳性率85.42%。41份阳性标本巢式RT-PCR产物经HindIII、HinfI酶切后,呈现2种不同的RFLP图谱:33份显示与R22株相似的酶切图谱,应属SEOV型;另外8份显示出与HTN76-118株相似的图谱,属HTNV型,这8份HTNV型标本均为10-12月间收集的病人血清。41份阳性标本巢式RT-PCR产物经SSCP分析,亦呈现2种不同的图谱:33份具有与R22株相似的SSCP图谱,应属SEOV型;而另8份则与HTN76-118株具有相似的SSCP图谱,属HTNV型。对部分扩增产物序列采用系统进化树分析也得出类似的结果:sdp1、sdp2、sdp3与HTN型76-118株亲缘关系相近,属同一簇,而sdp22、sdp37与SEOV型Z37、R22株亲缘关系相近,属另外一簇,这与RFLP和SSCP获得的结果相一致。结论山东肾综合征出血热重疫区病人基因型以SEOV型为主,但在秋冬季节也存在HTNV型。巢式RT-PCR结合RFLP、SSCP法可对HV准确分型,而且简便、迅速,适合于大规模流行病学调查。

关键词： HV 巢式RT-PCR RFLP SSCP 序列分析基因型

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通用型病毒检测芯片在三种人类致病病毒属检测中的应用

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中华实验和临床病毒学杂志 2006年第4期20卷 327-330页

作者：陈建明韩俊董辰方高晨雷艳君安润谭文杰周永东郭瑜姜慧英祝庆余董小平中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京100052 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的研究制备对人类有致病作用的38个属的病毒寡核苷酸(oligo)基因芯片对三种人类致病病毒的检测能力。方法应用生物信息学软件设计70-meroligo探针,固定于玻片载体制备成基因芯片。以痘苗病毒天坛株、甲肝病毒、乙肝病毒作为检测样本,... 详细信息

目的研究制备对人类有致病作用的38个属的病毒寡核苷酸(oligo)基因芯片对三种人类致病病毒的检测能力。方法应用生物信息学软件设计70-meroligo探针,固定于玻片载体制备成基因芯片。以痘苗病毒天坛株、甲肝病毒、乙肝病毒作为检测样本,提取病毒核酸,经随机引物扩增、荧光标记,用于芯片杂交,清洗和干燥后对芯片进行扫描和数据分析。结果芯片上oligo探针能与相应病毒的PCR扩增样品杂交,呈现阳性荧光信号。结论建立的病毒寡核苷酸基因芯片能够检出和区分三种检测病毒,为进行未知病毒的基因芯片筛查方法的建立奠定了基础。

关键词：基因寡核苷酸类序列分析病毒学诊断鉴别

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西尼罗病毒（WNV）传播动力学模型及防制措施评价的研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2006年第2期13卷 89-94页

作者：韩晓娜李承毅冯丹方立群曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

美国1999年首次在纽约检测到西尼罗病毒(WNV)后,病毒快速在西半球传播,导致WNV大范围的流行,仅2005年,截止到12月20日美国共发生近2799例人类感染病例。WNV如此快速的大面积扩散提醒我们要提高对WNV传入的警惕,提高对WNV传播过程的认识... 详细信息

美国1999年首次在纽约检测到西尼罗病毒(WNV)后,病毒快速在西半球传播,导致WNV大范围的流行,仅2005年,截止到12月20日美国共发生近2799例人类感染病例。WNV如此快速的大面积扩散提醒我们要提高对WNV传入的警惕,提高对WNV传播过程的认识。本研究根据WNV生态学特点,构建WNV在媒介(蚊虫)与宿主(鸟类与人群)间感染传播的数学模型。模型建立3个种群(蚊虫、鸟、人)相互间的联系过程。通过WNV感染过程及模型推导出基本传染数R0的计算公式,通过R。的阈值确定WNV传播动力学,如果R0≤1则说明疾病处于稳定状态,不会在局部范围内发生流行;如果R0≥1则说明疾病可在一定范围内发生流行。分析通过改变模型中参数提出应采取相应的控制措施,为进一步研究预防和控制WNV提供有力依据。

关键词：美国模型理论鸟类蚊科西尼罗病毒西尼罗热/传播西尼罗热/预防和控制动物人类

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一种简便、高效、经济的从凝胶中回收DNA的方法

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生物技术通讯 2006年第4期17卷 603-604页

作者：朱晓峰安小平陈锦辉陈士华张昕周育森童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的:尝试一种简便、高效的从凝胶中回收DNA的方法。方法:在Eppendorf管的管底用注射器扎孔,将一小团用Eppendorf管融化后拉成的细丝放入管中,把含有DNA的凝胶放在细丝上,离心,收集从管底流出的液体,经酚氯仿抽提后用乙醇沉淀DNA。结果... 详细信息

目的:尝试一种简便、高效的从凝胶中回收DNA的方法。方法:在Eppendorf管的管底用注射器扎孔,将一小团用Eppendorf管融化后拉成的细丝放入管中,把含有DNA的凝胶放在细丝上,离心,收集从管底流出的液体,经酚氯仿抽提后用乙醇沉淀DNA。结果:经过简单的离心即可近乎100%地回收凝胶中的DNA。结论:使用该方法从琼脂糖凝胶回收DNA,操作简单,回收率高,无其他试剂污染。

关键词： DNA回收琼脂糖凝胶

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荧光定量PCR检测查菲埃立克体

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寄生虫与医学昆虫学报 2006年第4期13卷 212-216页

作者：张晶波温博海陈梅玲杨晓李丽莉军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

依据查菲埃立克体16S rRNA基因序列设计特异性引物和TaqMan-MGB探针，以克隆的查菲埃立克体16S rRNA基因片段作DNA模板，建立实时荧光定量PCR检测方法。与套式PCR相比较，荧光定量PCR检测的灵敏度是其30倍；用荧光定量PCR检测其他相关... 详细信息

依据查菲埃立克体16S rRNA基因序列设计特异性引物和TaqMan-MGB探针，以克隆的查菲埃立克体16S rRNA基因片段作DNA模板，建立实时荧光定量PCR检测方法。与套式PCR相比较，荧光定量PCR检测的灵敏度是其30倍；用荧光定量PCR检测其他相关立克次体和细菌DNA样本，检出结果为0；对荧光定量PCR检测重复性进行分析，变异系数（CV）批内和批间误差在0．2％～2．0％之间。结果证明本研究建立的荧光定量PCR方法具有种特异性和良好的重复性，可用于检测感染样本中的微量查菲埃立克体DNA。

关键词：查菲埃立克体实时荧光定量PCR 16S rRNA基因埃立克体感染

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B型肉毒毒素重链抗原表位的预测及表位合成肽抗原性的检测

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生物技术通讯 2006年第2期17卷 183-185页

作者：孟露露荫俊王慧史晶侯晓军军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:预测B型肉毒毒素蛋白抗原表位,研究表位合成肽的生物学活性。方法:利用生物信息学,结合Anthwine分析软件及网络平台,预测B型肉毒毒素蛋白重链的B细胞抗原表位。人工合成4条(P1,P2,P3,P4)表位多肽,与抗B型肉毒毒素类毒素的马血清反... 详细信息

目的:预测B型肉毒毒素蛋白抗原表位,研究表位合成肽的生物学活性。方法:利用生物信息学,结合Anthwine分析软件及网络平台,预测B型肉毒毒素蛋白重链的B细胞抗原表位。人工合成4条(P1,P2,P3,P4)表位多肽,与抗B型肉毒毒素类毒素的马血清反应;采用腹腔注射的方式用合成肽免疫BALB/c小鼠,检测免疫血清与合成肽的结合;对免疫小鼠腹腔注射B型肉毒毒素。结果:合成的多肽能与抗B型肉毒毒素的类毒素的马血清结合;多肽免疫小鼠后能产生针对多肽的抗体,其中P1、P3、P4产生的抗体对受毒素攻击的小鼠具有保护作用。结论:成功预测了抗原表位,合成的表位多肽具有较好的抗原性。

关键词：肉毒毒素表位合成肽

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黄病毒衣壳蛋白研究进展

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国际病毒学杂志 2006年第2期13卷 47-50页

作者：朱武洋秦鄂德病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

衣壳蛋白是黄病毒的主要结构蛋白之一,除与RNA结合构成病毒核衣壳外,衣壳蛋白还参与了病毒感染的其他过程。同时,衣壳蛋白作为减毒突变的靶标为黄病毒疫苗的研究提供了新的思路。本文就黄病毒衣壳蛋白的结构、功能及其在疫苗研究中的应... 详细信息

衣壳蛋白是黄病毒的主要结构蛋白之一,除与RNA结合构成病毒核衣壳外,衣壳蛋白还参与了病毒感染的其他过程。同时,衣壳蛋白作为减毒突变的靶标为黄病毒疫苗的研究提供了新的思路。本文就黄病毒衣壳蛋白的结构、功能及其在疫苗研究中的应用做一综述。

关键词：黄病毒衣壳蛋白结构功能病毒感染

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