检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通讯 2016年第3期27卷 344-347,411页

作者：霍耐凡康晓平户义李裕昌李靖张雨冉鑫贾佳曹雪峰杨银辉军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:优化蜱传脑炎病毒包膜糖蛋白胞外区的密码子,提高其在真核系统中的表达量,为蜱传脑炎病毒感染血清的检测提供更为有效的检测抗原。方法:对蜱传脑炎病毒MDJ01株E蛋白胞外区进行真核密码子优化,获得优化的胞外区蛋白基因序列OPT-EC;... 详细信息

目的:优化蜱传脑炎病毒包膜糖蛋白胞外区的密码子,提高其在真核系统中的表达量,为蜱传脑炎病毒感染血清的检测提供更为有效的检测抗原。方法:对蜱传脑炎病毒MDJ01株E蛋白胞外区进行真核密码子优化,获得优化的胞外区蛋白基因序列OPT-EC;将抗原基因与海肾萤光素酶基因Rluc融合构建重组质粒pc DNA3.1-Rluc-OPT-EC、pc DNA3.1-Rluc-EC,用重组质粒转染COS7细胞获得融合抗原Rluc-OPT-EC和Rluc-EC,并将融合抗原用于临床感染血清样本的免疫共沉淀检测以评价抗原的灵敏性和特异性。结果:真核密码子优化显著提高了Rluc-OPT-EC的表达量;OPT-EC的检测灵敏度可达86%以上,其对乙型脑炎病毒(JEV)感染血清、黄热病度(YFV)感染血清、禽流感病毒(AIV)感染血清和正常人血清的检测特异度高于90%,但是在西尼罗病毒(WNV)感染血清和登革病毒(DV)感染血清的检测中发生了交叉反应。结论:优化后的E蛋白胞外区蛋白作为TBEV感染的检测抗原,能够有效地区分JEV、YFV感染,但不能区分WNV和DV感染。

关键词：包膜糖蛋白胞外区真核密码子优化蜱传脑炎病毒血清学诊断

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贝氏柯克斯体的相变异与脂多糖研究进展

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国际检验医学杂志 2016年第17期37卷 2431-2433页

作者：王涛于永慧宋立华军事医学科学院微生物流行病研究所/病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

贝氏柯克斯体（Cb）为一类兼性细胞内寄生的革兰阴性小杆菌,归属于军团菌目,柯克斯体科,柯克斯体属。传统上,因为Cb有类似立克次体的生物学特征,Cb被归类到立克次体目中,俗称为Q热立克次体,但其与立克次体目内各种菌株的亲缘关系相距较... 详细信息

贝氏柯克斯体（Cb）为一类兼性细胞内寄生的革兰阴性小杆菌,归属于军团菌目,柯克斯体科,柯克斯体属。传统上,因为Cb有类似立克次体的生物学特征,Cb被归类到立克次体目中,俗称为Q热立克次体,但其与立克次体目内各种菌株的亲缘关系相距较远。Cb地理分布广泛,在羊、牛等家畜中感染率高。Cb通过气溶胶感染人可导致急性或慢性Q热病,在部分患者中引起肺炎、肝炎、心内膜炎和脊髓炎等重症疾病。

关键词：贝氏柯克斯体立克次体 Q热脂多糖

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肠出血性大肠杆菌O157：H7 z1445基因缺失株的构建

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生物技术通讯 2016年第1期27卷 83-85页

作者：刘雪超黄洁李涛刘坤王慧军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:利用Red重组系统敲除肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7的z1445基因,构建大肠杆菌z1445基因缺失突变株。方法:以O157∶H7为模板,PCR扩增目的基因两侧的同源臂序列,分别经酶切后连接到p UC19-kan质粒的卡那霉素抗性基因kan两侧,PCR获... 详细信息

目的:利用Red重组系统敲除肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7的z1445基因,构建大肠杆菌z1445基因缺失突变株。方法:以O157∶H7为模板,PCR扩增目的基因两侧的同源臂序列,分别经酶切后连接到p UC19-kan质粒的卡那霉素抗性基因kan两侧,PCR获得中间嵌合kan基因(带有FRT位点)的同源线性片段,利用质粒p KD46敲除z1445基因,利用质粒p CP20去除抗性标记基因;PCR鉴定及测序验证目的基因缺失后,测定缺失株及野生株的生长曲线。结果:敲除了z1445基因,突变株与野生株的生长曲线接近。结论:构建了z1445基因缺陷型菌株,为进一步分析z1445基因在O157∶H7与宿主的相互作用中发挥的作用提供了材料。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 z1445基因 Red重组系统缺失突变株

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基于双抗体夹心ELISA建立人血浆肌钙蛋白I的定量测定技术

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军事医学 2016年第6期40卷 529-534页

作者：孙崇云周蕾王晓晨赵勇王鑫蕊张平平杨瑞馥王成彬温州医科大学检验医学院与生命科学学院浙江温州325035 军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 生物应急与临床POCT北京市重点实验室(BZ0329) 北京100071 吉林农业大学动物科学技术学院长春130118

目的基于双抗体夹心ELISA技术建立人血浆肌钙蛋白I(cTnI)定量检测方法,便于基层医疗机构使用。方法基于抗原、抗体筛选,包被抗体、酶标抗体用量优化,建立双抗体夹心ELISA检测cTnI的方法。测定cTnI标准抗原,利用Curve Expert软件建立定... 详细信息

目的基于双抗体夹心ELISA技术建立人血浆肌钙蛋白I(cTnI)定量检测方法,便于基层医疗机构使用。方法基于抗原、抗体筛选,包被抗体、酶标抗体用量优化,建立双抗体夹心ELISA检测cTnI的方法。测定cTnI标准抗原,利用Curve Expert软件建立定量公式,根据临床大型仪器实测结果校准定量公式,实现ELISA测定D值到血浆中cTnI浓度的直接定量。结果与结论双抗体夹心ELISA测量cTnI的敏感性可达0.1ng/ml,敏感性满足临床要求。小样本临床样品的评价实验显示,双抗体夹心ELISA定量结果与临床大型仪器测得的浓度差异无统计学意义(t=0.058,P>0.05)。所建立的双抗体夹心ELISA法可用于定量检测人血浆cTnI。

关键词：肌钙蛋白I 酶联免疫吸附试验定量检测

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蓖麻毒素单抗制备及上转发光免疫层析定量检测方法研究

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军事医学 2016年第8期40卷 676-679页

作者：王晓晨周蕾孙崇云赵勇王鑫蕊张平平杨瑞馥马馨吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京101071 生物应急与临床POCT北京市重点实验室BZ0329 北京101071 解放军总医院临床榆验科北京100853

目的建立一种可快速、精确地对蓖麻毒素（RT）进行定量检测的上转发光免疫检测技术（UPT-LF）,即RT-UPT-LF。方法采用杂交瘤细胞技术制备蓖麻毒素单克隆抗体并对效价进行评价;采用效价最高的4种单抗分别与上转发光纳米颗粒（UCP-NP）共... 详细信息

目的建立一种可快速、精确地对蓖麻毒素（RT）进行定量检测的上转发光免疫检测技术（UPT-LF）,即RT-UPT-LF。方法采用杂交瘤细胞技术制备蓖麻毒素单克隆抗体并对效价进行评价;采用效价最高的4种单抗分别与上转发光纳米颗粒（UCP-NP）共价偶联,分别作为检测带,进而两两配伍,确定最优的配伍组合条件建立RTUPT-LF方法;对RT-UPT-LF的敏感性、精密性、定量能力和特异性进行评价。结果与结论所建立的RT-UPT-LF方法可在15 min内完成对蓖麻毒素的检测,灵敏度可达0.5 ng/ml,定量范围为0.5-1000 ng/ml,与其他高浓度毒素无非特异反应,该法为蓖麻毒素检测提供了一种新手段。

关键词：蓖麻毒素上转发光纳米颗粒免疫层析技术快速定量检测

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遥控飞行喷雾杀灭白纹伊蚊的现场效果研究

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中华卫生杀虫药械 2017年第4期23卷 308-310,314页

作者：李春晓张映梅张恒端褚宏亮邢丹王浩姜友法吴治明张爱军陈红娜田野杨维芳沈阳贾炜华益林钱健陆长华吴小群周明浩董言德赵彤言军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 江苏省疾病预防控制中心江苏南京210009 山东风云农业科技有限公司山东临沂276000 江苏扬农化工股份有限公司江苏扬州225009 宜兴市疾病预防控制中心江苏宜兴214206

目的现场评价遥控飞行喷雾控制白纹伊蚊密度的效果,为蚊媒传染病的媒介应急处置提供技术方法。方法将遥控飞行喷雾器应用于白纹伊蚊栖息地实施低容量喷雾和超低容量喷雾,配套使用不同剂量的含有4%氯菊酯和1%四氟醚菊酯的水乳剂。低容量... 详细信息

目的现场评价遥控飞行喷雾控制白纹伊蚊密度的效果,为蚊媒传染病的媒介应急处置提供技术方法。方法将遥控飞行喷雾器应用于白纹伊蚊栖息地实施低容量喷雾和超低容量喷雾,配套使用不同剂量的含有4%氯菊酯和1%四氟醚菊酯的水乳剂。低容量喷雾模式下使用4.5和9.0 mg/m^2剂量,超低容量喷雾模式下使用1.5和3.0 mg/m^2剂量。人诱法监测蚊虫密度,观察施药前后实验区和对照区的白纹伊蚊密度变化,计算蚊虫密度下降率。结果使用9.0 mg/m^2剂量进行低容量喷雾25 min后,白纹伊蚊的密度下降率为91.3%;使用3.0 mg/m^2剂量进行超低容量喷雾25 min后,白纹伊蚊的密度下降率为92.5%。结论本研究给中国登革热暴发时的媒介应急处置提供了快速防控的技术方法。

关键词：白纹伊蚊遥控飞行器杀虫喷雾系统低容量喷雾超低容量喷雾

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添加扩增内标的单增李斯特菌PCR检测方法的建立与应用

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食品与发酵工业 2016年第9期42卷 192-196页

作者：张德福赵禹宗付绪磊张明仪淑敏徐永霞殷喆李春励建荣渤海大学食品科学与工程学院辽宁省食品安全重点实验室生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心辽宁锦州121013 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 渤海大学数理学院辽宁锦州121013

以单增李斯特菌inl A基因为靶基因,设计一对特异性引物,以16S rRNA为扩增内标对照,建立了一种含有扩增内标的单增李斯特菌PCR检测方法。优化了PCR反应体系,并对PCR检测方法的特异性、灵敏度、人工污染样品及食品样品检测效果进行了测试... 详细信息

以单增李斯特菌inl A基因为靶基因,设计一对特异性引物,以16S rRNA为扩增内标对照,建立了一种含有扩增内标的单增李斯特菌PCR检测方法。优化了PCR反应体系,并对PCR检测方法的特异性、灵敏度、人工污染样品及食品样品检测效果进行了测试。对2株单增李斯特菌、1株英诺克李斯特菌以及19株非李斯特菌菌株进行PCR检测,结果显示,只有2株单增李斯特菌能被检出大小为826 bp的特异性片段,其余20株细菌只能检出1 500 bp的扩增内标片段。灵敏度实验结果显示,基因组DNA和纯培养物的最低检出限分别为1.80×10~2fg/μL和1.21×10~2CFU/m L。当人工污染牛乳样品中单增李斯特菌在最低接种量为0.48 CFU/m L时,经8 h增菌培养后可被该方法检出。采用该研究建立的检测方法对36种食品样品进行检测,证实了该检测方法可以指示检测过程中出现的假阴性现象。综上所述,该研究建立的PCR检测方法能特异性的检测单增李斯特菌,并可有效排除检测过程中出现的假阴性现象,提高检测的准确性。

关键词：单增李斯特菌聚合酶链式反应检测方法扩增内标内化素基因

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我国东北地区森林脑炎的分布与环境特征研究

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中国病原生物学杂志 2016年第6期11卷 481-487,490页

作者：孙若曦李新楼刘昆姚宏武方立群曹务春安徽医科大学研究生院安徽合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国人民解放军第517医院山西岢岚036300

目的确定黑龙江省、吉林省和内蒙古自治区森林脑炎(tick-borne encephalitis,TBE)疫情的时空聚集区,探讨气象因素、土地利用类型等因素对TBE时空分布的影响。方法在乡镇尺度上应用时空扫描聚类分析方法确定TBE发病的热点区域;采用Spear... 详细信息

目的确定黑龙江省、吉林省和内蒙古自治区森林脑炎(tick-borne encephalitis,TBE)疫情的时空聚集区,探讨气象因素、土地利用类型等因素对TBE时空分布的影响。方法在乡镇尺度上应用时空扫描聚类分析方法确定TBE发病的热点区域;采用Spearman相关分析方法检验各热点区域的气象因素与TBE发病率之间的时间关联及其滞后效应;应用负二项回归模型分析土地利用类型对TBE疫情空间分布区域差异的影响。结果时空聚集性分析显示东北地区存在1个TBE的一级聚类区和3个二级聚类区,共包括1 086个乡镇。Spearman相关分析显示上述4个时空聚集区TBE月发病率均与当月平均气温、当月降雨量呈正相关关系(R>0.5,P<0.05);聚集区1、3、4TBE月发病率与前一个月的累积日照时数呈正相关关系,与前2个月的平均相对湿度呈负相关关系;聚集区2TBE月发病率与当月日照时数呈正相关关系,与前4个月的平均相对湿度呈负相关关系。负二项回归模型显示各乡镇TBE发病率主要与当地针阔叶混交林、阔叶林、针叶林、草地、草甸的覆盖面积百分比呈正相关关系,与农作物用地面积呈负相关关系,与灌丛面积百分比无显著相关性。结论东北地区存在TBE一、二级聚集区,气温、湿度、降雨量、日照时数,草地和混交林等覆盖面积及农作物场地面积是TBE发生的主要影响因素,这对该病的预防和控制具有重要意义。

关键词：森林脑炎时空聚集性 Spearman相关性分析气象因素负二项回归模型土地利用因素

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院内感染细菌多药耐药的质粒组学研究

院内感染细菌多药耐药的质粒组学研究

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2016年中国微生物学会学术年会暨中国微生物学会第十一次全国会员代表大会

作者：周冬生殷喆冯娇张德福杨文慧杨慧盈王洁军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

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院内感染细菌多药耐药的质粒组学研究

院内感染细菌多药耐药的质粒组学研究

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中国微生物学会第六届全国微生物基因组学学术研讨会

作者：周冬生殷喆冯娇张德福杨文慧杨慧盈王洁军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

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