检索结果-内蒙古大学图书馆

中国蠛蠓的地理分布特征

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寄生虫与医学昆虫学报 2012年第2期19卷 102-109页

作者：虞以新军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

根据以往多年及近期对蠛蠓属的研究报道，分析探讨了世界已知175种蠛蠓的分布概况，叙述了中国已知68种蠛蠓的分布区系特征。

关键词：蠛蠓属蠓科区系地理分布中国

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LETMD1单克隆抗体的鉴定及其在肝细胞癌临床诊断研究中的初步应用

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中国卫生检验杂志 2012年第2期22卷 201-204页

作者：胡冬李军锋于虹陈万荣周育森四川省绵阳市中心医院检验科四川绵阳621000 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:对制备的LETMD1-C末端单克隆抗体进行免疫特性鉴定,并将其应用于肝细胞癌的临床诊断研究。方法:使用ELISA,细胞免疫荧光及Western blot等免疫学技术对所制备的单克隆抗体进行免疫特性鉴定;以鉴定的抗体为工具,检测肝癌组织中LETMD... 详细信息

目的:对制备的LETMD1-C末端单克隆抗体进行免疫特性鉴定,并将其应用于肝细胞癌的临床诊断研究。方法:使用ELISA,细胞免疫荧光及Western blot等免疫学技术对所制备的单克隆抗体进行免疫特性鉴定;以鉴定的抗体为工具,检测肝癌组织中LETMD1编码产物表达情况。结果:免疫学鉴定结果验证了制备的单克隆抗体具有较高的使用效价和良好的特异性。检测肝组织标本中LETMD1编码产物表达情况,发现其在正常组织中不表达,在肝癌组织表达明显高于癌旁组织。结论:制备了抗-LETMD1-C末端的单克隆抗体,经鉴定具有较高的效价和良好的特异性,可以应用于LETMD1癌基因的功能研究和肝细胞癌的临床诊断研究,为深入研究LETMD1蛋白的生物学功能和建立新的肝细胞癌早期诊断方法奠定了可靠基础。

关键词：单克隆抗体 LETMD1 肝细胞癌临床诊断

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金黄色葡萄球菌疫苗及其免疫治疗进展

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微生物学免疫学进展 2012年第2期40卷 47-52页

作者：杨益隆易绍琼陈薇军事医学科学院微生物与流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

具有多重抗生素耐药性的金黄色葡萄球菌是导致医院感染最常见的致病菌,而目前高致病性耐甲氧西林菌株(MRSA)在社区中的传播使得健康人群也面临极大威胁,因此针对金黄色葡萄球菌的疫苗和免疫治疗的研究迫在眉睫。多数的研究以金黄色葡萄... 详细信息

具有多重抗生素耐药性的金黄色葡萄球菌是导致医院感染最常见的致病菌,而目前高致病性耐甲氧西林菌株(MRSA)在社区中的传播使得健康人群也面临极大威胁,因此针对金黄色葡萄球菌的疫苗和免疫治疗的研究迫在眉睫。多数的研究以金黄色葡萄球菌细胞壁锚定蛋白、荚膜多糖、外毒素等为靶点,虽然在一些临床前试验中显示出疫苗和免疫治疗对金葡菌感染具有保护性,但是目前临床试验结果却并不乐观,还没有一个经得起临床检验的疫苗。本文章从临床前试验和临床试验两个方面综述了目前关于金黄色葡萄球菌的疫苗和免疫治疗进展。

关键词：金黄色葡萄球菌疫苗免疫治疗致病因子

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基于Luminex悬浮芯片的鼠疫耶尔森菌SNP分型方法研究

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军事医学 2012年第7期36卷 502-507页

作者：朱鹏张青雯祁芝珍崔玉军肖潇杨瑞馥谭周进宋亚军湖南农业大学生物安全科学技术学院长沙410128 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 青海省地方病预防控制所西宁811602 湖南中医药大学微生物学教研室长沙410208

目的利用Luminex悬浮芯片技术,基于单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)建立我国鼠疫耶尔森菌东方型菌株(以下简称东方型鼠疫菌)的基因分型方法,为进一步研究东方型鼠疫菌多态性并分析其系统发育关系奠定基础。方法利... 详细信息

目的利用Luminex悬浮芯片技术,基于单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)建立我国鼠疫耶尔森菌东方型菌株(以下简称东方型鼠疫菌)的基因分型方法,为进一步研究东方型鼠疫菌多态性并分析其系统发育关系奠定基础。方法利用多重PCR,同时扩增东方型鼠疫菌中18个具有分型意义的SNP位点,扩增产物进行多重等位基因特异性引物延伸(allele specific primer extension,ASPE)反应以及Luminex悬浮芯片技术分析,随后利用MasterPlex GT V2.3软件计算平均荧光强度(median fluorescence intensity,MFI)比值,判断各SNP位点的碱基状态;并对SNP分型方法的重现性进行评价。结果 Luminex多重SNP技术能够快速、高通量地检测出各SNP位点的MFI值,从而在8 h内一次性成功确定东方型鼠疫菌中18个SNP的碱基状态;36株东方型鼠疫菌基于18个SNP可以分为7个基因型。结论本文建立的Luminex多重SNP检测方法作为一种高通量检测SNP的技术平台,为后期的东方型鼠疫菌SNP分型及系统发育分析奠定了基础。

关键词： Luminex技术耶尔森菌,鼠疫多态性,单核苷酸基因分型

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乙型流感病毒单克隆抗体的制备与评价

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免疫学杂志 2012年第12期28卷 1077-1080页

作者：张培瑞段跃强张德玺张绍庚李志伟王希良杨鹏辉中国人民解放军第三○二医院肝胆外科北京100039 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京阿斯可来生物工程有限公司 101500

目的制备抗乙型流感单克隆抗体,为建立特异、灵敏、简便的乙型流感病毒快速检测方法奠定基础。方法应用鸡胚接种法、ELISA方法、免疫扩散法、血凝抑制法筛选能稳定分泌抗乙型流感病毒单抗的杂交瘤细胞,并对分泌的单抗的安全性,有效性、... 详细信息

目的制备抗乙型流感单克隆抗体,为建立特异、灵敏、简便的乙型流感病毒快速检测方法奠定基础。方法应用鸡胚接种法、ELISA方法、免疫扩散法、血凝抑制法筛选能稳定分泌抗乙型流感病毒单抗的杂交瘤细胞,并对分泌的单抗的安全性,有效性、抗体亚型,特异性及灵敏性进行了全面评价。结果获得了3株能稳定分泌抗乙型流感病毒单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为3G11、4F9、8G6;制备的抗乙型流感病毒单克隆抗体无鼠源病毒污染;抗体亚型为IgG2a亚型,轻链均为κ链;对乙型流感病毒具有高度特异性,而与甲型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、呼吸道腺病毒等无交叉反应。结论制备的乙型流感病毒单克隆抗体具有特异性强、灵敏性高,为临床乙型流感的早期快速诊断及流行病调查奠定了实验基础。

关键词：流感乙型流感单克隆抗体

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无标签鼠疫耶尔森菌Ⅴ抗原突变体在大肠杆菌中的表达、纯化及免疫原性分析

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生物技术通讯 2012年第1期23卷 26-29页

作者：王猛任军张金龙李浩蔡晨光李建民陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071

目的:在大肠杆菌中表达、纯化无标签鼠疫耶尔森菌低钙反应V抗原突变体,并对其免疫原性进行研究。方法:采用融合PCR方法将Ⅴ抗原基因中编码半胱氨酸的碱基缺失突变,将获得得Ⅴ抗原突变体基因克隆到原核表达载体pET32a(+)后转化大肠杆菌BL... 详细信息

目的:在大肠杆菌中表达、纯化无标签鼠疫耶尔森菌低钙反应V抗原突变体,并对其免疫原性进行研究。方法:采用融合PCR方法将Ⅴ抗原基因中编码半胱氨酸的碱基缺失突变,将获得得Ⅴ抗原突变体基因克隆到原核表达载体pET32a(+)后转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达并进行柱层析纯化,纯化产物以Western印迹进行鉴定并免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测免疫血清效价。结果:目的蛋白在大肠杆菌中获得了可溶性高表达,经三步柱层析后纯度高于95%,经Western印迹检测可与野生型V抗原单克隆抗体特异性结合,免疫小鼠后获得高效价免疫血清。结论:获得了无标签的鼠疫耶尔森菌Ⅴ抗原突变体蛋白,并证实其具有免疫原性,将对V抗原结构和功能的研究提供帮助。

关键词：鼠疫耶尔森菌 Ⅴ抗原突变体表达纯化免疫原性

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动物口鼻动态气溶胶暴露系统的建立与效果评价

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解放军预防医学杂志 2012年第6期30卷 402-405页

作者：温占波李娜李劲松杨文慧王洁胡凌飞董晓凯鹿建春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的评价所设计的动物口鼻动态气溶胶暴露系统的上下层和每层各暴露口之间细菌气溶胶浓度的均匀性,为动物气溶胶吸入研究奠定基础。方法在负压气雾室中运行整体动物口鼻动态气溶胶暴露系统,DV 40气溶胶发生器发生粘质沙雷氏菌气溶胶,流... 详细信息

目的评价所设计的动物口鼻动态气溶胶暴露系统的上下层和每层各暴露口之间细菌气溶胶浓度的均匀性,为动物气溶胶吸入研究奠定基础。方法在负压气雾室中运行整体动物口鼻动态气溶胶暴露系统,DV 40气溶胶发生器发生粘质沙雷氏菌气溶胶,流量10 L/min,使用微生物采样器测试动物口鼻动态气溶胶暴露系统上下层之间和每层各暴露口之间细菌气溶胶粒谱分布,同时测试暴露系统在发生细菌气溶胶时是否发生泄漏。使用SAS 8.2统计学分析软件对实验结果进行统计学分析。结果上层暴露腔和下层暴露腔细菌气溶胶浓度分别为(23 770±2792)CFU/m3和(24 865±1583)CFU/m3,差异无显著性(P>0.05)。暴露系统上层3#、6#、9#暴露口的浓度分别为(7551±375)、(7363±89)、(7563±283)CFU/m3;下层11#、14#、17#暴露口的浓度分别为(7209±215)、(7362±525)、(7374±327)CFU/m3,各暴露口之间浓度差异无显著性(P>0.05)。整个测试过程未发生细菌气溶胶泄露。结论动物口鼻动态气溶胶暴露系统上下层之间和每层各暴露口之间细菌气溶胶浓度均匀性较好,未发生泄露,可以用于相关细菌气溶胶暴露的研究。

关键词：口鼻暴露系统细菌气溶胶均匀性建立评价

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猪链球菌2型强毒株*** 05ZY和弱毒株*** 1940的比较转录谱分析

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生物技术通讯 2012年第1期23卷 11-14,22页

作者：尉研袁媛曾小涛江华郑玉玲周冬生姜永强军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:比较猪链球菌2型强毒株*** 05ZY和弱毒株*** 1940毒力相关基因转录水平的差异,为进一步研究强毒株*** 05ZY毒力增强的原因提供实验基础。方法:分别提取*** 05ZY和*** 1940的RNA,反转录成cDNA并纯化,用Cy5或Cy3标记,与猪链球菌全基... 详细信息

目的:比较猪链球菌2型强毒株*** 05ZY和弱毒株*** 1940毒力相关基因转录水平的差异,为进一步研究强毒株*** 05ZY毒力增强的原因提供实验基础。方法:分别提取*** 05ZY和*** 1940的RNA,反转录成cDNA并纯化,用Cy5或Cy3标记,与猪链球菌全基因组DNA芯片进行杂交,扫描芯片进行数据分析,比较二者在转录水平上的差异基因。结果:编码溶血素、精氨酸氨基肽酶的基因分别上调4.4和6.0倍,参与荚膜多糖合成的相关基因cps2H、cps2I、cps2J和一些可能的毒力相关基因ofs、dpr、SSU05_0196、SSU05_0272、SSU05_1408-1409均发生转录水平的上调。结论:溶血素、荚膜多糖、精氨酸氨基肽酶及一些可能的毒力因子在转录水平的上调很可能与*** 05ZY的毒力增强有关。

关键词：猪链球菌2型 DNA芯片比较转录谱毒力因子

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利用扩增片段长度多态性分析鉴别炭疽和蜡样芽孢杆菌

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生物技术通讯 2012年第4期23卷 546-549页

作者：左庭婷李岩伟韩雪莲何君端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的：利用扩增片段长度多态性（AFLP）分析建立鉴别炭疽芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌的分子生物学方法。方法：3株炭疽芽孢杆菌和3株蜡样芽孢杆菌基因组经限制性内切酶EcoRⅠ和MseⅠ酶切后与对应接头连接,通过预扩增和选择性扩增获得特异性... 详细信息

目的：利用扩增片段长度多态性（AFLP）分析建立鉴别炭疽芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌的分子生物学方法。方法：3株炭疽芽孢杆菌和3株蜡样芽孢杆菌基因组经限制性内切酶EcoRⅠ和MseⅠ酶切后与对应接头连接,通过预扩增和选择性扩增获得特异性DNA片段,将片段进行毛细管电泳,并利用GeneScan和BioNumerics软件对电泳数据进行分析。结果：选择性扩增最佳引物组合为EcoRⅠ-G/MseⅠ-A,其扩增片段在100~500 bp范围内的有效数量为40~50条;比较炭疽芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌的AFLP特征峰值图和DNA指纹图谱,确定了5个有明显差异的片段区。结论：利用AFLP分析可对芽孢杆菌属中相近的炭疽芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌进行鉴别,该方法可作为炭疽芽孢杆菌传统鉴定方法的补充。

关键词：炭疽芽孢杆菌蜡样芽孢杆菌扩增片段长度多态性 DNA指纹图谱

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6种沙门菌单克隆抗体的制备和效能评价

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生物技术通讯 2012年第6期23卷 813-816页

作者：张平平张丽丽王浩然王津杨瑞馥周蕾军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:制备稳定、特异、高亲和性的分别针对甲型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、丙型副伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌的单克隆抗体。方法:用甲醛灭活的菌液抗原免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合;用... 详细信息

目的:制备稳定、特异、高亲和性的分别针对甲型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、丙型副伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌的单克隆抗体。方法:用甲醛灭活的菌液抗原免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合;用灭活的菌液包被酶标板,ELISA筛选阳性克隆株,建立细胞系;选取高效分泌杂交瘤细胞,常规制备腹水并纯化,进行单抗特异性与亲和性评价。结果:筛选得到分泌6种沙门菌相应单克隆抗体的杂交瘤细胞株,获得高亲和性单抗;所有单抗与大部分病原菌(包括7种沙门菌、3株志贺菌、2株李斯特菌、4株致病性大肠杆菌、2株霍乱弧菌)无交叉反应,但由于同类型O抗原的广泛分布,抗乙型副伤寒沙门菌单抗与鼠伤寒沙门菌、抗伤寒沙门菌单抗与肠炎沙门菌有明显的交叉反应。结论:沙门菌单抗的制备,为感染性腹泻的监测、诊断奠定了基础。

关键词：沙门菌单克隆抗体效价评价特异性评价

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