检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通讯 2012年第5期23卷 694-697页

作者：谢文龙骈亚亚吴凯郑玉玲姜永强陈福生华中农业大学食品科技学院湖北武汉430070 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:敲除2型猪链球菌(SS2)强毒株05ZYH33中的Fbps基因,研究该基因敲除对菌株生物活性及毒力的影响,为深入探讨猪链球菌致病机制提供实验基础。方法:从05ZYH33基因组中扩增Fbps基因上、下游同源臂,从pSET1质粒中扩增氯霉素抗性基因Cm,... 详细信息

目的:敲除2型猪链球菌(SS2)强毒株05ZYH33中的Fbps基因,研究该基因敲除对菌株生物活性及毒力的影响,为深入探讨猪链球菌致病机制提供实验基础。方法:从05ZYH33基因组中扩增Fbps基因上、下游同源臂,从pSET1质粒中扩增氯霉素抗性基因Cm,通过重叠PCR的方法将3个片段整合后连接到温敏自杀载体pSET4s上,电转入05ZYH33感受态细胞,通过改变培养温度实现双交换和质粒丢失,最后经抗性筛选获得敲除株05ZYH33ΔFBPS,分析敲除株的生物学性状,以CD1小鼠作为体外感染模型对突变株和野生株进行毒力比较。结果:PCR分析和测序结果均显示Fbps基因敲除成功,动物实验结果显示Fbps基因敲除后05ZYH33的毒力有所下降。结论:与野生株相比,突变株对小鼠的毒力有所降低。

关键词： 2型猪链球菌 Fbps基因基因敲除

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云南勐腊地区微小按蚊钠通道序列分析

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寄生虫与医学昆虫学报 2012年第3期19卷 156-160页

作者：郑重王刚李春晓汪中明谭伟龙邢丹董言德赵彤言军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 南京军区疾病预防控制中心南京210002

微小按蚊Anophelesminimus是云南省勐腊地区的重要传疟媒介，DDT和拟除虫菊酯类杀虫剂在该地区长期大量使用，研究微小按蚊与kdr抗性密切相关的para型钠通道基因对该地区选择合理的媒介控制方案预防和阻断疟疾的流行提供理依据。本文分... 详细信息

微小按蚊Anophelesminimus是云南省勐腊地区的重要传疟媒介，DDT和拟除虫菊酯类杀虫剂在该地区长期大量使用，研究微小按蚊与kdr抗性密切相关的para型钠通道基因对该地区选择合理的媒介控制方案预防和阻断疟疾的流行提供理依据。本文分别于2010和2011年9～10月在云南省勐腊县龙塘村和东方红村现场采集微小按蚊后，用分子学方法进行分型，根据GenBank发布的微小按蚊para钠通道IIS6段基因组DNA序列设计特异性引物，扩增现场采集的微小按蚊的该段基因，并测序对比。通过对415个个体的检测发现，1014位点编码的TTA氨基酸密码子没有突变，说明截止目前云南勐腊地区微小按蚊对DDT和拟除虫菊酯类杀虫剂抗性的kdr分子机制尚未出现，其击倒抗性较低，对DDT和拟除虫菊酯类杀虫剂仍然保持敏感。

关键词：微小按蚊 kdr para钠通道 1014位点

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结核分枝杆菌16-kDa α晶体蛋白的原核表达及纯化

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生物技术通讯 2012年第4期23卷 515-518页

作者：王晓娜刘大斌安小平李存李建彬范华昊张文慧张博米志强童贻刚广西医科大学基础医学院广西南宁530021 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:利用基因工程技术原核表达并纯化结核分枝杆菌α晶体蛋白(Acr)。方法:以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增Acr的编码基因,以pCold为载体构建重组质粒,再转化到表达宿主菌大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达,经S... 详细信息

目的:利用基因工程技术原核表达并纯化结核分枝杆菌α晶体蛋白(Acr)。方法:以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增Acr的编码基因,以pCold为载体构建重组质粒,再转化到表达宿主菌大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western印迹分析和纯化该表达产物。结果:构建了具有正确基因序列的Acr重组表达质粒,重组Acr在大肠杆菌BL21(DE3)中经低温诱导得到可溶性表达;分别用6×His的单克隆抗体和16-kDa单克隆抗体对表达产物进行Western印迹分析,结果显示在相对分子质量约19 000处均有特异性条带,与预计大小吻合;纯化后蛋白纯度达90%,浓度达0.8 mg/mL。结论:表达了重组可溶性Acr,为深入研究该蛋白的生物学、免疫学活性奠定了基础。

关键词：结核分枝杆菌 α晶体蛋白原核表达纯化

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病原菌耐药性进化的群体遗传学--以伤寒沙门氏菌氟喹诺酮耐药性为例

病原菌耐药性进化的群体遗传学--以伤寒沙门氏菌氟喹诺酮耐药性为...

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2012年全国病原微生物学术会议

作者：宋亚军病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京市丰台区东大街20号100071

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一种改良的鉴定原核生物非编码RNA的方法

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江苏大学学报（医学版） 2012年第5期22卷 387-390页

作者：纪晓岚曲奕韩延平黄新祥杨瑞馥江苏大学基础医学与医学技术学院生物化学研究室江苏镇江212013 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:构建一种鉴定原核生物非编码RNA(又称sRNA)的方法模型。方法:以鼠疫耶尔森菌为模型,基于非编码RNA的cDNA文库构建,改良RNA片段分离方法、获取全长RNA序列的RACE技术及rRNA去除方法,再应用RNA印迹法(Northern blot)对文库结果进行... 详细信息

目的:构建一种鉴定原核生物非编码RNA(又称sRNA)的方法模型。方法:以鼠疫耶尔森菌为模型,基于非编码RNA的cDNA文库构建,改良RNA片段分离方法、获取全长RNA序列的RACE技术及rRNA去除方法,再应用RNA印迹法(Northern blot)对文库结果进行验证。结果:同目前常用的检测原核生物sRNA方法相比较,本改良方法更易于获得真实可信和全长的sRNA分子。结论:获得了一种较完整、片段覆盖范围较广的原核生物非编码RNA的鉴定方法。

关键词：原核生物鼠疫耶尔森菌 sRNA cDNA文库

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PCR鉴定肺炎克雷伯菌的强毒性血清型

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生物技术通讯 2012年第4期23卷 554-557页

作者：和晋渝邱景富刘梦颖闫小娟李迎丽郭兆彪周冬生重庆医科大学公共卫生与管理学院重庆400016 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:了解肺炎克雷伯菌强毒性血清型K1、K2、K54和K57型菌株在我国重庆、北京、深圳三地的分布及流行趋势。方法:采用PCR对310株肺炎克雷伯菌临床分离株进行血清型K1、K2、K54和K57检测。结果:310株菌中,K1、K2、K54和K57血清型分别占14... 详细信息

目的:了解肺炎克雷伯菌强毒性血清型K1、K2、K54和K57型菌株在我国重庆、北京、深圳三地的分布及流行趋势。方法:采用PCR对310株肺炎克雷伯菌临床分离株进行血清型K1、K2、K54和K57检测。结果:310株菌中,K1、K2、K54和K57血清型分别占14.2%、9.4%、6.5%和4.2%;来自呼吸系统标本分离株中的K1血清型菌株在4种检测的强毒血清型中占首位,为呼吸系统总数的17.4%。结论:310株肺炎克雷伯菌的4种强毒性血清型中,K1血清型菌株所占比例高,较为流行。

关键词：肺炎克雷伯菌血清型强毒株聚合酶链反应

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副溶血弧菌毒力评价小鼠模型的建立与应用

副溶血弧菌毒力评价小鼠模型的建立与应用

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2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会

作者：郭李平徐镔蕊杜德燕姜汉雯邱业峰周冬生中国农业大学动物医学院农业部动物流行病学与人兽共患病重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院实验动物中心

目的本研究旨在建立评价副溶血性弧菌毒力的小鼠模型,为研究副溶血性弧菌的致病机制奠定基础。材料方法将不同剂量的RIMD210633菌液经腹腔感染4-5周龄雌性Balb/c小鼠,注射剂量分别为10～9、10～8、10～7、10～6CFU/只,观察小鼠的症状及... 详细信息

目的本研究旨在建立评价副溶血性弧菌毒力的小鼠模型,为研究副溶血性弧菌的致病机制奠定基础。材料方法将不同剂量的RIMD210633菌液经腹腔感染4-5周龄雌性Balb/c小鼠,注射剂量分别为10～9、10～8、10～7、10～6CFU/只,观察小鼠的症状及死亡数,以确定最佳感染量;然后将不同盐分浓

关键词：副溶血弧菌小鼠模型建立与应用

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流行性乙型脑炎发病率的气象影响因子分析

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中国媒介生物学及控制杂志 2012年第4期23卷 332-334页

作者：赵俊英代培芳刘美德孔祥盛张久松刘竹萍管翠强王海娇程璟侠山西省疾病预防控制中心病媒生物防控科山西太原030012 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室太原市疾病预防控制中心山西医科大学第一医院

目的探讨山西省运城地区流行性乙型脑炎(乙脑)发病率与气象因子之间的关系。方法收集2000-2009年7-9月运城地区乙脑发病率及同期气象资料,用SPSS17.0软件分析两者相关性,并用逐步回归分析建立乙脑发病率的气象因子拟合模型。结果运城地... 详细信息

目的探讨山西省运城地区流行性乙型脑炎(乙脑)发病率与气象因子之间的关系。方法收集2000-2009年7-9月运城地区乙脑发病率及同期气象资料,用SPSS17.0软件分析两者相关性,并用逐步回归分析建立乙脑发病率的气象因子拟合模型。结果运城地区乙脑病例多在6月开始出现,7月增多,8月达到高峰,9月减少,10月偶有发生。乙脑发病率与月平均温度、月平均气压等相关,与月温差、月日照、相对湿度、月降雨量无关。逐步回归分析得出乙脑发病率的气压回归方程,ap1(提前1个月的平均气压)有良好的拟合效果。结论气象因子对乙脑发病有重要影响,可以利用气压拟合模型预测乙脑发病率变化趋势。

关键词：流行性乙型脑炎发病率气象因子拟合模型

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吲哚胺2,3双加氧酶与乙肝病毒不同感染状态T淋巴细胞亚群及病毒载量的相关性研究

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北京医学 2012年第12期34卷 1025-1029页

作者：曾道炳卢实春李军峰胡冬周育森首都医科大学附属北京佑安医院肝胆外科暨肝移植中心 100069 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的探讨乙肝病毒(HBV)不同感染状态下,吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)表达水平及其与T淋巴细胞亚群及病毒载量的相关性。方法检测受检者外周静脉血IDO mRNA、IDO蛋白、IDO活性,T淋巴细胞亚群及病毒载量(对照组除... 详细信息

目的探讨乙肝病毒(HBV)不同感染状态下,吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)表达水平及其与T淋巴细胞亚群及病毒载量的相关性。方法检测受检者外周静脉血IDO mRNA、IDO蛋白、IDO活性,T淋巴细胞亚群及病毒载量(对照组除外);进行各组间均数比较及相关性分析。结果 IDO mRNA、IDO蛋白及IDO活性从高到低依次为急性乙型肝炎组(acute hepatitis B,AHB)、肝硬化组(HBV-related liver cirrhosis,LC)、慢性乙型肝炎组(chronic hepatitis B,CHB)、肝癌组(HBV-related hepatocellularcar cinoma,HCC)、对照组。HCC组及对照组均明显低于其他3组(P<0.01),其余各组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CD3+、CD4+T淋巴细胞在AHB组最高,对照组次之,LC组最低;AHB组、对照组及CHB组均明显高于LC组(P<0.05);AHB组、对照组明显高于HCC组(P<0.05)。CD8+T淋巴细胞在对照组最高,AHB组次之,LC组最低;但仅AHB组、对照组明显高于LC组(P<0.05)。AHB组CD4+/CD8+明显高于其他组(P<0.01)。CHB及LC组病毒载量最高,均明显高于HCC及AHB组(P<0.05)。CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞与病毒载量、IDO蛋白及IDO活性均呈负相关,CD8+T淋巴细胞与I-DO mRNA呈负相关(r=-0.287,P=0.039);CD4+/CD8+与IDO蛋白及IDO活性均呈正相关(r=0.470,P=0.000;r=0.285,P=0.040),病毒载量与IDO mRNA、IDO蛋白及IDO活性均呈正相关(r=0.530,P=0.001;r=0.416,P=0.002;r=0.649,P=0.000)。结论 HBV感染者IDO表达明显增强,与病毒载量呈正相关,与T淋巴细胞呈负相关,其早期升高有利于病毒清除,但持续升高会导致HBV特异性T淋巴细胞功能抑制,使HBV慢性化。

关键词：吲哚胺2,3双加氧酶乙型肝炎病毒 T淋巴细胞

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2型猪链球菌表面蛋白Hp0272的原核表达及其结合人血清IgA的活性分析

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生物技术通讯 2012年第6期23卷 800-803页

作者：甘淑珍任志强袁媛郑玉玲姜永强陈福生华中农业大学食品科学技术学院湖北武汉430070 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的：构建带GST标签的2型猪链球菌功能未知表面蛋白Hp0272的原核表达质粒并在大肠杆菌中表达，获得纯度较高的GST-Hp0272重组融合蛋白，鉴定其与人血清IgA（higA）的结合活性。方法：采用分子生物学方法构建pGEX-4T-1-0272重组表达载... 详细信息

目的：构建带GST标签的2型猪链球菌功能未知表面蛋白Hp0272的原核表达质粒并在大肠杆菌中表达，获得纯度较高的GST-Hp0272重组融合蛋白，鉴定其与人血清IgA（higA）的结合活性。方法：采用分子生物学方法构建pGEX-4T-1-0272重组表达载体，将其转入大肠杆菌BL21（DE3）菌株，IPTG诱导表达后，通过SDS-PAGE分析蛋白表达情况；用GSTrap柱亲和纯化目的蛋白并经Western印迹验证，采用配体印迹和ELISA方法鉴定GST-Hp0272与hlgA的结合活性。结果：构建了GST融合蛋白原核表达质粒，并获得GST-Hp0272融合蛋白，鉴定到Hp0272特异性地与hisA结合，且结合区域位于Hp0272的N端（41-318an）。结论：获得了GST-Hp0272融合蛋白，并鉴定到其能特异性结合hlgA，为进一步了解Hp0272在猪链球菌致病过程中的作用提供了基础。

关键词：猪链球菌 Hp0272 原核表达人血清IgA 特异结合

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