检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物工程杂志 2011年第2期31卷 1-6页

作者：董磊张晓鹏易绍琼毛亚丽于婷侯利华付玲于长明陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 空军总医院临床检验中心北京100142 空军总医院药学部北京100142

目的:探讨并建立可供药物评价或生物学功能研究的表达人PSCA抗原的荧光素酶小鼠肿瘤模型。方法:克隆人PSCA基因及荧光素酶基因luc,构建真核表达质粒pcDNA-PSCA及pcDNA-luc,共转染RM-1细胞株;照度计检测转染细胞的荧光素酶活性,RT-PCR及... 详细信息

目的:探讨并建立可供药物评价或生物学功能研究的表达人PSCA抗原的荧光素酶小鼠肿瘤模型。方法:克隆人PSCA基因及荧光素酶基因luc,构建真核表达质粒pcDNA-PSCA及pcDNA-luc,共转染RM-1细胞株;照度计检测转染细胞的荧光素酶活性,RT-PCR及流式细胞术检测PSCA的表达,筛选出共表达荧光素酶及人PSCA的RM-PSCA/luc细胞株;将RM-PSCA/luc细胞接种C57BL/6小鼠,观察所致肿瘤的生长情况及小鼠存活状况,并对小鼠进行活体成像检测Luc的表达;采用免疫组织化学染色方法检测人PSCA在小鼠肿瘤组织中的表达。结果:筛选到了稳定共表达Luc及人PSCA抗原的RM-PSCA/luc细胞,接种实验小鼠全部成瘤,肿瘤生长迅速,小鼠平均存活38天;转染荧光素酶基因的肿瘤细胞生物特性稳定,活体成像仪检测到转染荧光素酶细胞在小鼠体内活体成像,荧光素酶表达活性的强弱能够反映肿瘤大小;免疫组织化学染色方法检测到小鼠肿瘤组织PSCA的表达。结论:成功构建了可用于活体成像表达人PSCA抗原的小鼠肿瘤模型,为相关肿瘤药物及疫苗的研发奠定基础。

关键词：荧光素酶前列腺干细胞抗原肿瘤模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

吗啡对HIV-1在MT2细胞和巨噬细胞中复制的影响

引用

中华检验医学杂志 2011年第7期34卷 650-655页

作者：梁冰玉李敬云庄道民苏齐鉴刘思扬蒋俊俊肖信岑平陈晖梁浩广西医科大学公共卫生学院广西艾滋病防治研究实验室南宁530021 军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物安全国家重点实验室

目的附测定双抗体夹心法检测p24抗原表达.用Student-t检验或方差分析（ANOVA）比较不同细胞处理组间p24抗原表达差异;采用重复测量数据的方差分析比较不同时间吗啡处理组比对照组的p24抗原表达增加或减少倍数的变化趋势.结果 HIV-1感染... 详细信息

目的附测定双抗体夹心法检测p24抗原表达.用Student-t检验或方差分析（ANOVA）比较不同细胞处理组间p24抗原表达差异;采用重复测量数据的方差分析比较不同时间吗啡处理组比对照组的p24抗原表达增加或减少倍数的变化趋势.结果 HIV-1感染MT2细胞后第3、4、5和6天,3个浓度的吗啡处理的（1）组的p24抗原表达[第3天：（4.44±0.30）、（5.59±0.25）和（4.60±0.24） ng/ml;第4天：（24.30±2.66）、（31.73±1.17）和（26.02±0.37） ng/ml;第5天：（56.30±1.26）、（81.77±2.49）和（63.66±2.57） ng/ml;第6天：（150.70±8.97）、（243.09±8.93）和（173.72±7.73） ng/ml]均高于（4）组[第3~6天分别为（1.93±0.05）、（8.03±0.09）、（15.30±0.91）、（41.01±0.84） ng/ml],差异有统计学意义（第3天：t值分别为14.15、24.74和19.14,P均〈0.01;第4天：t值分别为10.59、34.92和81.2,P均〈0.01;第5天：t值分别为45.83、43.51和30.07,P均〈0.01;第6天：t值分别为20.09、39.02和29.55,P均〈0.01）.3个浓度的吗啡处理的（1）组的p24抗原表达比（4）组增加的倍数,随HIV-1感染MT2细胞的时间的延长具有上升的趋势,时间效应具有统计学意义（F=842.18,P〈0.01）.HIV-1感染巨噬细胞组后第4、6、8和10天,3个浓度的吗啡处理的（5）组的p24抗原表达[第4天：（0.68±0.15）、（0.87±0.41）和（0.75±0.09） ng/ml;第6天：（1.64±0.57）、（2.07±0.12）和（1.75±0.17） ng/ml;第8天：（6.31±0.17）、（8.81±0.34）和（7.19±0.11） ng/ml;第10天：（32.30±17.55）、（50.74±17.55）和（39.74±0.56） ng/ml]均高于（8）组[第4、6、8、10天分别为（0.60±0.01）、（1.16±0.07）、（3.84±0.45）、（17.55±0.86） ng/ml],差异有统计学意义（第4天：t值分别为7.27、11.06和3.02,P均〈0.05;第6天：t值分别为8.93、11.3和5.45,P均〈0.01;第8天：t值分别为8.83、15.11和12.42,P均〈0.01;第10天：t值分别为13.65、17.84和36.69,P均〈0.01）.3个浓度的吗啡处理的（5）组的p24抗原表达比（8）组增加的倍数,随HIV-1感染时间的延长具有上升的趋势,时间效应具有统计学意义（F=135.58,P〈0.01）.结论吗啡能够促进HIV-1在MT2细胞和巨噬细胞内的复制,并且随着感染时间的延长而增加;吗啡促进HIV-1复制的作用可被纳洛酮阻断.

关键词：吗啡 HIV-1 HIV核心蛋白质p24 巨噬细胞纳洛酮病毒复制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

重组外膜脂蛋白LipL32与致病性钩端螺旋体抗体的免疫反应性及与不同血清群交叉反应性的Western blotting评价

引用

解放军医学杂志 2011年第3期36卷 241-243页

作者：段鸿元刘志国邱少富何斌赵海宋利华朱虹端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军总医院第一附属医院门诊部北京100037

目的研究钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32与致病性钩体抗体的免疫反应性以及与不同钩体血清群之间的交叉反应性,为钩体病的血清学检测提供抗原。方法依据黄疸出血群赖型56601株外膜脂蛋白LipL32基因序列设计引物,扩增出该基因片段DNA,将其... 详细信息

目的研究钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32与致病性钩体抗体的免疫反应性以及与不同钩体血清群之间的交叉反应性,为钩体病的血清学检测提供抗原。方法依据黄疸出血群赖型56601株外膜脂蛋白LipL32基因序列设计引物,扩增出该基因片段DNA,将其克隆至表达载体pET-28a中。将构建好的重组质粒转化大肠埃希菌BL21并诱导表达,表达的重组蛋白纯化后采用Western blotting评价其与56601株及其他14个血清群致病性钩端螺旋体抗体的免疫反应性和交叉反应能力。结果扩增获得了56601株脂蛋白LipL32基因,成功构建了原核表达重组质粒pET28a-LipL32。重组蛋白rLipL32为包涵体表达,且与56601株及另外14个血清群的致病性钩端螺旋体的兔抗体发生了特异性免疫反应。结论原核表达重组外膜脂蛋白rLipL32在致病性钩体血清群之间有良好的交叉反应能力,可初步作为属范围内的钩端螺旋体抗体检测候选抗原。

关键词：钩端螺旋体,问号,黄疸出血型抗体交叉反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

HSV-2 gD融合gB CTL表位重组蛋白的原核表达及免疫原性评价

引用

动物医学进展 2011年第6期32卷 19-23页

作者：李君丽刘坤姜德玉张伟王希良于三科西北农林科技大学动物医学院陕西杨陵712100 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

为研制具有较强细胞免疫作用的单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)疫苗,将HSV-2糖蛋白D(gD)序列与糖蛋白B(gB)上两种CTL表位序列连接,人工合成重组基因gD-gBCTL,通过PCR扩增,将其克隆后连接至原核表达载体pET-22b(+),构建重组基因表达质粒pET-22b(... 详细信息

为研制具有较强细胞免疫作用的单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)疫苗,将HSV-2糖蛋白D(gD)序列与糖蛋白B(gB)上两种CTL表位序列连接,人工合成重组基因gD-gBCTL,通过PCR扩增,将其克隆后连接至原核表达载体pET-22b(+),构建重组基因表达质粒pET-22b(+)-gD-gBCTL,转化***21(DE3),IPTG诱导表达。对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,His TrapTMHP柱纯化目的蛋白并免疫Balb/c小鼠,间接ELISA法检测血清抗体效价,结果显示重组蛋白在大肠埃希菌中得到了高效表达,该重组蛋白具有较好的免疫原性。

关键词： HSV-2 糖蛋白D CTL表位原核表达免疫原性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

淋球菌孔蛋白基因与脂寡糖表位融合基因原核表达载体的构建及表达

引用

动物医学进展 2011年第5期32卷 77-81页

作者：赵莉群陈中伟张伟王希良于三科西北农林科技大学动物医学院陕西杨陵712100 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

PCR扩增淋球菌CMCC29400、CMCC29403株孔蛋白(PI)A、B及表位基因,使用linker GS-GGSG并通过重叠PCR法将表位基因连接在PIA、PIB上形成融合基因PIA-表位、PIB-表位,分别与克隆载体pMD-18T连接,测序正确后将目的基因插入表达载体pET32a(+)... 详细信息

PCR扩增淋球菌CMCC29400、CMCC29403株孔蛋白(PI)A、B及表位基因,使用linker GS-GGSG并通过重叠PCR法将表位基因连接在PIA、PIB上形成融合基因PIA-表位、PIB-表位,分别与克隆载体pMD-18T连接,测序正确后将目的基因插入表达载体pET32a(+)中,构建pET32a-PIA-表位、pET32a-PIB-表位、pET32a-PIA和pET32a-PIB重组表达质粒,PCR、双酶切鉴定及测序正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,经SDS-PAGE鉴定分析,成功表达融合蛋白。

关键词：淋球菌孔蛋白脂寡糖表位基因融合表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

埃及伊蚊传播西尼罗病毒的媒介效能研究

引用

中国媒介生物学及控制杂志 2011年第2期22卷 107-109页

作者：张映梅姜淑芳郭晓霞董言德赵彤言军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国人民解放军总医院

目的研究我国埃及伊蚊传播西尼罗病毒的潜在能力。方法人工配制病毒血餐感染埃及伊蚊并进行传播实验,应用反转录聚合酶链反应(RT?PCR)、病毒分离和间接免疫荧光法(IFA)检测蚊虫和来亨鸡体内病毒。结果动物实验结果表明敏感动物来亨鸡感... 详细信息

目的研究我国埃及伊蚊传播西尼罗病毒的潜在能力。方法人工配制病毒血餐感染埃及伊蚊并进行传播实验,应用反转录聚合酶链反应(RT?PCR)、病毒分离和间接免疫荧光法(IFA)检测蚊虫和来亨鸡体内病毒。结果动物实验结果表明敏感动物来亨鸡感染西尼罗病毒后,第2天其体内病毒量达到最高,说明进行传播实验后的第2天是检测传播是否成功的最佳时间。感染与传播实验结果表明埃及伊蚊对西尼罗病毒的感染率达到了63.3%,而且通过刺叮敏感动物(来亨鸡)能够传播该病毒,其传播率为30.0%。结论在未来我国可能的西尼罗热暴发中,埃及伊蚊可能成为其在海南等地的潜在传播媒介。

关键词：埃及伊蚊西尼罗病毒易感性传播

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

不同破壁方法提取酵母菌总RNA的比较

引用

食品科学 2011年第11期32卷 161-164页

作者：易弋容元平程谦伟黎娅王晓林广西工学院生物与化学工程系广西柳州545006 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

选择液氮碾磨、反复冻融、超声波、加玻璃珠漩涡振荡和蜗牛酶酶解5种方法破碎酵母菌细胞壁,再使用Trizol法提取酵母菌总RNA,通过对总RNA进行质量浓度和纯度分析,比较不同破壁方法对酵母菌总RNA提取的影响。结果表明:在使用Trizol法提取... 详细信息

选择液氮碾磨、反复冻融、超声波、加玻璃珠漩涡振荡和蜗牛酶酶解5种方法破碎酵母菌细胞壁,再使用Trizol法提取酵母菌总RNA,通过对总RNA进行质量浓度和纯度分析,比较不同破壁方法对酵母菌总RNA提取的影响。结果表明:在使用Trizol法提取酵母菌总RNA的实验中,反复冻融和液氮碾磨是较为有效且简便的酵母菌细胞壁破碎方法。

关键词： Trizol试剂 RNA提取酵母菌破壁

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

甲型H1N1流感病毒样颗粒疫苗的初步研究

引用

免疫学杂志 2011年第6期27卷 470-474页

作者：高啸潘玉竹陈中伟邢丽刘坤王文娟杨鹏辉王希良中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 重庆大学A区生物工程学院 400044

目的对甲型H1N1病毒样颗粒的免疫原性和保护效果进行初步研究,为研发不依赖鸡胚生产工艺的流感疫苗提供新的思路。方法使用昆虫-杆状病毒表达系统表达并纯化甲型H1N1流感病毒A/California/07/2009(H1N1)的病毒样颗粒;通过Western blot... 详细信息

目的对甲型H1N1病毒样颗粒的免疫原性和保护效果进行初步研究,为研发不依赖鸡胚生产工艺的流感疫苗提供新的思路。方法使用昆虫-杆状病毒表达系统表达并纯化甲型H1N1流感病毒A/California/07/2009(H1N1)的病毒样颗粒;通过Western blot、血凝、单向免疫扩散,透射电镜等方法鉴定病毒样颗粒;使用A/California/07/2009(H1N1)裂解疫苗作为对照,腹腔注射免疫Balb/c小鼠,并使用A/Beijing/501/2009(H1N1)进行攻毒,评价病毒样颗粒疫苗的免疫原性及保护效果。结果经鉴定,纯化后的病毒样颗粒血凝滴度为1:512,HA含量为92.9μg/ml,颗粒大小在100 nm左右,二免10 d后IgG抗体效价7.9×103,血凝抑制实验测得血抑(Hemagglutination Inhibition,HI)效价384,对50LD50的A/Beijing/501/2009(H1N1)病毒的保护率达到100%。结论甲型H1N1流感病毒样颗粒的免疫原性显著高于裂解疫苗,为发展不依赖鸡胚生产的流感亚单位疫苗提供了技术保证。

关键词：甲型H1N1 病毒样颗粒疫苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利用移码突变和终止密码子提高下游目的基因的表达水平

引用

中国生物工程杂志 2011年第8期31卷 92-96页

作者：陈斌李建彬米志强安小平李存刘大斌姜焕焕王娟黄芬张宝中范华昊何后军童贻刚江西农业大学动物科学技术学院南昌330045 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 华南农业大学食品学院广州510642

目的:在基因结构复杂的慢病毒载体插入报告基因并提高目的基因表达量。方法:慢病毒载体上有复杂的基因排列,为了不影响慢病毒载体的活性,必须尽量保留原有的基因,替换不必要的基因。首先将报告基因萤光素酶插入慢病毒载体替换基因Env后... 详细信息

目的:在基因结构复杂的慢病毒载体插入报告基因并提高目的基因表达量。方法:慢病毒载体上有复杂的基因排列,为了不影响慢病毒载体的活性,必须尽量保留原有的基因,替换不必要的基因。首先将报告基因萤光素酶插入慢病毒载体替换基因Env后,结果检测不到报告基因的表达。为了提高报告基因的表达水平,将报告基因的读码框向后移动一个碱基,同时在其上游增加一个终止密码子,然后检测报告基因的表达水平。结果:通过移动报告基因的读码框同时在上游增加终止密码子,使报告基因的表达水平大大提高。结论:在构建基因表达载体时,通过改变目的基因与上游起始密码子ATG之间的相对位置以及增加终止密码子,可以大幅提高目的基因的表达水平。

关键词：慢病毒载体报告基因基因表达定点突变

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗东方马脑炎病毒结构蛋白E2单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定

引用

中国预防兽医学报 2011年第11期33卷 893-897页

作者：赵晶孙恩成刘霓红杨涛杨银辉耿宏伟秦永丽王凌凤徐青元吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物/生物安全国家重点实验室北京100071

为制备抗东方马脑炎病毒(EEEV)结构蛋白E2的单克隆抗体(MAb)并鉴定其抗原表位,本研究以Bac-to-Bac真核表达系统表达EEEV E2蛋白,纯化后作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。以原核表达载体pET-30a... 详细信息

为制备抗东方马脑炎病毒(EEEV)结构蛋白E2的单克隆抗体(MAb)并鉴定其抗原表位,本研究以Bac-to-Bac真核表达系统表达EEEV E2蛋白,纯化后作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。以原核表达载体pET-30a表达并纯化的EEEV E2蛋白作为包被抗原建立间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,获得4株稳定分泌抗EEEV E2蛋白MAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为6F3、6F11、7C11、8B11。Western blot与间接免疫荧光试验结果表明,获得的4株MAbs均与EEEV呈阳性反应,而与西方马脑炎病毒、乙型脑炎病毒以及登革热病毒1型～4型呈阴性反应。利用部分重叠的原核表达的短肽对E2蛋白抗原表位进行鉴定,初步确定MAb 6F11、7C11和8B11识别的抗原表位均为E-33(321EGLEYTWGNHPPKRVW336),而MAb 6F3无短肽与其反应,推测可能为构象表位。本研究结果为建立EEEV型特异性检测方法、研究E2蛋白结构功能及该病的进一步防制奠定了基础。

关键词：东方马脑炎病毒 E2蛋白原核表达真核表达单克隆抗体抗原表位

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：