检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通讯 2014年第1期25卷 9-12,20页

作者：张博康怀兴米志强安小平张飞雄童贻刚首都师范大学生命科学学院北京100048 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:原核表达炭疽杆菌噬菌体γ裂解酶(PlyG)和萤光素酶(Luc),结合这2种酶建立特异定量检测炭疽杆菌的方法。方法:PCR扩增得到带有His标签的裂解酶基因和萤光素酶基因,构建重组表达载体pET22b-plyG和pET22b-luc,转化至大肠杆菌BL21(DE3... 详细信息

目的:原核表达炭疽杆菌噬菌体γ裂解酶(PlyG)和萤光素酶(Luc),结合这2种酶建立特异定量检测炭疽杆菌的方法。方法:PCR扩增得到带有His标签的裂解酶基因和萤光素酶基因,构建重组表达载体pET22b-plyG和pET22b-luc,转化至大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达,过镍柱纯化得到目的蛋白;利用裂解酶裂解和ATP生物发光定量检测蜡样芽孢杆菌RSVF1,与平板计数法对比建立线性关系。结果:表达了炭疽杆菌噬菌体γ裂解酶和萤光素酶,并建立了特异定量检测蜡样芽孢杆菌RSVF1的方法,与平板计数方法具有显著的线性相关。结论:因炭疽杆菌与蜡样芽孢杆菌RSVF1均对PlyG具有较强的敏感性,故本研究所建立的将炭疽杆菌噬菌体γ裂解酶与萤光素-萤光素酶系统相结合的检测方法对现场或临床定性定量检测炭疽杆菌提供了理论支持,具有良好的应用前景。

关键词：炭疽杆噬菌体裂解酶萤光素酶 ATP生物发光法定量检测

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致死性诱卵杯防治白纹伊蚊的现场效果研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2014年第3期21卷 172-175页

作者：李春晓董言德邓兵赵彤言军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京军区疾病预防控制中心北京100042

白纹伊蚊是我国登革热和登革出血热的主要传播媒介.致死性诱卵杯已在多个国家和地区的现场实验中被证实对防治埃及伊蚊有很好的效果.本研究是首次在我国将致死性诱卵杯用于白纹伊蚊的防治,将缓释型溴氰菊酯致死性诱卵杯应用于白纹伊蚊... 详细信息

白纹伊蚊是我国登革热和登革出血热的主要传播媒介.致死性诱卵杯已在多个国家和地区的现场实验中被证实对防治埃及伊蚊有很好的效果.本研究是首次在我国将致死性诱卵杯用于白纹伊蚊的防治,将缓释型溴氰菊酯致死性诱卵杯应用于白纹伊蚊孳生地,使用45 d后,诱卵杯中仍然没有白纹伊蚊幼虫孳生,将卵卡带回实验室进行孵化,孵化率只有57.7％.同时,对比对照区,实验区的成蚊密度下降率在诱卵杯的使用过程中逐渐上升,使用45 d后,实验区的成蚊密度下降率达到66.6％.说明使用致死性诱卵杯对防控白纹伊蚊有很好的作用,可以作为白纹伊蚊综合防治中的重要措施.

关键词：白纹伊蚊致死性诱卵杯溴氰菊酯防治

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新疆伊犁三道河地区蚊种组成及昼夜消长

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中华卫生杀虫药械 2014年第4期20卷 379-381页

作者：邢丹孙响张恒端王刚董言德张桂林赵彤言军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 新疆军区疾病预防控制中心新疆乌鲁木齐830011

目的调查新疆伊犁霍城三道河地区蚊虫种类及昼夜消长情况。方法采用人帐诱法于某部队营区内外选取3种不同生境(营区外畜圈、营区外菜地和营区内小树林),每小时人帐诱采集蚊虫15 min,计算捕获蚊虫数并进行鉴定分类。结果 3种生境共捕获蚊... 详细信息

目的调查新疆伊犁霍城三道河地区蚊虫种类及昼夜消长情况。方法采用人帐诱法于某部队营区内外选取3种不同生境(营区外畜圈、营区外菜地和营区内小树林),每小时人帐诱采集蚊虫15 min,计算捕获蚊虫数并进行鉴定分类。结果 3种生境共捕获蚊虫2 460只,蚊种有刺扰伊蚊、里海伊蚊、哈萨克斯坦伊蚊、凶小库蚊、尖音库蚊、米赛按蚊、萨氏按蚊、赫坎按蚊、环跗脉毛蚊和日本脉毛蚊。营区外菜地和营区内树林的昏峰在晚23:00,昏峰分别在早7:00和早6:00,营区外畜圈的蚊虫活动的昏峰较晚在晚24:00,晨峰不明显。结论 3种生境中库蚊占绝对优势,其中尖音库蚊为主要蚊种,营区外畜圈生境中蚊种较为丰富,相对于其他两个生境采集到的按蚊所占比例较高。

关键词：昼夜消长蚊种组成调查三道河地区

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抗新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10单克隆抗体的制备及鉴定

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生物技术通讯 2014年第2期25卷 203-206页

作者：于虹王欣杨裔陈万荣郭彦周育森高基民寇志华军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 温州医科大学检验医学与生命科学学院浙江温州325035

目的:以新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10为靶抗原,制备并鉴定特异性抗CAP10的单克隆抗体。方法:用纯化的重组CAP10免疫BALB/c小鼠,血清抗体效价达到适当水平时进行细胞融合;经多次亚克隆筛选出分泌特异性抗体的细胞株,制备单抗腹水并进行... 详细信息

目的:以新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10为靶抗原,制备并鉴定特异性抗CAP10的单克隆抗体。方法:用纯化的重组CAP10免疫BALB/c小鼠,血清抗体效价达到适当水平时进行细胞融合;经多次亚克隆筛选出分泌特异性抗体的细胞株,制备单抗腹水并进行抗体效价测定及亚类鉴定。结果:获得11株能稳定分泌抗新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10的单克隆抗体杂交瘤细胞株,抗体效价高且抗原特异性强。结论:获得了针对新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10的单克隆抗体,为深入研究CAP10蛋白的功能,以及临床新型隐球菌的检测和血清型分析奠定了基础。

关键词：新型隐球菌 CAP10蛋白单克隆抗体

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新型水包油佐剂SP01的安全性评价

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中国生物制品学杂志 2014年第7期27卷 885-889页

作者：姜佳琪于姝邢丽段跃强孟和宝力高牛燕王希良额尔敦内蒙古医科大学基础医学院免疫学教研室内蒙古呼和浩特010021 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国人民解放军第253医院免疫中心内蒙古呼和浩特010021

目的通过动物实验评价新型水包油佐剂SP01的安全性。方法通过昆明小鼠安全药理试验、昆明小鼠急性毒性试验、Hartley豚鼠过敏反应试验、溶血性试验、日本大白兔局部刺激性试验、SD大鼠长期毒性试验及BALB/c小鼠致突变、致畸、致瘤试验,... 详细信息

目的通过动物实验评价新型水包油佐剂SP01的安全性。方法通过昆明小鼠安全药理试验、昆明小鼠急性毒性试验、Hartley豚鼠过敏反应试验、溶血性试验、日本大白兔局部刺激性试验、SD大鼠长期毒性试验及BALB/c小鼠致突变、致畸、致瘤试验,对水包油佐剂SP01的安全性进行全面评价。结果水包油佐剂SP01对昆明小鼠的自主活动无明显影响;急性毒性试验中可观察到水包油佐剂SP01组昆明小鼠给药后无死亡,体重明显增加,且各组织器官无病理变化;水包油佐剂SP01注射豚鼠未见任何过敏反应及症状;溶血性试验结果显示,水包油佐剂SP01在体外对兔红细胞无溶血作用,不引起红细胞凝聚;将水包油佐剂SP01经日本大白兔耳缘静脉注射连续刺激5 d后,佐剂组与氯化钠注射液组家兔耳缘静脉给药部位肉眼观察均无明显变化,病理切片显微镜观察均未见炎性浸润、血管周围组织出血及坏死等刺激现象;将水包油佐剂SP01经肌肉连续注射大鼠1个月,佐剂组大鼠体重明显增加,精神状态、食欲、睡眠情况与氯化钠注射液组无明显差异,停药后连续观察3个月,大鼠精神状态、食欲、睡眠情况均良好;将水包油佐剂SP01连续经BALB/c小鼠腿部肌肉注射14 d后,其肌肉组织病理切片显示,与氯化钠注射液组小鼠的肌肉组织无明显差异。结论水包油佐剂SP01对实验动物无急性毒性、过敏反应、局部性刺激、长期毒性及致突变、致畸、致瘤作用,是安全、可应用的油类佐剂,本研究为该系列水包油佐剂的临床应用提供了实验依据。

关键词：水包油佐剂动物实验安全性评价

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遥控飞行喷雾器喷洒高效氟氯氰菊酯防治黑瞎子岛蚊虫和蚋的现场效果研究

遥控飞行喷雾器喷洒高效氟氯氰菊酯防治黑瞎子岛蚊虫和蚋的现场效...

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第31届全国卫生杀虫药械学术交流会

作者：李春晓董言德丁玉来郭晓霞王刚唐灵海赵彤言军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 沈阳军区佳木斯军分区边防四团卫生队辽宁沈阳110000

目的：探讨遥控飞行喷雾器喷洒高效氟氯氰菊酯防治黑瞎子岛上蚊虫和蚋的现场效果. 方法：使用遥控飞行喷雾器喷洒高效氟氯氰菊酯微胶囊悬浮剂,处理蚊虫和蚋栖息的植被,对黑瞎子岛上的刺扰伊蚊、八代按蚊和斑布蚋进行防控. 结果：... 详细信息

目的：探讨遥控飞行喷雾器喷洒高效氟氯氰菊酯防治黑瞎子岛上蚊虫和蚋的现场效果. 方法：使用遥控飞行喷雾器喷洒高效氟氯氰菊酯微胶囊悬浮剂,处理蚊虫和蚋栖息的植被,对黑瞎子岛上的刺扰伊蚊、八代按蚊和斑布蚋进行防控. 结果：使用该方法对于刺扰伊蚊、八代按蚊和斑布蚋分别达到了95.4％、81.7％和67.3％的种群密度下降效果,并且对蚊虫的防控效果在一周后仍然保持在80％以上. 结论：遥控飞行喷雾器喷洒高效氟氯氰菊酯防治黑瞎子岛上的蚊虫和蚋,可大幅度减少防治区域内蚊虫和蚋的刺叮叮咬.同时,在地理环境复杂的条件下,遥控飞行喷雾器也显示出了其机动性强、短时间可处理大面积地区的优越性能.通过本次现场实验,可以预见遥控飞行喷雾器在未来疾病预防控制领域将有着广阔的应用前景.

关键词：蚊虫蚋高效氟氯氰菊酯遥控飞行喷雾器防虫效果

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采用高通量测序技术分析尾病毒目噬菌体基因组末端序列特点

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病毒学报 2013年第1期29卷 39-43页

作者：李莎莎范航安小平范华昊姜焕焕米志强童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

证明噬菌体高通量测序中高频出现的序列即是噬菌体基因组的末端序列。在T3噬菌体基因组末端连接特异性序列接头,然后进行高通量测序,同时将不加接头的T3基因组也进行高通量测序,对测序结果进行生物信息学比较分析。采用类似高通量测序... 详细信息

证明噬菌体高通量测序中高频出现的序列即是噬菌体基因组的末端序列。在T3噬菌体基因组末端连接特异性序列接头,然后进行高通量测序,同时将不加接头的T3基因组也进行高通量测序,对测序结果进行生物信息学比较分析。采用类似高通量测序技术分析N4样噬菌体的全基因组序列。加接头的序列与无接头序列中的高频序列完全一致,证明了高通量测序过程中得到的高频序列就是加接头的基因组末端序列,同时证明T4样噬菌体的末端具有序列特异性而非完全随机,此外我们还发现N4样噬菌体基因组左侧末端具有唯一序列,而其基因组右侧末端不均一。高通量测序技术方便快捷,可用于噬菌体基因组末端和全基因组序列的同时测定。

关键词：高通量测序噬菌体基因组末端序列

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抗生素可替代品--噬菌体和益生菌会议

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生物工程学报 2013年第2期29卷 247-250页

作者：裴广倩韩传银史套兴童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

1会议简介近年来，随着抗生素的滥用，细菌对抗生素的耐药性不断增强。据报道，目前有些国家肺炎链球菌耐药发生率达到25％；美国75％的细菌感染会对一种或多种抗生素产生耐药性；日本葡萄球菌分离株半数以上都具有多重耐药性。

关键词：抗生素益生菌噬菌体替代品多重耐药性细菌感染肺炎链球菌会议简介

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利用优化的5′-RACE实验定位副溶血弧菌基因的转录起始位点

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生物技术通讯 2014年第3期25卷 328-332页

作者：李杰张义全高鹤王丽胡小许周冬生中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:优化5′-cDNA末端快速扩增(5′-RACE)实验平台,用于定位副溶血弧菌(VP)基因的转录起始位点。方法:提取VP的总RNA,用rDNaseⅠ消化去除可能污染的基因组DNA;利用T4 RNA连接酶将已知序列的寡核苷酸片段连接至RNA的5′端,进而将其逆转... 详细信息

目的:优化5′-cDNA末端快速扩增(5′-RACE)实验平台,用于定位副溶血弧菌(VP)基因的转录起始位点。方法:提取VP的总RNA,用rDNaseⅠ消化去除可能污染的基因组DNA;利用T4 RNA连接酶将已知序列的寡核苷酸片段连接至RNA的5′端,进而将其逆转录成cDNA;以cDNA为模板,采用巢式PCR技术扩增目的基因DNA片段,并将其直接克隆入T载体;最后通过测序比对的方法确定靶基因的转录起始位点。利用引物延伸实验进一步研究VPA1027的转录起始位点,以检验5′-RACE实验结果的可靠性。结果:5′-RACE实验结果表明,VPA1027、scrG、scrA、cpsA及VPA0198的转录起始位点分别为G(-103)、G(-70)、T(-205)、C(-129)和G(-238)(翻译起始位点为+1);引物延伸结果显示,VPA1027的转录起始位点也为G(-103)。结论:优化后的5′-RACE实验可以精确定位VP基因的转录起始位点。

关键词：副溶血弧菌 5'-cDNA末端快速扩增转录起始位点

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Q热血清分析贝氏柯克斯体亚基因组蛋白质芯片和鉴定主要血清反应蛋白

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中国科学：生命科学 2013年第5期43卷 397-403页

作者：王锡乐熊小路 Stephen Greaves John Stenos 温博海军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 Australian Rickettsial Reference Laboratory Barwon Health Geelong HospitalGeelong VIC3220Australia

贝氏柯克斯体是Q热的病原菌.为了鉴定贝氏柯克斯体的免疫反应蛋白,本实验室研发了该病原体的亚基因组蛋白芯片.该芯片由101个贝氏柯克斯体的毒力相关重组蛋白构成,用于贝氏柯克斯体感染小鼠血清及Q热患者血清对这些蛋白质做血清学分析.... 详细信息

贝氏柯克斯体是Q热的病原菌.为了鉴定贝氏柯克斯体的免疫反应蛋白,本实验室研发了该病原体的亚基因组蛋白芯片.该芯片由101个贝氏柯克斯体的毒力相关重组蛋白构成,用于贝氏柯克斯体感染小鼠血清及Q热患者血清对这些蛋白质做血清学分析.小鼠血清鉴定出16个血清反应阳性蛋白,其中有7个蛋白能够与至少45%的Q热患者发生血清反应.值得注意的是,热休克蛋白B(HspB)与Q热患者和小鼠血清的反应最强,阳性率最高.本研究鉴定出7个主要Q热血清反应蛋白,这些蛋白,特别是HspB是Q热诊断试剂和亚单位疫苗研制的候选靶标.

关键词：贝氏柯克斯体蛋白芯片患者血清血清学反应热休克蛋白B

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