检索结果-内蒙古大学图书馆

中华流行病学杂志 2007年第2期28卷 157-159页

作者：詹琳何静萨仁高娃吴晓明王剑波赵秋敏张泮河黄海楠蒋宝贵江佳富张晶波褚宸一高燕杨红曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所、流行病学研究室、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 内蒙古大兴安岭林业中心卫生防疫站

目的了解东北林区啮齿动物感染粒细胞埃立克体病原体的情况。方法运用聚合酶链反应方法对吉林、黑龙江、内蒙古林区采集的啮齿动物标本粒细胞埃立克体的16S rRNA和gltA基因片段进行检测并测序，将所测序列与OenBank中注册的基因序列进... 详细信息

目的了解东北林区啮齿动物感染粒细胞埃立克体病原体的情况。方法运用聚合酶链反应方法对吉林、黑龙江、内蒙古林区采集的啮齿动物标本粒细胞埃立克体的16S rRNA和gltA基因片段进行检测并测序，将所测序列与OenBank中注册的基因序列进行比较分析。结果共检测鼠标本276份，其中吉林长白山林区102份，黑龙江小兴安岭林区61份，内蒙古大兴安岭林区113份，阳性率分别为8．82％、1．64％及0．00％。体表有寄生蜱的鼠感染危险性是体表无寄生蜱鼠的11.30倍（P=0．002）。吉林、黑龙江林区鼠标本及其寄生蜱标本16SrRNA基因序列完全相同，与美国、瑞典、日本等国家检出的粒细胞埃立克体对应序列的同源性为97％～99％。gltA基因核苷酸序列与GenBank注册的相应片段比较相似性为87％～97％，推导的氨基酸序列相似性为84％～99％。结论吉林及黑龙江林区存在粒细胞埃立克体宿主动物感染。

关键词：粒细胞埃立克体宿主动物 16S rRNA基因 gltA基因

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新型狂犬病疫苗及其基因工程抗体的研究进展

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中国生物制品学杂志 2007年第5期20卷 383-386页

作者：蔡昆王慧军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

由于狂犬病动物传染源广泛存在,控制难度较大,一旦发病目前尚无法医治,所以研制狂犬病的预防制品非常重要。本文就新型狂犬病疫苗及狂犬病病毒基因工程抗体的研究进展进行比较全面的综述。

关键词：狂犬病疫苗抗体

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西尼罗病毒抗体酶联免疫吸附试验检测方法的评价

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中国人兽共患病学报 2007年第2期23卷 121-123页

作者：何虎鹏张久松丁国武张泮河刘一萍高玉然曹务春兰州大学公共卫生学院兰州730000 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的系统地评价血清西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,为在人群和宿主动物中进行WNV感染血清流行病学调查提供技术支持。方法利用构建的包膜蛋白重组质粒(pQE-30)表达纯化西尼罗病毒包膜蛋白,以... 详细信息

目的系统地评价血清西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,为在人群和宿主动物中进行WNV感染血清流行病学调查提供技术支持。方法利用构建的包膜蛋白重组质粒(pQE-30)表达纯化西尼罗病毒包膜蛋白,以此为抗原进行ELISA检测。在对抗原包被量、酶标抗体浓度、血清稀释度进行优化的基础上,对本方法的灵敏度和特异度进行评价。结果确定最适抗原包被量为0.034μg,酶标抗体工作浓度和血清稀释度分别为1∶4 800和1∶80;批内变异和批间变异分别为6.7%和22.6%;对小鼠WNV抗体阳性血清53份、JEV抗体阳性血清48份和阴性对照血清94份进行检测,灵敏度为86.8%,特异度分别为93.8%和92.6%。结论本研究建立的ELISA方法灵敏、检测抗体特异,结果可重复,是一种有价值的血清学调查方法。

关键词：西尼罗病毒包膜蛋白酶联免疫吸附试验

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13种虫媒病毒基因芯片检测方法的建立

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解放军医学杂志 2007年第8期32卷 832-835页

作者：朱晓光杨银辉康晓平刘洪胡玉洋曾海攀祝庆余军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京华大基因技术有限公司

目的建立能对虫媒病毒进行属水平筛查及种水平鉴定的基因芯片技术,为虫媒病毒提供一种高通量的检测与鉴定技术。方法从GenBank获得13种虫媒病毒的全部基因组序列,利用Clustal X和BLAST等比对软件,设计针对这些虫媒病毒所在的3个属的通... 详细信息

目的建立能对虫媒病毒进行属水平筛查及种水平鉴定的基因芯片技术,为虫媒病毒提供一种高通量的检测与鉴定技术。方法从GenBank获得13种虫媒病毒的全部基因组序列,利用Clustal X和BLAST等比对软件,设计针对这些虫媒病毒所在的3个属的通用寡核苷酸探针,用于病毒的属水平筛查。然后设计针对每种病毒的特异性寡核苷酸探针,用于每种病毒的检测鉴定。寡核苷酸探针长度均为70mer,将设计好的探针与GenBank上所有病毒基因组序列进行比对,验证其种属特异性,然后进行探针合成和基因芯片制备。所有病毒在BSL-3和BSL-2实验室进行培养,待检病毒核酸通过锚定随机PCR进行扩增,经荧光染料标记后与基因芯片杂交,利用激光共聚焦扫描仪扫描后进行结果分析。结果所检测的13种虫媒病毒均可获得种特异性及所在属的属特异性杂交信号,非特异性杂交信号不明显。分别用两种不同的病毒混合后,进行模拟混合病毒感染,也得到了相应的特异杂交信号。结论初步建立了13种虫媒病毒的基因芯片检测技术,可用于这些病毒的属水平筛查及种水平鉴定,并且可以进行混合感染标本的检测,为虫媒病毒的检测与鉴定提供了一种新的手段。

关键词：寡核苷酸序列分析虫媒病毒检测

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吉林省林区家畜中斑点热群立克次体与莱姆病螺旋体复合感染的血清学调查

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中国人兽共患病学报 2007年第2期23卷 146-148页

作者：黄海楠丁壮褚宸一何静韩晓娜高燕曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 吉林大学畜牧兽医学院重要病原与疫病研究室

目的了解吉林珲春地区家畜中斑点热、莱姆病及其复合感染的情况。方法应用间接免疫荧光法检测家畜血清中斑点热群立克次体和伯氏疏螺旋体的IgG抗体。结果牛血清中斑点热感染率为18.0%,莱姆病感染率为27.5%,复合感染率为9.5%;羊血清中斑... 详细信息

目的了解吉林珲春地区家畜中斑点热、莱姆病及其复合感染的情况。方法应用间接免疫荧光法检测家畜血清中斑点热群立克次体和伯氏疏螺旋体的IgG抗体。结果牛血清中斑点热感染率为18.0%,莱姆病感染率为27.5%,复合感染率为9.5%;羊血清中斑点热感染率为19.2%,莱姆病感染率为31.5%,复合感染率为12.8%。结论吉林珲春地区家畜中广泛存在斑点热和莱姆病的复合感染。

关键词：斑点热群立克次体伯氏疏螺旋体家畜复合感染

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A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

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军事医学科学院院刊 2007年第3期31卷 213-217页

作者：贾杨王俊虹高姗康琳王景林军事医学科学院微生物流行病研究所病原与生物安全国家重点实验室北京100071 武警医学院天津300162

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体。方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neuro-toxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B。对其基因进... 详细信息

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体。方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neuro-toxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B。对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因。分别插入原核表达载体pQE-30,再转化***15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定。结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在***中以包涵体形式获得高效表达。Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性。Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应。

关键词：肉毒毒素A 多表位串联体重叠PCR

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宁夏回族自治区HIV-1感染者抗病毒治疗前免疫学与病毒学指标调查

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第7期27卷 615-618页

作者：李韩平鲍作义王秀珍庄道民刘永健李林刘思扬李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所全军艾滋病检测中心病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 宁夏回族自治区疾病预防控制中心

目的了解该地区部分HIV-1感染者抗病毒治疗前CD4^+ T淋巴细胞、病毒载量分布及耐药性毒株存在情况。方法利用流式细胞技术对CD4^+ T淋巴细胞计数,使用NASBA方法测定病毒载量,利用RT-PCR获得目的基因序列,登陆http://***分析耐药突变位... 详细信息

目的了解该地区部分HIV-1感染者抗病毒治疗前CD4^+ T淋巴细胞、病毒载量分布及耐药性毒株存在情况。方法利用流式细胞技术对CD4^+ T淋巴细胞计数,使用NASBA方法测定病毒载量,利用RT-PCR获得目的基因序列,登陆http://***分析耐药突变位点。结果该地区感染人群中66.66%的患者CD4^+ T淋巴细胞数>350个/mm^3,患者病毒载量对数平均值为3.784±1.048,检测样本中有2例出现耐药性。结论该地区HIV-1感染者目前多为无症状期,但病毒拷贝数较高,耐药性毒株流行水平较低。应在该地区加强抗病毒治疗的宣传。

关键词： H1V-1 CD4^+T淋巴细胞病毒载量耐药性

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1例伤寒散发病例的实验室诊断

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军事医学科学院院刊 2007年第6期31卷 589-591页

作者：何君邱少富檀华左庭婷朱虹端青李俊成聂维忠李德昕王海军汪仁杰军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 秦皇岛出入境检验检疫局河北秦皇岛066002

2007年4月6日,香港注册Anglo-Eastern集团的一艘“Genco Commander”号货船在从印度驶往我国秦皇岛港口途中,一名印度籍船员发病,主要症状为乏力、头痛、高热(最高体温达40.1℃)、寒战,于靠岸次日(4月14日)被送入秦皇岛第三人民医院。... 详细信息

2007年4月6日,香港注册Anglo-Eastern集团的一艘“Genco Commander”号货船在从印度驶往我国秦皇岛港口途中,一名印度籍船员发病,主要症状为乏力、头痛、高热(最高体温达40.1℃)、寒战,于靠岸次日(4月14日)被送入秦皇岛第三人民医院。患者接受了头颅及胸部CT、腹部超声、心电图等各项检查,均未见异常。应用四环素、头孢噻肟、左氧氟沙星和罗红霉素等抗生素治疗,病情未见好转。4月26日,我实验室对河北省秦皇岛出入境检验检疫局卫生检疫处送检的患者血清和血培养物进行了细菌学鉴定和药敏试验。[第一段]

关键词：伤寒沙门菌免疫胶体金试剂生化反应药物敏感性试验

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呼肠病毒BYD株吸附蛋白σ1的原核表达及其抗原性鉴定

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微生物学通报 2007年第6期34卷 1093-1096页

作者：宋立华何君朱虹刘光桥黄如统貌盼勇端青病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071 解放军302医院传染病研究所病毒研究室北京100039

将呼肠病毒BYD株S1片段编码的细胞吸附蛋白基因连接至pET-28a(+),构建表达载体pET-28a(+)-S1,转化表达宿主菌*** BL21(DE3),分析表达载体能否表达预期大小的重组σ1,并进一步鉴定重组σ1的抗原性。SDS-PAGE实验表明,经IPTG诱导后,表达... 详细信息

将呼肠病毒BYD株S1片段编码的细胞吸附蛋白基因连接至pET-28a(+),构建表达载体pET-28a(+)-S1,转化表达宿主菌*** BL21(DE3),分析表达载体能否表达预期大小的重组σ1,并进一步鉴定重组σ1的抗原性。SDS-PAGE实验表明,经IPTG诱导后,表达载体能表达53kD左右蛋白质,与重组σ1的预期大小相符;免疫印迹分析表明重组σ1有较好的抗原性和特异性,可用于呼肠病毒诊断试剂的制备。

关键词：呼肠病毒 S1片段细胞吸附蛋白原核表达

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基于登革2型病毒PrM基因的新型脱氧核酶对病毒RNA降解作用的初步观察

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军事医学科学院院刊 2007年第1期31卷 16-19,23页

作者：尉雁姜涛李晓峰赵慧刘忠钰邓永强刘然陈水平于曼秦鄂德山西医科大学第二医院太原030001 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:针对登革2型病毒(DEN2)PrM基因设计新型脱氧核酶并观察其抗病毒作用。方法:根据脱氧核酶(DR z)裂解RNA靶位的特异性,选择DEN2 PrM基因中符合5′…R↓Y…3(′R=A/G,Y=U/C)特征且其二级结构中以未配对与配对碱基的磷酸二酯键为靶位,... 详细信息

目的:针对登革2型病毒(DEN2)PrM基因设计新型脱氧核酶并观察其抗病毒作用。方法:根据脱氧核酶(DR z)裂解RNA靶位的特异性,选择DEN2 PrM基因中符合5′…R↓Y…3(′R=A/G,Y=U/C)特征且其二级结构中以未配对与配对碱基的磷酸二酯键为靶位,设计合成DEN2特异性脱氧核酶,筛选具有裂解PrM RNA活性的DR z。观察DR z与靶序列浓度比、Mg2+浓度及反应时间对DR z裂解效率的影响。结果与结论:体外裂解实验显示,在所设计合成的8个脱氧核酶中,DR z614对登革病毒的PrM RNA靶序列具有裂解活性,降解效率高达82%。本研究为进一步探讨新型抗登革病毒策略奠定了基础。

关键词：登革病毒脱氧核酶 PrM基因

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