检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽医科大学学报 2014年第11期49卷 1582-1586页

作者：王德慧谭林林王琴陈芳红李涛王慧安徽医科大学军事医学科学院微生物流行病研究所微生物组学与生物信息学研究室合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的验证艰难梭菌鞭毛帽蛋白FliD的黏附细胞活性以推测其在艰难梭菌感染中的作用,并鉴定其抗原性以测试其应用于候选艰难梭菌疫苗组分的可能性。方法 PCR获取VPI 10463全长fliD基因,构建pET-22b-fliD原核表达质粒,转化至BL21（DE3）中,... 详细信息

目的验证艰难梭菌鞭毛帽蛋白FliD的黏附细胞活性以推测其在艰难梭菌感染中的作用,并鉴定其抗原性以测试其应用于候选艰难梭菌疫苗组分的可能性。方法 PCR获取VPI 10463全长fliD基因,构建pET-22b-fliD原核表达质粒,转化至BL21（DE3）中,诱导表达,Ni2＋亲和层析纯化,进行N端测序验证。蛋白3次皮下免疫大耳白兔后间接ELISA法检测其血清特异IgG水平并鉴定抗原性。间接免疫荧光染色后流式细胞术检测黏附Vero细胞能力。结果 VPI10463的fliD基因钓取成功,与GenBank公布的其他9株艰难梭菌的fliD基因相似度在89%～100%。pET-22b-fliD表达质粒构建成功,表达蛋白大小为56 ku,N端测序序列为MSSIS,与预期一致。一步纯化得到的蛋白纯度为99%以上。ELISA检测3次免疫后效价达到105。用流式细胞术检测其可以黏附在Vero细胞表面。结论构建的pET-22bfliD表达质粒成功表达FliD,具有黏附细胞活性,在艰难梭菌感染过程中起黏附因子作用,其具有较高的抗原性可以作为预防艰难梭菌感染的候选抗原之一。

关键词：艰难梭菌鞭毛帽蛋白FliD 重组表达流式细胞术黏附因子

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猪链球菌H因子结合蛋白截短体的表达、纯化及其结合人血清IgG的活性分析

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第5期30卷 537-541页

作者：李雪琴刘鹏骈亚亚郑玉玲姜永强袁媛霍春月安徽医科大学研究生学院安徽合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 首都医科大学燕京医学院北京101300

目的构建带His标签的2型猪链球菌H因子结合蛋白(Fhb)截短表达片段Fhb-N(45-344aa)和Fhb-C(345-664aa)的重组质粒,并在大肠杆菌中表达,获得高纯度的重组蛋白,鉴定其与人血清IgG(hIgG)结合的活性。方法以05ZYH33基因组为模板并设计引物扩... 详细信息

目的构建带His标签的2型猪链球菌H因子结合蛋白(Fhb)截短表达片段Fhb-N(45-344aa)和Fhb-C(345-664aa)的重组质粒,并在大肠杆菌中表达,获得高纯度的重组蛋白,鉴定其与人血清IgG(hIgG)结合的活性。方法以05ZYH33基因组为模板并设计引物扩增目的片段,构建His-Fhb-N和His-Fhb-C重组表达质粒,利用亲和层析纯化目的蛋白并用Western blot法进行验证。蛋白G亲和层析柱从健康人血清中纯化人IgG(hIgG),Western blot法和生物膜干涉(BLI)鉴定和分析His-Fhb与hIgG结合的活性。结果成功构建了带His标签的原核表达质粒并获得了His-Fhb-N和His-Fhb-C截短表达蛋白,验证出Fhb特异性地与hIgG结合,且结合区域位于Fhb-N(45-344aa)。结论 Fhb能够结合hIgG,结合区域位于Fhb-N。

关键词： 2型猪链球菌 Fhb 原核表达人血清IgG

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埃博拉病毒病流行病学

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浙江大学学报（医学版） 2014年第6期43卷 621-645页

作者：杨兴娄葛行义胡犇石正丽张永振方立群姚宏武曹务春卢珊中国科学院武汉病毒研究所中国疾病预防控制中心传染病预防控制所军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

埃博拉病毒为自然疫源性病原，其引起的埃博拉病毒病与人们食用野生哺乳动物或与其密切接触相关。在自然界埃博拉病毒可以感染非人类灵长类和翼手目（蝙蝠）动物，而自然或实验感染埃博拉病毒能引起非人类灵长类动物死亡，因此蝙蝠被认... 详细信息

埃博拉病毒为自然疫源性病原，其引起的埃博拉病毒病与人们食用野生哺乳动物或与其密切接触相关。在自然界埃博拉病毒可以感染非人类灵长类和翼手目（蝙蝠）动物，而自然或实验感染埃博拉病毒能引起非人类灵长类动物死亡，因此蝙蝠被认为是埃博拉病毒的自然宿主。埃博拉病毒可以在动物之间、动物与人之间、人与人之间传播。接触传播是埃博拉病毒主要传播方式，医源性传播也是人感染埃博拉病毒的途径之一，其是否能经气溶胶传播还有待于进一步研究证实。人类对埃博拉病毒普遍易感；埃博拉病毒病全年流行，无明显的季节性。至今埃博拉病毒的疫源地还仅局限于非洲，其他大陆出现的病例为输入性病例。埃博拉病毒病自1976年首次发现至今（截至2014年12月17日）已在非洲发生25次人类疫情，共报告21031例患者，死亡8537例。2013年12月前发生的23次疫情主要发生于赤道10°线内的5个非洲国家，包括苏丹（南部地区）、加蓬、刚果（布）、刚果（金）和乌干达；2013年12月始于西非的疫情是发现该病以来规模最大、覆盖范围最广的一次疫情，截至2014年12月17日，疫区已涉及利比里亚、几内亚、塞拉利昂、尼日利亚、马里、塞内加尔、美国、西班牙8个之前从未报道人类埃博拉病毒病疫情的国家，累计发病18603例，死亡6915例。此外，2014年在刚果（金）也出现了一次埃博拉病毒病的暴发疫情，发病69例，死亡49例。除非洲之外，其他地区也有实验室感染和非人类灵长类动物疫情的报道。到目前为止，尽管中国尚无感染埃博拉病毒的病例报道，但存在输入埃博拉病毒病的潜在风险。埃博拉病毒病暴发流行是卫生问题同时也是社会问题。生物和生态因素导致了病毒在丛林中的出现，而社会政治经济环境则决定了埃博拉病毒病的发生是一到两个孤立的病例还是一场大范围的持续暴发。

关键词：埃博拉病毒传染病/流行病学公共卫生工作风险调节埃博拉病毒病疾病监测

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产学研用结合引领生物医药产业发展——稀土资源在生物医药领域的科技创新

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中国科技产业 2015年第9期 73-73页

作者：周蕾军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

在门捷列夫的元素周期表里,有一片神秘的由17种金属元素组成的区域,这一区域中的元素在自然界中含量稀少,又常以氧化物的＂土＂颗粒状态存在,因而被称为＂稀土＂。别看＂稀土＂这个名字很不起眼,当今尖端武器、激光制导、新能源开发、... 详细信息

在门捷列夫的元素周期表里,有一片神秘的由17种金属元素组成的区域,这一区域中的元素在自然界中含量稀少,又常以氧化物的＂土＂颗粒状态存在,因而被称为＂稀土＂。别看＂稀土＂这个名字很不起眼,当今尖端武器、激光制导、新能源开发、汽车混合动力等新技术产物,无一不与稀土紧密相联。我国得天独厚稀土矿石约占世界总储量43%,占世界稀土市场98%的份额,但是长期以来始终局限于低端原料出口,由此造成了宝贵资源的极大浪费。

关键词：稀土资源生物医药领域能源开发纳米材料激光制导生物应用高附加值利用夜空下传染病防控临床急诊

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人腺病毒带来的威胁：中国是否需要制定以疫苗接种为主的预防策略

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中华预防医学杂志 2014年第12期48卷 1030-1034页

作者： Benjamin D.Anderson 马麦卷马蒙蒙陆家海 Gregory C.Gray Duke Infectious Diseases Duke Global Health InstituteDuke MedicineDurhamNC 27710USA 病原微生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所中山大学公共卫生学院

全球范围内，人腺病毒是常见的导致呼吸道和肠道疾病暴发的病原体。中国人口超过13亿，有较长的人腺病毒流行与暴发记录史。中国第1次人腺病毒感染事件发生于1958年冬季，主要在北京和长春市的6个月至2岁的儿童中暴发了病毒性肺炎，造成... 详细信息

全球范围内，人腺病毒是常见的导致呼吸道和肠道疾病暴发的病原体。中国人口超过13亿，有较长的人腺病毒流行与暴发记录史。中国第1次人腺病毒感染事件发生于1958年冬季，主要在北京和长春市的6个月至2岁的儿童中暴发了病毒性肺炎，造成了16．6％～33．3％的感染儿童死亡，后确认为人腺病毒感染［1－2］。

关键词：人腺病毒中国人口预防策略疫苗接种腺病毒感染疾病暴发儿童死亡病毒性肺炎

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肺炎克雷伯菌CRP对kfuABC操纵子的转录调控机制研究

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重庆医科大学学报 2014年第9期39卷 1197-1201页

作者：杨世亚张义全王丽杨瑞馥周冬生李迎丽邱景富重庆医科大学公共卫生与管理学院营养与食品卫生教研室重庆400016 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:利用分子生物学实验研究肺炎克雷伯菌环磷酸腺苷受体蛋白(cAMP receptor protein,CRP)对kfuABC操纵子的转录调控机制。方法:设计相关跨基因引物,用Real-time PCR方法验证kfuABC的转录结构。以肺炎克雷伯菌野生株NTUHK2044(wild typ... 详细信息

目的:利用分子生物学实验研究肺炎克雷伯菌环磷酸腺苷受体蛋白(cAMP receptor protein,CRP)对kfuABC操纵子的转录调控机制。方法:设计相关跨基因引物,用Real-time PCR方法验证kfuABC的转录结构。以肺炎克雷伯菌野生株NTUHK2044(wild type,WT)的总RNA为模板,利用引物延伸的方法寻找kfuA的转录起始位点,确定其核心启动子区。构建含kfuA启动子区DNA序列的LacZ重组质粒,并将其转入突变株△crp(肺炎克雷伯菌野生株基因组中crp基因敲除)和WT中,通过测定比较两株菌中β-半乳糖苷酶活性差异来判定CRP调控子对kfuA的调控关系;分别提取△crp和WT的总RNA,进一步采用实时定量Real-time PCR的方法验证CRP对kfuA的调控关系。通过凝胶阻滞实验验证His-CRP是否对kfuA启动子区具有直接的结合作用,进一步采用DNaseⅠ足迹实验确定具体的结合位点。结果:肺炎克雷伯菌kfuA、kfuB和kfuC位于同一个操纵子kfuABC;引物延伸实验结果显示kfuABC只有一个转录起始位点T;CRP能够结合到kfuABC启动子区-204到-171之间的碱基序列上(转录起始位点为+1),抑制其转录表达。结论:CRP能直接结合到kfuABC启动子区抑制其转录表达。

关键词：肺炎克雷伯菌环磷酸腺苷受体蛋白 kfuABC 转录调控

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耐环丙沙星鲍氏不动杆菌中喹诺酮耐药相关基因分析

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军事医学 2014年第7期38卷 510-513页

作者：周振江罗燕萍郭景玉吕瑞辰李艳君杨瑞馥黄新祥宋亚军江苏大学基础医学和医学技术学院江苏镇江212013 解放军总医院北京100853 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 海军总医院北京100048

目的研究鲍氏不动杆菌(ABA)临床分离株对喹诺酮类抗生素耐药机制。方法收集来自6家医院的114株耐环丙沙星ABA临床分离菌株,PCR扩增喹诺酮类抗生素结合靶基因(gyrA、gyrB、parC和parE),并进行序列测定,与参考菌株ATCC17978基因组进行比对... 详细信息

目的研究鲍氏不动杆菌(ABA)临床分离株对喹诺酮类抗生素耐药机制。方法收集来自6家医院的114株耐环丙沙星ABA临床分离菌株,PCR扩增喹诺酮类抗生素结合靶基因(gyrA、gyrB、parC和parE),并进行序列测定,与参考菌株ATCC17978基因组进行比对,确定其喹诺酮耐药决定区是否存在耐药相关突变;PCR扩增9个质粒介导的喹诺酮类耐药基因[qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、qepA、aac(6')-Ⅰb-cr、oqxA和oqxB],并对阳性扩增产物进行测序以确定基因亚型。结果绝大部分菌株(113/114,99.1%)的gyrA基因发生了Ser83Leu突变,其中67株菌(67/114,58.8%)同时发生了parC基因的Ser80Leu突变,以上两种突变是常见的喹诺酮耐药相关突变。与标准菌株进行比对,受试菌株gyrB基因Arg393Ser、Arg393Cys、Thr401Ala、Pro406Ser、Val430Phe、Cys440Ser和Gly480Arg突变率分别为95.6%、0.9%、96.5%、96.5%、100%、96.5%和96.5%;parE基因在7个位点发生了同义突变,突变率>96%。83.3%(95/114)的菌株中检出aac(6')-Ⅰb基因,但不存在"cr"突变,其余质粒介导的喹诺酮类耐药基因扩增均为阴性。结论该研究耐环丙沙星ABA中未发现质粒介导的喹诺酮耐药基因,在gyrB和parE基因中发现的突变可能与环丙沙星耐药性无关,实验菌株的环丙沙星耐药性主要与染色体上的喹诺酮耐药决定区GyrASer83Leu和ParC-Ser80Leu两种突变相关。

关键词：环丙沙星鲍氏不动杆菌喹诺酮耐药决定区质粒介导喹诺酮耐药

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含有CRISPR序列的噬菌体耐受菌的筛选

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安徽医科大学学报 2014年第6期49卷 833-836页

作者：滑玉会黄勇张志毅安小平米志强尹秀云陈建魁童贻刚安徽医科大学合肥 230032 军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京 100071 军事医学科学院附属医院临床检验科北京100071

人工设计合成规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)序列特异性引物,将从临床分离的大肠埃希菌株作为模板,采用PCR扩增方法筛选含有CRISPR系统的大肠埃希菌;利用噬菌斑法从医院未经消毒处理的污水中分离大肠埃希菌噬菌体,经过PEG沉淀的方法... 详细信息

人工设计合成规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)序列特异性引物,将从临床分离的大肠埃希菌株作为模板,采用PCR扩增方法筛选含有CRISPR系统的大肠埃希菌;利用噬菌斑法从医院未经消毒处理的污水中分离大肠埃希菌噬菌体,经过PEG沉淀的方法浓缩得到高滴度的噬菌体,再用该筛选噬菌体感染上述含有CRISPR的大肠埃希菌以筛选耐受该噬菌体的大肠埃希菌菌株。最后从70株大肠埃希菌中筛选到42株含有CRISPR序列的菌株,然后采用噬菌斑法分离到1株大肠埃希菌*** 147-30的裂解性噬菌体IME-EC1,在此基础上利用*** 147-30筛选到1株耐受噬菌体IME-EC1的大肠埃希菌菌株,命名为*** 147-30R1。

关键词： CRISPR系统大肠埃希菌噬菌体噬菌体耐受

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盐度和温度对副溶血弧菌运动能力的影响

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军事医学 2014年第12期38卷 962-964页

作者：董新波张义全杨瑞馥谢传晓周冬生安徽农业大学生命科学学院合肥230000 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 江苏大学医学院江苏镇江212013

目的研究盐度和温度调节副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的运动能力。方法将副溶血弧菌接种于不同盐度(0.5%、1.0%、2.0%和4.0%)的爬动和泳动平板上,37℃静置培养4.5 h后,通过比较不同盐度条件菌苔直径的差异来判定盐度对运动能力... 详细信息

目的研究盐度和温度调节副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的运动能力。方法将副溶血弧菌接种于不同盐度(0.5%、1.0%、2.0%和4.0%)的爬动和泳动平板上,37℃静置培养4.5 h后,通过比较不同盐度条件菌苔直径的差异来判定盐度对运动能力的影响。接种副溶血弧菌至含2.0%盐的爬动和泳动平板上,并分别置于37℃和26℃静止培养4.5 h后,通过比较不同温度下菌苔直径的差异来研究温度对运动能力的影响。结果与结论副溶血弧菌爬动不受盐度的影响,而其泳动与盐度呈正相关,2.0%时达到极值,4.0%时稍微下降;与26℃培养的结果相比,37℃培养时爬动和泳动均显著增强。这些结果表明盐度和温度能够调节副溶血弧菌的运动能力。

关键词：副溶血弧菌运动能力盐度温度

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DNA条形码研究进展

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寄生虫与医学昆虫学报 2014年第1期21卷 65-72页

作者：王刚董言德赵彤言军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

DNA条形码（ DNA Barcoding ）技术是一种新的物种识别方法，它是分子生物学和生物信息学相结合的产物。在最近几年里，该技术已成为生物分类学中引人注目的研究热点。这一概念认为，类似于商店里使用扫描仪读取条形码，对地球上每一种... 详细信息

DNA条形码（ DNA Barcoding ）技术是一种新的物种识别方法，它是分子生物学和生物信息学相结合的产物。在最近几年里，该技术已成为生物分类学中引人注目的研究热点。这一概念认为，类似于商店里使用扫描仪读取条形码，对地球上每一种生物通过快速分析其DNA中的一段基因（线粒体细胞色素c氧化酶Ⅰ亚基， mt COⅠ）加以识别。理论上， DNA条形码已被证明在生物分类鉴定中具有非常重要的作用，并推动了一系列相关学科的发展，但目前不同分类学家对其持的意见也不尽相同。本文综述了DNA条形码技术的产生、发展概况、原理与操作及其在分类中的应用，并概括了DNA条形码在应用于物种分类中可能存在的问题。

关键词： DNA条形码物种鉴定线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ亚基

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