检索结果-内蒙古大学图书馆

中华检验医学杂志 2005年第10期28卷 1102-1104页

作者：杨银辉军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 100071

同一种病毒不同分离株(变异株)之间核苷酸序列及抗原性之间的差异造成了各分离株间血清学反应性、致病性、毒力、对治疗的应答、流行区域及分布等的不同.因此，进一步研究病毒分型对流行病学调查、病毒毒力强弱的研究、不同亚型病毒特... 详细信息

同一种病毒不同分离株(变异株)之间核苷酸序列及抗原性之间的差异造成了各分离株间血清学反应性、致病性、毒力、对治疗的应答、流行区域及分布等的不同.因此，进一步研究病毒分型对流行病学调查、病毒毒力强弱的研究、不同亚型病毒特异疫苗的研制、病毒感染的自然历程及其持续感染在发病过程中的作用、病毒的演变过程、病毒与宿主的相互作用及临床治疗效果等有着十分重要的意义。

关键词：病毒分型基因分型方法临床治疗效果流行病学调查病毒毒力核苷酸序列流行区域不同亚型发病过程持续感染

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普氏立克次体120×10~3表面抗原的N端和C端重组蛋白免疫原性的研究

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军事医学科学院院刊 2005年第5期29卷 429-431,435页

作者：高宁温博海张军陈梅玲邱玲牛东升军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:评价普氏立克次体120×103表面抗原的N端和C端重组蛋白的免疫原性。方法:将纯化的N端和C端重组蛋白分别免疫小鼠,采用酶联免疫吸附试验和间接免疫荧光试验分析免疫小鼠的体液免疫应答水平;用MTT法评价小鼠脾淋巴细胞的增殖情况... 详细信息

目的:评价普氏立克次体120×103表面抗原的N端和C端重组蛋白的免疫原性。方法:将纯化的N端和C端重组蛋白分别免疫小鼠,采用酶联免疫吸附试验和间接免疫荧光试验分析免疫小鼠的体液免疫应答水平;用MTT法评价小鼠脾淋巴细胞的增殖情况,分析免疫小鼠的细胞免疫应答水平,并采用RT-PCR方法检测免疫小鼠脾淋巴细胞被重组蛋白刺激后细胞因子的表达。结果:N端和C端重组蛋白均诱导小鼠产生较高水平的特异性IgG抗体,诱导高水平的小鼠脾淋巴细胞增殖;经两种重组蛋白刺激的小鼠脾淋巴细胞均表达了IFN-γ和IL-2。结论:普氏立克次体120×103表面抗原的N端和C端重组蛋白具有良好的免疫原性,能够诱导机体产生高水平的体液免疫和细胞免疫应答,可作为流行性斑疹伤寒亚单位疫苗的候选蛋白。

关键词：普氏立克次体表面抗原重组蛋白免疫原性

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一株西尼罗病毒基因组cDNA亚克隆的构建与鉴定

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军事医学科学院院刊 2005年第5期29卷 424-428页

作者：李晓峰姜涛陈水平秦成峰于曼秦鄂德军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:构建我室保存的一株西尼罗病毒引进毒株(CH-01)基因组全长cDNA的亚克隆,为进一步构建该毒株的感染性全长cDNA克隆奠定基础。方法:根据CH-01病毒株基因组序列中含有的特异性酶切位点,利用DNAstar及O ligo6软件设计5对引物。以感染... 详细信息

目的:构建我室保存的一株西尼罗病毒引进毒株(CH-01)基因组全长cDNA的亚克隆,为进一步构建该毒株的感染性全长cDNA克隆奠定基础。方法:根据CH-01病毒株基因组序列中含有的特异性酶切位点,利用DNAstar及O ligo6软件设计5对引物。以感染细胞中的病毒RNA为模板,通过RT-PCR扩增出覆盖病毒基因组全长的5个cDNA片段,并分别将其克隆至pGEM-T easy载体,通过片段间共有的酶切位点进行连接,最终获得基因组5′和3′半分子,并分别通过序列测定加以鉴定。结果与结论:已构建出西尼罗病毒CH-01株基因组的5′和3′半分子,经酶切鉴定和序列测定表明所获得的cDNA克隆为该株病毒的特异性序列。

关键词：黄病毒西尼罗病毒 RT-PCR cDNA亚克隆

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Hendra病毒的实时PCR检测方法的建立

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军事医学科学院院刊 2005年第2期29卷 173-174,177页

作者：邓永强姜涛于曼陈水平秦成峰秦鄂德军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:建立针对Hendra病毒的敏感、特异和快速的实时PCR法,为Hendra病的早期诊断提供依据。方法:采用常规PCR法和实时PCR法分别对构建的Hendra病毒全长G基因的重组质粒DNA进行扩增,并比较两种方法的敏感性。结果与结论:应用常规PCR方法... 详细信息

目的:建立针对Hendra病毒的敏感、特异和快速的实时PCR法,为Hendra病的早期诊断提供依据。方法:采用常规PCR法和实时PCR法分别对构建的Hendra病毒全长G基因的重组质粒DNA进行扩增,并比较两种方法的敏感性。结果与结论:应用常规PCR方法可检测到100fg/μl的含Hendra病毒特异序列的重组质粒DNA,而实时PCR法则可检测到0.1fg/μl的DNA,后者的敏感性比常规PCR法的提高了1000倍,该方法不但操作上更加简便、快速,还可避免交叉污染,适于对Hendra病毒特异序列的检测。

关键词： Hendra病毒实时PCR 质粒

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肉毒神经毒素的作用机制及研究进展

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军事医学科学院院刊 2005年第6期29卷 563-566页

作者：孟露露荫俊军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

肉毒神经毒素(botu linum neurotoxins,BoNTs)是目前已知的毒力最强的毒素蛋白,它通过与神经肌肉接头处的神经元上的受体结合,抑制神经递质释放而引起松弛性麻痹,进而导致生物体死亡,是重要的生物恐怖剂之一。研究BoNT的作用机制,获得... 详细信息

肉毒神经毒素(botu linum neurotoxins,BoNTs)是目前已知的毒力最强的毒素蛋白,它通过与神经肌肉接头处的神经元上的受体结合,抑制神经递质释放而引起松弛性麻痹,进而导致生物体死亡,是重要的生物恐怖剂之一。研究BoNT的作用机制,获得具有中和活性的保护性抗体,对肉毒毒素中毒的防治具有重要意义。本文就BoNT的作用机制及近年来的研究进展作一综述。

关键词：肉毒神经毒素神经递质突触小泡

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HIV-1 B′亚型CNHN24毒株5′端和3′端长末端重复序列的测定及全基因组克隆的构建

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军事医学科学院院刊 2005年第6期29卷 512-515页

作者：王铮李韩平李林董华凰鲍作义刘思扬李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:对我国H IV-1B′亚型CNHN24毒株5′端和3′端长末端重复序列(LTR)进行扩增及测序并构建全基因组克隆。方法:利用PCR扩增出5′LTR和3′LTR片段;并利用高保真DNA聚合酶分别扩增出病毒全基因组的5′半分子和3′半分子DNA,然后依次将... 详细信息

目的:对我国H IV-1B′亚型CNHN24毒株5′端和3′端长末端重复序列(LTR)进行扩增及测序并构建全基因组克隆。方法:利用PCR扩增出5′LTR和3′LTR片段;并利用高保真DNA聚合酶分别扩增出病毒全基因组的5′半分子和3′半分子DNA,然后依次将其克隆入低拷贝载体pLG338。结果与结论:完成CNHN24毒株5′LTR和3′LTR的测序并提交至GenBank,其登录号分别为AY860947和AY894352,使CNHN24株成为具有完整全序列的H IV毒株;获得可以稳定传代的全基因组克隆质粒pCN24,利用此克隆转染293T细胞后可以产生恢复病毒。

关键词：人免疫缺陷病毒长末端重复序列全基因组克隆

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痘苗病毒检测方法的建立

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军事医学科学院院刊 2005年第3期29卷 272-274页

作者：段鸿元邓永强赵慧于曼李豫川严格秦鄂德军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:建立痘苗病毒的检测方法。方法:采用细胞病变法观察痘苗病毒感染的HeLa细胞,通过电镜直接观察病毒颗粒的形态特征,观察鸡胚绒毛尿囊膜上形成的痘斑并用分子生物学方法分析痘苗病毒HA基因片段。结果与结论:痘苗病毒感染HeLa细胞34h... 详细信息

目的:建立痘苗病毒的检测方法。方法:采用细胞病变法观察痘苗病毒感染的HeLa细胞,通过电镜直接观察病毒颗粒的形态特征,观察鸡胚绒毛尿囊膜上形成的痘斑并用分子生物学方法分析痘苗病毒HA基因片段。结果与结论:痘苗病毒感染HeLa细胞34h后出现典型细胞病变。在病毒感染细胞47h后的培养上清和胞浆中均可通过电镜观察到病毒颗粒。感染的鸡胚绒毛尿囊膜上出现痘斑。进一步采用PCR法扩增病毒的HA基因,RFLP限制性内切酶片段多态性分析和序列测定证明该序列与已知序列一致。所建立的痘苗病毒系列检测方法,为天花相关病毒的实验室诊断奠定了基础。

关键词：痘苗病毒诊断天花病毒

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新分离呼肠病毒BYD株生物学特性的研究

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军事医学科学院院刊 2005年第4期29卷 399-400,F0003页

作者：何君苏裕心朱虹宋立华黄如统端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

呼肠病毒为二十面体对称的双层衣壳结构,无包膜,能抵抗脂溶剂.完整的病毒颗粒直径为60～80 nm;其核酸为RNA,分节,由10个片段组成.目前人呼肠病毒分为3个不同的血清型,这3个血清型都能凝集人O型红细胞.该病毒国外研究较多,国内研究少见.

关键词：呼肠病毒 BYD株细胞敏感性试验抗酸性试验血凝试验病毒形态学

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应用AFLP方法对我国土拉弗菌基因分型的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第7期25卷 606-607页

作者：张芳刘玮何君端青张泮河杨红曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物安全国家重点实验室北京100071

土拉菌病又称"野兔热",是由土拉弗菌经患病野生动物、吸血昆虫或遭受污染的水或食物传播的一种自然疫源性疾病,呈世界性分布.其致病菌是革兰阴性胞内寄生菌,包括4种基因型.由于不同基因型在地理分布、毒性等方面存在较大差异... 详细信息

土拉菌病又称"野兔热",是由土拉弗菌经患病野生动物、吸血昆虫或遭受污染的水或食物传播的一种自然疫源性疾病,呈世界性分布.其致病菌是革兰阴性胞内寄生菌,包括4种基因型.由于不同基因型在地理分布、毒性等方面存在较大差异,基因分型研究一直是该领域的研究热点,而近年来随着16S rRNA的序列分析、随机引物扩增多态性(RAPD)、限制性片段长度多态性(RFLP)、扩增片段长度多态性(AFLP)等分子生物学方法在细菌分型中的应用,世界范围内许多地区的土拉弗菌株得到了很好的基因型鉴别,也对一些传统认识提出了新的质疑,如欧亚地区是否也存在致病性较强的A型菌株?事实上在1998年科学家们证实了这一疑问[1]。

关键词：基因分型土拉弗菌 AFLP 限制性片段长度多态性随机引物扩增多态性自然疫源性疾病不同基因型世界性分布土拉菌病

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贝氏柯克斯体被单核细胞吞噬及其在单核细胞内生长的初步研究

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中国人兽共患病杂志 2005年第11期21卷 940-944页

作者：李丽莉温博海张晶波邱玲陈梅玲牛东升军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨贝氏柯克斯体被单核细胞吞噬及其在单核细胞内生长的规律。方法将泛影葡胺梯度超速离心纯化的I相贝氏柯克斯体(强毒株)与体外培养人单核细胞(THP-1)相互作用,用免疫荧光染色和显微镜检查单核细胞内贝氏柯克斯体。用Gamma射线灭... 详细信息

目的探讨贝氏柯克斯体被单核细胞吞噬及其在单核细胞内生长的规律。方法将泛影葡胺梯度超速离心纯化的I相贝氏柯克斯体(强毒株)与体外培养人单核细胞(THP-1)相互作用,用免疫荧光染色和显微镜检查单核细胞内贝氏柯克斯体。用Gamma射线灭活贝氏柯克斯体作平行实验。结果在4 h内分析单核细胞的吞噬作用,发现单核细胞内灭活贝氏柯克斯体的数量迅速增加,而活立克次体的数量无明显变化。在第1-6d的实验周期内,单核细胞内灭活贝氏柯克斯体数逐渐减少,第5d近于完全消失;而活贝氏柯克斯体的数量从第4d开始逐渐增加。结论单核细胞吞噬活贝氏柯克斯体的效率明显低于对灭活贝氏柯克斯体的吞噬;活贝氏柯克斯体可以在人单核细胞内缓慢生长繁殖,而灭活贝氏柯克斯体则在单核细胞内逐渐被清除。

关键词：贝氏柯克斯体单核细胞吞噬感染

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