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细菌菌蜕是革兰阴性细菌被噬菌体PhiX174的裂解基因E裂解后形成的完整细菌空壳。细菌菌蜕兼顾了组合抗原免疫原性、佐剂效应、靶向性载体的作用,特别适合于黏膜免疫及口服免疫;由于缺乏内含物而更加安全;生产过程简单,适宜大规模生产。这些特性决定了细菌菌蜕是一种具有良好应用前景的候选疫苗及递送系统。本文就细菌菌蜕的研究进展作一综述。

关键词：细菌菌蜕递送系统疫苗佐剂

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禽流感病毒的传播、致病机制及其防治

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解放军医学杂志 2009年第2期34卷 125-130页

作者：李晓峰秦鄂德军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

高致病性禽流感病毒(H5N1)可导致严重的致死性疾病,已给全球禽类养殖及相关产业造成了巨大损失,并对人类健康造成了极大威胁。近30年来,H5N1病毒已在东南亚、中国、欧洲和非洲等地呈区域性流行。尽管目前还未发生人际传播,但该病毒一旦... 详细信息

高致病性禽流感病毒(H5N1)可导致严重的致死性疾病,已给全球禽类养殖及相关产业造成了巨大损失,并对人类健康造成了极大威胁。近30年来,H5N1病毒已在东南亚、中国、欧洲和非洲等地呈区域性流行。尽管目前还未发生人际传播,但该病毒一旦与人流感病毒重组,将会转变为可人间传播的高致死性流感病毒,从而导致新的流感大流行。直接接触感染禽流感病毒的禽类或其含病毒的排泄物是人类感染禽流感病毒的主要途径。禽流感病毒经过不断变异后有可能突破种属屏障而传播给哺乳动物及人类,从而进一步在病毒和宿主的多种因素作用下导致宿主发病乃至死亡。目前,疫苗接种仍是预防人禽流感的有效手段,同时神经氨酸酶抑制剂等抗病毒药物在禽流感的治疗中也发挥着重要作用。

关键词：禽流感流感病毒A型,H5N1亚型毒力

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高致病性人禽流感H5N1疫苗滴鼻免疫应答效果的初步研究

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免疫学杂志 2009年第1期25卷 16-19页

作者：何蕊吕进张良艳董梅王希良军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的通过高致病性人禽流感H5N1全病毒-MF59佐剂疫苗滴鼻免疫Balb/c小鼠,评价该疫苗所诱导的系统免疫与黏膜免疫应答效果。方法以不同剂量抗原按比例与MF59佐剂配伍制成粘膜疫苗,滴鼻免疫Balb/c小鼠,二免2周采血检测血清IgG、IgM效价及... 详细信息

目的通过高致病性人禽流感H5N1全病毒-MF59佐剂疫苗滴鼻免疫Balb/c小鼠,评价该疫苗所诱导的系统免疫与黏膜免疫应答效果。方法以不同剂量抗原按比例与MF59佐剂配伍制成粘膜疫苗,滴鼻免疫Balb/c小鼠,二免2周采血检测血清IgG、IgM效价及血清中HAI(HAinhibitor)的中和抗体效价,同时收集鼻、肺灌洗液,检测其IgG和sIgA抗体效价。结果H5N1+MF59组血清抗体效价较H5N1组有显著升高(P<0.01);在各剂量组中,随着剂量的增加抗体效价呈上升趋势,12μg后抗体效价呈下降趋势,以H5N1+MF59(12μg)组效价最高;肺鼻灌洗液中,均可检测到特异性分泌型IgA、IgG,其中特异性分泌型IgA效价略高于IgG;抗体亚型的分布以IgG1、IgG2b为主。结论灭活高致病性禽流感全病毒H5N1在佐剂MF59作用下可诱导机体产生体液免疫应答,同时还可以在黏膜局部产生特异性分泌型IgA、IgG,为高致病人禽流感病毒H5N1黏膜疫苗的研制奠定了基础。

关键词：高致病性人禽流感H5N1疫苗滴鼻免疫免疫应答

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结核分枝杆菌ESX分泌系统研究进展

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中国科学（C辑） 2009年第10期39卷 925-932页

作者：李浩徐俊杰陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

在结核分枝杆菌中存在能够使某些蛋白通过其高度疏水和通透性极差的细胞壁的分泌系统，其中ESX-1分泌系统负责ESAT-6（early secreted antigenic target of 6 kD）和CFP-10（culture filtrate protein of 10kD）的分泌．这两种蛋白能够... 详细信息

在结核分枝杆菌中存在能够使某些蛋白通过其高度疏水和通透性极差的细胞壁的分泌系统，其中ESX-1分泌系统负责ESAT-6（early secreted antigenic target of 6 kD）和CFP-10（culture filtrate protein of 10kD）的分泌．这两种蛋白能够形成1：1的二聚体结构，并且是结核分枝杆菌重要的毒力因子．近年来陆续发现其他一些蛋白也由ESX-1分泌系统所分泌．在结核分枝杆菌中还存在其他4种类似ESX-1的分泌系统ESX-2～***分泌系统也在其他革兰氏阳性菌和放线菌中被发现，有学者按照公认的术语称其为Ⅶ型分泌系统．本文综述了结核分枝杆菌ESX分泌系统的组成和分子机制，以及分泌蛋白与宿主的相互作用等方面的研究进展．

关键词：结核分枝杆菌 ESX—1 ESAT-6 CFP-10

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ASPCR检测微量HIV-1 K103N耐药突变方法的建立

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第12期29卷 1130-1134页

作者：郭东星李韩平李林庄道民王铮鲍作义刘思扬刘永健李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所全军艾滋病检测中心病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的建立检测微量HIV-1 K103N耐药突变的等位基因特异扩增实时定量PCR（allele-specific real-time PCR，ASPCR）方法，用于微量K103N耐药突变的检测和分析。方法首先建立检测K103N耐药突变的ASPCR方法，然后对方法进行验证，最后采用AS... 详细信息

目的建立检测微量HIV-1 K103N耐药突变的等位基因特异扩增实时定量PCR（allele-specific real-time PCR，ASPCR）方法，用于微量K103N耐药突变的检测和分析。方法首先建立检测K103N耐药突变的ASPCR方法，然后对方法进行验证，最后采用ASPCR方法检测对照样本。构建含K103N突变的质粒作为标准品，然后设计特异性引物用以区分野生型和突变型模板，采用SYBRgreen法进行实时定量PCR，并绘制标准曲线。分别采用特异性和非特异性引物扩增模板，根据二者Ct（cycle threshold）值结合相应的标准曲线判断是否存在K103N突变及突变比例。对ASPCR检测K103N突变位点的特异性、敏感性、准确性、重复性等进行验证。结果特异性和非特异性引物扩增等量野生型模板的Ct值之差（△Ct）可达13．56；当突变比例小于0．1％时仍具有良好的准确性；批内变异系数小于0．7，批间变异系数小于1．6；检测灵敏度可达0．01％。检测阴性对照样本的△Ct显著高于临界值，阳性对照样本检测结果均为阳性。结论ASPCR是一种快速、灵敏、准确的检测HIV-1微量耐药突变的方法，可为临床抗病毒治疗提供理论指导。

关键词： HIV ASPCR 微量耐药

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两种化合物对流感病毒神经氨酸酶活性的抑制作用

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军事医学科学院院刊 2009年第2期33卷 135-136页

作者：孙雅洁贝祝春王京燕军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:在分子水平评价化合物L20051117和AMMS607对甲型流感病毒和乙型流感病毒神经氨酸酶(NA)活性的抑制作用。方法:通过测定流感病毒NA的荧光密度来确定化合物对流感病毒NA的抑制活性。结果:L20051117对NA的抑制活性高于AMMS607,且两者... 详细信息

目的:在分子水平评价化合物L20051117和AMMS607对甲型流感病毒和乙型流感病毒神经氨酸酶(NA)活性的抑制作用。方法:通过测定流感病毒NA的荧光密度来确定化合物对流感病毒NA的抑制活性。结果:L20051117对NA的抑制活性高于AMMS607,且两者对甲型流感病毒NA抑制作用均略优于对乙型流感病毒NA的抑制作用。结论:通过体外测定L20051117和AMMS607对流感病毒NA的抑制活性,初步确定L20051117和AMMS607对流感病毒有一定抑制作用,且L20051117的作用效果优于AMMS607。

关键词：流感病毒神经氨酸酶抑制剂

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人淋巴细胞H9体外感染HIV-1后APOBEC3G mRNA水平的监测

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军事医学科学院院刊 2009年第4期33卷 308-310,343页

作者：刘永健李林鲍作义刘思扬庄道民李韩平李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:观察人淋巴细胞H9体外感染HIV-1后,在其细胞内APOBEC3G蛋白水平降低的同时,APOBEC3GmRNA的水平是否也下降,阐明HIV-1抵抗APOBEC3G蛋白抗病毒作用的机制。方法:H9细胞感染HIV-1后,在不同时间点收集细胞和培养上清,提取细胞总RNA,应... 详细信息

目的:观察人淋巴细胞H9体外感染HIV-1后,在其细胞内APOBEC3G蛋白水平降低的同时,APOBEC3GmRNA的水平是否也下降,阐明HIV-1抵抗APOBEC3G蛋白抗病毒作用的机制。方法:H9细胞感染HIV-1后,在不同时间点收集细胞和培养上清,提取细胞总RNA,应用实时定量PCR检测APOBEC3G mRNA的水平。检测上清液的HIV-1 p24抗原含量验证H9细胞是否感染了HIV-1。结果:(1)采用??CT相对定量PCR方法检测APOBEC3G mRNA水平,其准确性高于94%。(2)在体外水平,H9细胞在感染HIV后,APOBEC3G mRNA水平没有显著变化(P>0.05)。结论:HIV-1可能主要通过降低APOBEC3G蛋白的水平而抵抗其抗病毒作用,这比通过降低mRNA水平来抵抗APOBEC3G的抗病毒作用更为快速、有效。

关键词： HIV-1 APOBEC3G mRNA水平

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细胞自噬在病原体感染过程中的作用研究进展

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军事医学科学院院刊 2009年第5期33卷 469-472页

作者：章晟于长明殷瑛陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071

细胞自噬是一种通过降解蛋白质和细胞器维持细胞内平衡的细胞机制。细胞自噬具有很多重要的生理功能,包括清除病原体的感染。但是由于细胞自噬在进化过程中具有高度的保守性,某些病原体通过进化,具有逃避细胞自噬的能力,甚至利用细胞自... 详细信息

细胞自噬是一种通过降解蛋白质和细胞器维持细胞内平衡的细胞机制。细胞自噬具有很多重要的生理功能,包括清除病原体的感染。但是由于细胞自噬在进化过程中具有高度的保守性,某些病原体通过进化,具有逃避细胞自噬的能力,甚至利用细胞自噬为病原体复制和发育提供有利条件。本文综述了细胞自噬与病原体相互作用的研究进展。

关键词：细胞自噬病原体细胞自噬相关基因

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炭疽芽孢杆菌A16R株无菌培养滤液的蛋白质组学分析

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军事医学科学院院刊 2009年第1期33卷 6-9,13页

作者：董梅庄汉澜王希良军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:初步分析由我国炭疽疫苗株A16R所生产的无菌培养滤液中的主要成分。方法:运用免疫蛋白质组学的手段,从炭疽A16R疫苗株无菌培养滤液的二维凝胶电泳中选择与保护性抗体结合和不与该血清结合但丰度高的蛋白质点,进行质谱鉴定和信号肽... 详细信息

目的:初步分析由我国炭疽疫苗株A16R所生产的无菌培养滤液中的主要成分。方法:运用免疫蛋白质组学的手段,从炭疽A16R疫苗株无菌培养滤液的二维凝胶电泳中选择与保护性抗体结合和不与该血清结合但丰度高的蛋白质点,进行质谱鉴定和信号肽分析。结果:共选择73个点,从炭疽芽孢杆菌数据库中鉴定出66个。在66个点中,有43个点与保护性血清结合;23个为高丰度蛋白,不与该血清结合。在与保护性血清结合的43个点中,13个点为不同大小的PA分子,其中相对分子质量83×103和63×103占主导,相对分子质量较小的片段仅4个。其余成分包括炭疽表面蛋白EA1、Sap、胶原黏附蛋白、伴侣分子DnaK等。结论:我们制备的炭疽无菌培养滤液中含有PA成分,PA是炭疽疫苗的重要保护性抗原。但PA以外的其他成分在抗炭疽免疫中起何种作用,是否参与诱发机体免疫应答有待进一步研究。

关键词：炭疽炭疽疫苗 A16R株无菌培养滤液二维凝胶电泳免疫蛋白质组学

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