检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2012年第4期92卷 250-253页

作者：李韩平郭伟刘永健鲍作义李林庄道民刘思扬王晓林李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨人类免疫缺陷病毒（ HIV）逆转录酶区H221Y突变在抗病毒治疗失败人群HIV-1B’亚型毒株中的流行状况及突变模式.方法提取我国中部地区多个省份1205例抗病毒治疗失败及158例未抗病毒治疗的艾滋病患者血浆样本RNA,扩增HIV B’亚... 详细信息

目的探讨人类免疫缺陷病毒（ HIV）逆转录酶区H221Y突变在抗病毒治疗失败人群HIV-1B’亚型毒株中的流行状况及突变模式.方法提取我国中部地区多个省份1205例抗病毒治疗失败及158例未抗病毒治疗的艾滋病患者血浆样本RNA,扩增HIV B’亚型毒株聚合酶区（pol区）基因序列提交斯坦福大学HIV-1耐药数据库,根据数据库比对结果,分析H221Y突变在2组人群中发生频率及发生模式.结果 H221Y突变在抗病毒治疗失败人群中流行率（6.59％）显著高于未治疗人群（0.60％）（x2=6.59,P=0.027）.该突变的发生常伴随逆转录酶区位点T215、M184、K103、Y181突变的出现,突变模式以TAMs/H221 Y/Y181C/I为主.5种抗病毒治疗方案中,齐多夫定（AZT）/去羟肌苷（ddI）/奈韦拉平（NVP）治疗方案的H221Y突变发生率显著高于其他4种治疗方案（14.6％比3.5％、4.9％、2.3％、2.6％,均P ＜0.01）.结论使用一线方案治疗失败的艾滋病患者中H221Y突变有一定流行,该突变的发生以特有的突变模式出现.

关键词： HIV-1 突变抗药性 H221Y

来源：评论

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抗生素可替代品--噬菌体和益生菌会议

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生物工程学报 2013年第2期29卷 247-250页

作者：裴广倩韩传银史套兴童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

1会议简介近年来，随着抗生素的滥用，细菌对抗生素的耐药性不断增强。据报道，目前有些国家肺炎链球菌耐药发生率达到25％；美国75％的细菌感染会对一种或多种抗生素产生耐药性；日本葡萄球菌分离株半数以上都具有多重耐药性。

关键词：抗生素益生菌噬菌体替代品多重耐药性细菌感染肺炎链球菌会议简介

来源：评论

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HIV-1B′亚型毒株新型耐药相关突变位点的筛选

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中华流行病学杂志 2011年第5期32卷 499-503页

作者：李韩平郭伟刘永健鲍作义李林庄道民刘思扬王铮王晓林李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的筛选HIV—1 B′亚型病毒株中可能存在的新型耐药相关突变位点。方法收集整理前期研究获得的451条H1V-1B′亚型pol区基因序列，序列含蛋白酶全长（1～99个密码子）和反转录酶全长（1～560个密码子），长度约1977bp。将354条来自接受... 详细信息

目的筛选HIV—1 B′亚型病毒株中可能存在的新型耐药相关突变位点。方法收集整理前期研究获得的451条H1V-1B′亚型pol区基因序列，序列含蛋白酶全长（1～99个密码子）和反转录酶全长（1～560个密码子），长度约1977bp。将354条来自接受抗病毒治疗艾滋病患者的（服药组）序列与97条来自未接受治疗患者的（未服药组）序列，分别与B亚型野生型pol基因共享序列进行逐个密码子比对，筛选在服药组序列中出现的频率显著高于未服药组序列的突变位点，将筛选出来的突变位点在斯坦福大学HIV-1耐药数据库中检索，根据数据库收录的情况及解释，初步分析突变与耐药的关系。结果在服药组序列中反转录酶区有6个位点7个突变的频率显著高于未服药组，分别是D123E、V292I、K366R、T369A、T369V、A371V和1375V，即前2个突变位于反转录酶的聚合酶区、后5个突变位于反转录酶的连接区。检索数据库收录情况，有7个突变均为相应位点的主要变异形式，在服药患者中出现的频率显著高于未服药患者。结论筛选出的HIV-1B′亚型病毒株7个突变可能与耐药有关。

关键词： HIV-1 B′亚型新型耐药突变

来源：评论

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西尼罗病毒与乙型脑炎病毒生物学性状的比较与鉴别

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中华实验和临床病毒学杂志 2005年第4期19卷 340-343,F0003页

作者：张久松张泮河司炳银杨红曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的对西尼罗病毒(WNV)和乙脑病毒(JEV)的致细胞病变效应(CPE)、致病性、形态学、免疫学和分子生物学性状进行比较,为WNV感染的鉴别诊断提供依据。方法通过给C6/36细胞和乳鼠接种WNV或JEV,观察两种病毒的CPE和致病性;制作组织切片的透... 详细信息

目的对西尼罗病毒(WNV)和乙脑病毒(JEV)的致细胞病变效应(CPE)、致病性、形态学、免疫学和分子生物学性状进行比较,为WNV感染的鉴别诊断提供依据。方法通过给C6/36细胞和乳鼠接种WNV或JEV,观察两种病毒的CPE和致病性;制作组织切片的透射电镜标本进行病毒形态学观察;分别用间接免疫荧光试验(IFA)和RTPCR方法对两种病毒抗体阳性血清及病毒核酸进行检测。结果WNV和JEV所致C6/36细胞CPE分别以细胞融合和细胞脱落为主要特征;脑内接种两种病毒对乳鼠的致病性未见明显差别;电镜下,两种病毒体的形态与大小相似;WNV与JEV之间存在抗原交叉反应;用黄病毒通用引物可从WNV和JEV感染组织中检出病毒核酸,而用特异引物仅能扩增出相应病毒的核苷酸片段。结论病毒所致C6/36细胞CPE与病毒核酸检测可作为WNV与JEV有效的鉴别方法,对两种病毒抗体效价进行同时测定有助于病原体感染的诊断。

关键词：西尼罗病毒脑炎病毒,日本生物学性状

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炭疽毒素受体胞外区在毕赤酵母中分泌表达、纯化与活性鉴定

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生物化学与生物物理进展 2005年第7期32卷 657-661页

作者：赵剑徐俊杰缪静李冰杨秀旭宋小红陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 烟台师范大学生命科学院烟台264025

使用分泌型表达载体,实现了重组炭疽毒素受体胞外区(rATR(CMG2)-EXCELL)在毕赤酵母KM71H培养物上清中的分泌表达.表达量约占培养物上清总蛋白质的20%.经过螯合柱初步纯化,每升诱导培养物可获得约1mg电泳纯的rATR(CMG2)-EXCELL.体外与配... 详细信息

使用分泌型表达载体,实现了重组炭疽毒素受体胞外区(rATR(CMG2)-EXCELL)在毕赤酵母KM71H培养物上清中的分泌表达.表达量约占培养物上清总蛋白质的20%.经过螯合柱初步纯化,每升诱导培养物可获得约1mg电泳纯的rATR(CMG2)-EXCELL.体外与配基PA结合试验和细胞保护试验显示,rATR(CMG2)-EXCELL具有很好的生物活性.rATR(CMG2)-EXCELL的成功表达为今后研究炭疽毒素受体的作用机理、发展新型炭疽治疗药物打下基础.

关键词：炭疽杆菌炭疽毒素受体蛋白质表达毕赤酵母

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炭疽毒素受体与人IgG1的Fc段融合蛋白ATR-Fc在CHO细胞中的表达

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生物工程学报 2005年第5期21卷 826-831页

作者：高丽华胡显文陈薇徐俊杰赵剑陈惠鹏军事医学科学院生物工程研究所北京100071 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

ATR_Fc是人炭疽毒素受体(ATR)的胞外区与人免疫球蛋白IgG1的铰链区、CH2区和CH3区组成的融合蛋白。表达该蛋白是为了获得结合PA的抗体样分子,通过阻断PA与细胞受体的结合,而阻止炭疽致死毒素和水肿因子进入细胞内,可作为预防和治疗炭疽... 详细信息

ATR_Fc是人炭疽毒素受体(ATR)的胞外区与人免疫球蛋白IgG1的铰链区、CH2区和CH3区组成的融合蛋白。表达该蛋白是为了获得结合PA的抗体样分子,通过阻断PA与细胞受体的结合,而阻止炭疽致死毒素和水肿因子进入细胞内,可作为预防和治疗炭疽感染的生物制品。将编码炭疽毒素受体N端1_227氨基酸的基因和编码Fc段的基因连接,插入到pcDNA3.1的HindⅢ和NotⅠ位点得到表达ATR_Fc融合蛋白的真核表达载体pcDNA3.1ATR_Fc,并用脂质体方法将该载体转染至CHO_K1细胞中,用G418筛选并获得ATR_Fc表达水平为10～15μg(106cells·d)的基因工程CHO细胞系ATR_Fc_1D5。采用蛋白A纯化重组蛋白,并用ELISA法鉴定ATR_Fc与PA的亲和性,表明ATR_Fc可与PA特异性结合。

关键词：炭疽毒素受体 Fc融合蛋白重组CHO细胞抗体类分子抗毒素

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丙型肝炎病毒体外培养细胞模型研究进展

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中华肝脏病杂志 2008年第10期16卷 799-800页

作者：王盘童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所十室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

由于丙型肝炎病毒（HCV）的高度变异性以及缺乏高效率的细胞培养体系，人们对HCV生活史的认识、对相关疫苗和特异性抗病毒药物的研究进展缓慢。寻找高效率的HCV体外细胞培养体系一直是HCV研究的重点，现就近年来在相关领域的研究进展作... 详细信息

由于丙型肝炎病毒（HCV）的高度变异性以及缺乏高效率的细胞培养体系，人们对HCV生活史的认识、对相关疫苗和特异性抗病毒药物的研究进展缓慢。寻找高效率的HCV体外细胞培养体系一直是HCV研究的重点，现就近年来在相关领域的研究进展作一综述。

关键词：肝炎病毒丙型细胞培养模型细胞

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布鲁杆菌基因工程疫苗免疫保护效率的初步观察

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中国地方病学杂志 2006年第1期25卷 46-49页

作者：高永辉张松乐曾政罗德炎张良艳董梅王希良军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室免疫室北京100071

目的比较布鲁杆菌6种抗原表位所获得的基因工程疫苗的免疫保护效率。方法布鲁杆菌核糖体蛋白L7/L12、胞质蛋白P39、细胞表面蛋白BCSP31、二氧四氢喋啶合成酶BLS、16.5×103的外膜蛋白PAL和翻译起始因子IF3的基因片段与真核表达载体p... 详细信息

目的比较布鲁杆菌6种抗原表位所获得的基因工程疫苗的免疫保护效率。方法布鲁杆菌核糖体蛋白L7/L12、胞质蛋白P39、细胞表面蛋白BCSP31、二氧四氢喋啶合成酶BLS、16.5×103的外膜蛋白PAL和翻译起始因子IF3的基因片段与真核表达载体pcDNA3.1(+)构建的核酸疫苗及上述6条片段转入pET32a(+)后诱导表达的的重组蛋白免疫小鼠,3次免疫后进行攻毒实验,对其免疫保护效率进行初步观察。结果L7/L12和BLS的重组蛋白疫苗和核酸疫苗都产生了非常显著的保护作用,P39的核酸疫苗、IF3和BCSP31的重组蛋白疫苗也产生了非常显著的保护作用,其中L7/L12核酸疫苗的保护效率最高。结论初步认为布鲁杆菌的优势抗原表位所获得的基因工程疫苗可产生一定的抗布鲁杆菌作用,可作为未来布鲁杆菌新型疫苗的候选者,有进一步研究的价值。

关键词：布鲁杆菌菌苗基因疫苗,DNA 核酸

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Q热血清分析贝氏柯克斯体亚基因组蛋白质芯片和鉴定主要血清反应蛋白

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中国科学：生命科学 2013年第5期43卷 397-403页

作者：王锡乐熊小路 Stephen Greaves John Stenos 温博海军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 Australian Rickettsial Reference Laboratory Barwon Health Geelong HospitalGeelong VIC3220Australia

贝氏柯克斯体是Q热的病原菌.为了鉴定贝氏柯克斯体的免疫反应蛋白,本实验室研发了该病原体的亚基因组蛋白芯片.该芯片由101个贝氏柯克斯体的毒力相关重组蛋白构成,用于贝氏柯克斯体感染小鼠血清及Q热患者血清对这些蛋白质做血清学分析.... 详细信息

贝氏柯克斯体是Q热的病原菌.为了鉴定贝氏柯克斯体的免疫反应蛋白,本实验室研发了该病原体的亚基因组蛋白芯片.该芯片由101个贝氏柯克斯体的毒力相关重组蛋白构成,用于贝氏柯克斯体感染小鼠血清及Q热患者血清对这些蛋白质做血清学分析.小鼠血清鉴定出16个血清反应阳性蛋白,其中有7个蛋白能够与至少45%的Q热患者发生血清反应.值得注意的是,热休克蛋白B(HspB)与Q热患者和小鼠血清的反应最强,阳性率最高.本研究鉴定出7个主要Q热血清反应蛋白,这些蛋白,特别是HspB是Q热诊断试剂和亚单位疫苗研制的候选靶标.

关键词：贝氏柯克斯体蛋白芯片患者血清血清学反应热休克蛋白B

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mCD1.1分子的真核表达及其对NKT细胞的刺激作用

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第5期22卷 579-581页

作者：易绍琼彭虹王华王岚陈洁赵光宇高杰英军事医学科学院微生物流行病研究所病源微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:获得稳定表达mCD1.1分子的细胞系,研究其对肝脏和肠系膜淋巴结淋巴细胞的刺激作用。方法:分离C57小鼠的小肠上皮细胞,制备总RNA,通过RTPCR扩增mCD1.1编码区基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1。将所得重组质粒pcDNA3.1mCD1.1通... 详细信息

目的:获得稳定表达mCD1.1分子的细胞系,研究其对肝脏和肠系膜淋巴结淋巴细胞的刺激作用。方法:分离C57小鼠的小肠上皮细胞,制备总RNA,通过RTPCR扩增mCD1.1编码区基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1。将所得重组质粒pcDNA3.1mCD1.1通过电穿孔法转至CHO细胞中,在含G418的的选择性培养基中筛选抗性克隆,利用RTPCR和流式细胞术对挑取的克隆进行mCD1.1表达的鉴定。将表达mCD1.1的细胞与新分离的肝脏和肠系膜淋巴结(MLN)的淋巴细胞进行共培养,并用丝裂霉素C抑制CHO细胞的增殖,然后利用MTT法检测淋巴细胞的增殖情况;另外将表达mCD1.1的CHO细胞与淋巴细胞共培养后,分离淋巴细胞,然后用PEantiNK1.1和CychromeantiCD3对其进行标记,利用流式细胞术检测CD3细胞中NK1.1阳性细胞的比例。结果:通过RTPCR,得到mCD1.1的编码区基因,序列与预期相符;通过多次鉴定,证明筛选得到的细胞克隆可稳定表达mCD1.1;CHOmCD1.1细胞与新分离的淋巴细胞共培养,在有无LPS存在的情况下,均能刺激淋巴细胞发生增殖,并使CD3+细胞中NK1.1阳性细胞的比例增加。结论:表达mCD1.1的CHO细胞能够刺激NKT细胞增殖。

关键词： mCD1.1 NKT细胞细胞增殖

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