检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2006年第2期26卷 163-168页

作者：赵晓冬王翠娥吴小红李豫川曹军田严格李金凤军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的观察新疆出血热病毒感染乳鼠引起的病理学变化,建立病理学检测方法。方法分别经皮下与腹腔两种途径感染乳鼠,HE染色后观察引起的病理学变化,并分别应用免疫组化、RT-PCR以及透射电子显微镜对病毒抗原、核酸以及病毒粒子进行检测。... 详细信息

目的观察新疆出血热病毒感染乳鼠引起的病理学变化,建立病理学检测方法。方法分别经皮下与腹腔两种途径感染乳鼠,HE染色后观察引起的病理学变化,并分别应用免疫组化、RT-PCR以及透射电子显微镜对病毒抗原、核酸以及病毒粒子进行检测。结果乳鼠经两种不同途径接种病毒后均出现肝细胞的变性、坏死,并随时间延长逐渐加重。免疫组化可在肝细胞胞浆查见病毒抗原分布,透射电子显微镜下可在肝细胞胞浆内查见病毒粒子,RT-PCR可在心、肝、脾、肾以及脑组织内检测到病毒核酸。结论乳鼠对新疆出血热病毒敏感,经皮下与腹腔接种病毒均可致病;肝脏是新疆出血热病毒感染乳鼠的主要靶器官,主要病变为肝实质细胞的变性、坏死。结合免疫组化、透射电子显微镜与RT-PCR技术可对组织中的新疆出血热病毒进行检测与定位。

关键词：新疆出血热病毒乳鼠病理学

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SARS_CoV中国株基因组全长cDNA的构建及其恢复病毒的生物学性质

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微生物学报 2006年第6期46卷 922-927页

作者：韩剑峰姜涛陈水平于曼秦鄂德赵卓李晓峰秦成峰邓永强赵慧赵海龙李晓萸军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

严重急性呼吸综合征是SARS-CoV引起的一种重要新发传染病,其致病机制的研究对于防治该病十分必要。为了利用反向遗传学技术研究SARS-CoV的致病机制,将覆盖SARS-CoVBJ01株基因组全长的7个cDNA片段纯化后进行体外连接,构建基因组全长cDNA... 详细信息

严重急性呼吸综合征是SARS-CoV引起的一种重要新发传染病,其致病机制的研究对于防治该病十分必要。为了利用反向遗传学技术研究SARS-CoV的致病机制,将覆盖SARS-CoVBJ01株基因组全长的7个cDNA片段纯化后进行体外连接,构建基因组全长cDNA分子,以其为模板,使用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录,获得病毒RNA。用电穿孔转染法将转录体RNA导入VeroE6细胞,可观察到典型的SARS-CoV致细胞病变作用。对收获的恢复病毒采用RT-PCR方法进行鉴定,结果表明获得的恢复病毒与SARS-CoVBJ01株原病毒序列一致。以针对SARS-CoV的抗体对感染细胞作间接免疫荧光反应,证明获得了具有特异感染性的恢复病毒。同时用细胞病变法和空斑试验测定了恢复病毒及其亲本毒株的病毒滴度,结果表明二者在致病性上没有明显差异,恢复病毒具有与原型株相似的生物学特性。SARS-CoVBJ01株基因组全长cDNA的成功构建及对恢复病毒生物学性质的研究将为进一步探索SARS-CoV致病的分子机制及研制新型疫苗奠定良好的基础。

关键词： SARS-CoV BJ01株反向遗传学基因组全长cDNA 恢复病毒

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应用凝血反应检测杀鼠灵抗药性褐家鼠的可行性研究

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兽类学报 2006年第2期26卷 176-182页

作者：孙毅郭天宇董天义赵彤言 100071 北京军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室2004DAV00214 军事医学科学院微生物流行病研究所

为探讨凝血反应在鼠类抗药性检测中的应用前景,以褐家鼠为对象,在摄食实验基础上筛选抗药性褐家鼠,并在区分剂量12mg/kg作用下分析抗药性和敏感性褐家鼠的凝血能力的变化情况。结果显示,抗药性个体在区分剂量作用下,凝血酶活动度虽有所... 详细信息

为探讨凝血反应在鼠类抗药性检测中的应用前景,以褐家鼠为对象,在摄食实验基础上筛选抗药性褐家鼠,并在区分剂量12mg/kg作用下分析抗药性和敏感性褐家鼠的凝血能力的变化情况。结果显示,抗药性个体在区分剂量作用下,凝血酶活动度虽有所下降,下降幅度可达正常水平的17%,但在2～3d内可恢复到正常凝血水平;而敏感性褐家鼠的凝血酶下降到很低,且在随后不能恢复。另外,对褐家鼠凝血酶活动度的分布及其存活的关系研究也提示,区分剂量可促使凝血酶活动度的种群分布从单峰型向双峰型分化,其中敏感个体的凝血酶活动度在0～3.16之间,而抗药性个体则在17～100之间。并发现用药4d后的凝血酶活动度基本上可代表其未来的存活率,这提示了凝血反应与摄食实验结果的一致性。因此,以施药后4d凝血酶活动度PCA=17或INR=5.0作为阈值来区分抗药性和敏感性个体的凝血反应状况,进行家栖鼠抗药性测定是可行的。

关键词：凝血反应褐家鼠抗药性杀鼠灵检测

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LFn-PSCA融合蛋白的表达和生物活性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第10期26卷 929-932页

作者：于少洋易绍琼徐俊杰葛猛付玲于长明李冠霖陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的研究大肠杆菌中表达的炭疽毒素致死因子氨基端与前列腺干细胞抗原(PSCA)融合蛋白的生物活性。方法分别扩增炭疽毒素致死因子LF(lethal factor)N端254个氨基酸(LFn)的基因片段和PSCA氨基酸29～100的基因片段,将两片段先后克隆进分泌... 详细信息

目的研究大肠杆菌中表达的炭疽毒素致死因子氨基端与前列腺干细胞抗原(PSCA)融合蛋白的生物活性。方法分别扩增炭疽毒素致死因子LF(lethal factor)N端254个氨基酸(LFn)的基因片段和PSCA氨基酸29～100的基因片段,将两片段先后克隆进分泌型载体pAS22中,构建成表达质粒pAS-LFn-PSCA,在大肠杆菌中表达,并对融合蛋白进行纯化和活性检测。结果实现了融合蛋白LFn-PSCA的分泌型表达。纯化后纯度可达90％以上。体外试验显示LFn-PSCA对小鼠巨噬细胞无毒性,并保留了LFn与保护性抗原结合的活性。结论在大肠杆菌中实现了LFn-PSCA的分泌型表达,为继续进行以炭疽毒素为载体增强机体免疫应答的研究打下基础。

关键词：致死因子前列腺干细胞抗原融合蛋白

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我国HIV-1 B'亚型流行株vif基因序列特征及变异分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第8期26卷 743-746页

作者：李林刘永健鲍作义李韩平庄道民刘思扬李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的研究人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)B'亚型vif基因的变异特征,探讨其与HIV传播和致病性之间的关系。方法采集河南省部分HIV感染者的外周血,提取41例HIV感染者外周血淋巴细胞DNA,设计特异性引物扩增其前病毒基因组中的vif基因,对于扩... 详细信息

目的研究人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)B'亚型vif基因的变异特征,探讨其与HIV传播和致病性之间的关系。方法采集河南省部分HIV感染者的外周血,提取41例HIV感染者外周血淋巴细胞DNA,设计特异性引物扩增其前病毒基因组中的vif基因,对于扩增阳性的29例PCR产物进行vif区基因的测序及分析。结果29条vif基因的平均离散率是0．0328,突变主要集中于90～120、270 -302、372～405、450～470四个区域。Vif多肽链的90～93位和157～160位存在两个富含R和K带有强烈正电荷的亲水区,带正电荷的R或K交替出现,几乎没有其他的氨基酸残基。29个Vif多肽链有21条在90～93位存在R90 RKR93基序;有26条在157-160位存在K157 RRK160基序,29条序列在114位和133位存在两个在HIV-1和HIV-2以及SIV内保守的半胱氨酸(A)。结论vif在HIV-1基因组内具有相对保守性,其特征性区域和氨基酸基序对于保持Vif蛋白的功能是十分重要的。

关键词：人免疫缺陷病毒 vif基因

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以表位模拟肽为亲和靶标的肉毒毒素受体结合抑制剂的筛选及鉴定

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微生物学报 2006年第1期46卷 136-138页

作者：史晶王慧荫俊侯晓军军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

以设计合成的A型肉毒毒素表位模拟肽为亲和靶标,对噬菌体随机肽库进行筛选,寻找能与A型肉毒毒素表位模拟肽特异结合并能拮抗毒素毒性效应的分子,通过ELISA鉴定阳性克隆,并对鉴定的阳性克隆进行特异性分析及DNA测序。氨基酸序列同源性分... 详细信息

以设计合成的A型肉毒毒素表位模拟肽为亲和靶标,对噬菌体随机肽库进行筛选,寻找能与A型肉毒毒素表位模拟肽特异结合并能拮抗毒素毒性效应的分子,通过ELISA鉴定阳性克隆,并对鉴定的阳性克隆进行特异性分析及DNA测序。氨基酸序列同源性分析发现,针对P4、P5表位模拟肽获得了两条特异的结合序列,并通过动物保护实验在噬菌体展示肽水平对特异结合分子的毒素毒性拮抗效应进行了初步研究,初步证明结合肽对A型肉毒毒素有一定的保护作用。

关键词： A型肉毒毒素表位噬菌体肽文库

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第九届全军流行病学及第八届全军防生物危害医学专业学术会议通知

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中华流行病学杂志 2007年第6期28卷 575-575页

根据2007年度全军医学科技学术活动计划的安排,由全军流行病学专业委员会和全军防生物危害医学专业委员会共同主办,军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室承办的第九届全军流行病学及第八届全军防生物危...

根据2007年度全军医学科技学术活动计划的安排,由全军流行病学专业委员会和全军防生物危害医学专业委员会共同主办,军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室承办的第九届全军流行病学及第八届全军防生物危害医学专业学术会议定于2007年9月9-12日在杭州召开。

关键词：

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利用噬菌体随机肽库筛选可结合志贺毒素B亚单位的短肽序列

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微生物学报 2006年第5期46卷 749-752页

作者：包士中王慧荫俊杨慧盈史晶军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

以制备的重组志贺毒素B亚单位(StxB)为靶标,利用噬菌体展示亲和淘选技术,经4轮筛选,从随机十二肽库中筛选到与StxB结合的一批噬菌体克隆,对特异结合活性较高的27个噬菌体克隆的表面展示肽进行序列测定,其中A6序列出现16次,A9和A3序列分... 详细信息

以制备的重组志贺毒素B亚单位(StxB)为靶标,利用噬菌体展示亲和淘选技术,经4轮筛选,从随机十二肽库中筛选到与StxB结合的一批噬菌体克隆,对特异结合活性较高的27个噬菌体克隆的表面展示肽进行序列测定,其中A6序列出现16次,A9和A3序列分别出现2次和3次。为评价筛选克隆中和毒素毒性的能力,将展示肽出现频率最高的A6噬菌体克隆,体外与志贺毒素孵育进行动物试验,动物存活率达33.3%,表明毒素的毒性得到部分抑制,A6短肽可能发展成为志贺毒素的拮抗剂。

关键词：志贺毒素B亚单位噬菌体展示技术淘选毒性中和试验

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实时荧光定量PCR检测普氏立克次体

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中华流行病学杂志 2006年第11期27卷 963-967页

作者：杨晓陈梅玲温博海牛东升朱丽娜李青凤孙长俭军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的采用新型TaqMan-MGB探针建立检测普氏立克次体的实时荧光定量PCR方法。方法根据普氏立克次体外膜蛋白B的基因(ompB)序列设计引物和探针,以克隆的OmpB基因片段作DNA模板,在荧光定量PCR检测仪(ABI 7900型)上建立实时荧光定量检测方法... 详细信息

目的采用新型TaqMan-MGB探针建立检测普氏立克次体的实时荧光定量PCR方法。方法根据普氏立克次体外膜蛋白B的基因(ompB)序列设计引物和探针,以克隆的OmpB基因片段作DNA模板,在荧光定量PCR检测仪(ABI 7900型)上建立实时荧光定量检测方法。结果建立的定量标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0．999)；与巢式PCR相比较,荧光定量PCR检测敏感性是其100倍。用荧光定量PCR检测莫氏立克次体及其他相关立克次体和细菌DNA,检出结果均为阴性。用荧光定量PCR检测普氏立克次体感染的豚鼠血标本,某些样本检测为阳性,而用巢式PCR检测的结果均为阴性。结论研究中建立的检测普氏立克次体实时荧光定量PCR具有很高的特异性和敏感性,适合于快速检测样本中微量普氏立克次体DNA,可用作临床实验室快速确诊流行性斑疹伤寒。

关键词：流行性斑疹伤寒普氏立克次体实时定量PCR 外膜蛋白B基因

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第九届全军流行病学及第八届全军防生物危害医学专业学术会议通知

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中华流行病学杂志 2007年第7期28卷 682-682页

根据2007年度全军医学科技学术活动计划的安排，由全军流行病学专业委员会和全军防生物危害医学专业委员会共同主办，军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室承办的第九届全军流行病学及第八届全军防生物... 详细信息

根据2007年度全军医学科技学术活动计划的安排，由全军流行病学专业委员会和全军防生物危害医学专业委员会共同主办，军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室承办的第九届全军流行病学及第八届全军防生物危害医学专业学术会议定于2007年9月9—12日在杭州召开。

关键词：专业学术会议流行病学生物危害医学科技医学专业委员会军事医学科学院国家重点实验室病原微生物

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