检索结果-内蒙古大学图书馆

军事医学 2015年第9期39卷 677-681,687页

作者：范艳晓周亚洲冯娜汪琼毕玉晶韩延平杨瑞馥王效义安徽医科大学合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的制备鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)重组纤溶酶原激活剂(Pla)蛋白,为研究鼠疫菌蛋白之间相互作用和鼠疫的免疫学诊断奠定基础。方法应用PCR从鼠疫菌基因组中扩增pla基因,将其克隆到p ET28a表达载体中;转化大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表... 详细信息

目的制备鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)重组纤溶酶原激活剂(Pla)蛋白,为研究鼠疫菌蛋白之间相互作用和鼠疫的免疫学诊断奠定基础。方法应用PCR从鼠疫菌基因组中扩增pla基因,将其克隆到p ET28a表达载体中;转化大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达;SDS-PAGE电泳检测表达结果;应用8 mol/L尿素将包涵体变性,梯度稀释透析法将其复性,SDS-PAGE电泳和Western印迹检测目的蛋白;奶粉平板法检测纤溶酶原激活剂活性。结果与结论琼脂糖凝胶电泳和测序结果证明表达质粒构建成功;SDS-PAGE电泳结果表明Pla蛋白以包涵体形式表达,表达产物主要为目的蛋白,且目的蛋白的表达量较高;包涵体经变性、复性得到了电泳纯Pla蛋白,并具有纤溶酶原激活剂活性。该研究提供了一种简单、快速、高效制备具有活性的Pla蛋白的方法。

关键词：鼠疫耶尔森菌纤维蛋白酶原激活剂表达纯化

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在入境船舶上采获库蠓属一新种及一中国新纪录种(双翅目:蠓科)

在入境船舶上采获库蠓属一新种及一中国新纪录种(双翅目:蠓科)

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第六届媒介生物可持续控制国际论坛

作者：聂维忠聂晨辉刘恩东虞以新秦皇岛出入境检验检疫局河北秦皇岛066002 秦皇岛市农业局河北秦皇岛066004 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京 100071

该文报道了在秦皇岛港检疫锚地停泊的来自印度经停日本的一艘入境船舶上捕获的输入性库蠓一新种—远来库蠓(Culicoides abditus Yu and Nie,***.).该新种翅面明斑多而形态不规则,径2室全暗且其端明斑大,前抵翅前缘后覆中1脉,在其后及下... 详细信息

该文报道了在秦皇岛港检疫锚地停泊的来自印度经停日本的一艘入境船舶上捕获的输入性库蠓一新种—远来库蠓(Culicoides abditus Yu and Nie,***.).该新种翅面明斑多而形态不规则,径2室全暗且其端明斑大,前抵翅前缘后覆中1脉,在其后及下方明斑显著,但径-中横脉暗色,沿中脉有明带;中足第1跗节明显长,其TR3.24等特征可区别于其他已知库蠓种类.同时在该轮上采获一中国新纪录种—亚心库蠓(Culicoides pseudcoriger Wirth and Hubert,1989),以及斑背阿蠓[Alluaudomyia marmoratus(Carter&Macfie,1921)]和尖喙库蠓(Culicoides oxystoma Kieffer,1910)等输入性蠓类.

关键词：病媒生物输入性库蠓卫生检疫生物安全

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在来自澳大利亚的一艘进口动物船上采获输入性蚋属Morops亚属未定种活蚋(双翅目:蚋科)

在来自澳大利亚的一艘进口动物船上采获输入性蚋属Morops亚属未定...

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第六届媒介生物可持续控制国际论坛

作者：聂维忠聂晨辉赵彬刘恩东安继尧秦皇岛出入境检验检疫局河北秦皇岛066002 秦皇岛市农业局河北秦皇岛066004 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

2014年5月2日在秦皇岛港检疫锚地停泊的一艘来自澳大利亚维多利亚州的波特兰港(Port of Portland)的运载进口奶牛的入境船舶新加坡籍"吉布雷快车"(*** EXPRESS)轮上采获一只活的输入性蚋类雌虫.经鉴定,根据该蚋虫标本的中胸... 详细信息

2014年5月2日在秦皇岛港检疫锚地停泊的一艘来自澳大利亚维多利亚州的波特兰港(Port of Portland)的运载进口奶牛的入境船舶新加坡籍"吉布雷快车"(*** EXPRESS)轮上采获一只活的输入性蚋类雌虫.经鉴定,根据该蚋虫标本的中胸侧膜、中胸下侧片和爪基齿等形态结构,符合蚋属Morops亚属的特征.因仅采获一只蚋类雌虫,且无蛹的标本,因此未定种名,暂命名为蚋属Morops亚属未定种.现将该蚋类雌虫的形态学特征予以描述,以供同道者研究.标本保存于北京军事医学科学院医学昆虫馆.经查阅资料和咨询专家,了解到蚋科蚋属Morops亚属的蚋类为澳大利亚特有种类,仅发现于澳大利亚东南部地区.而该轮始发港澳大利亚的波特兰港(Port of Portland)即位于该地区,所装载的奶牛也来自附近区域.综上所述基本可以判断该蚋虫是由该轮白澳大利亚携带而来.同时在该轮上还采获大量输入性蚊类、蠓类和吸血蝇类.提示应高度重视入境船舶特别是运载动物的入境船舶携带输入性蚋类等病媒生物入侵的危害,确保国门生物安全.

关键词：病媒生物蚋类雌虫形态学特征卫生检疫生物安全

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上转发光技术快速检测尿液中氯胺酮

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刑事技术 2016年第2期41卷 103-106页

作者：张凯罗海峰胡秋实于莉林长青杨笑熳周蕾天津市公安局禁毒总队天津300240 北京热景生物技术有限公司北京102600 宁夏大学银川750021 中海智(北京)科技有限公司北京100027 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的利用上转发光免疫层析技术（UPT-LF）建立一种可在现场快速定量检测尿液中氯胺酮（Ketamine,KET）的方法并对其进行系统评价。方法利用竞争法免疫层析原理,以上转发光材料（UCP）作为生物示踪物,建立快速检测尿液中KET含量的上转发... 详细信息

目的利用上转发光免疫层析技术（UPT-LF）建立一种可在现场快速定量检测尿液中氯胺酮（Ketamine,KET）的方法并对其进行系统评价。方法利用竞争法免疫层析原理,以上转发光材料（UCP）作为生物示踪物,建立快速检测尿液中KET含量的上转发光免疫层析定量检测方法（KET-UPT-LF）,并通过专用的便携UPT生物传感器分析进而计算出氯胺酮浓度。通过系列浓度标准品检测评价其敏感性、精密性及线性响应。收集经LC-MS鉴定的现场尿液样本,同时进行KET-UPT-LF及胶体金的检测,一方面通过与胶体金定性检测结果的比较来评价KET-UPT-LF对于实际尿液样本中KET的定性检测能力,另一方面通过与LC-MS的定量检测结果比较来评价KET-UPT-LF定量检测性能。结果通过对系列浓度标准品检测结果分析,KET-UPT-LF敏感性为93.75 ng/m L,线性范围为93.75~6 000 ng/m L（r=-0.99448,P〈0.0005）。在现场样品检测评价中,同一样本的KET-UPT-LF和胶体金结果在定性分析,其结果是一致的。KET-UPT-LF与定量确证方法 LC-MS的定量检测结果经t检验无显著差异。结论本研究建立的氯胺酮上转发光免疫层析定量检测方法（KET-UPT-LF）,在满足胶体金等快筛试剂快速简便的基础上,进一步实现了现场快速定量检测,且用户友好性优于LC-MS等定量确证方法,为现场快速定量检测尿液中的毒品提供了技术保障。

关键词：上转发光技术免疫层析氯胺酮快速定量检测尿液

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一种用于生物气溶胶检测的微环境密闭舱室的研制

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军事医学 2015年第1期39卷 52-55页

作者：李娜温占波杨文慧王洁胡凌飞张柯李劲松军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室国家生物防护装备工程技术中心北京100071

目的研制一种具备气流控制和温湿度检测功能的微环境密闭舱室用于生物气溶胶检测研究。方法利用风速传感器、温湿度传感器、电动调节阀、管道高效过滤器和真空泵组成控制系统,解决气流流向控制、温度补偿技术、压力控制和气溶胶均匀分... 详细信息

目的研制一种具备气流控制和温湿度检测功能的微环境密闭舱室用于生物气溶胶检测研究。方法利用风速传感器、温湿度传感器、电动调节阀、管道高效过滤器和真空泵组成控制系统,解决气流流向控制、温度补偿技术、压力控制和气溶胶均匀分布技术。利用Fluent软件对该密闭舱室气溶胶浓度分布状况进行数值模拟,并测试不同位置的气溶胶浓度。结果该微环境密闭舱室由一个气密舱和一个控制柜组成,控制柜采用单片机控制,并为气密舱提供送风、排风和温湿度调控,设有单独排风模式和自循环送排风模式,且舱内保持着负压状态。数值模拟结果表明,在微环境密闭舱室内生成气溶胶5 min后,气溶胶粒子分布于整个舱室,底部气流可到达舱室上方,舱室内气溶胶浓度分布基本一致。结论该微环境密闭舱室以负压状态运行,能够避免生物气溶胶泄露,气溶胶浓度分布比较均匀,适用于进行生物气溶胶检测研究。

关键词：生物气溶胶微环境密闭舱室

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QseBC双组分调控系统对伤寒沙门菌动力的调节作用

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军事医学 2015年第5期39卷 357-359,367页

作者：吉滢倪斌张义全杨瑞馥黄新祥江苏大学医学院江苏镇江212013 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的研究伤寒沙门菌Qse BC双组分调控系统对伤寒菌动力的调节作用。方法比较伤寒沙门菌野生株(WT)、qse B缺陷株(Δqse B)和qse C缺陷株(Δqse C)动力差异,选取主要鞭毛基因flh D进行实时定量RT-PCR检测,同时检测qse B的表达水平;构建qs... 详细信息

目的研究伤寒沙门菌Qse BC双组分调控系统对伤寒菌动力的调节作用。方法比较伤寒沙门菌野生株(WT)、qse B缺陷株(Δqse B)和qse C缺陷株(Δqse C)动力差异,选取主要鞭毛基因flh D进行实时定量RT-PCR检测,同时检测qse B的表达水平;构建qse B高表达株,比较其与空载体对照株动力和flh D表达差异。结果与WT相比,Δqse B动力无变化,Δqse C动力减弱;在Δqse C中,flh D表达量下调至约1/4而qse B表达上调;qse B高表达株动力较WT减弱,flh D表达下调。结论 qse BC双组分调控系统能调节伤寒菌动力和主要鞭毛基因flh D的表达;qse B高表达时可抑制细菌动力。

关键词：伤寒沙门菌 QseBC双组分系统动力

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环介导恒温扩增技术快速检测鼠疫耶尔森菌

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军事医学 2015年第11期39卷 868-872页

作者：冯娜周亚洲范艳晓汪琼毕玉晶韩延平杨瑞馥周育森王效义安徽医科大学合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的建立简单、快速环介导恒温扩增技术(LAMP)检测鼠疫耶尔森菌的方法。方法基于鼠疫菌染色体上特异的核酸序列3a设计引物;应用浊度仪和目视法对反应结果进行检测;通过对鼠疫菌和其他近源菌同时进行检测评价方法的特异性;通过对不同稀... 详细信息

目的建立简单、快速环介导恒温扩增技术(LAMP)检测鼠疫耶尔森菌的方法。方法基于鼠疫菌染色体上特异的核酸序列3a设计引物;应用浊度仪和目视法对反应结果进行检测;通过对鼠疫菌和其他近源菌同时进行检测评价方法的特异性;通过对不同稀释浓度的鼠疫菌DNA模板进行LAMP和PCR检测以确定方法的灵敏度。结果用建立的LAMP法对与鼠疫菌近源30种其他菌株进行扩增,结果均为阴性,该方法具有很高的特异性。LAMP法检测鼠疫菌DNA的灵敏度可达到20 pg,比常规PCR法高10倍。检测反应在25 min以内完成。结论该方法具有快速、灵敏、特异、操作简单的特点,有望发展成为现场快速检测鼠疫菌的有效手段。

关键词：鼠疫耶尔森菌环介导恒温扩增技术检测

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鼠疫耶尔森菌201株和201△pCD1株蛋白表达谱比较研究

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军事医学 2015年第5期39卷 348-353页

作者：刘红胜郭景玉冯尔玲王效义王恒樑宋亚军朱力安徽大学生命科学学院合肥230011 军事医学科学院生物工程研究所北京100071 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的分析缺失编码Ⅲ型分泌系统的大质粒p CD1对鼠疫耶尔森菌蛋白质表达谱的影响,探索鼠疫菌的潜在致病机制,为鼠疫疫苗研制提供新线索。方法通过双向电泳与质谱分析相结合的方法,比较鼠疫菌在26℃和37℃不同培养温度下,全菌蛋白表达谱差... 详细信息

目的分析缺失编码Ⅲ型分泌系统的大质粒p CD1对鼠疫耶尔森菌蛋白质表达谱的影响,探索鼠疫菌的潜在致病机制,为鼠疫疫苗研制提供新线索。方法通过双向电泳与质谱分析相结合的方法,比较鼠疫菌在26℃和37℃不同培养温度下,全菌蛋白表达谱差异,鉴定差异蛋白并对其功能进行初步分析。结果成功分离并鉴定了鼠疫菌201株和201△p CD1缺失突变株中的差异蛋白,其中26℃条件下鉴定到24个差异蛋白,37℃条件下鉴定到25个差异蛋白,内含7个由p CD1质粒编码的蛋白。结论通过比较蛋白质组学研究,发现大质粒p CD1缺失后,多种染色体编码蛋白的丰度发生了显著变化,暗示大质粒能调控染色体编码基因的表达。

关键词：耶尔森菌,鼠疫 Ⅲ型分泌系统电泳,凝胶,双向蛋白表达谱质谱分析法

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致倦库蚊卵黄羧肽酶基因与溴氰菊酯抗性关系的研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2015年第4期22卷 212-216页

作者：刘钦梅李春晓刁晓平廖承红韩谦赵彤言海南大学农学院海口570228 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

本文通过对不同抗性株致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus卵黄羧肽酶基因（Vitellogeniccarboxypeptidase,VCP）表达量的比较,探讨VCP基因与溴氰菊酯抗药性的相关性.通过幼虫生物测定方法,分别得到致倦库蚊敏感株、野外株和抗性株... 详细信息

本文通过对不同抗性株致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus卵黄羧肽酶基因（Vitellogeniccarboxypeptidase,VCP）表达量的比较,探讨VCP基因与溴氰菊酯抗药性的相关性.通过幼虫生物测定方法,分别得到致倦库蚊敏感株、野外株和抗性株,半数致死浓度分别为0.00057、0.38900和42.26250 mg/L.采用SYBR荧光定量方法,以致倦库蚊核糖体蛋白L8（ribosomal protein L8）基因作为内参,获得VCP基因在致倦库蚊敏感株、野外株和抗性株校正后（拷贝/l×109RPL8）表达量分别为5.80×10 7、4.53×107、3.07×10 7.致倦库蚊敏感株、野外株和抗性株的抗药性从低到高,而VCP基因表达量却是从高到低,推测两者之间存在着负相关关系.进一步推测VCP基因为致倦库蚊抗性相关的新基因,为研究致倦库蚊的抗药性提供了新的方向.

关键词：致倦库蚊抗药性卵黄羧肽酶基因

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蚊虫RNAi显微注射方法的建立

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寄生虫与医学昆虫学报 2015年第4期22卷 233-237页

作者：吴群李春晓廖承红韩谦赵彤言海南大学农学院海口570228 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

本文构建了蚊虫显微注射方法.以致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus成蚊为注射对象,从不同麻醉方法对蚊虫进行固定、注射蚊虫身体不同部位、注射剂量等方面进行优化来构建最佳显微注射方案.结果显示蚊虫冰冻（-30℃）4、5、7、10 ... 详细信息

本文构建了蚊虫显微注射方法.以致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus成蚊为注射对象,从不同麻醉方法对蚊虫进行固定、注射蚊虫身体不同部位、注射剂量等方面进行优化来构建最佳显微注射方案.结果显示蚊虫冰冻（-30℃）4、5、7、10 min后蚊虫成活率分别为98.97％、89.63％、83.50％、79.87％,4 min麻醉效果最佳;对蚊虫充CO2气体持续0.5、1、2、4 min后蚊虫成活率均为100％;注射剂量为0.7～0.8 μL时可以明显看出蚊虫腹部变大;正对胸部腹面注射蚊虫的成活率67.81％,低于从胸部侧面注射成活率93.85％.结果表明选取羽化3～5d并断糖水4h蚊虫于-30℃冰冻4 min后放置于冰盒上,利用微量注射器从蚊虫胸部侧面注入0.7 ～0.8 μL dsRNA溶液是最佳的注射方法..

关键词：微量注射致倦库蚊成蚊

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