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寄生虫与医学昆虫学报 2013年第2期20卷 90-95页

作者：朱小娟郭晓霞李春晓汪中明邢丹董言德阎婷苏建新王刚张恒端吴治明赵彤言安徽医科大学合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

本研究采用实时荧光定量PCR（FQ—PCR）方法，检测感染登革病毒C6／36细胞I～7d及感染埃及伊蚊1、3、5、7、9、11、13d后，病毒在细胞和蚊虫体内增殖的动态变化。结果显示，随着时间增加，登革病毒增殖出现规律性变化。登革病毒在感染细... 详细信息

本研究采用实时荧光定量PCR（FQ—PCR）方法，检测感染登革病毒C6／36细胞I～7d及感染埃及伊蚊1、3、5、7、9、11、13d后，病毒在细胞和蚊虫体内增殖的动态变化。结果显示，随着时间增加，登革病毒增殖出现规律性变化。登革病毒在感染细胞1～2d后增殖不明显，3d后病毒开始大量复制达到高峰，但6d后有所下降。在蚊虫体内1—7d病毒增殖不明显，9d开始快速复制达到高峰，但11～13d后下降至病毒载量稳定。实验表明登革病毒在细胞内复制增殖的最佳时间在接种病毒3d后，在蚊虫体内9d开始快速复制达到高峰增殖，到11～13d后蚊虫体内病毒增殖稳定波动。

关键词：登革病毒 C6 36细胞埃及伊蚊实时荧光定量PCR 动态变化

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三带喙库蚊抗性水平与其对乙脑病毒易感性关系的研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2013年第2期20卷 96-101页

作者：吴治明汪中明李春晓郭晓霞阎婷王刚朱小娟张恒端董言德赵彤言安徽医科大学合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

为了解三带喙库蚊Culex tritaeniorhynchus抗药性水平与其对乙脑病毒易感性之间的关系，本研究采用浸渍法对野外采集的不同种群三带喙库蚊幼虫抗药性水平进行测定，同时对同批次蚊虫经口感染乙脑病毒，***法检测感染率。生测结果显示三... 详细信息

为了解三带喙库蚊Culex tritaeniorhynchus抗药性水平与其对乙脑病毒易感性之间的关系，本研究采用浸渍法对野外采集的不同种群三带喙库蚊幼虫抗药性水平进行测定，同时对同批次蚊虫经口感染乙脑病毒，***法检测感染率。生测结果显示三带喙库蚊幼虫实验室品系（LAB）、南京江浦种群（NJJP）、濉溪南坪种群（SXNP）、安康建民种群（AKJM）F1代和安康建民种群（AKJM）F3代对溴氰菊酯的半数致死浓度（LC50值）分别为0．0009、0．0071、0．0160、0．0027和0．0025mg／L，与敏感品系相比，抗药性指数在2．30～40．05之间；对高效氯氰菊酯的半数致死浓度（LC50值）分别为0．0043、0．0117、0．0528、0．0121和0．0141mg／L，抗药性指数在2．13～26．42之间。感染实验结果显示，三带喙库蚊实验室品系、南京江浦种群、濉溪南坪种群、安康建民种群F1代和安康建民种群F3代对乙脑病毒的感染率分别为84．44％、80．56％、62．5％、86．00％和91．89％。相关性分析结果显示：三带喙库蚊对乙脑病毒的感染率与其对溴氰菊酯和高效氯氰菊酯的抗性指数之间均有线性负相关关系（腰值分别为0．887和0．783，P值分别为0．0167和0．0460）。表明三带喙库蚊在杀虫剂的选择压力下，可能会影响其对乙脑病毒易感性，但这种影响的机制尚待进一步研究。

关键词：三带喙库蚊流行性乙脑病毒抗药性易感性

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噬菌体浓缩方法的比较

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生物技术通讯 2013年第5期24卷 695-697,721页

作者：韩传银张飞雄童贻刚首都师范大学北京100048 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:对不同噬菌体浓缩方法进行比较。方法:采用PEG沉淀、PEG反透析、阴阳离子结合树脂、超滤等5种方法对T4、T7、N4等3类噬菌体进行浓缩对比试验;在此基础上,用浓缩效果较好的方法对土壤和河道污水样本中的噬菌体进行浓缩,观察浓缩效... 详细信息

目的:对不同噬菌体浓缩方法进行比较。方法:采用PEG沉淀、PEG反透析、阴阳离子结合树脂、超滤等5种方法对T4、T7、N4等3类噬菌体进行浓缩对比试验;在此基础上,用浓缩效果较好的方法对土壤和河道污水样本中的噬菌体进行浓缩,观察浓缩效果。结果:上述5种方法对3类噬菌体均有浓缩效果;超滤的浓缩效果最好,其次是PEG反透析,PEG沉淀没有很好的浓缩效果;河水样本中噬菌体的回收率比土壤样本高。结论:可通过PEG反透析、超滤或两者相结合的方法,得到高浓度的有活性的噬菌体。

关键词：噬菌体浓缩方法回收率

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抗GPC3 C端抗体辅助杀伤肝癌细胞HepG2的活性检测及抗原表位鉴定

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生物技术通讯 2013年第1期24卷 13-18页

作者：张红飞张慧娜李军锋于虹代晓朋赵光宇郭彦王凯娟张建营周育森郑州大学公共卫生学院河南郑州450001 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的：检测制备的7株抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）蛋白C端单克隆抗体是否具有辅助杀伤肝癌细胞的活性，并研究其识别的抗原表位。方法：用细胞增殖法检测制备的抗体是否具有抗体依赖细胞介导的细胞毒性（ADCC）活性；用生物信息软件分... 详细信息

目的：检测制备的7株抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）蛋白C端单克隆抗体是否具有辅助杀伤肝癌细胞的活性，并研究其识别的抗原表位。方法：用细胞增殖法检测制备的抗体是否具有抗体依赖细胞介导的细胞毒性（ADCC）活性；用生物信息软件分析GPC3蛋白C端（359～580残基）的结构及抗原特征，并据此将其分为4个截短片段，将克隆的各基因片段分别连接到原核表达载体pGEX-4T-1中，进行蛋白表达和纯化，用间接ELISA和Western印迹分析GPC3C端单克隆抗体的表位识别情况。结果与结论：制备的7株单克隆抗体对肝癌细胞HepG2均具有不同程度的辅助杀伤作用，其中5号单克隆抗体的辅助杀伤效果最好；表达并纯化了GPC3C端4个截短片段的重组蛋白；间接ELISA和Western印迹检测结果表明，7株抗体均特异性结合GPC3蛋白的473～525残基区段。

关键词：磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 单克隆抗体肝癌细胞HepG2 抗体依赖细胞介导的细胞毒性表位识别

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耶尔森菌Ⅲ型分泌系统研究进展

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生物技术通讯 2013年第3期24卷 418-422页

作者：阳芬杨秋林杜宗敏南华大学医学院湖南衡阳421001 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

Ⅲ型分泌系统是目前细菌中已知的最为复杂的分泌系统,也是致病性耶尔森菌包括鼠疫耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌所共有的重要致病策略之一。简要综述了耶尔森菌Ⅲ型分泌系统的遗传构成、分泌装置的结构和组成、效应蛋... 详细信息

Ⅲ型分泌系统是目前细菌中已知的最为复杂的分泌系统,也是致病性耶尔森菌包括鼠疫耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌所共有的重要致病策略之一。简要综述了耶尔森菌Ⅲ型分泌系统的遗传构成、分泌装置的结构和组成、效应蛋白分泌及调控、效应蛋白的功能等方面的主要研究成果和研究进展。

关键词：耶尔森菌 Ⅲ型分泌系统鼠疫注射小体

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穿心莲内酯通过抗炎和调节免疫提高EV71感染小鼠的生存率

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免疫学杂志 2013年第9期29卷 737-744页

作者：管晨李敏任庆杰张伟单敏敏王融冰张广州刘清泉王希良赵忠鹏王玉光北京中医药大学第一临床学院中医内科 100029 军事医学科学院实验动物中心北京100071 军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 首都医科大学附属北京地坛医院感染科 100015 首都医科大学附属北京中医医院呼吸科 100010

目的阐明穿心莲内酯磺化物(喜炎平注射液)防治手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)的效果和机制。方法将不同质量浓度的喜炎平注射液分别作用于Vero细胞和7日龄乳鼠,观测细胞的CPE和乳鼠的死亡率,测定喜炎平注射液的CC50(50%cel... 详细信息

目的阐明穿心莲内酯磺化物(喜炎平注射液)防治手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)的效果和机制。方法将不同质量浓度的喜炎平注射液分别作用于Vero细胞和7日龄乳鼠,观测细胞的CPE和乳鼠的死亡率,测定喜炎平注射液的CC50(50%cell cytotoxicity)和MLD(median lethal dose);将1.25×107TCID50的71型肠道病毒(Enterovirus 71,EV71)BJ09/07毒株腹腔注射7日龄ICR乳鼠,建立HFMD重症感染模型;在喜炎平注射液无毒浓度下,通过比较喜炎平注射液药物组,相对于生理盐水对照组对EV71重症感染模型临床体征改善情况,测定喜炎平注射液防治EV71感染的效果;通过比较药物组,相对于对照组对EV71感染Vero细胞CPE的改善情况,测定喜炎平注射液的抗病毒效果;通过比较药物组和对照组的组织病变程度、炎症因子浓度、脾淋巴细胞增殖和激活程度,初步探索喜炎平注射液防治EV71的细胞和分子机制;通过比较药物组和对照组中性粒细胞MAPK/NF-κB信号通路分子表达和激活状态,初步揭示喜炎平注射液防治EV71的信号传导机制。结果在无毒质量浓度条件下,喜炎平注射液可显著降低EV71重症感染模型的死亡率和临床疾病得分,降低组织病变程度和炎症分子的质量浓度,提升脾T淋巴细胞的数量和激活状态;而喜炎平注射液防治HFMD的效果不是通过抗EV71病毒作用,而是主要通过降低炎性信号通路信号分子的表达和激活,从而抑制炎症因子分泌、改善机体细胞免疫状态,进而减轻组织炎症损伤而获得。结论喜炎平注射液可通过调节免疫治疗EV71感染引起的重症HFMD,暗示穿心莲内酯衍生物可能是1种有效的HFMD防治药物。

关键词：肠道病毒71 穿心莲内酯衍生物抗炎免疫调节

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河南蚋属一新种（双翅目：蚋科）

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寄生虫与医学昆虫学报 2013年第3期20卷 178-180页

作者：郭晓霞严格安继尧军事医学科学院微生物流行病研究所病原生物学生物安全国家重点实验室北京100071

本文记述河南省蚋属Simulium蚋亚属subgenusSimulium一新种，南阳蚋S．（Simulium）nangyangense。***．该蚋与s．（s．）jacuticumRubtsov1940，S．（s．）hirtipannusPuri，1932，S．（s．）spiculusChen，HuangetYang，2010蚋相似，但是，该新种的爪无基齿，茧无孔窗，腹部腹面第七节无分叉毛，与其他种有明显不同。模式标本保存在北京军事医学科学院医学昆虫标本馆。

关键词：双翅目蚋科蚋属蚋亚属新种

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中国蛙蠓新种——飞鹏蛙蠓的描述（双翅目：蛙蠓科）

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寄生虫与医学昆虫学报 2013年第4期20卷 261-264页

作者：虞以新黄恩炯张建庆病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071 福建国际旅行卫生保健中心福州350001

2011年6月，在福建武夷山进行医学昆虫调查中发现蛙蠓1新种，命名为飞鹏蛙蠓Corethrella feipengi Yu，Huang et Zhang ***．，此为我国蛙蠓科首次的新种描述。模式标本收藏于军事医学科学院医学昆虫标本馆。

关键词：蛙蠓科新种中国

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地理信息系统在虫媒病与寄生虫病研究中的应用

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寄生虫与医学昆虫学报 2013年第2期20卷 133-136页

作者：王丹丹李新楼黎银军方立群中南大学公共卫生学院长沙410008 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

本文综述了地理信息系统在虫媒病与寄生虫病研究中的应用情况。

关键词：地理信息系统虫媒传染病寄生虫病

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自然感染的宿主动物和病人体内汉城型汉坦病毒S片段末端序列多样性研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2013年第1期20卷 35-41页

作者：彭毅左曙青江佳富杨红曹务春中南大学湘雅医学院流行病与卫生统计学系长沙410013 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物安全国家重点实验室北京100071

在汉城型汉坦病毒（Seoulvirus，SEOV）长期感染的Vero—E6细胞过程中发现，病毒在持续感染过程中存在RNA3’末端序列缺失现象，可能对病毒的持续感染有重要作用。而自然感染的宿主动物或病人体内病毒RNA末端序列的变异情况并不清楚。... 详细信息

在汉城型汉坦病毒（Seoulvirus，SEOV）长期感染的Vero—E6细胞过程中发现，病毒在持续感染过程中存在RNA3’末端序列缺失现象，可能对病毒的持续感染有重要作用。而自然感染的宿主动物或病人体内病毒RNA末端序列的变异情况并不清楚。本文从SEOV感染的病例血块以及SEOV检测阳性的褐家鼠肺组织中提取RNA，测定病毒s片段末端序列，并进行RNA二级结构模拟。结果发现，自然感染的宿主动物褐家鼠体内的SEOVS片段5’末端、3’末端及双末端均可出现序列缺失，而感染病例体内的病毒仅在一个克隆检测到3’末端序列缺失。与长期感染的Vero．E6细胞感染模型中仅存在较短的3’末端序列缺失现象不同，宿主动物的克隆既有较短的3’末端序列缺失，也有5’末端和双末端序列缺失，另外还有典型的大片段序列缺失。不同序列缺失类型的RNA序列二级结构模型存在显著差异。自然感染的宿主动物和病人体内的SEOVS片段序列末端存在序列缺失多样性，但前者的多样化程度更高。因此我们认为这些序列缺失可能受宿主因素影响，并与病毒对宿主的持续感染相关。

关键词：汉城型汉坦病毒末端序列变异准种基因缺失

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