检索结果-内蒙古大学图书馆

军事医学科学院院刊 2008年第2期32卷 121-125页

作者：王锡乐温博海陈梅玲王君孙长俭杨晓军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:构建贝氏考克斯体毒力与毒力相关蛋白芯片。方法:根据贝氏考克斯体全基因组序列,筛选出约160个编码毒力及毒力相关蛋白的基因,采用PCR扩增基因片段,将获得的基因片段与pET32a表达载体连接,然后将该重组质粒转化大肠杆菌并使目的基... 详细信息

目的:构建贝氏考克斯体毒力与毒力相关蛋白芯片。方法:根据贝氏考克斯体全基因组序列,筛选出约160个编码毒力及毒力相关蛋白的基因,采用PCR扩增基因片段,将获得的基因片段与pET32a表达载体连接,然后将该重组质粒转化大肠杆菌并使目的基因表达,采用Ni-NTA亲和层析柱纯化表达的目的重组蛋白。将纯化的重组蛋白点在醛基化玻片上制备蛋白芯片。结果:由贝氏考克斯体104个重组蛋白构建毒力与毒力相关蛋白芯片,通过荧光扫描仪分析蛋白芯片与贝氏考克斯体感染的小鼠血清反应,发现10个重组蛋白与该血清反应为强阳性。结论:所制备的毒力与毒力相关蛋白芯片具有贝氏考克斯体特异性,可用于贝氏考克斯体感染患者血清的检测。

关键词：贝氏考克斯体重组蛋白蛋白芯片

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

金黄色葡萄球菌黏附因子ClfA作为金黄色葡萄球菌疫苗组分的研究

引用

军事医学科学院院刊 2010年第3期34卷 258-260页

作者：张晓艳易绍琼付玲刘树玲于婷刘颖陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的研究黏附因子丛生因子A(clumping factor A,ClfA)在金黄色葡萄球菌(SAU)不同菌株中的分布情况,为开发具有广泛保护效果的SAU疫苗奠定基础。方法采用PCR法扩增目的基因,构建重组质粒,以大肠杆菌BL21(DE3)为表达宿主,对目的蛋白进行... 详细信息

目的研究黏附因子丛生因子A(clumping factor A,ClfA)在金黄色葡萄球菌(SAU)不同菌株中的分布情况,为开发具有广泛保护效果的SAU疫苗奠定基础。方法采用PCR法扩增目的基因,构建重组质粒,以大肠杆菌BL21(DE3)为表达宿主,对目的蛋白进行表达、纯化。PCR及点杂交法检测ClfA在不同菌株中的分布情况。结果得到纯度较高的目的蛋白,PCR及点杂交结果显示ClfA存在于菌株USA300,而在菌株546、1884、1885中并无分布。结论 ClfA在SAU各菌株中分布不广泛,可能难以作为具有广泛保护效果的SAU疫苗组分。

关键词：金黄色葡萄球菌丛生因子A 疫苗聚合酶链反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞自噬在病原体感染过程中的作用研究进展

引用

军事医学科学院院刊 2009年第5期33卷 469-472页

作者：章晟于长明殷瑛陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071

细胞自噬是一种通过降解蛋白质和细胞器维持细胞内平衡的细胞机制。细胞自噬具有很多重要的生理功能,包括清除病原体的感染。但是由于细胞自噬在进化过程中具有高度的保守性,某些病原体通过进化,具有逃避细胞自噬的能力,甚至利用细胞自... 详细信息

细胞自噬是一种通过降解蛋白质和细胞器维持细胞内平衡的细胞机制。细胞自噬具有很多重要的生理功能,包括清除病原体的感染。但是由于细胞自噬在进化过程中具有高度的保守性,某些病原体通过进化,具有逃避细胞自噬的能力,甚至利用细胞自噬为病原体复制和发育提供有利条件。本文综述了细胞自噬与病原体相互作用的研究进展。

关键词：细胞自噬病原体细胞自噬相关基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肝特异性假病毒转运系统的构建

引用

军事医学科学院院刊 2007年第4期31卷 338-342页

作者：安小平朱晓峰张昕陈锦辉陈士华周育森童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:探索一种针对慢性乙型肝炎的特异性长效基因治疗手段。方法:改造乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)为基因治疗载体,敲除其所有的开放阅读框(open reading frames,ORFs),同时保留包装信号序列,并且插入增强绿色荧光蛋白(enhanced ... 详细信息

目的:探索一种针对慢性乙型肝炎的特异性长效基因治疗手段。方法:改造乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)为基因治疗载体,敲除其所有的开放阅读框(open reading frames,ORFs),同时保留包装信号序列,并且插入增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)作为报告基因。同时构建辅助细胞系,为上述病毒载体(假病毒)提供包装所需要的病毒蛋白。以该假病毒载体转染辅助细胞系,以酶联免疫方法检测细胞培养上清中乙型肝炎病毒抗原,并在荧光显微镜下观察EGFP的表达,用透射电镜观察培养上清中的病毒颗粒,同时用实时定量PCR的方法对分泌到细胞培养上清中的假病毒进行了定量检测。结果与结论:以假病毒载体转染辅助细胞后,电镜观察到培养上清中乙肝病毒的丹氏粒(Dane particle)。实时定量PCR分析结果显示,细胞分泌到培养上清的假病毒含量达103拷贝/μl。ELISA结果显示该上清中同时表达了HBV表面抗原和e抗原,通过荧光显微镜观察发现外源基因绿色荧光蛋白获得有效表达。

关键词：肝特异性病毒载体乙型肝炎病毒基因转运

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

炭疽毒素受体及其与保护性抗原结合机制的研究进展

引用

军事医学科学院院刊 2006年第1期30卷 87-90页

作者：赵剑徐俊杰陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

本文阐述了炭疽毒素的细胞表面受体研究及其与保护性抗原结合分子机制等方面的进展。到目前为止,共发现两种炭疽毒素受体,分别由TEM8和CMG2基因编码。炭疽毒素受体的发现和鉴定对炭疽的病理学研究具有重要的意义,而且体外实验发现的受... 详细信息

本文阐述了炭疽毒素的细胞表面受体研究及其与保护性抗原结合分子机制等方面的进展。到目前为止,共发现两种炭疽毒素受体,分别由TEM8和CMG2基因编码。炭疽毒素受体的发现和鉴定对炭疽的病理学研究具有重要的意义,而且体外实验发现的受体与毒素的高亲和力也为受体本身作为炭疽的治疗剂带来了希望。CMG2和PA结合状态晶体结构的解析使我们能够对毒素进入细胞质过程的分子细节有所推论。所建立的理论模型为研究其他类型穿透细胞膜发挥作用的毒素的作用过程提供了重要的参考。

关键词：炭疽芽孢杆菌炭疽毒素受体保护性抗原 von Willebrand A型因子结构域

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

贝氏柯克斯体感染小鼠血清与其毒力相关蛋白的免疫印迹反应

引用

中国人兽共患病学报 2008年第7期24卷 593-596页

作者：王锡乐陈梅玲吴德平孙长俭杨晓温博海军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的筛选与贝氏柯克斯体感染血清反应的贝氏柯克斯体毒力相关蛋白。方法以贝氏柯克斯体标准株九里株为模板,采用PCR扩增包括IV型分泌系统、分泌性蛋白和膜蛋白在内的毒力及毒力相关的基因,将扩得目的基因片段与原核表达质粒pET32a重组,... 详细信息

目的筛选与贝氏柯克斯体感染血清反应的贝氏柯克斯体毒力相关蛋白。方法以贝氏柯克斯体标准株九里株为模板,采用PCR扩增包括IV型分泌系统、分泌性蛋白和膜蛋白在内的毒力及毒力相关的基因,将扩得目的基因片段与原核表达质粒pET32a重组,将重组质粒转化大肠杆菌,用贝氏柯克斯体实验感染小鼠血清与转化大肠杆菌作免疫印迹。结果设计173对引物共扩增出170个目的基因,经PCR及酶切鉴定,有155个基因与pET32a质粒重组成功,SDS-PAGE电泳分析发现,共有104个转化菌表达目的蛋白,在104个重组蛋白中,筛选到32个与贝氏柯克斯体感染小鼠血清反应的重组蛋白。结论这些与贝氏柯克斯体感染血清反应的毒力相关蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性。

关键词：贝氏柯克斯体毒力重组蛋白免疫印迹

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一株西尼罗病毒基因组cDNA亚克隆的构建与鉴定

引用

军事医学科学院院刊 2005年第5期29卷 424-428页

作者：李晓峰姜涛陈水平秦成峰于曼秦鄂德军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:构建我室保存的一株西尼罗病毒引进毒株(CH-01)基因组全长cDNA的亚克隆,为进一步构建该毒株的感染性全长cDNA克隆奠定基础。方法:根据CH-01病毒株基因组序列中含有的特异性酶切位点,利用DNAstar及O ligo6软件设计5对引物。以感染... 详细信息

目的:构建我室保存的一株西尼罗病毒引进毒株(CH-01)基因组全长cDNA的亚克隆,为进一步构建该毒株的感染性全长cDNA克隆奠定基础。方法:根据CH-01病毒株基因组序列中含有的特异性酶切位点,利用DNAstar及O ligo6软件设计5对引物。以感染细胞中的病毒RNA为模板,通过RT-PCR扩增出覆盖病毒基因组全长的5个cDNA片段,并分别将其克隆至pGEM-T easy载体,通过片段间共有的酶切位点进行连接,最终获得基因组5′和3′半分子,并分别通过序列测定加以鉴定。结果与结论:已构建出西尼罗病毒CH-01株基因组的5′和3′半分子,经酶切鉴定和序列测定表明所获得的cDNA克隆为该株病毒的特异性序列。

关键词：黄病毒西尼罗病毒 RT-PCR cDNA亚克隆

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

登革4型病毒5′非编码区SLB元件对病毒复制和翻译的调控作用

引用

解放军医学杂志 2008年第7期33卷 806-810页

作者：于学东姜涛陈水平邓永强韩剑峰赵慧李晓峰刘然于曼秦成峰秦鄂德军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨登革4型病毒5′非编码区SLB元件对病毒复制和翻译的调控作用。方法首先通过mfold3·2软件对登革4型病毒5′端RNA二级结构进行预测,确定了3个突变位点:SLB1,缺失位于短茎环82-87位5′UAR环化序列,并破坏其保守茎环结构;SLB2... 详细信息

目的探讨登革4型病毒5′非编码区SLB元件对病毒复制和翻译的调控作用。方法首先通过mfold3·2软件对登革4型病毒5′端RNA二级结构进行预测,确定了3个突变位点:SLB1,缺失位于短茎环82-87位5′UAR环化序列,并破坏其保守茎环结构;SLB2,在次环引入突变破坏其环状结构(M77G/C);SLB3,突变仅涉及核苷酸,不破坏该次环二级结构(M77-78AG/GA)。然后在含有海肾荧光素酶(Renilla Luciferase,R·luc)报告基因的复制子(DEN-R·luc2A-RP)基础上,利用重叠PCR构建上述突变体。将突变体(包括相关的阳性和阴性对照复制子)分别线性化并体外转录成RNA后,取等量各转录体RNA,以脂质体法分别转染BHK-21细胞。通过间接免疫荧光(IFA)、RT-PCR、R·luc报告基因技术和实时定量RT-PCR对突变体的复制和翻译水平进行检测。结果SLB1突变体的翻译水平并未受到显著影响,但其复制水平出现显著下调。SLB2突变体的翻译水平亦未受到显著影响,但其复制水平受到完全抑制;SLB3突变体的复制和翻译水平均受到了完全抑制。结论登革4型病毒5′非编码区SLB元件对基因组RNA复制和翻译具有重要的调控作用。

关键词：登革热病毒复制子基因,报告病毒复制翻译

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Hendra病毒的实时PCR检测方法的建立

引用

军事医学科学院院刊 2005年第2期29卷 173-174,177页

作者：邓永强姜涛于曼陈水平秦成峰秦鄂德军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:建立针对Hendra病毒的敏感、特异和快速的实时PCR法,为Hendra病的早期诊断提供依据。方法:采用常规PCR法和实时PCR法分别对构建的Hendra病毒全长G基因的重组质粒DNA进行扩增,并比较两种方法的敏感性。结果与结论:应用常规PCR方法... 详细信息

目的:建立针对Hendra病毒的敏感、特异和快速的实时PCR法,为Hendra病的早期诊断提供依据。方法:采用常规PCR法和实时PCR法分别对构建的Hendra病毒全长G基因的重组质粒DNA进行扩增,并比较两种方法的敏感性。结果与结论:应用常规PCR方法可检测到100fg/μl的含Hendra病毒特异序列的重组质粒DNA,而实时PCR法则可检测到0.1fg/μl的DNA,后者的敏感性比常规PCR法的提高了1000倍,该方法不但操作上更加简便、快速,还可避免交叉污染,适于对Hendra病毒特异序列的检测。

关键词： Hendra病毒实时PCR 质粒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肉毒毒素疫苗及治疗性抗体的研究进展

引用

军事医学 2013年第7期37卷 550-554页

作者：游哲荣王景林军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京10007

肉毒中毒是由肉毒毒素引起、以中枢神经系统症状为主的致死性神经中毒疾病。肉毒毒素是目前已知毒性最强的蛋白毒素,被国际上列为重要的生物毒素战剂,也是恐怖分子最有可能使用的生物恐怖剂之一。由于肉毒毒素具有很强的抗原性和免疫原... 详细信息

肉毒中毒是由肉毒毒素引起、以中枢神经系统症状为主的致死性神经中毒疾病。肉毒毒素是目前已知毒性最强的蛋白毒素,被国际上列为重要的生物毒素战剂,也是恐怖分子最有可能使用的生物恐怖剂之一。由于肉毒毒素具有很强的抗原性和免疫原性,因此发展肉毒毒素疫苗和抗体是有效防治肉毒中毒最重要的医学措施。该文综述了肉毒毒素疫苗及治疗性抗体的研究进展。

关键词：肉毒中毒肉毒毒素生物毒素战剂疫苗抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：