检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2012年第10期28卷 867-871页

作者：李仲任庆杰门丽管晨杨巧芝赵忠鹏田庆玲闫芳王希良山西农业大学动物科技学院太原030801 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京中医药大学第一临床学院中医内科 100029 聊城市人民医院儿科 252000 唐山市妇幼保健院感染性疾病科 063000

目的建立EV71型手足口病乳鼠动物模型并进行免疫、致病特性研究。方法将临床分离的EV71病毒株经蚀斑纯化,3T3细胞适应,乳鼠驯化,最终获得1株能致死7日龄乳鼠的EV71毒株,命名为BJ09/07(GenBank Accession ***319054,EV71-BJ)。EV71-BJ感... 详细信息

目的建立EV71型手足口病乳鼠动物模型并进行免疫、致病特性研究。方法将临床分离的EV71病毒株经蚀斑纯化,3T3细胞适应,乳鼠驯化,最终获得1株能致死7日龄乳鼠的EV71毒株,命名为BJ09/07(GenBank Accession ***319054,EV71-BJ)。EV71-BJ感染7日龄ICR乳鼠后,观测临床疾病得分、体质量变化、死亡率并测定病毒载量、免疫分子、内分泌水平、组织病理损伤等病毒、免疫、内分泌、病理指标。结果 EV71-BJ毒株感染7日龄ICR乳鼠,其病毒毒力为150 LD50/ml,感染后不同时期肌肉病毒载量均高于脑中,至第4天达到高峰,后不断下降。至感染后第6天发病达高峰时做病理检测,相对于脑组织,肌肉中有更严重的淋巴细胞浸润,引起更严重的炎性分子升高。肌肉研磨液和血清中MCP-1、IFN-γ、IL-6和TNF-α显著升高,而肾上腺素和皮质醇未见明显变化。结论初步建立了EV71型手足口病乳鼠动物模型,为药物筛选、疫苗研发及免疫机理研究奠定了基础。

关键词： EV71 ICR乳鼠免疫内分泌病理

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鼠肝炎冠状病毒非结构蛋白1及其突变体的原核表达

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生物技术通讯 2012年第4期23卷 471-475页

作者：柳洪涛林磊孙走南罗彦军何湘吴晓燕杨益苏文莉祝庆余刘景梅常国辉广西医科大学基础医学院广西南宁530021 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 军事医学科学院疾病预防控制所北京100071

目的:构建鼠肝炎冠状病毒(MHV)非结构蛋白1(NSP1)及其突变体(NSP1 mu)的原核重组表达质粒,在大肠杆菌中分别融合表达重组NSP1及NSP1 mu。方法:以现有质粒载体为模板,扩增编码NSP1及NSP1 mu的基因片段,并克隆至pMD18-T克隆载体;菌落PCR... 详细信息

目的:构建鼠肝炎冠状病毒(MHV)非结构蛋白1(NSP1)及其突变体(NSP1 mu)的原核重组表达质粒,在大肠杆菌中分别融合表达重组NSP1及NSP1 mu。方法:以现有质粒载体为模板,扩增编码NSP1及NSP1 mu的基因片段,并克隆至pMD18-T克隆载体;菌落PCR鉴定阳性克隆并测序分析;将阳性克隆的目的片段亚克隆至表达载体pET-28a,并转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,PCR和双酶切鉴定转化菌落;将阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并加入IPTG诱导表达,SDS-PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的表达。结果:PCR扩增得到表达NSP1及NSP1 mu的特异片段,并克隆到pMD18-T载体,测序结果正确无误;构建了NSP1和NSP1 mu的重组表达质粒,并在大肠杆菌BL21(DE3)中分别融合表达了重组NSP1及NSP1 mu,表达的目的蛋白均能与His单克隆抗体特异结合;用Ni-NTA琼脂糖试剂盒纯化重组蛋白,获得可溶性的NSP1及NSP1 mu,相对分子质量分别为27×103和28×103。结论:在大肠杆菌中分别表达并纯化获得了大量可溶性重组NSP1及NSP1 mu。

关键词：鼠肝炎冠状病毒非结构蛋白1 突变体表达纯化

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基于荧光检测的新型细胞传感器

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生物化学与生物物理进展 2011年第2期38卷 185-190页

作者：辛文文王景林军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

主要介绍了一类基于荧光检测的新型细胞传感器,这类传感器利用免疫细胞表面分子特异性识别、结合抗原的特性和生物(或化学)发光技术,通过检测荧光信号在数分钟内达到检测病原体或其他抗原的目的.这类传感器的发光原理主要是利用钙离子... 详细信息

主要介绍了一类基于荧光检测的新型细胞传感器,这类传感器利用免疫细胞表面分子特异性识别、结合抗原的特性和生物(或化学)发光技术,通过检测荧光信号在数分钟内达到检测病原体或其他抗原的目的.这类传感器的发光原理主要是利用钙离子敏感型化学荧光探针发光,如Fluo-4等,或钙离子敏感型发光蛋白发光,如水母发光蛋白、绿色荧光蛋白等.现在已经应用的主要是B细胞传感器和肥大细胞传感器.这类传感器具有灵敏度高、检测准确、反应速度快的优点.同时又存在交叉反应、细胞不易保存等不足之处.这类传感器在疾病诊断、环境监测、生物战剂检测等领域具有较大的应用前景.

关键词：细胞传感器荧光检测免疫细胞病原体检测

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中国麻虻属一新记录种（双翅目：虻科）

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寄生虫与医学昆虫学报 2012年第3期19卷 176-178页

作者：张晓龙孙毅刘宇夫赵文王静中国检验检疫科学研究院北京100123 勐腊出入境检验检疫局云南勐腊666300 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物安全国家重点实验室北京100071

本文记述了我国麻虻属毛股麻虻组Haematopota pilosifemura group一新纪录一突缘麻虻Haematopota procyon Stone et Philip，1974。标本保存于军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆。

关键词：突缘麻虻毛股麻虻组新纪录

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副溶血弧菌毒力评价小鼠模型的建立与应用

副溶血弧菌毒力评价小鼠模型的建立与应用

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2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会

作者：郭李平徐镔蕊杜德燕姜汉雯邱业峰周冬生中国农业大学动物医学院农业部动物流行病学与人兽共患病重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院实验动物中心

目的本研究旨在建立评价副溶血性弧菌毒力的小鼠模型,为研究副溶血性弧菌的致病机制奠定基础。材料方法将不同剂量的RIMD210633菌液经腹腔感染4-5周龄雌性Balb/c小鼠,注射剂量分别为10～9、10～8、10～7、10～6CFU/只,观察小鼠的症状及... 详细信息

目的本研究旨在建立评价副溶血性弧菌毒力的小鼠模型,为研究副溶血性弧菌的致病机制奠定基础。材料方法将不同剂量的RIMD210633菌液经腹腔感染4-5周龄雌性Balb/c小鼠,注射剂量分别为10～9、10～8、10～7、10～6CFU/只,观察小鼠的症状及死亡数,以确定最佳感染量;然后将不同盐分浓

关键词：副溶血弧菌小鼠模型建立与应用

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猪链球菌2型与宿主细胞体外相互作用研究进展

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现代生物医学进展 2012年第36期12卷 7196-7200页

作者：付忠琳马世良袁媛纪颖霍春月沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁沈阳110866 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 首都医科大学燕京医学院北京101300

猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype2,SS2)是一种世界范围内的引起猪链球菌病的重要的人兽共患病原菌,人感染SS2后多呈现败血症型和脑膜炎型。2005年猪链球菌在我国四川省的感染暴发和近年来不断出现的零散病例给我国的公共卫生... 详细信息

猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype2,SS2)是一种世界范围内的引起猪链球菌病的重要的人兽共患病原菌,人感染SS2后多呈现败血症型和脑膜炎型。2005年猪链球菌在我国四川省的感染暴发和近年来不断出现的零散病例给我国的公共卫生和食品安全带来了威胁,但迄今为止,对SS2致病机制研究尚不够深入。SS2的致病过程和宿主细胞相互作用密切相关,SS2-体外宿主细胞相互作用模型的建立对于揭示SS2致病分子机理具有重要的意义。目前的研究报道主要是从猪链球菌黏附与侵袭上皮细胞或内皮细胞、猪链球菌抗吞噬细胞的吞噬和猪链球菌激活免疫细胞炎症反应方面研究猪链球菌与宿主细胞的相互作用,但与其他常致病性链球菌如化脓性链球菌和肺炎链球菌相比,有些SS2-体外宿主细胞相互作用模型还缺乏统一的标准,由于感染模型的实验参数不尽相同得到结果也有所不同。本文对近年来猪链球菌2型与宿主细胞体外相互作用及其致病机理研究进展作一综述。

关键词：猪链球菌2型(SS2) 病原菌-宿主相互作用黏附与侵袭炎症

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葡萄球菌肠毒素B突变体的构建及其抗肿瘤活性分析

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生物技术通讯 2012年第6期23卷 772-776页

作者：郑欣郑玉玲王君谷丽维吴应良江华沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳110016 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 沈阳药科大学中药学院辽宁沈阳110016

目的:通过对葡萄球菌肠毒素B(SEB)32位His进行定点突变,获得抑瘤效果显著增强的SEB突变体。方法:利用基因定点突变的方法,将SEB的32位His替换为Asn,将重组质粒转入大肠杆菌中诱导表达,用CM弱阳离子层析柱纯化获得重组蛋白,用SDS-PAGE和W... 详细信息

目的:通过对葡萄球菌肠毒素B(SEB)32位His进行定点突变,获得抑瘤效果显著增强的SEB突变体。方法:利用基因定点突变的方法,将SEB的32位His替换为Asn,将重组质粒转入大肠杆菌中诱导表达,用CM弱阳离子层析柱纯化获得重组蛋白,用SDS-PAGE和Western印迹对其进行鉴定,并用增殖实验检测其丝裂原活性,通过MTS法检测其体外抗肿瘤活性。结果:构建并高效表达了突变体蛋白SEB(H32N),纯化获得了足够纯度的突变体蛋白;体外实验表明,在相同浓度下,SEB(H32N)的丝裂原活性及体外抗肿瘤活性明显优于野生型SEB。结论:同野生型SEB相比,突变体蛋白SEB(H32N)对肿瘤生长的抑制作用得到了提高。

关键词：葡糖球菌肠毒素B 突变体表达纯化抗肿瘤

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葡萄球菌肠毒素C2突变体的构建及其体外抗肿瘤活性分析

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生物技术通讯 2012年第5期23卷 631-634页

作者：王君郑玉玲郑欣谷丽维陈思维江华军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳110016 沈阳药科大学中药学院辽宁沈阳110016

目的：利用基因定点突变的方法将葡萄球菌肠毒素C2（SEC2）的31位定点突变,以获得抑瘤效果增强的肠毒素。方法：利用基因定点突变的方法,将SEC2中31位的His用Asn替代,转入大肠杆菌中诱导表达,采用CM弱阳离子层析柱纯化蛋白,并用SDS-PAGE... 详细信息

目的：利用基因定点突变的方法将葡萄球菌肠毒素C2（SEC2）的31位定点突变,以获得抑瘤效果增强的肠毒素。方法：利用基因定点突变的方法,将SEC2中31位的His用Asn替代,转入大肠杆菌中诱导表达,采用CM弱阳离子层析柱纯化蛋白,并用SDS-PAGE和Western印迹对其进行鉴定,通过MTS法检测其体外抗肿瘤活性。结果：构建了突变体蛋白SEC2（H31N）,并在大肠杆菌中实现了高效表达。体外实验表明,在相同浓度下,SEC2（H31N）对多种肿瘤细胞的抑制作用明显优于野生型SEC2,尤其在低浓度下此现象更为明显。对于5个受试细胞株,SEC2（H31N）的IC50均低于SEC2;SEC2（H31N）浓度分别为0.01~10、0.01和0.1 ng/mL时,对肿瘤细胞SMMC-7721、HepG2、A549的生长抑制率与SEC2相比均显著提高。结论：同野生型SEC2相比,突变体蛋白SEC2（H31N）对肿瘤生长的抑制作用得到了提高。

关键词：葡糖球菌肠毒素C2 超抗原突变体抗肿瘤

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抗禽流感病毒H5N1分泌型IgA在中国仓鼠卵巢细胞中的表达

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生物工程学报 2011年第2期27卷 219-225页

作者：李存张宝中安小平米志强刘大斌姜焕焕潘博王盛陈斌黄芬王娟王晓娜童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

分泌型IgA(SIgA)在机体的粘膜免疫中具有重要作用,在外分泌道中比单体IgA和IgG抗体具有更好的抗感染活性。为了表达抗禽流感病毒H5N1人-鼠嵌合分泌型IgA抗体,首先以本室先前构建的稳定表达IgA的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系为基础,共转... 详细信息

分泌型IgA(SIgA)在机体的粘膜免疫中具有重要作用,在外分泌道中比单体IgA和IgG抗体具有更好的抗感染活性。为了表达抗禽流感病毒H5N1人-鼠嵌合分泌型IgA抗体,首先以本室先前构建的稳定表达IgA的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系为基础,共转染分泌片和J链表达质粒,然后用抗生素Zeocin选择阳性克隆细胞,利用倍比稀释的方法筛选分泌SIgA的单克隆细胞,通过Western blotting分析培养上清中SIgA的表达情况。结果表明,在CHO细胞中成功表达了SIgA抗体,上述研究为研制分泌型IgA抗体制剂奠定了良好的基础。

关键词：禽流感病毒H5N1 Western blotting SIgA抗体

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从厩真厉螨中检出与猫立克次体近缘的立克次体核酸片段

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寄生虫与医学昆虫学报 2012年第3期19卷 136-140页

作者：姚李四刘勇先邵丽筠张晓龙杨宇王静徐宝梁王宝麟赵彤言军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国检验检疫科学研究院北京100123 长白出入境检疫检疫局吉林长白134400 吉林出入境检验检疫局吉林长春130062

本研究用立克次体属特异的gltA和ompB基因扩增引物，从吉林长白县捕获鼠中分拣的534只厩真厉螨中扩得gltA和ompB基因片段。通过基因片段的序列测定、BLAST比对和系统发育分析，显示两个扩增基因与猫立克次体Rickettsia fells同源性最高... 详细信息

本研究用立克次体属特异的gltA和ompB基因扩增引物，从吉林长白县捕获鼠中分拣的534只厩真厉螨中扩得gltA和ompB基因片段。通过基因片段的序列测定、BLAST比对和系统发育分析，显示两个扩增基因与猫立克次体Rickettsia fells同源性最高（99％），证明该地区厩真厉螨携带与猫立克次体近缘的立克次体。

关键词： Rickettsia falis 厩真厉螨 gltA基因 ompB基因

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